2021年高考生物二轮复习：选修一核心考点复习提纲版（全面！）

2021年高考生物二轮复习：选修一核心考点复习提纲精编版

专题1传统发酵技术的应用

课题1果酒和果醋的制作

1、果酒制作的菌种是？其代谢类型（同化作用和异化作用）和生殖方式是什么？

菌种：酵母菌（单细胞真菌、真核生物）

代谢类型：异养兼性厌氧性同化作用类型:异养异化作用类型：兼性厌氧型

生殖方式：无性生殖（出芽生殖、抱子生殖、分裂生殖）

2、菌种进行有氧呼吸的目的？其方程式是？并写出酒精发酵的方程式：

在有氧条件下，醵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖。反应式：C6Hl2。6+602+6H2O->6CO2+12H2O

在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。反应式：C6Hl2O6-2C2H5OH+2c02

3、是酵母菌发酵和生长的重要条件？繁殖和发酵时应将其控制在什么范围内？

温度是酵母菌发酵和生长的重要条件。20℃左右最适合醵母菌繁殖，酒精发酵时一般将温度控制在

18—25℃O

4、什么在葡萄酒的自然发酵中其主要作用？（附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。）

5,为什么葡萄酒呈深红色？

在发酵过程中，随着酒精度数的提高，红葡萄皮的色素也进入发醵液，使葡萄酒呈现深红色。

6、在发酵过程中，为什么不需要另行消毒或灭菌？

在缺氧、呈酸性的发醵液中，醵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而

受到抑制。

7、果醋制作的菌种是？其代谢类型（同化作用和异化作用）和生殖方式是？

菌种：醋酸菌（单细胞细菌、原核生物）

代谢类型:异养需氧型同化作用类型：异养异化作用类型：需氧型

生殖方式：二分裂

8、为什么密封不严的酒会变酸？在变酸的酒的表面为什么会出现一层白色的膜？

醋酸菌在有氧条件下，将乙醇氧化成醋酸。

在变酸的酒的表面观察到的菌膜就是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的。

第1页共35页

9、为什么醋酸发酵需要充足的氧气？

醋酸菌是好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。醋酸菌对氧气的含量特别敏感，

当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。

10、果醋制作的实验原理是什么？（相关的反应式）

当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；

当氧气充足、缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。（反应式如下）

C2H50H+02-CH3coOH+H20

n、醋酸菌的最适生长温度为？（30-35℃）

12、制作果酒果醋的实验流程是什么？挑选葡萄T冲洗T榨汁一酒精发酵T果酒（T醋酸发酵T果醋）

13、用带盖的瓶子制葡萄酒时，在发酵过程中每隔12h将瓶盖拧松一次，目的是什么？为什么不能打

开瓶盖？

放出C02,防止CO2过多导致发酵瓶爆裂。不打开瓶盖的目的：防止。2和其他杂菌进入。

14、P4页图l-4b的发酵装置，充气口、排气口和出料口分别有什么作用？为什么排气口要通过一个

长而弯曲的胶管与瓶身连接？

充气口：在醋酸发酵时连接充气泵进行充气。

排气口：排出酒精发酵时产生的C02。

出料口：用来取样。

与瓶身相连的长而弯曲的胶管：防止空气中微生物的污染。

15、制果酒时，充气口应该如何操作？制果醋呢？

制果酒时，应该关闭充气口；制果醋时，应将充气口连接充气泵进行充气。

16、冲洗葡萄的目的为？能否反复冲洗？为什么？

冲洗1一2遍除去污物，不能反复冲洗，防止菌种流失。

17、先冲洗葡萄还是先出去枝梗？简述原因：

先冲洗，然后再除去技梗，以避免除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会。

18、应该从哪些方面防止发酵液被污染？

榨汁机和发醵瓶要清洗干净，且发酵瓶要用70%的酒精进行消毒；

清洗葡萄时要先清洗后除枝梗；

第2页共35页

发酵瓶排气管用曲颈管不用直管。

19、葡萄汁装入发酵瓶中，为什么要留大约1\3的空间？

①先让酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，耗尽。2后再进行酒精发醵；

②防止发醵过程中产生的C02造成发酵液溢出。

20、制葡萄酒时，为什么要将温度控制在？制葡萄醋时，为什么要将温度控制在30-350C?

温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。18-250C是醵母菌生长和繁殖的最适温度；而醋酸菌是嗜热

菌，30-35℃有利于醋酸菌的繁殖和醋酸发酵。

21、检测果汁发酵后是否有酒精产生，用什么来检验？在什么条件下？有什么颜色变化？

用重珞酸钾来检验。在酸性条件下，重铝酸钾与酒精反应呈现灰绿色。先在试管中加入发酵液2mL,

再滴入物质的量浓度为3mol/L的H2s043滴，振荡混匀，最后滴加常温下饱和的重珞酸钾溶液3

滴，振荡试管，观察颜色。

22、为提高果酒品质，更好地抑制其他微生物的生长，可直接在果汁中加入什么？

加入人工培养的酵母菌。

23、制作葡萄醋时为什么要适时通入空气？

（醋酸菌是好氧细菌。）

24、果酒发酵装置发酵后期能否产生大量的果醋？原因是？

果酒发酵装置发酵后期不能产生大量的果醋，原因是：①醋酸菌的最适生长温度为30-35℃,而醋

酸菌的最适生长温度为18-25℃;②果酒发醵后期装置内缺氧，而醋酸菌是好氧细菌，没有氧气无法

生活。

课题2:腐乳的制作

1、为什么腐乳经过微生物的发酵，味道会很鲜美且易于消化和吸收？

豆腐中的蛋白质被分解成小分子的肽和氨基酸，味道鲜美，易于消化和吸收。

2、多种微生物参与了腐乳的发酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉，其中起主要作用的是毛霉。

3、毛霉（一种丝状真菌）属于真核（"原核"或"真核"）生物，代谢类型为异养需养型。

生长迅速，具有发达的白色菌丝；以抱子生殖为主。

4、豆腐长白毛是怎么回事？（毛霉的白色菌丝。）

5、制作腐乳的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂

肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。

第3页共35页

6、挑选什么样的豆腐？理由是什么？

所用豆腐的含水量为70%左右，水分过多则腐乳不易成形。含水量过低，不利于毛霉的生长繁殖。

7、腐乳外部有一层致密的皮，这层皮是怎样形成的？对人体有害吗？作用是什么？

“皮”是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝（匍匐菌丝），对人体无害。它能形成腐乳的“体”，使

腐乳成形。

8、传统生产腐乳的毛霉来自于哪里？现代工艺生产呢？

传统生产腐乳的毛霉来自空气中的毛霉抱子；现代工艺生产：直接接种优良毛霉菌种。

9、在腐乳制作的过程中应该怎么加盐？加盐的目的是什么？

加盐腌制：将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中，同时逐层加盐，随着层数的加高而增加盐量，

接近瓶口表面的盐要铺厚一些。加盐腌制的时间约为8天左右。

食盐的作用：①抑制微生物的生长，避免腐败变质；②析出水分，使豆腐变硬，在后期制作过程中不

易酥烂。

10、在腐乳制作的过程中盐的浓度过高会导致什么问题？过低呢？

用盐腌制时，注意控制盐的用量：盐的浓度过低，不足以抑制微生物的生长，可能导致豆腐腐败变质；

盐的浓度过高会影晌腐乳的口味。

11、卤汤由什么组成？香辛料的作用？

配制卤汤：卤汤直接关系到腐乳的色、香、味。卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的。

香辛料的作用：①调制腐乳的风味；②具有防腐杀菌的作用.

12、酒的含量为多少？加酒的作用有哪些？浓度过高和过低分别会导致什么？

酒的含量一般控制在12%左右.

酒的作用：①抑制微生物的生长；②使腐乳具有独特的香味。

酒精含量过高，对蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延长；酒精含量过低，不足于抑制微生

物生长，可能导致豆腐腐败。

13、腌制腐乳时，为什么要随着豆腐层的加高而增加盐的用量？

越接近瓶口，被杂菌污染的可能性越大。

第4页共35页

14、为什么在接近瓶口的表面要将盐铺厚一些？（防止杂菌污染。）

15、用来腌制腐乳的玻璃瓶可通过什么方式来处理?目的是什么？

用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用沸水消毒.目的是方式杂菌污染。

16、装瓶时，要怎样处理瓶口？

装瓶时，操作要迅速小心。整齐地摆放好豆腐、加入卤汤后，要用胶条将瓶口密封。封瓶时，最好

将瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染。

17、腐乳制作的流程：

让豆腐上长出毛霉T加盐腌制一加卤汤装瓶—密封腌制

18、毛霉生长温度应该控制在多少？为什么控制到该温度？

15~18℃,并保持一定的湿度。因为15~18P是毛霉生长繁殖的最适温度。

19、哪些因素可以影响腐乳的风味？请举例论述。

①水的控制：豆腐含水量70%,含水量过高，腐乳不易成形；含水量过低，不利于毛霉的生长。②

温度的控制：15~18℃O③盐量的控制：盐浓度过低，不足于抑制微生物生长，可能导致豆腐腐败变

质；盐浓度过高，会影响腐乳的口味。④酒含量的控制：酒精含量过高，腐乳成熟的时间将会延长；酒

精含量过低，不足于抑制微生物生长，可能导致豆腐腐败。⑤发酵时间的控制：发酵时间短，蛋白质未

完全水解，加盐后蛋白质变性，豆腐变硬；发醵时间过长，豆腐会软化，不易成形。

课题3:泡菜的制作

1、在泡菜腌制过程中，我们需要检测什么的含量？（亚硝酸盐。）

2、制作泡菜需要什么菌种？其代谢类型是？

乳酸菌（单细胞原核生物）

代谢类型：异养厌氧型同化作用类型：异养异化作用类型：厌氧

3、制作泡菜的原理是什么？

在无氧条件下，乳酸菌进行无氧呼吸将葡萄糖糖分解为乳酸,反应式为：C6Hl206T2c3H6。3

4、常见的乳酸菌有哪两类？常用于生产的酸奶的是什么？

常见的乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌。乳酸杆菌常用于生产酸奶。

5、为什么含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶？

抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长。

6、亚硝酸盐的摄入量达到多少引起中毒？多少引起死亡？

第5页共35页

达到0.3—0.5g时，会引起中毒；达到3g时会引起死亡。

7、亚硝酸盐会在人体内积累吗？会转变成什么致癌物质？

亚硝酸盐被吸收后随尿液排出体外，不会再人体内积累，但在适宜pH、温度和一定微生物作用下

会形成致癌物质亚硝胺。

8、为什么不宜多吃腌制食品？

人体摄入亚硝酸盐含量达到0.3—0.5g时，会引起中毒；达到3g时会引起死亡。并且在适宜pH、

温度和一定微生物作用下形成致癌物质亚硝胺。

9、泡菜的制作流程？

选择泡菜坛——选择原■——原料处理——配制盐水一^坛——封坛发醵——成品

10、制作泡菜时，盐和清水的比例是多少？（清水：盐=4:1）

11、将盐水煮沸冷却的目的是？

煮沸的作用：一是除去水中。2,二是杀灭盐水中的其他细菌。

冷却的目的：防止高温杀死乳酸菌。

12、为什么要向坛盖边缘的水槽中注满水？

以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。

13、测定亚硝酸含量的原理是什么？测定亚硝酸盐含量的方法是什么？

测定亚硝酸盐含量的方法是：比色法

原理是：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-蔡基乙二胺盐酸

盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量。

14、应选择什么样的泡菜坛?（选择气密性好的以创造无氧环境，有利于乳酸菌发酵防止蔬菜腐烂。）

15、如何检测泡菜坛的气密性？（将坛口向上压入水中，看坛内有无渗水现象。）

16、腌制过程中，哪些因素会造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加？

在泡菜的腌制过程中，要注意控制腌制的时间、温度和食盐的用量。温度过高、食盐用量过低、腌制

时间过短，容易滋生细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。

①温度：温度过高，不利于乳酸菌生长，容易滋生杂菌，亚硝酸盐含量增加；温度过低，则发酵时间延

长。

②食盐：食盐用量过低，不足于抑制其他微生物的生长，容易滋生杂菌，亚硝酸盐含量增加；食盐用量

过高，则抑制乳酸菌生长，导致泡菜"咸而不酸”。

第6页共35页

③腌制时间：腌制时间过短，产生的乳酸少，容易滋生杂菌，亚硝酸含量增加；腌制时间过长，产生的

乳酸多，影响泡菜的风味。

17、一般在腌制几天后，亚硝酸盐的含量开始下降？（一般在腌制10d后，亚硝酸盐含量开始下降。）

18、导致泡菜"咸而不酸"的原因是什么？（食盐用量过高，抑制了乳酸菌的生长。）

19、在制作泡菜的过程中，有机物的干重如何变化？泡菜坛内有机物的种类如何变化？

干重减少（因为乳酸菌进行无氧呼吸消耗葡萄糖）；有机物种类增加（因为在乳酸发酵的过程中产生

了丙酮酸等中间产物，及乳酸）

20、为什么在泡菜制作过程中会加入陈泡菜水？（增加乳酸菌的数量。）

21、为什么泡菜坛内有时候会长一层白膜？你认为这层白膜是怎样形成的？

产膜醵母的繁殖。醵母菌是兼性厌氧微生物，泡菜发酵液营养丰富，其表面氧气含量丰富，适合酵母

菌繁殖。

22、检测亚硝酸盐含量的操作步骤依次有哪些？

配制溶液——制备标准显色液——制备样品处理液——比色

23、制备样品处理液时，加入氢氧化铝乳液的目的？（吸附杂质，使泡菜滤液脱色变澄清。）

24、画出亚硝酸盐含量、乳酸菌含量、乳酸含量随时间的变化趋势图，并解释其原因。

乳酸菌乳酸亚硝酸盐

发酵少（有。2,乳酸菌活动受到抑制）少增多（乳酸含量少，亚硝酸还原菌大量

初期繁殖）

发酵最多（乳酸抑制其他杂菌活动）增加，PH下降减少（乳酸含量增加，抑制了亚硝酸还

中期原菌）

此时乳酸菌数量增加，杂菌数量减

少的原因：乳酸菌比杂菌更耐酸

发酵减少（乳酸继续积累，PH下降，继续熠多，PH减少至相对稳定（亚硝酸还原菌被完全

后期抑制了乳酸菌的活动）继续下降抑制）

乳酸含量的变化：增加PH的变化：下降

乳酸菌含量的变化：先增加后减少亚硝酸盐含量的变化：先熠加后减少

25、在整个泡菜制作过程中，如何防止泡菜被污染？

每次取样用具要洗净，取样后迅速封坛，防止泡菜被污染。

专题2微生物的培养与应用

第7页共35页

课题1微生物的实验室培养

1、研究和应用微生物的前提是什么？（防止杂菌入侵，获得纯净的培养物。）

2、实验室培养微生物需要注意哪两方面？

一方面需要为培养的微生物提供合适的营养和环境条件

另一方面需要确保无处不在的其他微生物无法混入。

3、什么叫做培养基？

培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。

4、琼脂是什么？性质有哪些？

琼脂是一种从红藻中提取的多糖。琼脂在98℃以上熔化,在440c以下凝固，在常规培养条件下呈现

固态。

5、培养基的种类，按物理性质可分为哪些？他们各自有哪些作用？

培养基按照物理性质可分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基。

液体培养基（不含凝固剂）：配制成的液体状态的基质。

固体培养基：在液体培养基中加入凝固剂琼脂后，制成琼脂固体培养基。微生物在固体培养基表面生

长，可以形成肉眼可见的菌落。根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。

用途：液体培养基应用于工业或生活生产，常用来扩大培养微生物数量；固体培养基应用于微生物的

分离和鉴定；半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。

6、培养基的种类，按功能可以分为哪些？请举例说明。

按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。

选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的

生长。鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别

不同类别的微生物。

7、培养基的成分主要有哪些？

水、碳;原、氮源、无机盐。

碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。如82、NaHCCh等无机碳源；糖类、石油、花生饼

等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源。

氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如N2、NH3、NO%、NH4+等无机氮源；蛋白质、

氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白陈等有机氮源。只有固氮微生物才能利用

N2O

第8页共35页

8、培养基除满足几种主要营养物质的基础上，还需要满足什么条件？

满足微生物生长对PH、温度、氧气以及特殊营养物质的要求。

9、培养乳酸杆菌时，还需要在培养基中添加什么？霉菌呢？厌氧微生物呢？

培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素；培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性；培养细菌是

需要将pH调至中性或微碱性；培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件。

10、牛肉膏和蛋白陈主要能提供哪些营养物质？（碳源和氮源。）

11、获得纯净培养物的关键是？（防止外来杂菌的入侵。）

12、无菌技术对实验操作的空间、操作者的衣着和手要进行什么操作？（清洁和消毒。）

13、无菌技术对用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基要进行什么操作？（灭菌。）

14、实验操作应在什么附近进行？（酒精灯火焰。）

15、无菌技术的目的？（①防止培养物被污染；②防止污染环境；③避免感染操作者。）

16、消毒和灭菌的定义是什么？

消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽抱和抱子X

灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽抱和抱子。

比较项理化因素的作用强度消灭微生物的数量芽抱和抱子能否被消灭

消毒较为温和部分生活状态的微生物不能

灭菌强烈全部微生物能

17、实验室常用的消毒方法有哪些？常用的灭菌方法有哪些？

消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（对于一些不耐高温的液体）还有化学药剂（如酒精、氯气、

石炭酸等）消毒、紫外线消毒。

灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。

18、煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒、紫外线消毒法的方法操作及适用对象？

方法操作适用对象

煮沸消毒法100℃煮沸5—6min耐高温的日常用品

巴氏消毒法75℃煮30min或在80℃煮15min不耐高温的液体，如牛奶

化学药剂消毒法酒精、氯气、石炭酸、煤酚皂溶液等消如用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源

第9页共35页

毒液

紫外线消毒法紫外线照射接种室、接种箱、超净工作台

19、灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌的方法操作及适用对象？

方法操作适用对象

灼烧灭菌酒精灯火焰上灼烧接种环、接种针或其他金属用具

干热灭菌干热灭菌箱内,在160-170℃加热1耐高温的、需要保持干燥的物品，如

—2h玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用

具

高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌锅内，压力为lOOkPa,培养基

温度为，维持15—30min

20、高压蒸汽灭菌为达到良好的灭菌效果，压力为多少？温度为多少？维持多长时间？

压力为lOOkPa,温度为1210c，维持15—30min

21、高压蒸汽灭菌中把锅内的水加热煮沸的原因是什么？（排除冷空气。）

22、紫外线消毒，在照射前喷洒什么可以加强消毒效果？（石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液。）

23、培养基丢弃前要做什么操作？为什么？（灭菌，防止培养基上滋生细菌污染环境。）

24、配制牛肉膏蛋白陈培养基的流程是什么？（计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。）

25、应该在什么时候调节PH?（熔化之后、灭菌之前。）

26、为什么称取时动作要迅速？（牛肉膏和蛋白陈都容易吸潮。）

27、溶化过程中不断用玻璃棒搅拌的作用？（防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。）

28、培养基灭菌后，温度要冷却到多少左右时才能用来倒平板？用什么来估计培养基的温度？

50。匚可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行

倒平板了。

29、为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？（通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。）

30、倒平板操作中，平板冷却凝固后还需要如何操作？目的是什么？

平板冷凝后，将平板倒置。可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。

31、在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生

物吗？为什么？

第10页共35页

空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。

32、微生物的接种方法包括平板划线法、稀释涂布平板法、斜面接种、穿刺接种,其中最

常用的是平板划线法、稀释涂布平板法,其核心是防止杂菌的污染，保证培养物的纯净度。

33、用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是：使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在

培养基表面形成单个的菌落，以便于纯化菌种。

34、平板划线法的原理是什么？

平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作。将聚集的菌种逐步稀释分散到培

养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌

落。

35、平板划线法的操作步骤？

①将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红。

②在火焰旁冷却接种环，并打开棉塞。

③将试管口通过火焰。

④将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液。

⑤将试管通过火焰，并塞上棉塞。

⑥左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线,盖上

皿盖。注意不要划破培养皿。

⑦灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。重复以上操作，在三、

四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第一区相连。

⑧将平板倒置放入培养箱中培养。

36、为什么使锥形瓶的瓶口通过火焰？（防止杂菌污染。）

37、为什么在操作的每一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束以后，仍然要灼烧，为

什么？说出每一次灼烧的原因。

①操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；

②每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环

上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少,

以便得到菌落。

③划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。

38、在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后在进行划线？（以免接种环温度太高，杀死菌种。）

第11页共35页

39、在做第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？

划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目

随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。

40、为什么最后一次划线区不能与第一区相连？

最后一次划线区的细菌数目最少，不能与第一区相连，可以保证最终能得到单个细菌繁殖而来的菌

落。

41、稀释涂布平板法的原理是什么？

稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培

养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能

在培养基表面形成单个的菌落。

42、用何种物质来对菌液进行梯度稀释？为什么要进行梯度稀释？

无菌水。进行梯度稀释的原因：菌液中的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落。

43、在用移液管进行稀释时？应该在菌液中吹吸三次，目的是什么？

使菌液与水充分混匀，从而达到稀释的目的。

44、移液管需要经过灭菌,操作时，试管口和移液管应在离火焰1—2cm处。

45、涂布平板的操作步骤？

①将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。

②取少量菌液，滴加到培养基表面。

③将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8~10s。

④用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。

46、如何检验培养基的灭菌是否合格？

将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入在370c恒温箱中培养12h和24ho若未接种的

培养基无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。

47、培养时放在什么中进行培养？培养的温度多少？（恒温箱，37℃O）

48、如果培养基上观察到了不同形态的菌落，说明了什么？

说明在接种过程中受到了杂菌的污染；或者培养基的制备不合格。

49、为了保持菌种的纯净，需要进行菌种的保藏。对于频繁使用的菌种采用临时保藏法。对于需要

长期保存的菌种采用甘油管藏法.

第12页共35页

50、临时保藏法需要将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养。当菌落长成后,

将试管放入的冰箱中保藏。

51、临时保藏法有什么缺点？

保存的时间不长，菌种容易被污染或产生变异。

52、甘油管藏法:在3mL的甘油瓶中，装入1mL甘迪后灭菌。将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中,

与甘油充分混匀后，放在二?空的冷冻箱中保存。

课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

1、尿素能不能直接被农作物吸收？需要被分解成什么才可以被植物利用？

尿素是一种重要的农业氮肥，尿素并不能直接被农作物吸收。只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨

之后，才能被植物利用。

2、土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为能合成什么？

士康中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成眼酶。

3、如何寻找目的菌株？

在寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。

4、实验室中微生物的筛选应用的原理是什么？

人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。

5、为什么以尿素作为唯一氮源的培养基能够选择出分解尿素的微生物？

培养基中尿素作为唯一氮源，只有能够利用尿素的微生物才能够生长。

6、什么是选择培养基？

将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。

7、培养基中加入青霉素能分离出什么微生物？加入高浓度食盐能分离出什么微生物？

加入青霉素能分离出酵母菌和霉菌。（青霉素抑制细菌、放线菌的生长）

加入高浓度食盐能分离出金黄色葡萄球菌。

8、培养基中缺乏氮源能分离出什么微生物？缺乏有机碳源能分离出什么微生物？

培养基中不加入氮元素，可以选择培养能固氮的微生物；

培养基中不加入有机碳源可以选择培养自养微生物；

9、培养基中以NH3作为唯一氮源能分离出什么微生物？以石油作为唯一碳源能分离出什么微生物？

第13页共35页

以NH3作为唯一氮源能分离出硝化细菌；

以石油作为唯一碳源能分离出能分解石油的微生物。

10.测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数法。

11、常用来统计样品中活菌数目的方法是什么？

稀释涂布平板法。

12、为什么通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中的活菌数？（稀释涂布平板法统计样品中活菌

的数目的原理）

当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统

计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活细菌。

13、为了保证结果正确，一般选择菌落数在什么范围的平板进行计数？（30-300.）

14、某位同学在106浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230，他的结果是否合理？为什么？

不合理。没有设置重复组，结果不具有说服力。

15、某位同学在同样的浓度下涂布了三个平板，统计的菌落数分别为21、212和256，他的结果是否

合理？为什么？

合理。因为在同一个稀释度下得到两个菌落数目接近的平板，且菌落数在30-300之间。

16、某位同学在同样的浓度下涂布了三个平板，统计的菌落数分别为21、212和256,该同学以这三

个平板上菌落数的平均值163作为统计结果。他的结果是否合理？为什么？

不合理。设置的重复组中有一组结果相差太远，且菌落数不在30-300之间。

17、统计样品菌落数目，为使结果具有说服力，应设置重复组。

18、如何根据平板上的菌落数推测出每克样品中的细菌数？

统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计3个平板，计算出平板菌落数的平均值

每克样品中的菌落数=（C/V）*M其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布

平板时所用的稀释液的体积（创），M代表稀释倍数.

19、用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目,（实际活菌数量比测得的数量偏

高）原因是什么？

因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。

20、除了稀释涂布平板法外，还有什么测定微生物数量的方法？用到什么工具？

显微镜直接计数法。血细胞计数板。

21、用显微镜直接计数法统计的菌落数比活菌的实际数目,原因是什么？

第14页共35页

显微镜直接计数法不能区分活菌和死菌，死菌也计数在内。

22、设置对照的目的是什么？

设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。对照

实验是指除了被测试的条件以外，其他条件都相同的实验，其作用是比照试验组，排除任何其他可能原

因的干扰，证明确实是所测试的条件引起相应的结果。

23、检验选择培养基是否起到了选择作用，应该如何设置对照？

用接种了菌液的牛肉膏蛋白陈培养基和接种了菌液的选择培养基进行对照，在牛肉膏蛋白陈培养基

上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，则说明选择培养基起到了选择作用。

24、分离和计数土壤中分解尿素的细菌的实验流程？

土壤取样-制备培养基一样品的稀释一取样涂布一培养观察一菌落计数

25、土壤取样时，为什么要铲去表层土?

土壤中的微生物，大约70%—90%是细菌。细菌适宜在酸碱度接近中性的潮湿土壤中生长，绝大多

数分布在距地表3—8cm的土壤层。

26、测定土壤中细菌、放线菌、真菌的数量分别选用什么稀释倍数进行平板培养？

测定土壤中细菌的数量，一般选用。、、

14105106

测定放线菌的数量，一般选用103、10%105

测定真菌的数量,一般选用1。2、10\IO4

27、为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？（因为土壤中各类微生物的数量是不同的。）

28、细菌、放线菌、霉菌各自的培养温度和培养时间？

不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间。细菌30-37℃1-2天；

放线菌25—28℃5—7天；霉菌25—28℃3—4天。

29、微生物培养时要每隔24h统计一次菌落数目，选取什么的记录作为结果？原因是什么？

选取菌落数目稳定时的记录作为结果。防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。

30、一般来说，在一定条件下（相同培养基、温度及培养时间）,同种微生物表现出稳定的菌

落特征.

31、菌落特征包括哪些方面？（菌落的性状、大小、隆起程度和颜色等方面。）

32、在实验中应该从哪些方面注意无菌操作？（至少3点）

第15页共35页

①取土样用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都需要灭菌。

②应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中，塞好棉塞。

③在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁操作。

33、什么是鉴别培养基？（根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品。）

34、在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，会有什么颜色变化？（指示剂将变红。）

35、为什么能通过酚红指示剂来鉴定能分解尿素的细菌？

在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的眼酶将尿素分解成了氨。氨会使培养基的碱性增强，PH

升高，酚红指示剂将变红。

36、测定饮用水中的大肠杆菌数目可以用什么方法？

滤膜法。将已知体积的水过滤后，将滤膜放在伊红舞培养基上，大肠杆菌的菌落呈现黑鱼。可以

根据培养基上黑色菌落的数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。

课题3分解纤维素的微生物的分离

1、纤维素是由什么首尾相连而成的高分子化合物？（葡萄糖。）

2.地球上含量最丰富的多糖类物质是什么？（纤维素。）

3、为什么纤维素能被土壤中某些微生物分解利用？（因为它们能够产生纤维素酶。）

4、纤维素酶是一种复合酶，由哪些组分组成？

纤维素酶是一种复合酶,它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苗酶。

5、纤维素是如何被纤维素酶分解成葡萄糖的？

C1酶、CX酶使纤维素分解成纤维二糖，葡萄糖普酶将纤维二糖分解成葡萄糖。

6、筛选纤维素分解菌的方法是什么？（刚果红染色法。能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选。）

7、筛选纤维素分解菌的原理是什么？通过什么现象来判断有纤维素分解菌？

刚果红（简称CR）是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解

后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养

基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培

养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。这样，我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分

解菌。

8、分离分解纤维素的微生物的实验流程？

第16页共35页

土壤取样一选择培养（此步是否需要，应根据样品中目的菌株数量的多少来确定）一梯度稀释T将

样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上一挑选产生透明圈的菌落

9、为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌？

由于生物与环境的相互依存关系，在富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相对提高，因此从

这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。

10、土壤取样时，为什么将滤纸埋在土壤中？

将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集，实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。

一般应将纸埋于深约10cm左右腐殖土壤中。

11、选择培养的目的是什么？

通过选择培养熠加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物.

12、为什么选择培养能够"浓缩"所需的微生物？

在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这

种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。

13、选择培养用固体培养基还是液体培养基，为什么？

液体培养基。液体培养基可以使营养成分充分消耗，有利于菌种大量繁殖。

14、选择培养时振荡培养的目的是什么？

提高培养液中溶解氧的含量；同时使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率。

15、如何判断一个培养基是固体培养基还是液体培养基？（是否加入琼脂（凝固剂I）

16、以纤维素作为唯一碳源的选择培养基可以选择出什么微生物？为什么？

可以选择出纤维素分解菌，因为以纤维素作为唯一碳源，有利于纤维素分解菌生长，同时抑制其他

微生物生长。

17、鉴别纤维素分解菌的培养基用固体培养基还是液体培养基？（固体培养基。）

18、刚果红染色法有哪两种方法？分别是如何操作的？

一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是在倒平板时就加入刚果红。

方法一：在长出菌落的培养基上，覆盖质量浓度为lmg/ml的CR溶液，10—15min后，倒去CR溶

液，加入lmol/L的Nad溶液,15min后倒掉NaCI溶液，此时，产生纤维素酶的菌落周围将会出现

透明圈。

方法二：配制质量浓度为10mg/ml的CR溶液，灭菌后，按照每200ml培养基加入1ml的比例加入

第17页共35页

CR溶液，混匀后倒平板。等培养基上长出菌落后，产生纤维素酶的菌落周围将会出现明显的透明圈。

19、两种刚果红染色法中哪种方法刚果红需要灭菌？哪种方法刚果红不需要灭菌？

菌落形成后加入刚果红，刚果红不需要灭菌；菌落形成前倒平板时加入刚果红，刚果红需要灭菌。

20、为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行什么实验？（发酵产纤维素酶的实验。）

21、纤维素酶的发酵方法有哪两种？（液体发酵和固体发酵。）

22、纤维素酶的测定是通过对什么物质进行定量测定？

对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。

专题6植物有效成分的提取

课题1植物芳香油的提取

1、天然香料的来源？（植物、动物。）

2、植物芳香油的特点及组成？（植物芳香油挥发性强，成分复杂，主要包括菇类化合物及其衍生物。）

3、植物芳香油的提取方法有哪些？（蒸馈、压榨和萃取。）

4、植物芳香油提取的常用方法是什么？（水蒸气蒸谣法。）（注意："气"字不要写错）

5、水蒸气蒸储法的原理、适用范围、不足？

原理：利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来形成油水混合物，冷却后混合物又会重新分

出油层和水层。

适用范围：适用于提取玫瑰油、逋荷油等挥发性强的芳香油。

不足：水中蒸播会导致原料焦糊和有效成分水解等问题。

6、压榨法的原理、适用范围、不足？

原理：通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油。

适用范围：适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取。

不足：出油率低。

7、萃取法的原理、适用范围、不足？

原理：使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发出有机溶剂后就可获得芳香油。

适用范围：适用范围广，要求原料的颗粒尽可能细小，能充分浸泡在有机溶剂中。

不足：使用的有机溶剂必须事先精制，除去杂质，否则会影响芳香油的质量。

第18页共35页

8、根据蒸储过程中原料放置的位置，可以将水蒸气蒸储法分为哪几类？

水中蒸储：原料放在沸水中加热蒸储。

水上蒸谭：原料隔放在沸水上加热蒸储。

水气蒸储：利用外来高温水蒸气加热蒸溜。

9、为什么柑橘和柠檬中的芳香油不能用蒸储法提取？应用什么方法提取？

因为水中蒸憎会导致原料焦糊和有效成分水解等问题。因此，柑橘和柠檬芳香油的制备通常使用压

榨法。

10、提取玫瑰精油的实验流程：

鲜玫瑰花+清水一水蒸气蒸储一油水混合物一分离油层（加入NaCI）-除水（加入无水NaSO4）一

过滤一玫瑰油

11、在提取玫瑰精油时要用的哪两种物质？作用分别是？

NaCI:促使油水分离。无水Na2s。4：除去油层中的水分。

12、玫瑰花瓣与清水的质量比？（玫瑰花瓣与清水的质量比为1:4。）

13、用于提炼玫瑰精油的玫瑰花期是？（每年5月上、中旬，此阶段花朵含油量最高。）

14、玫瑰精油的化学性质有哪些？

玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸储。

15、用水蒸气蒸憎法提取玫瑰精油，在水中蒸憎、水上蒸储和水气蒸储的方法中，妞麴1更简便易行。

16、如何处理水蒸气蒸憎后收集到的乳白色的乳浊液？

锥形瓶中收集到的乳白色的乳浊液，这是玫瑰油与水的混合物。

①向乳浊液中加入NaCI,增加盐的浓度，就会出现明显的分层。

②然后再用分液漏斗将油层和水层分开。

③加入无水Na2s。4除去油层中的水分。

④过滤除去固体Na2s。4就可以得到玫瑰油了。

17、哪些因素会导致玫瑰精油的品质较差？提高玫瑰精油品质的方法是什么？

影响玫瑰精油品质的因素：蒸微温度和蒸储时间。

蒸情温度太高，蒸惘时间太短,产品品质就比较差。

如果要提高玫瑰精油的品质，可以延长蒸馈的时间。

第19页共35页

18、橘皮精油的主要成分是什么？（柠檬烯。）

19、为什么不能用水蒸气蒸储法提取橘皮精油？

橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸谭时会发生部分水解，使用水中蒸情又会产生原料焦糊的问题。

20、提取橘皮精油的方法是什么？（压榨法。）

21、提取橘皮精油的实验流程：（石灰水浸泡一漂洗T压榨T过滤T静置T再次过滤一橘皮油）

22、石灰水的作用？（能够破坏细胞结构，分解果胶，防止橘皮压榨时滑脱，提高出油率。）

23、柑橘皮中有大量的果蜡、果胶和水分，如果直接压榨，出油率较低。为了提高出油率，应该怎么做？

将柑橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡。

24、压榨是一个什么过程？

（压榨是机械加压过程，既将原料压紧，防止原料滑脱，又要将油分挤压出来。）

25、为了使橘皮油易于与水分离，要加入哪两种物质？（相当于橘皮质量0.25%的NaHCCh和5%

的Na2s04。）

26、压榨液的处理？

①先用鳗布袋过滤除去固体物和残渣；

②然后离心进一步除去质量较小的残留固体物；

③再用缝漏斗将上层的橘皮油分离出来；

④然后静置5-7d,使杂质沉淀,用吸管吸出上层澄清橘皮油，其余部分通过型过滤,滤液与吸出

的上层橘油合并，成为最终的橘皮精油。

27、橘皮在石灰水中的浸泡时间为？目的是什么？

10h以上。为了使橘皮浸透，这样压榨时不会滑脱，出油率高，并且压榨液的黏稠度不会太高，过滤

时不会堵塞筛眼。

课题2胡萝卜素的提取

1、胡萝卜素可以分为哪几类？分类依据是什么？

根据碳碳双键的数目可以将胡萝卜素划分为a、乐Y三类。

2、胡萝卜素中最主要的组成成分是哪一类？（B-胡萝卜素。）

3、为什么可以用胡萝卜素来治疗夜盲症、幼儿生长发育不良、干皮症等？

一分子的B一胡萝卜素在人或动物的小肠、肝脏等器官被氧化成两分子的维生素A。夜盲症、幼儿生

第20页共35页

长发育不良、干皮症都是因缺乏维生素A而引起的疾病。

4、胡萝卜素除了用来治疗各种疾病外，还有什么用途？

常用的食品色素；天然胡萝卜素还具有使癌变细胞恢复成正常细胞的作用。

5、胡萝卜素的性质？

橘黄色结晶，化学性质比较稳定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醛等有机溶剂。

6、在用胡萝卜做菜时，为什么会呈现出橘黄色？在用胡萝卜做菜时要多加些油，原因是什么？

胡萝卜素溶解在油中产生的。多加油的原因：胡萝卜素易溶解在油中，溶解的胡萝卜素容易被人体

吸收，因此炒胡萝卜时要多加些油。

7、在工业生产上，提取天然B一胡萝卜素的方法有哪几种？

①从植物中提取；②从大面积养殖的岩藻中获得；③利用微生物的发酵生产。

8、从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是什么？原因是？（萃取法。因为胡萝卜素易溶于有机溶剂。）

9、胡萝卜素能用水蒸气蒸储;才是取吗？原因是？

不能用水蒸气蒸谣法。因为水蒸气蒸谣法适用于分离挥发性较强的物质，而胡萝卜素不易挥发，不能

随水蒸气蒸憎出来。

10、提取胡萝卜素的实验流程：（粉碎一干燥一萃取一过滤一浓缩一胡萝卜素）

1L水溶性有机溶剂有哪些？水不溶性有机溶剂有哪些？

水溶性有机溶剂（能与水混溶）：乙醇、丙酮

水不溶性有机溶剂（不能与水混溶）：石油酸、乙酸乙酯、乙醛、苯、四氯化碳等

12、萃取胡萝卜素的有机溶剂应具备什么条件？

（具有较高沸点，能够充分溶解胡萝卜素，且不与水混溶。）

13、乙副口丙酮能够用于胡萝卜素的萃取吗？为什么？

不能。乙醇和丙酮是水溶性有机溶剂，在萃取中能与水混溶而影响萃取效果。

14、萃取的效率主要取决于什么？同时还受到哪些因素的影响？

主要因素：萃取剂的性质和使用量。

次要因素：原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等。

15、一般来说，要想萃取效果好，要保证什么？

第21页共35页

一般来说，原料颗粒小，萃取