三七圆斑病诊断与防控

1DB53/TXXXXX—XXXX三七圆斑病诊断与防控本文件规定了三七圆斑病的症状，病原，发生，诊断，防控等。本文件适用于三七圆斑病的诊断及防控。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T8321.10农药合理使用准则DB53/T三七农药使用准则DB53/T三七种子DB53/T三七育苗技术规程3术语和定义GB/T20000.1界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3.1圆斑病三七栽培过程中，由槭菌刺孢菌Mycocentrosporaacerina(Hartig)Deighton侵染叶，同时也可侵染根、茎、花、果等引起的毁灭性病害。3.2中心病株田间零星出现的具有极强传染性的病株。3.3科赫氏法则确定侵染性病害病原物的规范性操作程序，参见附录A。4诊断4.1田间诊断2DB53/TXXXXX—XXXX4.1.1监测时间一年生苗期或二年生以上三七展叶期开展圆斑病监测直至植株落棵。每年4月中下旬，气温16℃~22℃,相对湿度80%以上，连续2d～3d降雨，或日平均降雨量达15mm以上时，至10月中旬结束。4.1.2发病中心带菌种苗或带菌土壤作为初侵染源，遇适宜的环境条件，所发生的中心病株或病窝点。4.1.3症状、发生特点病害症状与发生特点见附录B。4.1.4病样采集对取样现场和病害症状拍照后采样。采集典型的新鲜单病斑病样，用吸水纸包裹，标识采集人，时间，地点，采集部位等。4.2室内诊断4.2.1病原分离、纯化按以下要求分离、纯化病原：a)选取具有明显症状的新鲜单病斑，自来水冲洗，灭菌吸水纸吸去多余的水分；b)剪取病健交界处2mm×3mm小块，于75%的酒精中表面消毒1min，再放入0.1%升汞中消毒30S，之后用灭菌水清洗3次；c)接种于PDA培养基中，置于20℃恒温培养箱中培养2d～3d；d)选取边缘菌丝反复纯化3次以上，用无菌打孔器(Φ=5mm）打取菌饼，反接种于PDA培养基中，全光照，18℃恒温培养15d；e)产生大量的分生孢子和厚垣孢子后，参照附录B.2进行验证，并按4.2.2的方法进行病原菌的致病性测定。4.2.2病原物致病性测定采用柯赫氏法则测定病原物致病性，参见附录A.1。4.2.3确诊根据病原菌形态学、致病性测定，确诊三七圆斑病。5.1防控原则遵循以下防控原则：a)预防为主，综合防治；b)结合气象条件进行病情监测；c)一旦出现发病中心，立即采用治疗性药剂予以控制。5.2病情调查3DB53/TXXXXX—XXXX病情调查方法参见附录C，调查记录表参见用附录A.2。5.3防控措施5.3.1农业措施5.3.1.1选地与整地选择PH值为5.6～7，质地疏松的土壤或沙壤土。深翻犁，晒垡，挖沟起垄，采用符合DB53/T三七农药使用准则要求的生石灰或药剂进行土壤处理。5.3.1.2种子与育苗种子应符合DB53/T三七种子要求。按DB53/T三七育苗技术规程要求育苗。5.3.1.3轮作与林下栽培选择前作为玉米、陆稻、荞麦等的地块种植三七，轮作年限为8年以上，经物理、化学消毒剂处理的土壤可减少轮作年限。在未种植过三七的冬瓜树林、栎树林等阔叶林或混交林下栽培。5.3.1.4水肥土壤含水量保持在25%～30%左右，七园湿度以80%左右为宜。施肥应以有机肥为主，少施氮肥，磷钾比例适中，多施底肥，适时追肥。5.3.1.5海拔宜选择海拔1400m～1600m，年平均气温15℃~17℃,最冷月均温8℃~10℃,最热月均温20℃~22℃,大于等于10℃年积温4500～5500℃,年降水量1000～1300mm，无霜期300d以上的区域。5.3.1.6透光率二年生三七适宜的光照强度12%～15%，三年生三七适宜的光照强度15%～20%。5.3.2生物防控5.3.2.1生防菌剂用木霉（Trichodermaspp.）、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)或解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)生防菌剂对三七种苗（子）进行浸泡，在植株展叶期时进行喷施，药剂施用方法参照使用说明书。5.3.2.2施用时间和次数移栽时或出苗后进行第1次施药，之后每隔5d～7d施药1次，连续施药3次～4次。施用过生防菌剂的田块不得施用杀菌剂。5.3.3化学防控5.3.3.1种子（苗）处理对疑是带病种子或种苗按以下要求进行处理：4DB53/TXXXXX—XXXXa)用40%菌核净可湿性粉剂400倍液、58%瑞毒霉锰锌可湿性粉剂500倍液浸种或处理种苗15Min～20Min；b)或用65%代森锰锌可湿性粉剂按种子重量0.2%～0.5%拌种、拌苗后播种、移栽；5.3.3.1农药使用使用农药应符合GB/T8321.10和DB53/T三七农药使用准则的规定，并交替轮换用药，每隔7d5.2.3.4中心病株处理发现中心病株时，连根挖出，带出七园外销毁，病塘用生石灰处理。对病株周围50m范围内喷施58%瑞毒霉锰锌和65%代森锰锌等药剂，每隔7d喷1次，连喷3次。5.2.3.5保护性药剂防控当病情指数在5以下时，可采用以药剂下配方进行防治：a)65%代森锰锌可湿性粉剂500倍液；b)50%福美双可湿性粉剂500倍～700倍液；c)75%百菌清可湿性粉剂400倍～600倍液；d)50%异菌脲可湿性粉剂800倍～1000倍液。5.2.3.6治疗性药剂防控当病情指数大于5时，应采用以下药剂单独使用或两种药剂混合使用：a)10%宝丽安（多氧霉素）可湿性粉剂1000倍～1500倍液；b)3%多抗霉素可湿性粉剂100倍～200倍液；c)30%爱苗乳油2500倍液；d)10％世高(10%苯醚甲环唑)水散性颗粒剂2000倍液；e)50%速克灵(50%腐霉利)可湿性粉剂1200倍液；f)58%瑞毒霉锰锌可湿性粉剂500倍液。6采收用药后间隔30d以上采收。5DB53/TXXXXX—XXXX（资料性附录）柯赫氏法则和中心病株调查表A.1柯赫氏法则确定某种生物是否是病原生物应遵循的原则与操作程序1）在病植物上常伴随一种病原生物存在2）该生物可在离体或人工培养基上分离和纯化3）将该纯培养物接种到相同品种的健康植株上，表现出与原来相同的症状4）从接种发病的植物上再次分离到该生物的纯培养，性状与原来记录的相同。A.2中心病株调查中心病株调查表见表A.1。表A.1三七圆斑病中心病株调查表面积/m2地势土壤海拔/m温度/℃湿度/%降雨/mm遮阴棚材料遮阴棚透光率/%前茬作物有无病史七龄有无病害调查株数/株发病株数/株发病率/%病情分级病情指数/%6DB53/TXXXXX—XXXX（资料性附录）三七圆斑病症状、病原及发生特点B.1三七圆斑病症状三七根、根茎、芽、茎、叶、叶柄、花、花轴、果实、果柄等均能被侵染，但以茎、叶受害严重。叶片病斑初期呈水渍状，而后变为黑褐色圆形，有明显轮纹，病健交界处可见黄色晕圈，最后病斑合并脱落或腐烂。叶柄和枝柄受害则呈暗褐色水渍状缢缩，脱落；茎杆受害后病斑变褐折垂，潮湿环境下病斑表面生稀疏白色霉层即孢子层，见图B.1。B.2三七圆斑病病原三七圆斑病的病原为半知菌亚门，丝孢纲，暗色菌科，菌剌孢属槭菌刺孢Mycocentrosporaacerina(Hartig)Deighton。病菌在PDA培养基上初期菌落疏展、无色，后变绿色、灰色或紫红色,最后变成黑色。光照条件下产生明显的玫瑰红色，菌落呈同心轮纹状扩展。菌丝有隔，宽4μm～7μm。菌落中心常形成念珠状串生的膨大菌丝细胞，厚壁、深褐色，即厚垣抱子。厚垣孢子深褐色，长椭圆形或矩圆形，大小为15μm～30μm×15μm～20μm。将培养基上菌落切割后，加入无菌水，于18℃光照培养1d～2d，可产生大量分生孢子梗和分生孢子。分生孢子梗短菌丝状，淡褐色，分枝，有隔膜，合轴式延伸，7μm~24μm×4μm～7μm。产孢细胞合生，圆桶形，孢痕平截。分生孢子单生、顶侧生，倒棍棒形，具长喙，基部平截，淡褐色，大小为54μm～250μm×7.7μm～14μm，4个～16个隔膜，隔膜处微突起。少数孢子具有一个从基部细胞侧生出的刺状附属丝，大小为25μm～124μm×2μm～3μm,见图B.1。B.3三七圆斑病发生特点三七圆斑病的发生与温度和湿度的关系较为密切，低温高湿多发病，且发病率随产区海拔的升高而增加。当日均温在21℃以下时，空气相对湿度达80%以上，持续2d～3d小雨天气或日降雨量达15㎜以上时，圆斑病即可发生，且发病率随产区海拔的升高而增加，主要集中于海拔1700m以上的高山地区，海拔1400m～1600m的地区零星发生，其发病早、持续时间长、危害重。该病害发病初期，病株零星发生，而到中后期则具有明显的发病中心。7DB53/TXXXXX—XXXX图B.1三七圆斑病的症状与病原注：A：叶部病斑；B：叶柄症状；C：茎杆症状；D:中心病株；E：田间病害；F：槭菌刺孢分生孢子；G:槭菌刺孢产孢结构及分生孢子；H:槭菌刺孢厚垣孢子8DB53/TXXXXX—XXXX（资料性附录）病情分级、危害程度、调查表格和统计方法C.1病情分级圆斑病病情分级标准见表c.1。表C.1三七圆斑病病情分级标准症状植株无病植株个别叶片发病，叶片不脱落植株1/3叶片发病，有1小叶～2小叶脱落1个复叶柄发病或仅花序和花轴发病或植株叶片总数1/2脱落茎秆发病，或2/3叶片脱落地上部分枯死或仅剩茎秆C.2病害危害程度病害危害程度划分标准见表c.2。表C.2病害危害程度划分标准病情指数1轻发生2中等偏轻5～10310～154中等偏重15～255大发生C.3病情调查圆斑病病情系统调查表见表c.3。表C.3三七圆斑病病情系统调查表9DB53/TXXXXX—XXXX地点田块类型七龄生育期调查株数发病株数病株率（%）病情