检验科血清总胆红素测定标准操作规程

玉环县人民医院检验科文件编号：JYK-3-SH-013版本/修订号：C/0主题内容生化室作业指导书生效日期：20110701第1页共4页编写制定日期审核审核日期：核准执行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林华2011-07-01血清总胆红素测定标准操作规程1检验申请单独检验项目申请：血清总胆红素测定(缩写TBIL)；组合项目申请：血生化中肝功能测定。临床医生根据需要提出检验申请。2标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。2.2.2标本保存时间：血液胆红素见光易分解，标本注意避光保存。室温（15～25℃）下可稳定2h，普通冰箱中（2～8℃）稳定12h。-15～-25℃度可以稳定3～4个月。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。2.3.2不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。3方法原理钒酸盐氧化法：钒酸盐钒酸盐pH3.0胆红素胆绿素pH3.0测定钒酸盐作用前后吸光度差异，可求得样品中的直接胆红素的浓度。4试剂及其他用品4.1试剂：钒酸盐氧化法总胆红素试剂盒（货号TB6073），由北京利德曼生化技术有限公司出品。4.2试剂盒保存：保存于2～8℃，试剂未启封情况下可稳定至标签的失效期。启封试剂在仪器的试剂仓冰箱中至少稳定14天。开盖后避免污染。当试剂变混浊，或者未开盖的液体有沉淀，或空白吸光度＞0.5时，表明试剂已变质，不能继续使用。4.3试剂盒准备：液态双试剂型，即开即用，无特殊准备4.4试剂盒主要成分：柠檬酸缓冲液100mmol/L，反应促进剂1mmol/L，表面活性剂2mmol/L，磷酸缓冲液10mmol/L，偏钒酸钠10mmol/L，含有表面活性剂和保护剂。5校准品与校准模式5.1校准品：Beckman-CoulterSYNCHRONSystems胆红素校准液（P/N465915），其胆红素浓度值可溯源至美国国家标准技术研究所（NIST）标准参考材料。5.2校准类型和校准点数目：线性模式，1个校准点。5.3校准周期：校准间隔时间不限。但在：①更换试剂批号或出现质控漂移时；②仪器进行全面保养后；③仪器的重要零件更换后；均须进行一次校准。5.4校准液重建方法：Beckman-CoulterSYNCHRONSystems胆红素校准液即开即用，无需特殊准备。6质控品与室内质控规则6.1质控品采用由Beckman-Coulter公司提供的两个不同水平未定值质控血清。6.2质控液重建方法：液态质控血清，即开即用，无需特殊准备。6.3质控品测定：在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。6.4质控规则：采用Westgard多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。6.5如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。7适用仪器适用AEROSET和C16000全自动生化分析仪器。8标本检测步骤装载试剂→进行校准→进行质控→输入标本检测项目→加载标本→标本测定→结果复核→报告。9主要分析参数参见说明书。10结果计算计算公式：总胆红素浓度（μmol/L）＝仪器根据此公式自动给出每个标本测定结果。11检验结果的报告及范围11.1结果的报告11.1.1结果经审核后，确认准确无误后发出报告。11.1.2报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。11.1.3如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。11.2报告范围：0～680μmol/L。超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本稀释后重复测定的结果。12操作性能12.1精密度：批内CV5.0%，总CV6%。12.2准确度：回收率98.7％～101.5％。12.3线性范围：0～680μmol/L。12.4方法的有限性及干扰因素：甘油三酯达10.2mmol/L时影响小于6%，血红蛋白达250mg/L时影响小于10%。13参考范围及医学决定水平参考范围：5-22umol/L14临床意义14.1血清总胆红素和结合胆红素多用于黄疸的诊断和黄疸性质鉴别。由于胆红素和肝脏功能密切相关，总胆红素是重要的常规肝功能指标。14.2各种原因引起的黄疽都有血清总胆红素增高，如胆汁性肝硬化、胆道梗阻、阻塞性黄疸、肝细胞性黄疸，如肝炎、肝硬化，溶血性黄、新生儿黄疽或输血错误。14.3血清总胆红素可作为暴发型肝衰竭（FHF）和自体免疫性肝炎（AIH）预后死亡的独立危险因子，TBIL＞255µmol/L预测FHF预后死亡的敏感性为77.5%，特异性为46.8%。15结果审核以及分析与相关项目的联系15.1由资深专业人员负责检验结果的审核。15.2认真审核每一个测定结果，审核者对发出报告结果的准确性和可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。15.3相关项目：审核与直接胆红素（Dbil）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、谷胺酰转移酶的关系，如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。16威胁生命的“紧急值”及报告规定此项未做规定。17有关引用程序与文件17.1Abbott自动生化分