生物中图版学案：第五章第二节植物种苗脱毒技术

学必求其心得，业必贵于专精学必求其心得，业必贵于专精学必求其心得，业必贵于专精第二节植物种苗脱毒技术掌握植物种苗脱毒的基本过程。一、种苗脱毒把茎尖分生组织从感染病毒的植株上剥离，在离体条件下进行组织培养,从而获得不含病毒的脱毒苗，这一过程称为种苗脱毒.二、脱毒苗的培养实例1．马铃薯脱毒苗的培养（1）取材和消毒将欲脱毒的马铃薯块茎催芽，剪芽并剥去外叶，用自来水冲洗10min,在无菌室内用质量分数为5％的漂白粉溶液消毒后，用无菌水冲洗2～3次。（2)剥离和接种取马铃薯芽的尖端1～2cm，在解剖镜下，用解剖刀小心地除去茎尖周围的叶片组织，露出顶端圆滑的分生区，用解剖针细心剥取所需的茎尖（约0.1～0。5cm)，接种于MS培养基上,切面接触培养基。(3）培养于25℃、1500～3000lx光照下培养，当长成3～4片叶的小植株时，即可移栽。2．草莓脱毒苗的培养3．探究切取茎尖的最佳长度在进行种苗脱毒时，切取的茎尖越小，脱毒效果就越好，但组织培养的速度就越慢，越不容易成活；如果切取的茎尖大一些，组织培养虽容易成功，但脱毒效果却很差。污染的预防污染就是指在组织培养过程中，培养容器内滋生菌斑，使培养材料不能正常生长发育，从而导致培养失败的现象。植物组织培养不同于扦插、分根、叶插等常规无性繁殖。由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，所以对培养条件的要求较高，对无菌操作的要求非常严格。污染有两种类型:（1）细菌污染：菌斑呈黏液状,界限比较明显,一般接种后1～2天即能发现。主要是大肠杆菌和链球菌。一般是由接种人员造成的。（2）真菌污染：菌斑呈绒毛状、絮状，界限不明显,伴有不同颜色的孢子,接种后3～10天才能发现。主要是霉菌污染，可能是植物材料灭菌不当造成的。可以通过以下措施做好预防.（1）防止外植体带菌。①选择好外植体采集时期和采集部位。外植体采集以春秋为宜，优先选择地上部分作为外植体，阴雨天勿采，晴天下午采,采前喷杀虫剂、杀菌剂或套塑料袋。②在室内或无菌条件下进行预培养.③外植体严格灭菌。做灭菌效果试验，多次灭菌和交替灭菌。（2）保证培养基及接种器具彻底灭菌。①分装时，注射器勿与瓶接触，培养基勿黏瓶口。②检查封口膜是否有破损。③扎瓶口要位置适当、松紧适宜。④保证灭菌时间和高压锅内温度。⑤接种工具用前彻底灭菌.⑥工作服、口罩、帽子等布质品定期进行湿热灭菌。（3）操作人员严格遵守无菌操作规程.如一定要规范着装，操作过程中不说话等。（4）保证接种与培养环境清洁.①污染瓶经高压灭菌后再清洁.②接种环境定期熏蒸消毒、紫外灯照射或用臭氧灭菌和消毒.③定期对培养室消毒、防止高温。对外植体进行表面消毒时,既要考虑到药剂的消毒效果,又要考虑到植物的耐受力。不同药剂、不同植物材料，甚至不同器官要区别对待。消毒用过的有毒药品应收集后统一交给有关专业部门处理，以免引起环境污染。一旦发现培养材料被污染,特别是真菌性污染，一定不要打开培养瓶。应先将所有被污染的培养瓶统一放在高压蒸汽灭菌锅中灭菌后，再打开培养瓶进行清洗.题型种苗脱毒技术【例题】甘薯种植多年后易积累病毒而导致品种退化。目前生产上采用茎尖分生组织离体培养的方法快速繁殖脱毒的种苗，以保证该品种的品质和产量水平。这种通过分生组织离体培养获得种苗的过程不涉及细胞的（）.A．有丝分裂B．分化C．减数分裂D．全能性解析：茎尖分生组织离体培养的基本原理是细胞的全能性，在组织培养过程中通过脱分化才能成为愈伤组织，又经过再分化、细胞有丝分裂，成为具有根和芽的植物体。此过程不涉及减数分裂。答案：C1马铃薯利用它的块茎进行无性繁殖，种植的世代多了以后往往会感染病毒而减产，为此农户都希望得到无病毒的幼苗进行种植.获得无病毒植株的最佳办法是（）。A．选择优良品种进行杂交B．进行远缘植物体细胞杂交C．利用芽体进行组织培养D．人工诱导基因突变解析：马铃薯被植物病毒侵染后引起品质下降,可利用植物组织培养技术进行脱毒。具体做法是选取含病毒最少或无病毒的植物细胞进行组织培养，可获得无病毒植株。答案：C2影响植物组织培养的因素包括（）。①培养基的配制②外植体的选取③激素的运用④消毒⑤温度、pH、光照A．①②③④⑤B．①②③C．①②③④D．①②③⑤解析：离体的植物组