2024年华师大版选择性必修3生物下册阶段测试试卷

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A.图中①②③依次称之为透明带、滋养层、内细胞团B.胚胎从①中伸展出来的过程叫孵化，发生在囊胚期C.高等哺乳动物的细胞分化开始于囊胚期，胚层分化始于原肠胚期D.胚胎移植前要取出③的细胞进行性别鉴定2、杨梅果实可食用，也可加工成果酒、果醋等饮品，下列相关叙述，不正确的是A.杨梅果醋发酵是先通氧再密闭B.制作杨梅果醋所需的细胞没有成形的细胞核C.制作杨梅果酒所需要的微生物主要是酵母菌D.杨梅果汁能够为酵母菌的生长提供水、无机盐、碳源、氮源等营养物质3、2017年我国科学家成功培养出胚胎细胞克隆猴“中中”和“华华”。克隆猴的细胞来源是一只流产母猴胚胎的成纤维细胞，用了127个卵细胞，109个抽取细胞核，79个注入细胞核，21个再生，6个代孕，2个出生，2个存活。两只克隆猴分别是2017年11月27日和12月5日诞生的。下列相关叙述中错误的是（）A.“中中”和“华华”由不同的母猴孕育，它们没有血缘关系B.克隆猴的培育过程充分体现了科学技术发展的艰辛与曲折C.“中中”和“华华”的出生是首次成功克隆灵长类动物，意义重大D.“中中”和“华华”不是那个死胎的复活，是它无性生殖的后代4、生殖性克隆和治疗性克隆既有相同点，又有本质的区别。下列相关叙述错误的是（）A.两者都涉及体细胞核移植技术B.前者为了产生新个体，后者为了治疗疾病C.前者面临伦理问题，后者不会面临伦理问题D.我国允许生殖性克隆动物，但禁止生殖性克隆人5、某高校采用如图所示的发酵罐进行葡萄酒主发酵过程的研究；下列叙述错误的是（）

A.夏季生产果酒时，常需对罐体进行降温处理B.乙醇为挥发性物质，故发酵过程中空气的进气量不宜太大C.正常发酵过程中罐内的压力不会低于大气压D.可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵6、蛋白质工程的基本流程正确的是（）

①蛋白质分子结构设计②DNA合成③预期蛋白质功能④根据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列A.①②③④B.④②①③C.③①④②D.③④①②7、寒兰为珍稀的兰花品种。为了增加野生寒兰数量，科研人员希望对其进行人工大量繁殖，再移栽至原有生境。在人工繁殖时可以应用的最合适的生物工程技术手段是（）A.将寒兰体细胞核移植到其他植物去核卵细胞中B.将寒兰的外植体消毒处理后进行植物组织培养C.将寒兰体细胞与繁殖力强的其他植物细胞进行融合D.将生长素基因转入野生寒兰获得生长速度快的寒兰8、干细胞是一类具有自我更新能力的细胞，能产生特定组织甚至生物体的所有细胞类型。根据个体发育过程中干细胞出现的次序和发育潜能的不同，可分为胚胎干细胞和成体干细胞。下列相关说法错误的是（）A.胚胎干细胞分化为完整个体体现了已分化动物细胞具有全能性B.已分化细胞可在体外被诱导成为一种类似于胚胎干细胞的细胞C.利用成体干细胞进行疾病治疗理论上无需考虑免疫排斥的问题D.将干细胞用于临床上的疾病治疗可能存在导致肿瘤发生的风险评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)9、下列关于人早期胚胎发育过程中桑椹胚和囊胚的叙述中，正确的是（）A.囊胚与桑椹胚相比，每个细胞内DNA总量增加B.囊胚期出现了细胞分化，但遗传物质未发生改变C.囊胚期内细胞团和滋养层细胞差异不是复制水平上的差异，而是转录水平上的差异引起D.桑椹胚的形成在卵巢，囊胚的形成在输卵管10、哺乳动物的造血干细胞具有以下哪些性质？（）A.分化为骨骼肌细胞B.分化为红细胞C.分化为嗜中性粒细胞D.分化为神经细胞11、传统发酵技术是我国文化中的精髓，是我国人们利用勤劳的双手、机智的头脑所探究出来的智慧结晶。下列有关说法错误的是（）A.利用发酵技术，在鲜奶中加入乳酸菌可制成乳酸制品B.制作泡菜的坛子加水密封隔绝空气是为了抑制乳酸菌繁殖C.白酒的酿造过程中利用了霉菌和酵母菌两种微生物的发酵作用D.将做好的发酵食品冷藏于地窖中，其目的是促进微生物代谢产物的累积12、植株甲金花菜是一种多年生开花植物，具有多种优良性状，另一种远缘植株乙青花菜存在抗除草剂基因，欲将植株乙细胞中抗除草剂基因引入植株甲中，进行了如下操作。下列相关叙述，正确的是（）

A.过程A取顶芽细胞的操作有利于获得脱毒苗B.过程B中常用PEG诱导原生质体融合C.两个细胞融合完成的标志是再生出细胞壁D.该杂种植株的获得利用了植物细胞的全能性13、在动物细胞培养的过程中，贴壁的细胞不一定都能增殖并形成克隆（单个细胞繁殖形成的细胞群体），而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞，这一特点可用于测定动物细胞的增殖能力。大致流程如下图，相关叙述不正确的是（）

A.出现接触抑制后，细胞克隆停止增殖B.克隆细胞与接种的细胞的遗传信息不一定相同C.胰蛋白酶可使细胞分散成单个利于计数D.需采用固体培养基培养才能形成细胞克隆14、图甲为培育转基因生物时选用的载体，图乙是含有目的基因的一段DNA序列，图中标注了相关限制酶的酶切位点。下列叙述错误的是（）

A.若通过PCR技术提取该目的基因，应该选用引物a和引物cB.构建表达载体时应选用BamHⅠ和HindⅡ这两种限制酶C.图乙中一个DNA分子在PCR仪中经过四轮复制得到所需目的基因的分子数为8个D.只利用含四环素的培养基就可以直接筛选出成功导入表达载体的受体细胞评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)15、体细胞核移植技术存在的问题：

克隆动物存在着健康问题、表现出______缺陷等。16、统计的菌落数往往比活菌的实际数目_____________。这是因为______________________。因此，统计结果一般用而不是用活菌数来表示。除了上述的活菌计数法外，______________也是测定微生物数量的常用方法。17、_________℃左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵时一般将温度控制在_______________℃。18、重组DNA或重组质粒导入受体细胞后，筛选______的依据是______。19、目的基因是指：______20、结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：______和______。21、不同国家的政府对待生殖性克隆人的态度是不同的｡我们认同我国政府对待生殖性克隆人研究的态度吗？为什么？_____。22、某种微生物合成的一种蛋白酶与人体消化液中某种蛋白酶的结构和功能很相似，只是前者热稳定性较差，进入人体后容易失效。尝试根据本节课所学知识提出改造该种微生物蛋白酶的思路_________。23、蛋白质工程在生物制药上有广泛的应用。如果已经确认某种新蛋白质可能具有特殊的抗癌功能，其氨基酸序列也已经确认，如何通过蛋白质工程生产这种新药？如果回答有困难，可以向老师请教或通过互联网查找答案。_____评卷人得分四、判断题(共3题，共12分)24、制备单克隆抗体时，2次筛选的目的不同。()____A.正确B.错误25、胚胎发育早期，细胞的数量不断增加，胚胎的总体积也增加。()A.正确B.错误26、我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。（选择性必修3P108）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共3题，共24分)27、［生物——选修1生物技术实践］

某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基；灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题。

（1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了___________________和___________________。除此之外，培养基还必须含有基本成分是___________________和___________________。

（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是___________________。

（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于___________________中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种___________________作为对照进行实验。

（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有___________________种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越___________________。

（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐___________________细菌，这种培养基被称为___________________。28、下图是泡菜的制作及测定亚硝酸盐含量的实验流程示意图；请据图回答：

（1）泡菜是乳酸菌发酵的产物，乳酸菌的代谢类型是___________________。制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜，原因是____________________________。

（2）将盐与清水按照一定的比例配制盐水，待盐水煮沸冷却后，注入装好原料的泡菜坛中，同时加入一定量的“老汁”(陈泡菜水)。将盐水煮沸冷却的目的是____________________；加入“老汁”的作用是____________________________。

（3）测定亚硝酸盐含量的方法是_________________。即在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与____________________________发生重氮化反应后，与N－1－萘基乙二胺盐酸盐结合后形成_______________色的染料，然后将显色反应后的样品与已知浓度的____________进行目测比较，大致估算出亚硝酸盐的含量。29、研究者改造与肠道共生的大肠杆菌；口服该工程菌后激活机体特异性免疫，实现肿瘤的预防和治疗。

(1)部分肠道细菌能够分泌外膜囊泡（OMV）；如图1．OMV能穿越肠道上皮屏障活化肠黏膜内丰富的免疫细胞。细菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量较高的特异蛋白。

研究者利用含图2所示元件的表达载体转化大肠杆菌制备工程菌，ClyA基因的作用是_____；Fc表达产物能够与树突状细胞表面的特异性受体结合，提高树突状细胞_____OMV的能力。

(2)为研究上述工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应的效果，研究者用健康小鼠进行如下实验：。组别第0、3、8天口服工程菌每次服用工程菌12小时后，饮用含阿拉伯糖的水结果检测第1组空载体+第12天，每组随机取5只小鼠等量的脾脏细胞与黑色素瘤细胞共培养，检测杀伤率，结果如图3．第2组ClyA-Fc+第3组ClyA-OVA+第4组第5组

注：“+”；“-”代表是否饮用；

口服工程菌12小时后其在肠道内存在数量较多。

①第4、5组的操作是_____。图3结果说明工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应，理由是_____。

②为进一步验证上述结论，研究者进行如下实验：先加入_____（填选项前字母）保温后漂洗，再加入_____（填选项前字母）保温后漂洗，检测荧光细胞的数目，若第5组_____为最大值；则上述结论成立。

A．带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物。

B．带有绿色荧光标记的细胞毒性T细胞特异性抗体。

C．第1-5组小鼠脾脏细胞。

③肿瘤患者术后极易复发，研究者重复上表实验，并在第3次口服工程菌后第50天给小鼠注射黑色素瘤细胞。目的是_____。

(3)该工程菌的研发为不同肿瘤的精准治疗和预防提供了可能。依据本研究，设计针对肺癌治疗的工程菌表达载体元件：_____。评卷人得分六、综合题(共3题，共18分)30、微生物修复目前已成为去除农药残留污染的一种重要方法；而筛选高效农药降解菌是开展农药污染生物修复工作的重要前提。回答筛选降解溴氰菊酯（一种具有高效杀虫性的拟除虫菊酯类农药）的有关问题：

（1）分离纯化溴氰菊酯降解菌株：培养基中加入溴氰菊酯作为唯一碳源，这样的培养基从功能上看称为__________培养基。

（2）对获取的菌株进一步纯化时；用稀释涂布平板法接种后培养的两个平板中菌落长出后分别如下平板甲和平板乙：

出现平板甲的原因是______，出现平板乙的原因是___________。

（3）菌株降解溴氰菊酯的能力可以用________________来表示。

（4）请补充完成“探究溴氰菊酯浓度对菌株降解溴氰菊酯能力的影响”的探究实验思路：取相等且适量的菌悬液分别接种到__________液体培养基中；恒温摇床振荡培养一定时间，检测各组菌株降解溴氰菊酯的能力。

（5）上述降解菌能否运用于生产实际，在外界环境中保持稳定的数量和较高的降解活性是生物修复技术亟待解决的问题。除上述（4）提到的因素外，还应该研究______（写出1点，合理即可）等外环境因素对该菌株的影响。31、在生物技术上常利用大肠杆菌制成“工程菌”。某生物小组的同学；利用实验室提供的大肠杆菌品系及其他必要材料，对该品系大肠杆菌进行了培养。请分析回答下列问题：

(1).微生物在生长过程中对各种成分的需求量不同，故制备培养基时各成分要有合适的____________。培养基中含有的蛋白胨、淀粉可分别为微生物提供______________、______________。

(2).配制培养基时，需将pH调至________或微碱性。

(3).对培养基进行灭菌，应该采用的方法是________________________。32、胰岛素是治疗糖尿病的一种重要的蛋白质类药物。如图为利用基因工程技术借助乳腺（房）生物反应器生产人胰岛素的操作过程示意图；请回答下列问题：

（1）科学家采用人工合成的方法合成了人胰岛素基因后，通常还需要对目的基因进行PCR快速扩增，利用PCR技术扩增目的基因的前提，是要有_________。

（2）因后期要构建乳腺生物反应器，因此①过程中的重组质粒还必须含有能在乳腺中特异性表达的基因的_________。

（3）②过程通常采用的_________方法将重组质粒导入哺乳动物的受精卵。

（4）③过程依次经历_________、_________。

（5）为了提高胚胎的利用率，④过程中通常先进行_________再进行_________。参考答案一、选择题(共8题，共16分)1、D【分析】【分析】

胚胎发育的过程：受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原肠胚→幼体。

①卵裂期：细胞进行有丝分裂；数量增加，胚胎总体积不增加。

②桑椹胚：32个细胞左右的胚胎（之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞）。

③囊胚：细胞开始分化；其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔（注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化）。

④原肠胚：内细胞团表层形成外胚层；下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。（细胞分化在胚胎期达到最大限度）。

据图分析；为胚胎发育的囊胚期，①表示透明带，②表示滋养层，③表示内细胞团。

【详解】

A；题图是胚胎发育过程中囊胚期示意图；①②③依次称之为透明带、滋养层、内细胞团，A正确；

B；囊胚进一步扩大；会导致①（透明带）破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫孵化，B正确；

C；高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于囊胚期；原肠胚阶段出现了胚层分化，形成外胚层、中胚层和内胚层，C正确；

D；进行胚胎分割前；取囊胚中②滋养层细胞进行性别鉴定，这样不会破坏胚胎，D错误。

故选D。2、A【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：

（1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量；

（2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量。

2；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：

当氧气；糖源都充足时；醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

【详解】

A；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是需氧型，不需要密闭，A错误；

B；参与果醋制作的醋酸菌属于原核生物；没有成形的细胞核，B正确；

C；制作杨梅果酒所需要的微生物主要是酵母菌；C正确；

D；杨梅果汁能够为酵母菌的生长提供水、无机盐、碳源、氮源等营养物质；D正确。

故选A。3、A【分析】【分析】

动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。

【详解】

A；克隆猴的细胞来源是一只流产母猴胚胎的成纤维细胞；所以“中中”和“华华”有共同的遗传上的母亲，有血缘关系，A错误；

B；实验过程中用了127个卵细胞；109个抽取细胞核，79个注入细胞核，21个再生，6个代孕，2个出生，2个存活，说明了科学技术发展的艰辛与曲折，B正确；

C；“中中”和“华华”的出生是首次成功克隆灵长类动物；可成为人类疾病动物模型之一，将促进人类脑疾病、免疫缺陷、肿瘤、代谢性疾病的新药研发进程，C正确；

D；细胞核移植属于无性繁殖；所以“中中”和“华华”不是那个死胎的复活，是它无性生殖的后代，D正确。

故选A。4、C【分析】【分析】

1；治疗性克隆是指把患者体细胞移植到去核卵母细胞中构建形成重组胚胎；体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞（如神经细胞、肌肉细胞和血细胞）用于治疗。

2；生殖性克隆就是以产生新个体为目的克隆。即用生殖技术制造完整的克隆人。目的是产生一个独立生存的个体。与此相对的是研究性克隆或医学性克隆；指的是产生研究所用的克隆细胞。不产生可独立生存的个体。

【详解】

A；生殖性克隆和治疗性克隆都涉及体细胞核移植技术；A正确；

B；生殖性克隆就是以产生新个体为目的的克隆；治疗性克隆用于治疗疾病，B正确；

C；生殖性克隆和治疗性克隆都涉及伦理问题；我国政府不允许进行任何生殖性克隆人实验，也同样重视治疗性克隆所涉及的伦理问题，C错误；

D；我国允许生殖性克隆动物；但禁止生殖性克隆人，D正确。

故选C。5、B【分析】【详解】

【分析】葡萄酒发酵的原理是酵母菌的无氧呼吸；即葡萄糖在无氧条件下分解产生二氧化碳和酒精并释放少量的能量，发酵的温度在18℃-25℃。

【详解】根据以上分析已知；果酒发酵的适宜温度为18℃-25℃，因此夏季生产果酒时，常需对罐体进行降温处理，A正确；乙醇是酵母菌无氧呼吸的产物，因此分解过程中不需要通入空气，B错误；无氧呼吸产生了二氧化碳，但是没有消耗氧气，因此发酵罐中的气压不会低于大气压，C正确；葡萄酒发酵的原料是糖类，因此可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵，D正确。

【点睛】解答本题的关键是了解与掌握果酒发酵的原理，明确无氧呼吸没有消耗氧气，但是产生了二氧化碳，因此发酵罐中的气压可能升高。6、C【分析】【分析】

蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。

【详解】

蛋白质工程的基本流程是：③预期蛋白质功能→①预期蛋白质分子结构组成→④据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列→②合成DNA。

故选C。7、B【分析】【分析】

植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性；其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织（高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松；无规则的组织），愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。

【详解】

A；植物体细胞能表达出全能性；能通过植物组织培养进行大量繁殖，不需要进行细胞核移植，A错误；

B；“为了增加野生寒兰数量；对其进行人工大量繁殖，再移栽至原有生境”，可利用植物组织培养技术得到寒兰幼苗，然后再移栽，可以将寒兰的外植体消毒处理后进行植物组织培养，B正确；

C；植物体细胞具有全能性；能通过植物组织培养进行大量繁殖，不需要将寒兰体细胞与繁殖力强的其他植物细胞进行融合，C错误；

D；植物细胞中本来就含有生长素基因；不需要将生长素基因转入野生寒兰获得生长速度快的寒兰，D错误。

故选B。8、A【分析】【分析】

1；胚胎干细胞：具有分化为任何一种类型的细胞；并进一步形成有机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。

2；诱导多能干细胞（iPS细胞）：是通过体外诱导成纤维细胞；获得的类似胚胎干细胞的一类细胞。

3；成体干细胞：具有组织特异性；只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力。

【详解】

A；在适当条件下；胚胎干细胞可被诱导分化为多种细胞、组织、器官，不能分化为完整个体，A错误；

B；已分化细胞可在体外被诱导成为一种类似于胚胎干细胞的细胞；比如诱导多能干细胞（iPS细胞），B正确；

C；成体干细胞来源于自体；利用成体干细胞进行疾病治疗理论上无需考虑免疫排斥的问题，C正确；

D；干细胞分裂分化能力强；会增加生物体内细胞的分裂能力，将干细胞用于临床上的疾病治疗可能存在导致肿瘤发生的风险，D正确。

故选A。二、多选题(共6题，共12分)9、B:C【分析】【分析】

胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂；数量增加，胚胎总体积不增加；（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎；（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔；（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。

【详解】

A；由桑椹胚发育到囊胚进行的是有丝分裂；形成的每个细胞内DNA总量不变，A错误；

B；囊胚期细胞出现了细胞分化；但细胞分化的实质是基因的选择性表达，因此其遗传物质未发生改变，B正确；

C；囊胚期内细胞团和滋养层细胞的差异不是DNA复制水平上的差异；而是转录水平上的差异，即基因的选择性表达，C正确；

D；受精卵在输卵管中形成；后在子宫中发育，故胚胎发育的早期不可能在卵巢，D错误。

故选BC。10、B:C【分析】【分析】

该题主要考察了细胞的分化；干细胞是一类仍然保留有分裂和分化能力的细胞，其可以分为全能干细胞；多能干细胞和专能干细胞，其中造血干细胞属于多能干细胞。

【详解】

造血干细胞属于多能干细胞；其可以分化为血液中的多种细胞，例如红细胞；血小板和白细胞，白细胞包括嗜中性粒细胞，B、C正确；骨骼肌细胞不是造血干细胞分化来的，神经细胞是由神经干细胞分化而来，A、D错误；

故选BC。11、B:D【分析】【分析】

（1）微生物的发酵在食品的制作中具有重要意义；如制馒头；面包、酿酒要用到酵母菌，制酸奶要用到乳酸菌。

（2）低温能抑制细菌；真菌的生长和繁殖。

（3）制作泡菜的原理就是利用乳酸菌使蔬菜中的有机物生成乳酸。

【详解】

A；制酸奶要用到乳酸菌；乳酸菌发酵产生乳酸，使得酸奶有一种特殊的酸味，所以在鲜奶中加入乳酸菌可制成乳酸制品，A正确；

B；制作泡菜的坛子加水密封隔绝空气是为了抑制需氧型微生物繁殖；B错误；

C；白酒的酿造过程中利用了酵母菌的发酵作用；同时利用霉菌产生的淀粉酶将淀粉糖化，C正确；

D；地窖中温度低；能抑制细菌、真菌等微生物的生长和繁殖，使其繁殖速度慢，数量少，不能充分分解食物，达到保鲜的目的，所以将做好的发酵食品冷藏于地窖中是为了抑制微生物的生长，D错误。

故选BD。12、A:B:C:D【分析】【分析】

分析图可知；该图为植物体细胞杂交过程，其中A为去除细胞壁，制备原生质体，可用酶解法；B为诱导原生质体融合，可以用聚乙二醇（PEG）处理；C为培养筛选出所需的杂种细胞；D为照分化，据此答题即可。

【详解】

A；顶端分生组织几乎不带毒；因此，过程A中取顶芽细胞进行体细胞杂交有利于获得脱毒苗，A正确；

B；B为诱导原生质体融合；可使用聚乙二醇（PEG）促融，B正确；

C；两个植物细胞融合完成的标志是再生出细胞壁；C正确；

D；植物体细胞杂交技术利用了细胞膜的流动性和植物细胞的全能性等原理；D正确。

故选ABCD。13、D【分析】【分析】

动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞；制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。

【详解】

A；在动物细胞培养的过程中；当出现接触抑制后，细胞克隆停止增殖，A正确；

B；在细胞分裂的过程中；可能会发生基因突变，因此，克隆细胞与接种的细胞的遗传信息不一定相同，B正确；

C；胰蛋白酶可使细胞分散成单个；从而利于计数，C正确；

D；需采用液体培养基培养才能形成细胞克隆；D错误。

故选D。14、B:D【分析】【分析】

分析题图：构建表达载体时；不能选用限制酶BamHⅠ，否则会导致两种抗性基因都被破坏，因此应该选择Bc1I和HindⅢ这两种限制酶，根据引物的延伸方向，所用的引物为图乙中引物a和引物c。

【详解】

A；PCR技术要求两种引物分别和目的基因的两条单链结合；根据引物的延伸方向，所用的引物为图乙中引物a和引物c，A正确；

B；根据图甲可知；BamHⅠ会导致两种抗性基因都被破坏，同时为防止目的基因自身环化，因此只能选BclI和HindⅢ两种限制酶切割，B错误；

C；图乙中一个DNA分子在PCR仪中经过四轮复制可得到16个DNA片段；其中所需目的基因的分子数为8个，C正确；

D；由于选择BclI和HindⅢ这两种限制酶；破坏了氨苄青霉素抗性基因，但没有破坏四环素抗性基因，因此应该先用含四环素的培养基筛选出含有基因表达载体和普通质粒的大肠杆菌，再用含氨苄青霉素的培养基筛选含重组质粒的大肠杆菌，培养基加氨苄青霉素含普通质粒的大肠杆菌能生存，而含重组质粒的不能生存，从而筛选出成功导入表达载体的受体细胞，D错误。

故选BD。三、填空题(共9题，共18分)15、略

【解析】遗传和生理16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】低当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落菌落数17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】2018～2518、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】含有基因表达载体受体细胞标记基因是否表达。19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】是人们所需要转移或改造的基因20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】黏性末端平末端。21、略

【分析】【详解】

对待生殖性克隆人的研究，我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。因为生殖性克隆（也就是克隆人），违反人类繁衍的自然法则，损害人类作为自然人的尊严，会引起严重的道德、伦理、社会和法律问题。所以，现阶段生殖性克隆绝对不可以应用于人类本身。【解析】认同。因为生殖性克隆（也就是克隆人），违反人类繁衍的自然法则，损害人类作为自然人的尊严，会引起严重的道德、伦理、社会和法律问题。所以，现阶段生殖性克隆绝对不可以应用于人类本身。22、略

【分析】【详解】

要提高酶的热稳定性，可采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，改善其功能，需要从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。【解析】采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，提高该酶的热稳定性，从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。23、略

【分析】【详解】

蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列，以下按照基因工程的一般步骤进行。该蛋白质的氨基酸序列已知，因此通过蛋白质工程，生产该蛋白质新药的基本过程为：根据已知的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成该蛋白质新药基因→将获得的目的基因与质粒构建形成基因表达载体→将重组质粒导入受体菌→获得工程菌→生产该蛋白质新药。【解析】根据已知的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成该蛋白质新药基因→将获得的目的基因与质粒构建形成基因表达载体→将重组质粒导入受体菌→获得工程菌→生产该蛋白质新药四、判断题(共3题，共12分)24、A【分析】【详解】

制备单克隆抗体时，第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞，第二次筛选目的是获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，故正确。25、B【分析】【详解】

胚胎发育早期；细胞数量不断增加，但胚胎总体积不变或略有缩小。

故错误。26、A【分析】【详解】

生殖性克隆存在伦理道德等方面的问题，我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。本说法正确。五、实验题(共3题，共24分)27、略

【分析】【详解】

微生物生长繁殖过程中需要氮源、碳源、水分、无机盐等营养物质，有些微生物还需要生长因子；培养基的灭菌一般采用高压蒸汽灭菌，该过程一般在高压蒸汽灭菌锅中进行；影响微生物生长繁殖的因素主要是营养和温度，因此培养微生物时除提供适宜的营养外，还要提供合适的温度；为排除无关变量的影响，该实验要设立空白对照，可以用蒸馏水代替样品来进行对照；在培养基中加入食盐可以选择耐盐菌，如金黄色葡萄球菌等，这种培养基叫做选择培养基。【解析】氮源（碳源不作要求）碳源无机盐水高压蒸汽灭菌恒温培养箱无菌水多高盐（或NaCl）选择性培养基28、略

【分析】【分析】

1；泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌；代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。

2；泡菜的制作过程：按照清水与盐的质量比为4：1的比例配制盐水；将盐、水煮沸冷却。将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡莱坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。向坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常向水槽中补充水。发酵时间长短受室内温度的影响。

3；泡菜中的亚硝酸盐含量可以用比色法测定；即在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应生成重氮盐，重氮盐与N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。

（1）

乳酸菌的代谢类型是异养厌氧型；制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜或其他原料；这是因为新鲜的蔬菜亚硝酸盐的含量低。

（2）

将盐水煮沸冷却的目的是煮沸的目的是除去盐水中的空气和杀菌；冷却的目的是防止高温杀死原料中的乳酸菌（乳酸菌的生命活动不受影响）；加入“老汁”的作用是“老汁”中含有大量的乳酸菌；可使其在短时间内成为优势菌。

（3）

测定亚硝酸盐含量的方法是比色法。即在盐酸酸化条件下；亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N－1－萘基乙二胺盐酸盐结合后形成玫瑰红色的染料，然后将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液进行目测比较，大致估算出亚硝酸盐的含量。

【点睛】

本题考查制作泡菜，要求考生识记制作泡菜的原理和过程，理解用比色法测定亚硝酸盐的含量，意在考查考生的识记能力和分析能力。【解析】（1）异养厌氧型亚硝酸盐的含量低。

（2）煮沸的目的是除去盐水中的空气和杀菌；冷却的目的是防止高温杀死原料中的乳酸菌（乳酸菌的生命活动不受影响）“老汁”中含有大量的乳酸菌；可使其在短时间内成为优势菌。

（3）比色法对氨基苯磺酸玫瑰红标准显色液29、略

【分析】【分析】

树突状细胞为抗原呈递细胞；可识别；摄取和传递抗原信息。

【详解】

（1）细菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量较高的特异蛋白；而OMV能穿越肠道上皮屏障活化肠黏膜内丰富的免疫细胞。所以，ClyA基因的作用为表达出细菌溶素A（ClyA），使OVA和Fc定位至OMV表面，进而融合基因可以被免疫细胞识别。Fc表达产物能够与树突状细胞表面的特异性受体结合，进而提高树突状细胞识别；摄取和传递抗原信息的能力。

（2）①根据表格和柱状图可知；服用的工程菌采用“加法原理”，逐渐增加部件，且第4组和第5组工程菌都是完整的，即第4组:ClyA-OVA-Fc第5组:ClyA-OVA-Fc，但是第4组饮用含阿拉伯糖的水，进而激活融合基因的表达；第5组不饮用含阿拉伯糖的水，不能激活融合基因的表达。所以，第3；5组含有OVA，在人为控制口服阿拉伯糖后产生OMV，激活特异性免疫，对肿瘤细胞的杀伤率较高；1、2组缺乏OVA，第4组无阿拉伯糖诱导，杀伤率均低。

②小鼠脾脏细胞具有免疫细胞；可在抗原刺激下引起特异性免疫。带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物可引起小鼠脾脏细胞发生特异性免疫，故先加入第1-5组小鼠脾脏细胞和带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物进行保温，判断特异性免疫的强度；

故选AC。

再加入带有绿色荧光标记的细胞毒性T细胞特异性抗体；目的是检测OVA抗原肽复合物是否能够产生特异性细胞毒性T细胞。

故选B。

若第5组同时被红色和绿色荧光标记的细胞数目占比越多；说明工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应，结论成立。

③肿瘤患者术后极易复发；说明特异性免疫功能减弱。所以，可多次注射黑色素瘤细胞，进而研究该口服工程菌是否能够诱发长期免疫记忆，从而抑制肿瘤复发。

（3）本实验中融合基因里面有OVA（黑色素瘤细胞特异性抗原），所以只需将OVA替换为肺癌细胞特异性抗原即可。即将元件中的OVA替换为肺癌细胞特异性表达的抗原基因。【解析】(1)表达ClyA；使OVA和Fc定位至OMV表面识别；摄取。

(2)第4组:ClyA-OVA-Fc和-第5组:ClyA-OVA-Fc和+第3；5组含有OVA；在人为控制口服阿拉伯糖后产生OMV，激活特异性免疫，对肿瘤细胞的杀伤率较高;1、2组缺乏OVA，第4组无阿拉伯糖诱导，杀伤率均低ACB同时被红色和绿色荧光标记的细胞数目占比研究该口服工程菌是否能够诱发长期免疫记忆，从而抑制肿瘤复发。

(3)将元件中的OVA替换为肺癌细胞特异性表达的抗原基因六、综合题(共3题，共18分)30、略

【分析】【分析】

1；微生物的培养需要提供的基本营养物质：碳源（提供所需碳元素的营养物质）、氮源（提供所需氮元素所需的营养物质）、水、无机盐、特殊营养物质--生长因子（维生素、氨基酸、碱基等）；微生物培养所需的条件：pH、氧气条件、特殊营养等。

2；微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

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