2025年人教新课标选择性必修3生物上册阶段测试试卷含答案

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A.①过程只能产生一种杂交瘤细胞B.②过程筛选出的杂交瘤细胞都能产生抗HCG抗体C.③过程以抗HCG单克隆抗体为抗原进行检测D.④过程可在体内进行，也可在体外进行3、据下图分析；下列有关基因工程的说法不正确的是（）

A.能够检测到标记基因表达产物的受体细胞中，也一定会有目的基因的表达产物B.限制酶、DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键C.与启动子结合的应该是RNA聚合酶D.为防止目的基因与质粒任意结合而影响基因的表达，应用限制酶Ⅰ、Ⅱ同时切割二者4、治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义；具体流程如下图，下列叙述正确的是（）

A.过程①中最常用的试剂是聚乙二醇B.过程②采用的是早期胚胎培养技术C.胚胎干细胞一般来自囊胚中的滋养层细胞D.图中获得的组织器官移植给个体A不会发生免疫排斥反应5、下列关于DNA粗提取与鉴定及DNA片段的扩增与电泳鉴定的叙述，正确的是（）A.用同样方法从等体积猪血和鸡血中提取的DNA量相近B.使用二苯胺试剂能有效测定不同提取液中DNA的纯度差别C.PCR扩增的DNA片段在琼脂糖凝胶中迁移的速率与凝胶浓度、DNA分子大小等有关D.PCR扩增4次循环后，得到的含有两种引物的DNA片段所占比例为1/86、利用酵母菌、醋酸菌和毛霉进行发酵的适合温度分别是（）A.30~35℃、18~35℃、15~18℃B.18~25℃、30~35℃、15~18℃C.18~35℃、20~35℃、15~18℃D.30~35℃、20~35℃、15~18℃7、病毒A常导致西瓜、甜瓜等多种瓜类发病或减产，下图示科研人员制备抗病毒A单克隆抗体的部分过程，有关叙述错误的是（）

A.以提纯的病毒A作为抗原对小鼠甲进行免疫B.单细胞悬液可由小鼠甲的脾脏用解离液分散成单个细胞制得C.制备过程中筛选1和筛选2的原理和目的均不相同D.制备成功的单克隆抗体可用于检测田间西瓜是否感染病毒A8、蜡状芽孢杆菌是从土壤中分离获得的一种降解纤维素能力很强的菌株，下列叙述错误的是（）A.观察空白培养基上是否有菌落产生，以判断培养基是否被污染B.接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落C.刚果红能与纤维素分解后的纤维二糖和葡萄糖形成红色复合物D.用刚果红染色法筛选出来的目的菌不一定都能分解纤维素9、下列与传统发酵有关的微生物的比较中，正确的是。选项ABCD微生物酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物学分类原核生物原核生物真核生物原核生物代谢类型异养兼性厌氧异养厌氧异养需氧异养厌氧适宜温度20℃左右30～35℃30℃左右室温主要用途酿酒酿醋制作腐乳制作泡菜

A.AB.BC.CD.D评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)10、下列相关实验的叙述，正确的是（）A.发酵过程中，要严格控制温度、pH等发酵条件，否则会影响菌种代谢产物的形成B.DNA的粗提取与鉴定实验中，用菜花替代鸡血作为实验材料，实验操作会有不同C.PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液、蒸馏水等在使用前不用灭菌D.用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物时，DNA分子的迁移速率与凝胶浓度、分子大小无关11、下列关于小鼠体外受精及胚胎发育的叙述，错误的是（）A.精子在获能液中培养的目的是使精子获取能量B.注射到囊胚腔中的胚胎干细胞可以参与个体器官的发育C.小鼠在特定光控周期条件下饲养，注射相关激素有促进超数排卵的作用D.分割的胚胎细胞有相同的遗传物质，因此发育成的个体没有形态学差异12、多种实验材料都可以用于DNA的粗提取与鉴定，用香蕉也可以取得较好的实验效果。下列叙述错误的是（）A.将粗提取的DNA加入到2mol/L的NaCl溶液的目的是为了溶解DNAB.冷却的体积分数为95%的酒精可以溶解某些蛋白质，得到粗提取的DNAC.向剪碎的香蕉果肉组织中加入蒸馏水并研磨，以释放核DNAD.将DNA溶于NaCl溶液后加入现配的二苯胺试剂，沸水浴冷却后会出现蓝色13、下列关于DNA粗提取与鉴定、DNA片段的扩增及电泳鉴定的原理的叙述正确的是（）A.利用DNA不溶于酒精，但蛋白质均溶于酒精的原理，可分离DNA与蛋白质B.利用在一定温度下DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色的原理对粗提取的DNA进行鉴定C.PCR技术利用了DNA的热变性原理，通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合D.电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理14、甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状；但属于胞质雄性不育品种。通过体细胞杂交，成功地将乙品种细胞质中的可育基因引入甲中，下图为该操作示意图。下列相关叙述正确的是（）

A.人工诱导原生质体融合可使用离心法B.融合的原生质体再生出细胞壁后再进行组织培养C.杂种细胞经过一定激素和营养的诱导，发育成为杂种植株D.筛选出的杂种植株含有控制甲青花菜优良性状的基因，但只能通过母本进行传递15、长春花是野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。研究人员利用已免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞通过杂交技术生产出能够同时特异性识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体，制备过程如图所示。下列说法错误的是（）

A.①过程要多次注射抗原，其目的是刺激小鼠产生更多的抗体B.经③过程获得的杂交瘤细胞都能产生抗癌胚抗原的特异性抗体C.图中“?”处只能使用PEG融合法和电融合法来诱导细胞融合D.制备双特异性抗体的目的是使长春碱能定向地作用于癌细胞16、研究人员用无机盐、琼脂和石油配制的培养基从被石油污染的土壤中筛选出了一种石油降解菌，下列相关表述正确的是（）A.培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利B.这种培养基是一种选择培养基C.利用这种石油降解菌可以降解石油，修复土壤D.相对于未被污染的土壤，从被石油污染的土壤中更容易分离到石油降解菌17、荧光原位杂交可用荧光标记的特异DNA片段为探针；与染色体上对应的DNA片段结合，从而将特定的基因在染色体上定位。下列说法正确的是（）

A.由图1可知，DNA探针的本质是荧光标记的DNA片段，其基本单位是脱氧核苷酸B.由图2可知，高温可以使双链DNA分子中的氢键断裂形成DNA单链C.图2中两条姐妹染色单体中最多可有2条荧光标记的DNA片段D.若C分别代表不同来源的一个染色体组，已知AA和BB中各有一对同源染色体可被荧光探针标记。若植物甲（AABB）与植物乙（AACC）杂交，则F1有丝分裂中期的细胞中可观察到6个荧光点评卷人得分三、填空题(共8题，共16分)18、禁止生物武器公约。

（1）1972年4月10日，苏联、美国、英国分别在其首都签署了《禁止试制、生产和储存并销毁细菌（生物）和毒剂武器公约》（简称_____）；并于1975年3月26日生效。1984年11月15日，我国也加入了这一公约。

（2）我国在任何情况下_____、_____、_____生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。19、载体具备的条件：①_____。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③______。20、基因工程操作一般经历如下四个步骤：_____。21、常用的转化方法：

将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是_______，其次还有______和______等。

将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是_______。此方法的受体细胞多是_______。

将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是_______，最常用的原核细胞是_____，其转化方法是：先用______处理细胞，使其成为______，再将______溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。22、转化的概念：是______进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持______的过程。23、通常将DNAD的羟基（—OH）成为_______________端，而磷酸基团的末端成为___________端。由于_______________，因此DNA需要引物，因此DNA的合成方向总是从_________________延伸。24、沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌；被感染了沙门氏菌的人或带菌者的粪便污染的食品，会使人发生食物中毒。沙门氏菌的最适繁殖温度为37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其对热抵抗力不强，在60℃的条件下15min就能被杀死。肉桂精油是从肉桂树中提炼获得的，具有不溶于水；易溶于有机溶剂且易挥发的特性，能抑制沙门氏菌的繁殖。回答下列问题：

（1）培养沙门氏菌时要进行无菌操作，常用的灭菌方法有________（答出两种）。用平板培养沙门氏菌时一般需要将平板________（填“倒置”或“正置”）。单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小和颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是________。

（2）从鸡粪便取样，经选择培养后需要经过一系列________才能将样品涂布到鉴别培养基上。对获得的沙门氏菌常采用________的方法长期保存。

（3）根据题干信息，为避免食用被沙门氏菌污染的食品而引发的食物中毒，家庭中储存、加工食品的方法是________。

（4）根据肉桂精油的化学特性，可采用________法来提取，提取过程中影响精油品质的因素有________。25、随着现代科技的发展，有些新的致病微生物被发现，它们的危害可能更大。通过互联网或图书馆搜集近年发现的致病微生物的相关资料，分析和归纳这些资料__________。评卷人得分四、判断题(共3题，共21分)26、理性看待转基因技术，就是听之任之，不管不问（______）A.正确B.错误27、蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。（选择性必修3P93）()A.正确B.错误28、蛋白质工程是一项难度很大的工程，主要是因为蛋白质发挥功能必须依赖于正确的高级结构，而这种高级结构往往十分复杂。（选择性必修3P95）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共12分)29、学校开展以“利用传统发酵技术制作食品”为主题的相关活动。小余同学兴致勃勃地回家；发现冰箱中可用的原材料有草莓；豆腐、白萝卜、牛奶等。请回答下列问题：

（1）传统发酵技术一般是指直接利用原材料中天然存在或前一次发酵保存下来的发酵物中的______进行发酵；制作食品的技术。

（2）小余同学将草莓洗净、切块，装入瓶中。加入原浆醋（经粮食直接酿制，不经勾兑）少许、白糖两勺，置于保温箱中，每隔一段时间拧开瓶盖换气，两周后得到草莓醋。小余同学加入原浆醋的目的是接种更多的______，加入糖并经常开盖换气的目的是保证______都充足。保温箱温度应保持在______℃。

（3）小余同学还打算制作一些腐乳和萝卜泡菜给住宿生作早餐。从豆腐到腐乳，多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是_______，属于______（填“真核”或“原核”）生物。豆腐中的成分也会发生一定的变化，其中蛋白质被分解成______，脂肪被分解成______；用白萝卜制作泡菜的过程中，能达到缩短腌制时间的操作有______（填下面的序号）。

①将白萝卜切成小块②用沸水短时间处理白萝卜块。

③添加陈泡菜汁④向容器中通入无菌空气。

（4）小余同学欲从泡菜汁中分离制作酸奶的乳酸菌，首先对陈泡菜汁进行过滤，然后取滤液用无菌水进行充分______，再用涂布器接种到特定的______培养基中进行初步筛选。30、《本草纲目》记载；“蝉花可治疗惊痫，夜啼心悸，功同蝉蜕”。蝉花是蝉拟青霉寄生于蝉若虫后形成的虫菌复合体，内含虫草多糖；甘露醇和必需氨基酸等活性成分。研究人员从天然蝉花中分离纯化蝉拟青霉菌株进行人工培养。

(1)制备培养基：

①该实验选择马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基，配方如下：马铃薯200g，葡萄糖20g，KH2PO42g，MgSO40.5g，琼脂20g，用蒸馏水定容至1000mL，自然pH，培养基中的马铃薯可为蝉拟青霉生长提供_____等营养成分（至少写出2种），该培养基的自然pH为______性范围。

②为了便于筛选蝉拟青霉菌株，培养基中还应加入氯霉素等抗生素以抑制_____的生长。该培养基从功能上分类属于______培养基。

③配制的培养基必须进行灭菌处理，目的是_______。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是_____。

(2)蝉拟青霉的分离纯化：取新鲜蝉花，挑取虫体胸腔中的少量菌丝采用_______法接种至PDA培养基上进行培养。

(3)发酵生产：发酵生产中常用液体培养基扩大培养。下表为发酵菌丝体和天然蝉花的主要成分及含量的测定结果，据表判断_______（填“能”或“不能”）用发酵菌丝体替代天然蝉花，判断的理由是_______。粗蛋白（%）粗纤维（%）灰份（%）水分（%）虫草多糖（mg/g）甘露醇（mg/g）发酵菌丝体25．388．327．878．9233．278．9天然蝉花19．653．127．849．8128．553．631、随着游泳运动的普及；游泳池水质安全问题越来越受到人们的重视。在游泳池池水净化中，常用的方法是用氯或含有效氯化合物进行氯化消毒。氯化消毒后池水中的游离性余氯可保证持续消毒效果，但游离性余氯含量过高会影响人体健康。国家标准规定的人工游泳池水质指标卫生标准包括游离性余氯0.3~1.0mg/L；菌落形成单位不得超过200个/mL等指标。研究人员对某地学校、酒店、健身会所、社区等场所游泳池水进行抽样监测，其中，对游泳池水活细菌总数进行检测的实验步骤如下：

①采样瓶的预处理：在采样瓶中加入适量的Na2S2O3溶液后对采样瓶进行灭菌处理。

②采样：在客流高峰时段进行采样。采集位置在水下30cm左右；取水500mL。

③接种：用灭菌吸管吸取水样1mL；注入灭菌培养皿中。将熔化并冷却至45℃的营养琼脂培养基倒入培养皿内，每皿15mL。立即旋摇培养皿，使水样和培养基充分混匀。平行重复若干实验组。

④计数：待琼脂凝固后翻转培养皿；置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落数，并求平均值。

回答下列问题：

(1)检测游泳池活细菌总数时，不宜用细菌计数板在显微镜下直接计数，原因是_____________

(2)Na2S2O3具有还原性，可消除水样中的残余氯。据此分析步骤①中在采样瓶中添加Na2S2O3溶液，对检测的意义是_____________。

(3)步骤③中，将培养基倒入培养皿时，应在____________附近进行。为使实验数据更准确，应至少设置____________个实验组。步骤③中还应增加对照组，下列不宜作为对照组的是______________。

a．15mL营养琼脂培养基。

b．1m无菌水+15mL营养琼脂培养基。

c．1mL蒸馏水+15mL营养琼脂培养基。

(4)步骤④中，统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，这是因为_____________。若观察到培养后的培养皿中的菌落连成一片，则该培养皿不宜计数。出现成片的菌落的原因可能步骤③中_____________操作不妥当造成的。

(5)不同季度微生物检测结果如下表所示，第三季度合格率下降的可能原因包括____________。

a．气温升高b．客流量增加。

c．检测的场馆数多d．泳池氯化时间过长。季度检测场馆数合格场馆数合格率（%）一3434100.0二403895.0三39932982.5四3636100.0

根据检测结果，要进一步加强第三季度的场馆管理。下列属于提升游泳池水质安全性的合理建议有____________。

a．强制要求个人淋浴后入池b．增加游泳池水质监测的频次。

c．游泳池装设水循环过滤装置d．每日在临近开馆前氯化消毒32、黏多糖贮积症是由IDUA基因突变导致的遗传病。科研人员对此病的治疗进行相关研究。

(1)黏多糖贮积症患者细胞中IDUA基因由于碱基对___________造成突变，转录出的mRNA长度不变但提前出现终止密码子，最终导致合成的IDUA酶分子量___________；与正常IDUA酶的空间结构差异显著而失去活性，积累过多的黏多糖无法及时清除，造成人体多系统功能障碍。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）与普通tRNA的结构、功能相同，但它的反密码子可以与终止密码子配对。在上述这一类突变基因的翻译过程中，加入sup-tRNA可以发挥的作用是___________；从而诱导通读获得有功能的全长蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以携带不同氨基酸；为比较它们的通读效果，科研人员进行了相关研究，实验结果如图。

注：“-”代表未加入。

据图分析，实验组将___________基因导入受体细胞，并采用___________技术检测导入基因的表达情况。据结果分析，携带酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人员利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA突变基因纯合小鼠及IDUA基因敲除小鼠进行治疗，检测肝脏细胞IDUA酶活性和组织黏多糖的积累量，与不治疗的小鼠相比较，实验结果为_____________，表明携带酪氨酸的sup-tRNA可以治疗黏多糖贮积症。评卷人得分六、综合题(共2题，共4分)33、使用高效的细胞毒素类药物进行化疗可有效杀伤肿瘤细胞。但细胞毒素没有特异性；在杀伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造成伤害，这限制了它在临床上的应用。抗体—药物偶联物(ADC)通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC通常由抗体；接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，它的作用机制如图所示。

请回答下列问题:

(1)制备单克隆抗体需要用到动物细胞工程中的____________技术和____________技术。若要大量制备单克隆抗体，可将杂交瘤细胞注射到小鼠的________中进行增殖，再从________中提取纯化获得单克隆抗体。

(2)ADC中抗体的作用是___________________，其优点有______________________。

(3)ADC中药物的作用是杀死肿瘤细胞，与单独使用药物相比，ADC的优点为______________。（写出一点即可)

(4)除细胞毒素外，还可以用____________标记单克隆抗体，对肿瘤细胞进行靶向放疗。34、下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tet表示四环素抗性基因；amp表示氨苄青霉素抗性基因，BamHI；HindⅢ、SmaΙ直线所示为三种限制酶的切割位点：

（1）科学家用PCR的方法对人乳铁蛋白基因进行体外扩增，加热至94℃的目的是使DNA样品的_______键断裂；如果人乳铁蛋白基因的部分序列是：

5’ATGGCTAGGAAC3’

3’TACCGATCCTTG5’

根据上述序列应选择引物B和_______（填字母）进行PCR。

【选项A】引物：5’-TACCGA-3’【选项B】引物：5’-GTTCCT-3’

【选项C】引物：5’-AUGGCU-3’【选项D】引物：5’-ATGGCT-3’

（2）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用_______、______限制酶同时切割载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含_________的培养基上进行。

（3）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是______

【选项A】启动子【选项B】tetR【选项C】复制原点【选项D】ampR

（4）过程①可采用的操作方法是________技术。

【选项A】农杆菌转化【选项B】大肠杆菌转化【选项C】显微注射【选项D】细胞融合。

（5）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，通常可采用________技术。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、C【分析】【分析】

醋酸菌是异养需氧型生物；其进行醋酸发酵时需要在有氧的条件下；酵母菌是异养兼性厌氧型生物，其有氧呼吸能大量繁殖，无氧呼吸时能进行酒精发酵；乳酸菌是异养厌氧型生物，能进行乳酸发酵；参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，属于异养需氧型。

【详解】

A；乳酸菌是异养厌氧型生物；能进行乳酸发酵，泡菜腌制就是利用了乳酸菌的乳酸发酵，A正确；

B；酵母菌无氧呼吸能产生酒精；因此酵母菌利用葡萄糖汁产生酒精需要在无氧条件下，B正确；

C；醋酸菌是好氧菌；利用乙醇生产醋酸需在有氧条件下进行，C错误；

D；腐乳制作的原理是毛霉等微生物的蛋白酶和脂肪酶；能将豆腐中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收的小分子，D正确。

故选C。2、D【分析】【分析】

1；单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。具有特异性强、灵敏度高；并可能大量制备的特点。

2；单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内；使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞（A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞），不需要A、B、AA、BB型细胞。第二次筛选：利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。

【详解】

A；①过程是动物细胞融合；可产生多种杂交瘤细胞，A错误；

B；②过程筛选出的杂交瘤细胞不一定全部产生抗HCG抗体；还需要进行专一抗体检测，B错误；

C；③过程以HCG为抗原；利用抗原-抗体杂交的原理进行检测，C错误；

D；④过程可在体内进行；也可在体外进行，D正确。

故选D。3、A【分析】【分析】

基因表达载体的构建：

1；过程：用限制酶切割目的基因和运载体；再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子。

2；目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用。

3；基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。（1）启动子在基因的首段；它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始；（2）终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束；（3）标记基因便于目的基因的鉴定和筛选。

【详解】

A；重组DNA分子上的抗性基因（标记基因）可用于目的基因的检测与鉴定；但即使存在目的基因也不一定表达了相关产物，A错误；

B；限制酶、DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键；前者是切割磷酸二酯键，后者是连接磷酸二酯键，B正确；

C；启动子是一段有特殊结构的DNA片段；是RNA聚合酶的结合位点，能启动转录过程，C正确；

D；限制酶Ⅰ和酶Ⅱ识别的核苷酸序列不同；所以用限制酶Ⅰ和酶Ⅱ同时切割目的基因和质粒可防止二者任意结合，D正确。

故选A。4、B【分析】【分析】

分析题图；个体A是提供细胞质的供体，个体B是提供细胞核的供体，①是核移植技术，②是早期胚胎培养。

【详解】

A；聚乙二醇是植物细胞杂交时诱导原生质体融合的；过程①中不需要，A错误；

B；过程②重组细胞形成囊胚；采用的是早期胚胎培养技术，B正确；

C；胚胎干细胞一般来自囊胚中的内细胞团；C错误；

D；图中获得的组织器官移植给个体A有可能会发生免疫排斥反应；D错误。

故选B。5、C【分析】【分析】

1；DNA的粗提取和分离。

（1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低）；利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。

（2）DNA不溶于酒精溶液；但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离。

2；DNA的鉴定：在沸水浴条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

【详解】

A；猪是哺乳动物；哺乳动物的成熟红细胞中没有细胞核，不含DNA，因此用同样方法从等体积猪血和鸡血中提取的DNA量不是相近的，A错误；

B；DNA遇二苯胺会被染成蓝色；二苯胺试剂只能鉴定DNA的有或无，不能测定DNA的纯度，B错误；

C；PCR扩增的DNA片段在琼脂糖凝胶中迁移的速率与凝胶浓度、DNA分子大小等有关；C正确；

D；PCR扩增4次即DNA复制4次；共形成16个DNA，根据半保留复制，有2个子代DNA含有其中一种引物，14个子代DNA同时含有两种引物，因此同时含有两种引物的DNA占14/16=7/8，D错误。

故选C。

【点睛】6、B【分析】【分析】

果酒和果醋发酵：①将葡萄汁装入发酵瓶；要留要大约13的空间，并封闭充气口。②制葡萄酒的过程中，将温度严格控制在18℃~25℃，时间控制在10~12d左右，可通过出料口对发酵的情况进行。及时的监测。③制葡萄醋的过程中，将温度严格控制在30℃~35℃，时间控制在前7~8d左右，并注意适时通过充气口充气。

【详解】

利用酵母菌进行果酒制作的适宜温度是18~25℃；利用醋酸菌进行醋酸发酵的适宜温度是30～35℃；利用毛霉进行腐乳制作的适宜温度是15~18℃；B正确。

故选B。7、B【分析】【分析】

单克隆抗体技术是把一种B淋巴细胞与能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞融合；所得到的融合细胞大量增殖，产生足够数量的特定抗体；单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备，因此被广泛用作诊断试剂，在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要的作用。

【详解】

A；以提纯的病毒A作为抗原对小鼠甲进行免疫；使小鼠产生相应的B淋巴细胞，A正确；

B；用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间；将组织分散成单个细胞获得单细胞悬液，B错误；

C；制备过程中筛选1是利用DNA复制途径不同筛选杂交瘤细胞；筛选2是利用抗原抗体特异性结合筛选产生特定抗体的杂交瘤细胞，故原理和目的均不相同，C正确；

D；制备成功的单克隆抗体可用于检测田间西瓜是否感染病毒A；单克隆抗体特异性强灵敏度高，可快速检测，D正确。

故选B。8、C【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法：

（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；判断培养基是否被污染需要将空白培养基在适宜的无菌环境中放置一段时间；观察培养基上是否有菌落产生，若没有菌落产生则培养基没有被污染，否则被污染，A正确；

B；平板划线法在线的开始部分；微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落，因此接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落，B正确；

C；刚果红可以与纤维素形成红色复合物；当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，C错误；

D；刚果红染色法筛选出来的目的菌不一定都能分解纤维素；可能还会生长一些能利用纤维素分解的产物——葡萄糖的微生物，D正确。

故选C。9、D【分析】【详解】

酵母菌属于真核生物，代谢类型为异养兼性厌氧型，生存的适宜温度为18～25℃，可用于酿酒等，A错误；醋酸菌属于原核生物，代谢类型为异养需氧型，生存的适宜温度为30～35℃，可用于酿醋，B错误；毛霉属于真核生物，代谢类型为异养需氧型，生存的适宜温度为15～18℃，可用于制作腐乳，C错误；乳酸菌属于原核生物，代谢类型为异养厌氧型，生存于室温下，可用于制作泡菜，D正确。二、多选题(共8题，共16分)10、A:B【分析】【分析】

1；DNA粗提取和鉴定过程中破碎动植物细胞；获取含DNA的滤液区别：动物细胞的破碎比较容易，以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞，需要先用洗涤剂溶解细胞膜。例如，提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。

2；影响DNA在琼脂糖凝胶中迁移速率的因素很多；包括DNA分子大小和构型、琼脂糖浓度、所加电压、电泳缓冲液的离子强度等。

【详解】

A；微生物发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件；因为环境条件的变化不仅会影响菌种的生长繁殖，而且会影响代谢产物的形成，A正确；

B；用菜花替代鸡血作为实验材料；其实验操作步骤不完全相同，如植物细胞有细胞壁，破碎细胞时需要研磨并加入食盐和洗涤剂，B正确；

C；为避免外源DNA等因素的污染；PCR反应中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌，C错误；

D；用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物时；DNA分子的迁移速率与琼脂糖的浓度、DNA分子大小及构型等因素有关，D错误。

故选AB。

【点睛】

本题考查发酵技术、DNA和蛋白质技术等相关知识，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验需要采用的试剂及试剂的作用、实验现象等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。11、A:D【分析】【分析】

1；胚胎分割的特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质；胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。

2；胚胎干细胞的特点：具有胚胎细胞的特性；在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。

【详解】

A；精子在获能液中培养的目的是使精子获能；不是获取能量，A错误；

B；注射到囊胚腔中的胚胎干细胞可以分化形成各种组织；因此可以参与个体器官的发育，B正确；

C；小鼠在特定光控周期条件下饲养；注射相关激素（促性腺激素）有促进超数排卵的作用，C正确；

D；分割的胚胎细胞有相同的遗传物质；由于生物体的性状还受环境因素的影响，因此发育成的个体可能会存在形态学差异，D错误。

故选AD。

【点睛】12、C【分析】【分析】

根据DNA的溶解性提取DNA；1；DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaC中的溶解度不同。2、DNA不溶于酒精，但是某些蛋白质则溶于酒精。3、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性不同。

【详解】

A；将粗提取的DNA加入到2mol/L的NaCl溶液的目的是为了溶解DNA；A正确；

B；DNA不溶于酒精；而某些蛋白质溶解于酒精，可用体积分数为95%冷酒精溶解某些蛋白质，析出DNA，获得粗提取的DNA，B正确；

C；香蕉果肉组织细胞有细胞壁保护；因此加蒸馏水不会破坏细胞，不能将DNA释放岀来，C错误；

D；将DNA再次溶于NaCl溶液；加入现配的二苯胺试剂，沸水浴冷却出现蓝色，D正确。

故选C。

【点睛】13、B:C:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鉴定的原理：

（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶；高温和洗涤剂的耐受性。

（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

【详解】

A；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精，可将DNA与蛋白质分离，A错误；

B；在沸水浴的条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色，B正确；

C；PCR是一种体外扩增DNA片段的技术；利用了DNA热变性原理，通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合，包括：高温变性（解链）→低温复性→中温延伸三个步骤，C正确；

D；由于同性相斥、异性相吸；带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动，电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理，D正确。

故选BCD。14、A:B:C【分析】【分析】

题图分析：该图为体细胞杂交过程；其中A为去除细胞壁，制备原生质体，可以用酶解法，B为诱导原生质体融合，可以用聚乙二醇处理，融合的杂种细胞应该具备乙品种细胞质中的可育基因，甲品种的控制多种优良性状的核基因，该过程的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。

【详解】

A；人工诱导原生质体融合的方法有化学法（聚乙二醇）和物理法（离心、振动、电刺激等）两大类；A正确；

B；杂种细胞再生出细胞壁是细胞融合成功的标志；融合成功之后再进行组织培养，B正确；

C；杂种细胞经过外源生长素和细胞分裂素的诱导；脱分化形成愈伤组织，再分化形成胚状体，进一步成为杂种植株，C正确；

D；甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状；杂种植株细胞核内含有控制甲青花菜优良性状的基因，具备乙品种细胞质中的可育基因，因此精子中具备一半核基因，并可通过父本（精子）进行传递，D错误。

故选ABC。15、A:B:C【分析】【分析】

单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融台，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基坮养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】

A；①过程要多次注射抗原；其目的是刺激小鼠产生更多的已免疫的B淋巴细胞，A错误；

B；③为选择培养基；经选择培养基获得的杂交瘤细胞不一定能产生所需抗体，要产生所需抗体还要进行抗体检测阳性和克隆化培养，B错误；

C；诱导动物细胞融合可以使用PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等；C错误；

D；双特异性抗体中的癌胚抗原抗体能将药物定向引导至和癌细胞结合；从而避免对其他细胞的破坏，D正确。

故选ABC。16、B:C:D【分析】【分析】

在微生物学中；将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水；碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。

【详解】

A；培养基中的营养物质浓度过高会导致微生物不能从培养基中吸水；将出现失水过多而死亡的现象，对生长不利，A错误；

B；这种培养基以石油为唯一碳源；只有石油降解菌可在该培养基上正常存活，因此是一种选择培养基，B正确；

C；被石油污染的土壤通气性极差；利用这种石油降解菌可以降解石油，修复土壤，C正确；

D；根据生物与其生存环境相适应的特点；未被污染的土壤中几乎不含石油分解菌，从被石油污染的土壤中更容易分离到石油降解菌，D正确。

故选BCD。17、A:B:D【分析】【分析】

1；基因探针是用放射性同位素、荧光分子等标记的DNA分子作为探针；原理是DNA分子杂交。

2；DNA分子是一个独特的双螺旋结构；是由两条平行的脱氧核苷酸长链盘旋而成，外侧由脱氧核糖和磷酸交替连接构成基本骨架，内侧是碱基对（A-T；C-G）通过氢键连接。

3；目的基因的检测与鉴定：

分子水平上的检测：

①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；

②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；

③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。

个体水平上的鉴定：

抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；由图1可知；DNA探针是用荧光分子标记的DNA分子，DNA的基本组成单位是脱氧核苷酸，因此荧光标记的DNA探针的基本单位是脱氧核糖核苷酸，A正确；

B；由图2可知；高温（煮沸）可以使双链DNA分子中的氢键断裂形成DNA单链，B正确；

C；图中两条姐妹染色单体中含有2个DNA分子共有4条链；所以最多可有4条荧光标记的DNA片段，C错误；

D、由于AA和BB中各有一对同源染色体可被荧光探针标记，若植物甲（AABB）与植物乙（AACC）杂交，则其F1（AABC）含有3个荧光点；经间期复制加倍，有丝分裂中期的细胞中可观察到6个荧光点，D正确。

故选ABD。三、填空题(共8题，共16分)18、略

【分析】【详解】

为最大程度的保障人类权益；签署了禁止生物武器公约：

（1）《禁止试制；生产和储存并销毁细菌（生物）和毒剂武器公约》；简称《禁止生物武器公约》。

（2）我国对于生物武器的态度是在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。【解析】①.《禁止生物武器公约》②.不发展③.不生产④.不储存19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】能在受体细胞中复制并稳定保存具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法显微注射技术受精卵繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少大肠杆菌Ca2+感受态细胞重组表达载体DNA分子22、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因稳定和表达23、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】3，5，DNA聚合酶不能从头开始合成，而只能从3，端延伸DNA子链的5，端向3，端24、略

【分析】【分析】

微生物实验中常用的灭菌方法有干热灭菌；高压蒸汽灭菌和灼烧灭菌；其中对于培养基一般用高压蒸汽灭菌，对于接种环一般用灼烧灭菌，对于培养皿等可以用干热灭菌。培养基放入培养箱中需要倒置培养，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，即将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养，当菌落长成后将试管放入4℃的冰箱中保藏，以后每3-6个月都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上；对于需要长期保存的菌种可以采用甘油管藏法，在3mL的甘油瓶中装入1mL甘油后灭菌，将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后放在-20℃的冷冻箱中保存。植物有效成分的提取方法主要有蒸馏法、压榨法和萃取法，如玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏，常采用蒸馏法提取；对于如橘皮精油，其主要储存在橘皮部分，由于橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解，又会产生原料焦糊问题，所以一般采用压榨法提取。

【详解】

（1）微生物培养中常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌法；灼烧灭菌法、干热灭菌法等。用平板培养沙门氏菌时一般需要将平板倒置；可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征，因此单个细菌在平板上会形成菌落，通常可根据菌落的形状、大小和颜色等特征来初步区分不同种的微生物。

（2）从鸡粪便取样；经选择培养后，如果要将样品涂布到鉴别培养基上，需要经过一系列梯度稀释。对获得的沙门氏菌进行长期保存常采用甘油管藏法。

（3）根据题干信息；沙门氏菌的最适繁殖温度为37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其对热抵抗力不强，在60℃的条件下15min就能被杀死，因此为避免食用被沙门氏菌污染的食品而引发的食物中毒，家庭中可采取低温储存；高温加工方法进行处理。

（4）根据题意；肉桂精油不溶于水；易溶于有机溶剂且易挥发，故可采用水蒸气蒸馏法进行提取，提取过程中蒸馏的温度、时间都会影响精油品质。

【点睛】

本题主要考查现代生物科技的原理和运用，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力，能运用所学知识，准确判断问题的能力。【解析】灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法、干热灭菌法倒置在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征梯度稀释甘油管藏低温储存、高温加工水蒸气蒸馏蒸馏的温度、时间25、略

【分析】【详解】

致病微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，包括病毒、细菌、真菌、原生动物和蠕虫等，其中以细菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通过空气、体液、食品、水等传播途径，从一个宿主转移到另一个宿主，致病微生物由于看不见、摸不着，难于防范，且存在传染性，因而危害极大。同时近年来由于温室效应加剧，也会使致病微生物的繁殖周期变短，可能会使危害性更大，因此我们需要积极开展科学研究，掌握防范的措施和防范，实现最好的防护，目前对致病微生物最好的防护措施还是疫苗的研究和使用。【解析】致病微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，包括病毒、细菌、真菌、原生动物和蠕虫等，其中以细菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通过空气、体液、食品、水等传播途径，致病微生物由于看不见、摸不着，难于防范，且存在传染性，因而危害极大。目前对致病微生物最好的防护措施还是疫苗的研究和使用。四、判断题(共3题，共21分)26、B【分析】【详解】

理性看待转基因技术，正确的做法是趋利避害，而不能因噎废食，所以本题错误。27、A【分析】【详解】

蛋白质工程是在分子水平上通过基因修饰或基因合成来完成的，是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程。故该说法正确。28、A【分析】【详解】

蛋白质工程是一项难度很大的工程，主要是因为蛋白质发挥功能必须依赖于正确的高级结构，而这种高级结构往往十分复杂，并且蛋白质的结构具有多样性，这也在一定程度上增加了蛋白质工程的难度，故说法正确。五、实验题(共4题，共12分)29、略

【分析】【分析】

醋酸菌是好氧性细菌；当缺少糖源和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气；糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。腐乳的制作利用的微生物主要是毛霉，多种微生物参与了豆腐的发酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸，这些小分子物质有利于人体的消化和吸收。

【详解】

（1）传统发酵技术一般是指直接利用原材料中天然存在或前一次发酵保存下来的发酵物中的微生物进行发酵；制作食品的技术；一般不需要严格灭菌。

（2）原浆醋中含有发酵产生醋酸的醋酸菌；加入原浆醋的目的是接种更多的醋酸菌，加入糖并经常开盖换气的目的是保证糖源；氧气都充足，当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。醋酸菌适宜的发酵温度为30~35℃，故保温箱温度应保持在30~35℃。

（3）腐乳的制作利用的微生物主要是毛霉；毛霉属于真核生物，毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸，这些小分子物质有利于人体的消化和吸收。①将白萝卜切成小块可以扩大白萝卜与腌料的接触面积，缩短腌制时间，①正确；②用沸水短时处理，可抑制某些微生物的繁殖，提高泡菜品质，也可缩短腌制时间，②正确；③泡菜汁中含有一定量的发酵菌种，所以在腌制过程中，加入一些已经腌制过泡菜汁可缩短腌制时间，③正确；④泡菜制作所需菌种为乳酸菌，制作过程中应保持无氧环境，向容器中通入无菌空气不利于腌制，④错误；综上分析，①②③操作能达到缩短腌制时间。

（4）从泡菜汁中可分离制作酸奶的乳酸菌；首先对经多次发酵的泡菜汁进行过滤，然后取滤液用无菌水进行稀释，再用涂布分离的方法在特定的热选择培养基中进行初步筛选乳酸菌。

【点睛】

本题考查传统发酵技术的应用，意在考查考生对发酵原理、发酵过程的识记和应用能力。【解析】微生物醋酸菌糖源、氧气30~35毛霉真核小分子肽和氨基酸甘油和脂肪酸①②③稀释选择30、略

【分析】【分析】

为了杀灭培养基中的微生物；实验所配制的培养基必须进行灭菌处理；可将灭菌后的固体培养基放置在适宜的温度下培养一段时间，以检测培养基的灭菌效果，若培养基中无菌落长出，说明培养基的灭菌是合格的；在固体培养基上接种微生物的方法有平板划线法或稀释涂布平板法。

【详解】

（1）①马铃薯中含有淀粉；蛋白质和无机盐等物质；故培养基中的马铃薯可为蝉拟青霉生长提供碳源、氮源、无机盐等营养成分；

培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性；培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，即培养蝉拟青霉的培养基的自然pH为酸性范围。

②氯霉素等抗生素可以通过抑制肽聚糖（细菌细胞壁的主要成分）的合成来抑制细菌的生长；而对真菌的生长无影响。为了便于筛选蝉拟青霉（真菌）菌株，培养基中还应加入氯霉素等抗生素以抑制细菌的生长，该培养基从功能上分类属于选择培养基。

③为了杀灭培养基中的微生物；配制的培养基必须进行灭菌处理；将灭菌后的固体培养基放置在适宜的温度下培养一段时间，若培养基中无菌落长出，说明固体培养基的灭菌是合格的。

（2）蝉拟青霉的分离纯化：由（1）的题干信息可知；PDA为固体培养基，在固体培养基上接种微生物的方法有平板划线法或稀释涂布平板法。

（3）根据题意“蝉花是蝉拟青霉寄生于蝉若虫后形成的虫菌复合体，内含虫草多糖、甘露醇和必需氨基酸等活性成分”，并结合表格信息可知，发酵菌丝体中各种活性成分的含量明显高于天然蝉花，故能用发酵菌丝体来替代天然蝉花。【解析】(1)碳源；氮源、无机盐酸细菌选择杀灭培养基中的微生物将灭菌的固体培养基放置在适宜的温度下培养一段时间；观察是否长出菌落。

(2)平板划线（稀释涂布平板）

(3)能发酵菌丝体活性成分的含量明显高于天然蝉花31、略

【分析】【分析】

统计菌落数目的方法：（1）显微镜直接计数法①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板；在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数；③缺点：不能区分死菌与活菌。（2）间接计数法（活菌计数法）①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

（1）

测定培养液中游泳池活细菌总数可以使用稀释涂布平板法进行计数；而显微镜直接计数获得的结果包含活菌和死菌的总数。

（2）

氯化消毒后池水中的游离性余氯可保证持续消毒效果，Na2S2O3具有还原性，可消除水样中的残余氯，对游泳池水活细菌总数进行检测，步骤①中在采样瓶中添加Na2S2O3溶液；可以避免残留氯杀菌。

（3）

微生物培养时应注意无菌操作；故步骤③中，将培养基倒入培养皿时，应在酒精灯火焰附近进行；为使实验数据更准确，应至少设置3个实验组；微生物培养时应注意避免杂菌污染，由于蒸馏水中含有较多的杂质和微生物，故不宜用作对照组，故选c。

（4）

步骤④中；用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落；出现成片的菌落的原因可能是水样与培养基没有混匀，是步骤③中旋摇操作不充分造成的。

（5）

a；气温升高会导致微生物繁殖加快；导致合格率降低，a正确；

b、客流量增加，携带的微生物增多，导致合格率降低，b正确；

c；由于不同场馆分别计数；故检测的场馆数多不是导致合格率降低的原因，c错误；

d；泳池氯化时间过长会杀灭更多的微生物；不是导致合格率降低的原因，d错误。

故选ab。

根据检测结果，要进一步加强第三季度的场馆管理，可增加游泳池水质监测的频次、游泳池装设水循环过滤装置，强制要求个人淋浴后入池不现实，每日在临近开馆前氯化消毒，余氯含量过高会影响人体健康，故选bc。【解析】(1)显微镜直接计数获得的结果包含活菌和死菌的总数。

(2)避免余氯杀菌。

(3)酒精灯火焰3c

(4)当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落旋摇

(5)abbc

32、略

【分析】【分析】

基因突变是指DNA分子中发生碱基对的替换；增添和缺失；而引起的基因结构的改变。翻译是指在核糖体上，以mRNA为模板、以氨基酸为原料合成蛋白质的过程，该过程还需要tRNA来运转氨基酸。

密码子由位于mRNA上决定一个氨基酸的三个相邻的碱基组成。终止密码子的作用是终止翻译过程。

基因工程中检测目的基因在受体细胞内是否成功表达可以用抗原-抗体杂交技术。

【详解】

（1）由题干信息可知；黏多糖贮积症患者细胞中IDUA基因突变后，转录出的mRNA长度不变，说明其没有发生碱基对的增添和缺失，因为这两者改变会导致转录出的mRNA长度改变，因此推测其基因突变是由于碱基对替换。由于终止密码子提前出现，导致翻译提前终止，肽链变短，IDUA酶分子量变小，空间结构改变而失活。

（2）由题干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最终诱导核糖体通读mRNA上的遗传信息合成具有功能的全长蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）与普通tRNA的结构；功能相同，据此推测该抑制性tRNA可以携带氨基酸至核糖体并与终止密码子碱基配对使翻译过程继续。

（3）本实验目的是比较携带不同氨基酸的sup-tRNA的通读效果；需要保证实验组细胞含有突变IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶对实验结果产生干扰），同时保证在不同的实验组细胞中可以转录出携