2025年沪科新版选择性必修3生物上册阶段测试试卷含答案

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A.可用灭活病毒诱导细胞融合B.未融合的细胞和融合的同种核细胞都能在HAT培养液中生长C.杂交瘤细胞需进一步筛选才能用于生产D.细胞膜的选择透过性是细胞融合的基础9、基因工程利用某目的基因（图甲）和Pl噬菌体载体（图乙）构建重组DNA；限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ；EcoRⅠ和Sau3AⅠ。下列分析正确的是（）

A.构建重组DNA时，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌体载体B.构建重组DNA时，可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌体载体C.图乙中的P1噬菌体载体只用EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团D.用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，再用DNA连接酶连接，只能产生一种重组DNA10、茯砖茶的制作包括发酵与发花等工序，发酵前要下“诱水”，下“诱水”就是将原有老茶煮水后喷洒在料堆之上。发花可使砖茶原料在加工过程中形成“金花”，学名“冠突散囊菌”——茶界“益生菌”，也是国家茶业界二级机密保护菌种。下列相关叙述错误的是（）A.茯砖茶的制作需利用酵母菌等多种细菌进行发酵B.下“诱水”相当于微生物培养过程中的“接种”，推测相关菌种可耐热C.发酵过程涉及多种酶催化，发酵后饮用有利于营养物质的吸收D.茯砖茶发酵完成后要灭菌并密封，有利于长期保存11、细菌X合成的tcel蛋白和tcil蛋白使其在与其他细菌的竞争中占优势，其中tcel蛋白是一种有毒性的分泌蛋白。研究人员利用野生型细菌X及其不同突变体进行了实验：在固体培养基表面放置一张能隔离细菌的滤膜，将一种菌（下层菌）滴加在滤膜上后再放置第二张滤膜，滴加等量的另一种菌（上层菌），共同培养后，对上、下层菌计数得到如图结果。下列分析正确的是（）

A.实验中的培养皿、固体培养基和滤膜均需要进行灭菌处理B.对上、下层菌计数时应采用稀释涂布平板法而不能用显微镜直接计数C.由甲、乙、丙三组结果可推测tcil蛋白能够中和tcel蛋白的毒性D.野生型细菌X在与tcel-tcil双突变体和tcel突变体的竞争中均占优势12、如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析正确的是（）

A.某一稀释度下至少涂3个平板，该实验方法统计得到的结果常会比实际活菌数目少B.3号试管中的样品溶液稀释倍数为104倍C.5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×108个D.该实验需设置牛肉膏蛋白胨培养基作对照，用以判断选择培养基是否有选择作用13、免疫PCR是对微量抗原的一种检测方法。下图是利用该技术检测牛乳中微量抗生素的流程图：首先将抗体1固定在微板上，冲洗后加入待检的牛乳，再加入DNA标记的抗体2，进行PCR扩增，最后进行电泳检测，相关叙述正确的是（）

A.图示中的DNA可以是非牛乳基因中的DNA片段B.如果第三次冲洗不充分则有可能出现假阳性现象C.电泳检测结果只能判断阳性与否，无法判断牛乳中抗生素的含量D.微量抗原抗体反应通过PCR技术间接扩增放大，从而达到可检测的水平评卷人得分三、填空题(共8题，共16分)14、虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有_____________、___________________(提供碳元素的物质)、_________________(提供氮元素的物质)和__________________。15、酶是细胞合成的生物催化剂。随着生物科学技术的发展；酶已经走出实验室，走进人们的生产和生活。请回答下面有关酶的问题：

（1）在腐乳制作的过程中；利用毛霉等微生物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成________，____________将脂肪水解为甘油和脂肪酸。加酶洗衣粉里添加的酶制剂中，应用最广泛；效果最明显的是____________。

（2）果胶酶包括_____________________________；生产中如果要固定果胶酶；最好采用______________________________________法固定化。

（3）酶提取和分离原理：需要用__________法去除相对分子质量大的杂质蛋白，以纯化酶；利用_________________________法对酶进行纯度鉴定。16、为了避免外源DNA等因素污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行_____________。而使用的缓冲液并在__________℃存储。17、去除DNA中的杂质，可以在滤液中加入2mol/L浓度的NaCL溶液，目的是____去除__________________；再调节NaCL溶液浓度为0．14mol/L，目的是_______________，_______________去除_______________；最后用浓度为2mol/L的NaCL溶液重新溶解________________18、_______mol/L浓度下，DNA溶解度最大。19、沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌；被感染了沙门氏菌的人或带菌者的粪便污染的食品，会使人发生食物中毒。沙门氏菌的最适繁殖温度为37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其对热抵抗力不强，在60℃的条件下15min就能被杀死。肉桂精油是从肉桂树中提炼获得的，具有不溶于水；易溶于有机溶剂且易挥发的特性，能抑制沙门氏菌的繁殖。回答下列问题：

（1）培养沙门氏菌时要进行无菌操作，常用的灭菌方法有________（答出两种）。用平板培养沙门氏菌时一般需要将平板________（填“倒置”或“正置”）。单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小和颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是________。

（2）从鸡粪便取样，经选择培养后需要经过一系列________才能将样品涂布到鉴别培养基上。对获得的沙门氏菌常采用________的方法长期保存。

（3）根据题干信息，为避免食用被沙门氏菌污染的食品而引发的食物中毒，家庭中储存、加工食品的方法是________。

（4）根据肉桂精油的化学特性，可采用________法来提取，提取过程中影响精油品质的因素有________。20、细胞产物的工厂化生产。

组织培养技术除了在农业上的应用外，还广泛应用于另一个重要的领域，即______。21、科学家采用定点诱变的方法构建T4溶菌酶的新蛋白质，发现其中一种新蛋白质的第9和第164位氨基酸残基被转换为半胱氨酸残基，并形成一个二硫键。这种新蛋白质的热稳定性会有什么变化？这项技术的要点是什么？_________评卷人得分四、实验题(共4题，共32分)22、尿素是一种重要的农业氮肥；但尿素并不能直接被农作物吸收，只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。某课题小组从土壤中分离能够分解尿素的细菌并进行计数的过程如图1所示，图2是乙中的培养基配方。请回答下列问题：

（1）为了获得尿素分解菌；可在__________取样；经系列处理后如图2所示培养基，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是___________；__________。

（2）甲中培养基与乙中培养基的成分相比；唯一的区别是___________。

（3）在涂平板前需要对甲中的菌液进行稀释；稀释涂布后能得到菌落数目在___________________的平板，则说明稀释操作比较成功。

（4）对分离得到的尿素分解菌作进一步鉴定时；可在上述培养基中加入酚红指示剂，指示剂变红的原因是尿素分解菌_____________________，再结合菌落的特征等进行确定。

（5）统计的菌落数往往比活菌的实际数目_________，除了上述的活菌计数法外，______________也是测定微生物数量的常用方法。23、金黄色葡萄球菌是一种常见的病原菌；具有高度耐盐化的特性，在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。某研究小组进行了测定某处土壤中金黄色葡萄球菌数量的实验。回答下列问题：

(1)实验小组选用含7．5%NaCl的牛肉膏蛋白胨培养基培养金黄色葡萄球菌，制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是_________（用文字和箭头表示）。培养基中加入7．5%NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选，原因是_________。

(2)在制作血平板时需要等平板冷却后，方可加入血液，以防止_________。在血平板上，金黄色葡萄球菌菌落的周围会出现_________。

(3)土壤是微生物天然的培养基，测定土壤中金黄色葡萄球菌的数量时，一般采用_________法。为了保证获得菌落数在_________之间适于计数的平板，需要选用一定稀释范围的样品液进行培养。测定土壤中金黄色葡萄球菌、放线菌和真菌的数量时，稀释倍数较低的是_________。实验结果统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，其原因是_________。24、进行垃圾分类收集可以减少垃圾处理时间；降低处理成本。科研小组欲分离及培养若干种微生物用于处理湿垃圾，如剩菜剩饭；骨头、菜根菜叶、果皮等食品类废物。请分析回答：

(1)科研小组从土壤中筛选产脂肪酶的菌株时，配制的培养基需要以__________为唯一碳源。制备固体培养基的步骤是；计算→称量→溶化→__________→__________。接种微生物最常用的方法是__________。

(2)获得产脂肪酶的菌株后，在处理含油垃圾的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。现获得可产脂肪酶的A、B两种菌株，并进行了培养研究，结果如图1所示。据图分析，应选择菌株__________进行后续相关研究，理由是______________________________。

(3)科研小组从土壤中筛选淀粉分解菌时，加碘液染色后，选择培养基上出现了A、B和C三种菌落（如图2所示）。若要得到淀粉酶活力最高的菌株，应选择__________（填“A”“B”或“C”）菌落进一步纯化。经检测A菌落为硝化细菌，A菌落能在此培养基上生长且没有形成透明圈的原因是____________________。

(4)在微生物分解处理垃圾的过程中，纤维素分解菌能够分泌纤维素酶，该酶可将纤维素分解为葡萄糖。纤维素酶由三种复合酶组成，其中__________酶可将纤维二糖分解为葡萄糖。25、酿酒；酿醋、腐乳、泡菜、酱制品等是源于中国的传统发酵技术；为部分地区经济发展做出巨大贡献。请依据相关生物学知识回到下列问题。

（1）泡菜腌制过程中，进行发酵的主要微生物在细胞结构上属于___________生物。不能采用加入抗生素的方法来抑制杂菌的原因是____________________________。

（2）腐乳外部有一层致密的“皮”，是前期发酵时______等生物在豆腐表面上生长的菌丝。

（3）测定亚硝酸盐含量的方法是___________，在泡菜腌制过程中定期测定亚硝酸盐含量的目的是____________________________。

（4）为了保证既无杂菌，又能使发酵菌发挥正常作用，泡菜所用盐水应__________再使用。

（5）某些制作泡菜的某些蔬菜也可用作DNA粗提取与鉴定，沸水浴条件下，提取出的DNA可与_________试剂反应呈_______________色。评卷人得分五、综合题(共1题，共9分)26、乳酸菌中的谷氨酸脱羧酶（GAD）能消耗H+将谷氨酸转化为y-氨基丁酸（GABA）；GABA在制药；食品等方面具有较大应用。研究人员从泡菜样品中筛选高产GABA的乳酸菌株，并优化其发酵条件。回答下列问题：

（1）已知MRS固体培养基因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌所产的酸可与碳酸钙发生反应，从而在培养基上形成____________。从功能上判断，MRS培养基可作为乳酸菌的___________培养基。

（2）利用MRS培养基分离纯化乳酸菌时，首先需用_________对泡菜滤液进行梯度稀释，然后再结合其他方法筛选出具高产GABA特性的乳酸菌。进行梯度稀释的目的是__________________。

（3）研究人员对高产菌株产GABA的发酵时间和温度分别进行了研究；结果显示，发酵时间在48～60h范围内，GABA的相对产量较高；发酵温度在35～39℃范围内，GABA的相对产量较高。研究人员认为，要进一步提高GABA相对产量，以达到最佳生产效果，还需同时对发酵时间和发酵温度进行优化。请为该优化实验设计一个实验结果记录表。

______参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、A【分析】【分析】

如果通过直接有性杂交产生白菜-甘蓝；体细胞染色体数目为19，属于异源二倍体，由于异源二倍体没有同源染色体，通过减数分裂产生有效配子的可能性很小，所以一般是不育的，但也可能产生有效配子，所以偶尔会出现可育的现象．偶尔会出现可育现象的另一个原因是，异源二倍体可能某种原因出现染色体自然加倍，成为异源四倍体。

【详解】

A；白菜和甘蓝是两个不同的物种；存在生殖隔离，A正确；

B；染色染染色体用碱性染料；如龙胆紫，B错误；

C；可通过人工诱导产生四倍体“白菜-甘蓝”；这种变异属于染色体变异，C错误；

D；将雌蕊离体培养获得“白菜-甘蓝”杂种幼苗需要采用植物组织培养技术；该技术的原理是植物细胞具有全能性，D错误。

故选A。

【点睛】2、D【分析】【分析】

果酒和果醋制作过程中的相关实验操作：

（1）材料的选择与处理：选择新鲜的葡萄；榨汁前先将葡萄进行冲洗，除去枝梗。

（2）灭菌：①榨汁机要清洗干净；并晾干。②发酵装置要清洗干净，并用70%的酒精消毒。

（3）榨汁：将冲洗除枝梗的葡萄放入榨汁机榨取葡萄汁。

（4）发酵：①将葡萄汁装入发酵瓶；要留要大约1/3的空间，并封闭充气口。②制葡萄酒的过程中，将温度严格控制在18℃～25℃，时间控制在10～12d左右，可通过出料口对发酵的情况进行及时的监测。③制葡萄醋的过程中，将温度严格控制在30℃～35℃，时间控制在前7～8d左右，并注意适时通过充气口充气。

【详解】

A；酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳；A正确；

B；在黄酒的酿造初期；酵母菌可进行有氧呼吸进行大量繁殖，氧气消耗尽之后，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，B正确；

C；酵母菌发酵过程产生的酒精；抑制其它微生物生长，C正确；

D；无氧呼吸第一阶段释放能量；合成ATP，丙酮酸转变为酒精是无氧呼吸第二阶段不合成ATP，D错误。

故选D。

【点睛】3、C【分析】【分析】

基因工程：是指按照人们的愿望；通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们所需要的新的生物类型和生物产品。

【详解】

转基因食品必须在商品标签上注明，如“原料为转基因大豆”，转基因的技术还有很多未知的领域，这样做的目的是关注转基因食品的安全性，故选C。4、A【分析】【分析】

植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞；进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。

【详解】

A；植物细胞壁的成分主要是纤维素果胶；根据酶的专一性可知，植物细胞使用纤维素酶和果胶酶处理细胞壁获得原生质体，A错误；

B；番茄和马铃薯的原生质体可采用聚乙二醇融合法得到杂种细胞；此外还可通过物理方法等诱导其融合，B正确；

C；杂种细胞需经过诱导经脱分化形成愈伤组织后再经再分化过程发育成完整的杂种植株；C正确；

D；生物体中基因的作用是相互的；且基因控制相关性状，“番茄—马铃薯”杂种植株没达预期目标与基因无法有序表达有关，D正确。

故选A。5、D【分析】【分析】

生物武器是有意识地利用致病微生物；毒素、昆虫侵袭敌人的军队、人口、农作物或牲畜等目标；以达到战争目的的一类武器。生物武器一般由致病微生物、毒素、昆虫以及装载它们的容器和投掷物组成，其中起伤害作用的微生物、毒素又称生物战剂。

【详解】

A；生物武器一般由致病微生物、毒素、昆虫以及装载它们的容器和投掷物组成；其中起伤害作用的微生物、毒素又称生物战剂，A正确；

B；相对于常规武器、核武器、化学武器；生物武器具有传染性，携带和投放相时简单等特点，B正确；

C；现代生物武器的防护主要包括预警体系（可以尽早发现疫情）、防体体系（对已经发现的疫情进行有效控制）、疫苗库（预先储备和及时更新疫苗）；C正确；

D；生物武器主要指致病微生物；所以它们的生存、繁殖、死亡易受环境条件的影响，D错误。

故选D。6、B【分析】【分析】

1；生物武器种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂；以及经过基因重组的致病菌等。

2；生物武器的特点：单位面积效应大；有特定的伤害对象；具有传染性；危害时间久；不易被发现和鉴定；使用者本身易受伤害；生物武器造价低；技术难度不大，隐秘性强，可以在任何地方研制和生产。

【详解】

A；人类从没接触过转基因技术制造的新型致病菌；这可能让大批受感染者突然发病而又无药可医，A正确；

B；转基因技术制造的新型致病菌人体会对它们产生免疫反应；但不一定能杀灭病原体，B错误；

C；转基因技术制造的新型致病菌可能具有超强的传染性和致病性；C正确；

D；转基因技术制造的新型致病菌可能使具有某种易感基因的民族感染；而施放国的人却不易感染，D正确。

故选B。二、多选题(共7题，共14分)7、A:C【分析】【分析】

1；试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精；并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。

2；设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎；然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术。

【详解】

A；在采集卵母细胞之前；需要给供卵者注射适量的促性腺激素，促进超数排卵，A正确；

B；从卵巢中吸取的卵母细胞；必须经体外培养成熟后才能与获能的精子受精，B错误；

C；受精过程中；卵母细胞会发生透明带反应和卵细胞膜反应，这是防止多精入卵的两道屏障，C正确；

D；以治疗为目的的设计试管婴儿技术；是救治患者最好、最快捷的办法之一，不是有利于生育健康的下一代，并存在伦理问题，D错误。

故选AC。

【点睛】8、A:C【分析】【分析】

（1）动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性；细胞的增殖；诱导手段有电激、聚乙二醇、灭活的病毒等，结果产生杂交细胞，主要用于制备单克隆抗体。

（2）单克隆抗体制备的原理包括：①免疫理：B淋巴细胞能产生特异性抗体；②细胞融合原理：利用病毒对宿主细胞的穿透性使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合；③动物细胞培养技术：对杂交瘤细胞进行体内；体外培养。

（3）制备单克隆抗体过程中的几种细胞：①免疫B细胞（浆细胞）：能产生单一抗体；但不能无限增殖；②骨髓瘤细胞：能无限增殖，但不能产生抗体；③杂交瘤细胞：既能产生单一抗体，又能在体外培养条件下无限增殖。

【详解】

A；诱导动物细胞融合的方法有电激、聚乙二醇、灭活的病毒（如灭活的仙台病毒）等；A正确；

B；两两融合的细胞包括免疫B细胞与免疫B细胞融合的具有同种核的细胞、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合的具有同种核的细胞、免疫B细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞；骨髓瘤细胞虽然能无限增殖，但缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶，免疫B细胞虽然有次黄嘌呤磷酸核糖转移酶，但不具有无限增殖的本领，所以在HAT筛选培养液中，两两融合的具有同种核的细胞都无法生长，只有杂交瘤细胞才能生长，B错误；

C；因每个免疫B细胞只分泌一种特异性抗体；因此在HAT筛选培养液中筛选出来的众多的杂交瘤细胞所分泌的抗体，不一定都是人类所需要的，还需要进一步通过专一抗体阳性检测，把能分泌人类所需要抗体的杂交瘤细胞筛选出来，C正确；

D；动物细胞融合是以细胞膜的流动性为基础的；D错误。

故选AC。

【点睛】9、A:B:C【分析】【分析】

一种限制酶只能识别一种核苷酸序列且在特定的位点对DNA分子进行切割；切割出的末端有黏性末端和平末端两种，具有相同黏性末端的DNA片段之间可以在DNA连接酶的作用下连接到一起。

【详解】

A；如果用BglⅡ和Sau3AI切割目的基因；目的基因两端将形成不同的黏性末端，同样用BglⅡ和Sau3AI切割Pl噬菌体载体也形成这两种相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，A正确；

B；由于Sau3AI的切割位点在EcoRI的左侧；因此用EcoRI和Sau3AI切割目的基因，目的基因两端将形成不同的黏性末端，同样用EcoRI和Sau3AI切割Pl噬菌体载体也形成这两种相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，B正确；

C；P1噬菌体载体为环状DNA；其上只含有一个EcoRI的切点，因此用EcoRI切割后，该环状DNA分子变为线性双链DNA分子，因每条链上含有一个游离的磷酸基团，因此切割后含有两个游离的磷酸基团，C正确；

D；从图甲看出；用EcoRI切割目的基因后两端各有一切口，与图乙中EcoRI切口对接时，可有两种可能，即可产生两种重组DNA，D错误。

故选ABC。10、A:D【分析】【分析】

根据题意分析：茯砖茶的制作包括发酵与发花等工序；发酵过程涉及多种酶催化，发酵后饮用有利于营养物质的吸收。

【详解】

A；酵母菌是真菌；不是细菌，A错误；

B；下“诱水”就是将原有老茶煮水后喷洒在料堆之上；相当于微生物培养过程中的“接种”，推测相关菌种可耐热，B正确；

C；发酵过程涉及多种酶催化；发酵后富含多种小分子营养物质，因此发酵后饮用有利于营养物质的吸收，C正确；

D；茯砖茶在储藏过程中仍然继续自然发酵；因此灭菌并密封处理，不利于长期保存，D错误。

故选AD。11、A:B:C【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；为避免杂菌的污染；实验中的滤膜、培养皿、固体培养基等均需灭菌处理，A正确；

B；对活菌进行计数的方法是稀释涂布平板法；具体方法是：先将菌体进行梯度稀释，再涂布到滤膜的表面，待菌落数稳定时进行计数，不能用显微镜直接计数的原因是显微镜直接计数不能区分死菌和活菌，B正确；

C；tcel蛋白是一种有毒性的分泌蛋白；乙组中野生型可产生tce1蛋白作用于tcel-tcil双突变体，后者无法产生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生菌在竞争中占据优势；而在丙组中，野生型可产生tce1蛋白作用于tcel突变体，后者可以产生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生型的生长受到抑制，由此推测，tcil蛋白能够中和tcel蛋白的毒性，C正确；

D；由甲组、乙组可知；野生型细菌X在与tcel-tcil双突变体的竞争中均占优势，由甲组、丙组可知，野生型细菌X在与tcel突变体的竞争中不占优势，D错误。

故选ABC。12、A:B:D【分析】【分析】

分析题图：图中5支试管为梯度稀释；最后经稀释涂布平板法接种培养后进行计数。统计菌落数在30~300的平板，取其平均值，进行计数。计数公式为（C÷V）×M。（C为平均菌落数，V为涂布液体积，M为稀释倍数）。

【详解】

A；设置重复组；增强实验的说服力与准确性，故某一稀释度下至少涂3个平板。稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落，使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低，A正确；

B、据图可知，将10g土样加入到90mL无菌水中定容至100mL后，此时土样稀释倍数为10倍，再经3次10倍稀释得到3号试管中的样品，故3号试管中样品的稀释倍数是104倍；B正确；

C、5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为（168+175+167）÷3×106÷0.1≈1.7×109个；C错误；

D；要判断选择培养基是否起到选择作用；需设置接种了的牛肉膏蛋白胨培养基作对照，若牛肉膏蛋白胨培养基培养基上的菌落种类数目多于选择培养基上的菌落类型，则说明起到了选择作用，D正确。

故选ABD。13、A:B:D【分析】【分析】

免疫PCR是一种抗原检测系统；将一段已知序列的DNA片段标记到抗体2上，通过抗原抗体的特异性识别并结合，抗体2会和固定抗体1；抗生素形成复合物“固定抗体1—抗生素—抗体2”，再用PCR方法将这段DNA进行扩增，通过检测PCR产物的量，即可推知固定抗体1上吸附的抗生素的量。

【详解】

A；免疫PCR中所用的DNA不选用受检样品（牛乳）中可能存在的DNA。待检测的牛乳中可能含有牛乳腺细胞的DNA（其上含有牛乳基因的DNA片段）；若图示中的DNA用牛乳基因中的DNA片段，经过PCR扩增后的产物中，不仅有抗体2上的DNA扩增产物，还可能有牛乳中本身含有的牛乳基因片段的扩增产物，使检测结果偏大，A正确；

B；如果第三次冲洗不充分；可能使残留的、呈游离状态的抗体2上的DNA也作为PCR的模板参与扩增，会出现假阳性现象，B正确；

CD；微量抗原抗体反应；是通过PCR技术扩增抗体2上连接的DNA，最后通过检测扩增产物—DNA的量来确定抗生素的量的方法。因此，PCR扩增产物的量与牛乳中抗生素的量呈正相关，抗原、抗体的数量可通过PCR技术间接扩增放大，C错误，D正确。

故选ABD。三、填空题(共8题，共16分)14、略

【解析】①.水②.碳源③.氮源④.无机盐15、略

【分析】【分析】

1；腐乳制作过程中多种微生物参与了发酵；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生蛋白酶能将豆腐中的蛋白质转化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪转化成甘油和脂肪酸。

2；果胶酶能够分解果胶；瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得容易，而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得浑浊的果汁变得澄清。果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶。

【详解】

（1）在腐乳制作的过程中；利用毛霉等微生物产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸；加酶洗衣粉里添加的酶制剂中，应用最广泛；效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。

（2）果胶酶并不特指某一种酶；而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶；果胶分解酶和果胶酯酶；在果汁生产过程中如果要固定果胶酶，最好采用化学结合和物理吸附法固定化，这是因为酶分子小，体积小的酶容易从包埋材料中漏出。

（3）酶提取和分离原理：需要用凝胶色谱法去除相对分子质量大的杂质蛋白；以纯化酶；利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法对酶进行纯度鉴定。

【点睛】

本题考查腐乳制作和酶提取等知识，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验步骤、实验采用的试剂及试剂的作用等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。【解析】小分子肽和氨基酸脂肪酶碱性蛋白酶和碱性脂肪酶半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶化学结合法和物理吸附凝胶色谱（分配色谱）聚丙烯酰胺凝胶电泳16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】高压灭菌—2017、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】不容的杂质析出DNA过滤溶液中的杂质DNA18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】0．1419、略

【分析】【分析】

微生物实验中常用的灭菌方法有干热灭菌；高压蒸汽灭菌和灼烧灭菌；其中对于培养基一般用高压蒸汽灭菌，对于接种环一般用灼烧灭菌，对于培养皿等可以用干热灭菌。培养基放入培养箱中需要倒置培养，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，即将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养，当菌落长成后将试管放入4℃的冰箱中保藏，以后每3-6个月都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上；对于需要长期保存的菌种可以采用甘油管藏法，在3mL的甘油瓶中装入1mL甘油后灭菌，将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后放在-20℃的冷冻箱中保存。植物有效成分的提取方法主要有蒸馏法、压榨法和萃取法，如玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏，常采用蒸馏法提取；对于如橘皮精油，其主要储存在橘皮部分，由于橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解，又会产生原料焦糊问题，所以一般采用压榨法提取。

【详解】

（1）微生物培养中常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌法；灼烧灭菌法、干热灭菌法等。用平板培养沙门氏菌时一般需要将平板倒置；可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征，因此单个细菌在平板上会形成菌落，通常可根据菌落的形状、大小和颜色等特征来初步区分不同种的微生物。

（2）从鸡粪便取样；经选择培养后，如果要将样品涂布到鉴别培养基上，需要经过一系列梯度稀释。对获得的沙门氏菌进行长期保存常采用甘油管藏法。

（3）根据题干信息；沙门氏菌的最适繁殖温度为37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其对热抵抗力不强，在60℃的条件下15min就能被杀死，因此为避免食用被沙门氏菌污染的食品而引发的食物中毒，家庭中可采取低温储存；高温加工方法进行处理。

（4）根据题意；肉桂精油不溶于水；易溶于有机溶剂且易挥发，故可采用水蒸气蒸馏法进行提取，提取过程中蒸馏的温度、时间都会影响精油品质。

【点睛】

本题主要考查现代生物科技的原理和运用，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力，能运用所学知识，准确判断问题的能力。【解析】灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法、干热灭菌法倒置在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征梯度稀释甘油管藏低温储存、高温加工水蒸气蒸馏蒸馏的温度、时间20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】细胞产物的工厂化生产。21、略

【分析】【详解】

蛋白质形成二硫键，使蛋白质的结构更加稳定，因此T4溶菌酶的热稳定性会提高。这项技术属于蛋白质工程技术，其步骤为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。【解析】会提高T4溶菌酶的耐热性。这项技术属于蛋白质工程技术，该技术的要点是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。四、实验题(共4题，共32分)22、略

【分析】【分析】

自然界中目的菌株的筛选要根据它对生存环境的要求；到相应的环境中去寻找，要分离尿素细菌应该使用只含有尿素为唯一氮源培养基进行培养，这样的培养基其他细菌不能生存，存活下来的细菌则是可以分解尿素。

【详解】

（1）自然界中目的菌株的筛选要根据它对生存环境的要求；到相应的环境中去寻找，要获得分解尿素的细菌，应到含尿素较多的土壤中去取样，图2中培养基为微生物提供碳源的是葡萄糖，提供氮源的是尿素；

（2）甲为液体培养基；乙为固体培养基，唯一的区别在于甲培养基内无琼脂；

（3）为了保证结果的准确性；一般应选择菌落数在30-300的平板进行计数，在30-300范围内的菌落数说明稀释比较成功；

（4）酚红遇碱变红；合成的脲酶将尿素分解成氨，使培养基的碱性增强；

（5）该小组采用稀释涂布平板法统计土壤溶液中活菌的数目时；统计的菌落数比活菌的实际数目低，是因为当两个或多个菌落连在一起时，只能统计一个菌落，细菌还可以使用显微镜直接计数。

【点睛】

熟记并理解微生物的实验室培养、微生物的分离与计数等相关基础知识、形成清晰的知识网络，在此基础上从题意中提取信息并进行作答。【解析】含尿素较多的土壤中葡萄糖尿素甲中培养基无琼脂30~300的平板（则说明稀释操作比较成功）合成的脲酶将尿素分解成氨，使培养基的碱性增强低显微镜直接计数23、略

【分析】【分析】

制备牛肉膏蛋白胨固体培养基；其基本过程为计算；称量、溶化、灭菌、倒平板。培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物生长，培养、分离出特定的微生物（如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度的食盐）。

(1)

制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本操作步骤是计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。金黄色葡萄球菌具有高度耐盐化的特性；培养基中加入7.5%NaC1不影响金黄色葡萄球菌生长的同时会抑制其他杂菌生长，起到了选择的目的。

(2)

在制作血平板时需要等平板冷却后；方可加入血液，以防止高温破坏血细胞。在血平板上，由于金黄色葡萄球菌可破坏红细胞而使其褪色，因此菌落的周围会出现褪色圈。

(3)

测定土壤中金黄色葡萄球菌的数量时，一般采用稀释涂布平板法。为了保证获得菌落数在30～300之间适于计数的平板，需要选用一定稀释范围的样品液进行培养。测定土壤中金黄色葡萄球菌的数量，一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养；测定放线菌的数量，一般选用103、104、105倍的稀释液进行平板培养；测定真菌的数量，一般选用102、103、104倍的稀释液进行平板培养。因此稀释倍数较低的是真菌。由于当两个或多个细胞连在一起时；平板上观察到的只是一个菌落，因此实验结果统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。

【点睛】

本题主要考查微生物的培养与分离，考查学生的实验与探究能力。【解析】(1)计算→称量→溶化→灭菌→倒平板7．5%NaC1不影响金黄色葡萄球菌生长的同时会抑制其他杂菌生长。

(2)高温破坏血细胞褪色圈（或溶血圈）

(3)稀释涂布平板30～300真菌当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落24、略

【分析】【分析】

分析图1可知，菌株A的细胞密度增殖速率低于菌株B，脂肪剩余量菌株A高于菌株B。

从图2中可知，ABC三种菌株中，BC菌落周围出现透明圈，而A菌落周围未出现透明圈。

【详解】

（1）科研小组从土壤中筛选出产脂肪酶的菌株时，需设置只利于产脂肪酶的菌株生长，而其他杂菌生长受抑制的培养基，因此配制的培养基需要以脂肪为唯一碳源。制备固体培养基的步骤是：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，其次还有穿刺接种和斜面接种。

（2）据图1分析可知，菌株B增殖速度快，且脂肪剩余比例小，降解脂肪能力强，故应选择菌株B进行后续相关研究。

（3）科研小组从土壤中筛选淀粉分解菌时，加碘液染色后，选择培养基上出现了A、B和C三种菌落，淀粉遇碘液会变蓝，而淀粉酶能够分解淀粉，则不同产酶活力的菌株周围会形成不同直径的透明圈，淀粉酶活力越强的菌株周围的透明圈越大，因此若要得到淀粉酶活力最高的菌株，应选择C菌落进一步纯化，这是因为C菌株的