生物课后训练：专题课题　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

学必求其心得，业必贵于专精学必求其心得，业必贵于专精学必求其心得，业必贵于专精课后训练1．可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是（）。A．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B．以尿素为唯一氮源的培养基中加二苯胺试剂C．以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂2．关于微生物的培养，下列叙述错误的是(）.A．细菌一般在30～37℃的温度下培养1~2dB．放线菌一般在25～28℃的温度下培养5~7dC．霉菌一般在25～28℃的温度下培养3～4dD．不同种类的微生物，一般需要相同的培养温度和培养时间3．在寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找,下列不属于厌氧细菌生存环境的是（）。A．土壤深层B．人或动物体内C．真空D．池塘淤泥4．需要在火焰旁操作的有(）.①土壤取样②称取土壤③稀释土壤溶液④涂布平板⑤微生物的培养A．①②③④⑤B．②③④⑤C．③④⑤D．②③④5．分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是(）.①加尿素②不加尿素③加琼脂④不加琼脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸盐⑧不加硝酸盐A．①③⑤⑦B．②④⑥⑧C．①③⑤⑧D．①④⑥⑦6．以下关于分解尿素的细菌的说法正确的是（）.A．能分解尿素的原因是能合成分泌蛋白酶B．以尿素作为唯一的碳源C．环境中含有大量的尿素诱导该细菌产生了分解尿素的特性D．以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基培养该菌后不会使酚红指示剂变红7．稀释涂布平板法分离分解尿素的细菌时使用的涂布器应保存在体积分数为70%的酒精中，取出后又要放在酒精灯火焰上引燃,这两步分别属于什么技术？（）A．灭菌、灭菌B．消毒、消毒C．灭菌、消毒D．消毒、灭菌8．下列有关土壤中微生物的分离与计数的说法中，错误的是（）。A．因为土壤中各类微生物的数量不同,所以，为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离B．测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围不同C．如果得到了2个或2个以上菌落数目在30～300的平板,则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数D．牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目明显小于选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落9．马丁培养基是实验室常用的培养基之一。下列为马丁培养基的化学成分，据此回答下列问题。成分含量成分含量KH2PO4·3H2O0。1g葡萄糖1gMgSO4·7H2O0。05g蛋白胨0.5g0。1%孟加拉红溶液0.33mL琼脂1.5～2g2%去氧胆酸钠溶液2mLH2O100mL链霉素溶液（1×104μ/mL）0.33mL—（1）该培养基中加入了链霉素，能抑制细菌和放线菌，但真菌可以在上面生长，因此培养基是一种________培养基。(2）葡萄糖能给微生物生长提供______和______。(3）蛋白胨能给微生物生长提供______和______.（4）培养基中KH2PO4·3H2O可给微生物提供含________的无机盐。(5）琼脂的作用是作为________.10．探究如何从土壤中分离自生固氮菌并计数。实验原理：农田的表层土壤中，自生固氮菌的含量比较多.将用表层土制成的稀泥浆，接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下，只有自生固氮菌才能生长繁殖。材料用具:农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛9mL无菌水的大试管若干、无菌移液管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛90mL无菌水的锥形瓶、酒精灯、恒温箱.方法步骤:(1）倒平板。分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板,应在__________操作。（2)制备土壤稀释液。取土样10g加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀。用无菌移液管吸取上清液1mL,转至9mL无菌水的大试管中，依次稀释到107倍稀释度。为实现无菌操作，试管口和移液管应在离火焰__________cm处。(3）涂布。按照由107~103稀释度的顺序分别吸取0。1mL进行平板涂布，每个稀释度下，无氮培养基应至少涂布______个平板,牛肉膏蛋白胨培养基涂布______个平板.（4）培养.放入恒温箱内,在适宜温度条件下培养3～4d.一般每隔______小时统计一次，选取______时的记录作为结果，这样可以防止________________________________________________________________________。(5)细菌的计数。当菌落数目稳定时,选取菌落数在__________的平板进行计数。如果测试的平均值为50,则每克样品中的菌株数是__________。（稀释度是105）（6)预期结果。相同稀释度下，牛肉膏蛋白胨平板上的菌落数__________（填“多于”或“少于”）无氮培养基上的数目。理由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________.

参考答案1答案：A解析：细菌合成的脲酶可以催化尿素分解形成氨。氨会使培养基的碱性增强，pH升高。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后,如果pH升高,指示剂若变红,则说明该细菌能产生脲酶分解尿素。2答案：D解析：不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和时间.3答案：C解析：厌氧型微生物的生长繁殖不仅需要厌氧环境，同时还需要生存所必需的各种营养物质，如碳源、氮源、水、无机盐等。真空环境只能提供无氧环境，却不能提供其他营养物质。4答案:D解析:除了土壤取样和微生物的培养不便于在火焰旁进行外，其他均要在火焰旁进行,以防止杂菌污染。5答案:C解析：分离分解尿素的细菌，应该以尿素为唯一氮源,不用加硝酸盐来提供氮源.另外还要加葡萄糖提供碳源，加琼脂作为凝固剂,制成固体培养基，利于细菌的分离、鉴定、计数等。6答案：D解析：A项：酶有专一性，分解尿素的细菌之所以能分解尿素是因为能合成分泌脲酶.B项:该菌能以葡萄糖作为碳源。C项：环境中含有大量的尿素对分解尿素的性状起了选择作用而非诱导作用。D项:该菌产生脲酶把尿素分解为氨后，使pH升高,进一步使酚红指示剂变红，但添加酸碱缓冲剂后，阻止了pH的升高，因此培养基不再使酚红指示剂变红。7答案：D解析：消毒和灭菌是不同的。往往消毒比较温和，仅仅消灭危害健康的致病菌；而灭菌就比较强烈，如高压蒸汽、灼烧等,它是杀死一切菌。因此本题前者属消毒，后者属灭菌。8答案：D解析:样品的稀释度直接影响平板上生长的菌落的数目。实际操作中,通常选用一定稀释范围的样品液进行培养,以保证获得菌落在30~300之间适于计数的平板。测定土壤中细菌的数量，一般选用104、105和106倍的稀释液；测定放线菌的数量一般选用103、104和105倍的稀释液;测定真菌的数量，一般选用102、103和104倍的稀释液。将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目,从而说明选择培养基的筛选作用。9答案：选择答案：碳源能源答案：氮源维生素答案：K、P答案：凝固剂解析：链霉素能抑制细菌和放线菌生长，真菌可以在上面生长.因此该培养基是一种选择培养基.葡萄糖是一种含碳的有机物，既可给微生物提供碳源，又可给微生物提供能源.该培养基蛋白胨可以给微生物提供氮源和维生素。10答案：酒精灯火焰旁答案:1～2答案：31答案：24菌落数目稳定因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目答案：30～3005×107答案：多