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文档简介

实验最大吸收波长的确定和测量实验目的1、掌握定量分析的三种方法2、熟练操作紫外分光光度计3、通过实验用三种不同方法来计算实验结果分析方法实验内容实验目的小结1、吸收系数法2、对照品法3、标准曲线法E——物质在测定波长下的百分吸收系数，100mL·g-1·cm-1郎伯-比尔定律：A=Kbcc——溶液的浓度K——吸光系数b——液层厚度紫外分光光度计的定量分析方法E未知未知样的浓度与对照品相差较大实验目的实验内容分析方法小结（一）确定维生素B1的最大吸收波长（二）用吸收系数法测定维生素B1的含量（三）用对照品比较法测定维生素B1的含量（四）用标准曲线法测定维生素B1的含量实验内容实验目的分析方法实验内容小结（一）确定维生素B1的最大吸收波长1、用1cm的石英吸收池，以试剂空白作参比；2、浓度为2.50μg/mL的维生素B1溶液作为测试液，在200～400nm波长范围内每隔20nm测定一次吸光度；3、在峰值附近（10nm范围）每间隔2nm测量一次;4、波长作为横坐标，吸光度A作为纵坐标，绘制吸收曲线，并确定维生素B1的最大吸收波长λmax。实验目的分析方法实验内容小结Aλ200220240260280300320340360380400ⅩⅩⅩⅩⅩⅩⅩⅩⅩⅩ维生素B1的吸收曲线实验目的分析方法实验内容小结（二）用吸收系数法测定维生素B1的含量在最大吸收波长λmax下，用1cm的吸收池，以试剂空白作参比，测定供试品溶液的吸光度，按吸收系数法测定供试品溶液的含量。E维生素B1=421×100mL·g-1·cm-1实验目的分析方法实验内容小结项目吸光度A含量/μg/mL供试品-10.1453.44结果在最大吸收波长λmax下，用1cm的吸收池，以试剂空白作参比，分别测定对照品（5.00μg/mL）、供试品溶液的吸光度，按对照品比较法，计算维生素B1的含量。（三）用对照品比较法测定维生素B1的含量实验目的分析方法实验内容小结项目吸光度A含量/μg/mL对照品0.082/供试品-10.1454.42结果1、测定标准曲线在最大吸收波长λmax下，用1cm的吸收池，以试剂空白作参比，分别测定标准系列溶液吸光度。2、绘制标准曲线绘制标准溶液吸收光谱曲线，记录维生素B1标准系列溶液相应的吸光度，并以c为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线，求线性回归方程。3、测定供试品溶液根据供试品溶液的吸光度，从线性回归方程上获得对应的维生素B1浓度，从而求得供试品中维生素B1的含量。（四）用标准曲线法测定维生素B1的含量。实验目的分析方法实验内容小结项目0123供试品1浓度c/μg/mL0.002.505.0012.50吸光度0.0000.0820.1470.3250.145含量c/μg/mL/5.26线性回归方程/相关系数y=0.0255x+0.0109R2=0.9953结果实验目的分析方法实验内容小结小结1、供试品可以通过测定得到最大吸收波长，且与浓度无关；2、不同的情况下可以选用

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