2025年北师大新版选择性必修3生物上册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年北师大新版选择性必修3生物上册阶段测试试卷80考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共6题，共12分)1、图1为某种质粒简图；图2表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoRⅠ；BamHⅠ、HindⅢ的酶切位点。下列有关叙述错误的是()

A.在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则可选EcoRⅠB.如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoRⅠ酶切点有1个C.为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理D.一个图1所示的质粒分子经EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团2、正常情况下，人体胚胎发育的主要场所是（）A.胎盘B.子宫C.输卵管D.卵巢3、下列关于微生物鉴别方面的叙述正确的是（）A.尿素为唯一氮源的培养集中加入酚红培养细菌，指示剂变红，说明该细菌能分解尿素B.纤维素粉为唯一碳源的培养基中加入刚果红培养细菌，菌落周围出现透明圈则说明该细菌能分解纤维素C.在一定培养条件下，培养基上形成菌落的形状、大小、隆起程度可作为菌种计数的依据D.鉴别淀粉分解菌的蓝色培养基（加碘）上出现透明圈，一定是碘被分解了4、下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程；有关叙述不正确的是（）

A.用特定的选择培养基对乙筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长B.图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原C.利用PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等方法均可诱导细胞融合获得乙D.丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁5、我国具有悠久的酿酒文化和历史，汉代以后的相当长一段时间内，中国人喝的酒其实是各种黄酒，黄酒是曲蘖参与糖化发酵制成的谷物酒。在《说文解字》中，关于酒的记载也有着类似的描绘“曲，酒母也；蘖，芽米也”。黄酒的制作流程主要为：制曲→浸米→煮酒（浸好的小米加入开水中煮熟）→拌曲→入缸发酵→压榨→装瓶。下列有关叙述正确的是（）A.一般选择温度较低的天气制曲，避免其腐坏变质B.浸米有利于淀粉水解产生酒精从而提高酒的产量C.入缸发酵时不能将搅拌好的煮熟的小米装满发酵缸D.煮酒完成后为避免杂菌污染要立刻拌曲6、使用现代生物科技手段达到所需目的的物质或过程，与生物体内有差异的是（）A.植物组织培养过程中形成的愈伤组织B.PCR技术扩增基因时使用的DNA聚合酶C.动物细胞培养时细胞正常分裂的代数是有限的D.构建的基因表达载体中需要启动子来驱动转录评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)7、从蓝光到紫外线都能使绿色荧光蛋白（GFP）激发；发出绿色萤光。研究人员将某病毒的外壳蛋白（L1）基因与GFP基因连接，获得了L1-GFP融合基因，并将其插入质粒PO，构建了重组质粒P1。下图为P1部分结构和限制酶酶切位点的示意图，相关叙述正确的是（）

A.将L1-GFP融合基因插入质粒PO时，使用了E1、E2和E4三种限制性核酸内切酶B.可借助基因工程、核移植技术、早期胚胎培养及胚胎移植技术获得转基因的克隆牛C.可采用抗原-抗体杂交技术检测该融合基因是否存在于转基因牛的不同组织细胞中D.若在某转基因牛皮肤细胞中观察到绿色荧光，则说明L1基因在该细胞中完成表达8、下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（）A.培养基一般为固体培养基B.培养结果只能获得大量细胞及生物制品，而不能获得生物体C.需要氧气来满足细胞代谢的需要，不需要二氧化碳D.通过细胞培养可以检测有毒物质，判断某物质的毒性9、下列就“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的有关叙述，正确的是（）A.经高压蒸汽灭菌的培养基所倒平板和接种后培养时的平板均要倒置B.同一稀释度下至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数C.在稀释度足够高时，所形成的单个菌落中所有细胞的遗传信息必定相同D.在相同培养条件下，未接种的培养基表面无菌落生长说明培养基没有被杂菌污染10、下列关于小鼠体外受精及胚胎发育的叙述，错误的是（）A.精子在获能液中培养的目的是使精子获取能量B.注射到囊胚腔中的胚胎干细胞可以参与个体器官的发育C.小鼠在特定光控周期条件下饲养，注射相关激素有促进超数排卵的作用D.分割的胚胎细胞有相同的遗传物质，因此发育成的个体没有形态学差异11、下列有关生物技术安全性和伦理问题的观点，合理的是（）A.对转基因技术，我们应该趋利避害，理性看待B.我国禁止生殖性克隆和治疗性克隆C.我国不发展、不生产、不储存生物武器，并反对其扩散D.对基因检测应该保护个人遗传信息的隐私权12、下列关于现代生物技术的叙述正确的是（）A.从酵母菌细胞中提取到人干扰素说明相应的目的基因完成了在受体细胞中的表达B.在植物细胞与组织培养中，花药不能作为组织培养的材料C.在动物细胞培养中，用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞D.多种显微操作和处理技术使体外受精、胚胎移植和胚胎分割成为可能评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)13、在课题1中，我们学习了稀释涂布平板法。这一方法常用来统计样品中_________________的数目。当样品的稀释度足够高时，____________________。14、1.基因检测引发的伦理问题。

（1）基因身份证：基因身份证指把个人的_____和_____检测出来；记录在磁卡上，而做成的个人基因身份证。

（2）基因检测引发的争论①_____②_____③_____④_____⑤_____⑥_____

。项目。

反对。

支持。

技术方面。

目前人类对①及基因间的相互作用尚缺乏足够的认识；通过基因检测达到②的目的是很困难的；基因检测结果会给受检者带来巨大的③。

通过基因检测可以对遗传性疾病及早采取④；适时进行治疗，达到挽救患者生命的目的。

道德方面。

基因资讯的泄露造成⑤；如个人婚姻困难；人际关系疏远，更明显的是造成一支遗传性失业大军。

对于基因歧视现象；可以通过正确的科学知识传播；⑥教育和立法得以解决。

2.试管婴儿与设计试管婴儿的比较①_____②_____③_____④_____

。项目。

设计试管婴儿。

试管婴儿。

技术手段。

胚胎移植前①（填“需要”或“不需要”）进行遗传学诊断这一环节。

②（填“需要”或‘不需要”）进行遗传学诊断。

实践应用。

用于白血病；贫血病等遗传性疾病的预测。

解决不孕不育问题。

联系。

二者都是③受精；体外进行早期胚胎发育，再进行胚胎移植，从生殖方式上都为④

15、本课题对能分解尿素的细菌进行了初步的筛选。但是，这只是分离纯化菌种的第一步。对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助生物化学的方法。在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的___________将尿素分解成了_____________。氨会使培养基的________________，pH______________。因此，我们可以通过检测培养基______________来判断该化学反应是否发生。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_____________，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变________________。16、_________℃左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵时一般将温度控制在_______________℃。17、动物细胞培养的流程：

取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用______处理分散成______→制成______→转入培养瓶中进行______培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续_____培养。18、基因表达载体的组成及其作用。

一个基因表达载体的组成，除了______________、_______________外，还必须有__________、______________等(如图所示)。

①______________②______________③______________

④______________⑤______________⑥______________

⑦______________评卷人得分四、判断题(共4题，共28分)19、目前，种植的转基因作物中以水稻和小麦最多，其次是转基因棉花和油菜（______）A.正确B.错误20、培养动物细胞一般使用液体培养基，培养基通常需要加入血清等一些天然成分。()A.正确B.错误21、胚胎发育早期，细胞的数量不断增加，胚胎的总体积也增加。()A.正确B.错误22、蛋白质工程是一项难度很大的工程，主要是因为蛋白质发挥功能必须依赖于正确的高级结构，而这种高级结构往往十分复杂。（选择性必修3P95）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共2题，共8分)23、某化工厂为了处理排出污水中的一种有害的；难以降解的有机化合物A；其研究团队用化合物A、磷酸盐镁盐和微量元素等配制了培养基，成功地筛选出能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示，请分析回答问题。

（1）在培养基中加入化合物A的目的是______________，这种培养基属于____________培养基。

（2）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量__________的培养液，接入新的培养液中连续培养，使目的菌的数量____________。

（3）若要研究目的菌的生长规律，可挑取单个菌落进行液体培养，再采用______方法进行计数。请你预测目的菌的种群数量会发生怎样的变化。

（4）将目的菌用于环境保护实践时，还有哪些问题需要解决？_______

（5）有人提出，可以通过改造细菌的基因来获得能够降解化合物A的细菌，请分析这种方法是否可行。_______24、三氯生是一种抑菌物质，具有优异的贮存稳定性，可以替代抗生素用于基因工程中筛选含目的基因的受体细胞。已知fabV（从霍乱弧菌中发现的烯脂酰ACP还原酶）基因可以使大肠杆菌抵抗三氯生。

(1)通过PCR方法扩增fabV基因时，先要根据_____设计两种特异性引物序列，以确保Taq酶从引物的3′端延伸DNA链，至少需要经过_____次扩增才能获得8个双链等长的目的基因。

(2)基因工程的核心步骤是_____；某科研团队将可以受温度调控的基因插入上述选出的重组质粒中，构建了温度调控表达质粒（如图2）。其中C基因在低温下会抑制P2，R基因在高温下会抑制P1，如果将lacZ基因和GFP（绿色荧蛋白）基因插入图2质粒中，使得最后表现为低温下只表达GFP蛋白，而高温下只表达lacZ蛋白。则lacZ基因插在_____之间，GFP基因的插入位置及注意点是_____。

(3)若以大肠杆菌为受体细胞，筛选上述插入了GFP基因的受体细胞的依据是：大肠杆菌能在含_____的培养基上生长，且_____。评卷人得分六、综合题(共4题，共36分)25、利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体的流程如下图所示。请据图回答问题：

（1）通过过程①得到的B淋巴细胞在从小鼠体内分离出之前；需对小鼠____________________。

（2）该过程中区别于原生质体融合的方法是用________________处理。

（3）过程③至少需要通过两次筛选和克隆培养；其中第一次筛选的目的是获得______________。图中X细胞具有________________________________的特点。单克隆抗体的特点是______________________________________________。

（4）经过筛选和克隆化培养得到杂交瘤细胞后，一般采用体内培养和体外培养两种方式进行培养，动物细胞的体外培养对环境条件的要求比较高，如培养液需适宜的温度、________________________等。（答出两项即可）26、近日，中国农科院周文彬团队在水稻中发现一个低氮诱导下表达量显著上升的基因OsDREBIC（简称D基因）。为了探究D基因的作用，科研人员将D基因导入野生型水稻，获得转基因水稻。该实验主要流程如下，其中Hygr为潮霉素抗性基因，Kanr为卡拉霉素抗性基因；请回答。

(1)提取水稻的_____，经过逆转录获得cDNA，以cDNA为模板设计引物扩增D基因。为使目的基因与载体正确连接，在设计上游引物时需添加限制酶_____的识别序列。

(2)切割无菌苗叶片置于添加_____（填植物激素的名称）的培养上，诱导形成愈伤组织。农杆菌转化愈伤组织时，用含_____的选择培养基筛选转化的愈伤组织。将经组织培养获得的D基因过度表达水稻种植；发现产量较野生型水稻高41．3%～68%。

(3)进一步研究发现，D基因表达产物发挥转录因子作用。转录因子是一类与基因上游特定序列专一性结合，激活或者抑制基因表达的蛋白质。已知R基因会提高水稻光合作用中二氧化碳固定酶的含量和活性。为探究D转录因子对R基因的表达的影响，团队人员用荧光素酶（能够催化荧光素氧化发光的酶）报告基因法，将_____基因的启动子与荧光素酶基因融合形成嵌合基因表达载体（P1），与另一个含有D基因的表达载体（P2）一起导入水稻原生质体，得到实验组。加入荧光素后，结果如图所示。

①对照组水稻；原生质体应导入_____。

②科学家继续用N基因（氮素吸收转运相关基因）替代R基因，进行如上实验，荧光对比结果类似。结合以上实验结果推测D基因有助于大幅增产的分子机制：_____。27、接种疫苗是控制新冠肺炎的重要措施之一；新冠病毒疫苗有多种，我国科学家团队研发的腺病毒载体重组新冠病毒疫苗（重组疫苗）是一种基因工程疫苗。如图是构建含新冠病毒S蛋白（抗原）基因的重组腺病毒表达载体的过程，箭头表示NcoⅠ，SphI，NheⅠ，BamHI的酶切位点（四种酶的识别序列详见下表）。回答下列问题：

识别序列和切割位点限制酶NcoISphINheIBamHIC↓CATGGCCATG↓CG↓GATCCG↓CTAGC

(1)新冠病毒是RNA病毒，一般先通过逆转录得到_____，再经PCR技术获取大量S蛋白基因，PCR技术扩增S蛋白基因依据的原理是_____。

(2)根据图表可知，构建重组质粒时，需要选择的限制酶是_____。将重组质粒导入受体细胞后，需要用_____技术检测S蛋白是否成功合成。合成的S蛋白多次注射到实验鼠体内后，在实验鼠的脾脏中分离出浆细胞，利用_____（答出两种）技术，至少经过_____次筛选，就能得到_____的杂交瘤细胞；该细胞经体外培养后就能得到大量的单克隆抗体，用于治疗新冠肺炎。

(3)腺病毒是DNA病毒，对人体危害较小，利用腺病毒制备的重组腺病毒疫苗只需注射一针即可完成接种。数周后接种者体内仍然能检测到重组腺病毒DNA．请由此推测只需注射一针即可起到免疫保护作用的原因是_____。28、5月13日起；全程只需打一针的腺病毒载体重组新冠疫苗已经在上海开始接种了，该疫苗由中国人民解放军军事科学院军事医学研究院生物工程研究所陈薇院士团队研发。该疫苗研发原理是：剔除腺病毒中与复制相关的基因，使其不能增殖，同时插入新冠病毒外壳上的刺突蛋白（S蛋白）基因。重组疫苗进入人体后，S蛋白基因可在体内表达出新冠病毒刺突蛋白。激发机体产生S蛋白抗体和记忆细胞，请回答下列问题：

（1）扩增S蛋白基因要用到PCR技术，PCR是___________________的缩写，反应需在一定的缓冲溶液中进行，除需要模板、原料外，还需要_________________种引物和________________。扩增循环一次依次分为变性、________________和________________三步。

（2）在构建基因表达载体时，在S蛋白基因的上游与下游需要分别具有__________、________。

（3）与S蛋白抗体的合成和运输有关的有膜细胞器是_______________________。

（4）该疫苗与灭活或减毒的疫苗相比会更安全，原因是_____________。参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、B【分析】【详解】

目的基因两侧都有，且质粒也有的限制酶是EcoRⅠ，所以在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，可选EcoRⅠ，A正确；如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoRⅠ酶切点有2个，B错误；为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理，C正确；一个图1所示的质粒分子经EcoRⅠ切割后，产生两个黏性末端，含有2个游离的磷酸基团，D正确。2、B【分析】【分析】

精子的精液进入阴道后；精子缓慢通过子宫，在输卵管内与卵细胞相遇，一个精子与卵细胞结合，形成受精卵。受精卵不断进行细胞分裂，逐渐发育成胚泡，胚泡缓慢移动到子宫，最终植入子宫内膜，这是怀孕。胚泡中细胞继续分裂和分化，逐渐发育成胚胎，并于怀孕后8周左右发育成胎儿--开始呈现人的形态。胎儿生活在子营内半透明液体羊水中，通过胎盘；脐带从母体获取所需营养物质和氧，并排出二氧化碳等废物．一般怀孕到第38周，胎儿发育成熟．成熟胎儿和胎盘从母体阴道排出，这个过程叫分娩，可见，人体胚胎发育的主要场所是子宫。

【详解】

结合分析可知；人体胚胎发育大约需要38周，而在子宫内发育的时间是36周，因此人体胚胎发育的主要场所是子宫。

故选B。3、A【分析】尿素分解菌能够产生脲酶；在脲酶的作用下能够将尿素分解为氨，使pH升高与酚红指示剂反应呈红色。刚果红染液可以与纤维素反应呈红色，纤维素分解菌能够将纤维素分解而出现无色的透明圈。不同细菌在固体培养基上形成的菌落大小；颜色、隆起程度等特征不同，可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型。淀粉与碘反应呈蓝色，淀粉分解菌能够分解淀粉而使菌落周围出现透明圈。

【详解】

A；尿素为唯一氮源的培养集中加入酚红指示剂培养细菌；如果指示剂变红，说明该细菌能分解尿素，A正确；

B；刚果红染液可以与纤维素反应呈红色；纤维素分解菌能够将纤维素分解而出现无色的透明圈，说明该细菌能分解纤维素，B错误；

C；不同细菌在固体培养基上形成的菌落大小、颜色、隆起程度等特征不同；可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型，不是计数的依据，C错误；

D；淀粉与碘反应呈蓝色；淀粉分解菌能够分解淀粉而使菌落周围出现透明圈，D错误。

故选A。4、A【分析】【分析】

甲表示抗原；乙表示杂种细胞，丙表示杂交瘤细胞，丁表示能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。单克隆抗体的两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群，两次抗体检测：专一抗体检验阳性。

【详解】

A；用特定的选择培养基对乙筛选；自身融合的细胞以及未融合的细胞均不能生长，A错误；

B；实验目的是制备抗人体胃癌的单克隆抗体；因此给小鼠注射的甲应是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原，B正确；

C；诱导动物细胞融合可用PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法；C正确；

D；丙为杂交瘤细胞；为了筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞，丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁，D正确。

故选A。5、C【分析】【分析】

酵母菌是兼性厌氧菌；有氧呼吸产生二氧化碳和水，无氧呼吸产生酒精和二氧化碳；酿酒利用的是酵母菌进行无氧呼吸，从而产生酒精。

【详解】

A；制曲主要是为了获得足够多的酵母菌；环境温度稍高，有利于酵母菌的生长和繁殖，A错误；

B；酿酒主要是将葡萄糖不彻底氧化分解形成酒精；小米的主要成分是淀粉，经过浸泡后有利于淀粉分解成葡萄糖，B错误；

C；酵母菌无氧呼吸会产生二氧化碳；为防止发酵液溢出，故入缸发酵时不能将发酵缸装满，C正确；

D；煮酒完成后若立刻拌曲；材料温度过高会使酒曲中的酵母菌死亡，D错误。

故选C。6、B【分析】【分析】

1；转录过程需要启动子来驱动。

2；PCR技术的条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。

3；正常动物细胞的分裂能力是有限的；传代次数也是有限的。

【详解】

A；植物组织培养过程中通过脱分化形成愈伤组织的过程进行有丝分裂；细胞内遗传物质不变，与生物体无差异，A错误；

B；PCR技术扩增基因时使用的DNA聚合酶是热稳定DNA聚合酶；而体内DNA复制所用的酶不能耐高温，这与题意相符，B正确；

C；动物细胞培养时细胞正常分裂的代数是有限的；体内细胞分裂的代数也是有限的，与题意不符，C错误；

D；构建的基因表达载体中需要启动子来驱动转录；体内转录过程也需要启动子来驱动，与题意不符，D错误。

故选B。二、多选题(共6题，共12分)7、B:D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；将L1-GFP融合基因插入质粒P0时；使用了El和E4两种限制性核酸内切酶，A错误；

B；可借助基因工程、核移植技术、早期胚胎培养及胚胎移植技术获得转基因的克隆牛；B正确；

C；可采用DNA分子杂交技术检测该融合基因是否存在于转基因牛的不同组织细胞中；抗原-抗体杂交技术用于检测目的基因是否成功表达，C错误；

D；若在某转基因牛皮肤细胞中观察到绿色荧光；则说明L1基因在该细胞中完成表达，D正确。

故选BD。8、A:C【分析】【分析】

1；动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。

2、动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境；②营养；③温度和pH；④气体环境：95%空气+5%CO2。

【详解】

A；动物细胞一般用液体培养基来培养；需要无菌、无毒的环境、基本营养物质、适宜的温度和pH、一定量的氧气和二氧化碳等，A错误；

B；由于动物细胞分化程度高；虽然细胞核内具有该物种的全套遗传物质，但单个细胞不能形成完整生物体，所以目前还不能通过动物细胞培养获得生物体，B正确；

C；动物细胞培养过程中；需要氧气满足细胞代谢，需要二氧化碳维持培养液的pH，C错误；

D；通过动物细胞培养可以生产生物制品；可以培养皮肤移植的材料，还可以检测有毒物质等，D正确。

故选AC。9、A:B:D【分析】【分析】

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中；需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，计数的关键是经梯度稀释后的倍数要合适，计数时通常选择菌落数在30-300之间的实验组平板进行计数。

【详解】

A；倒置培养的原因是可以防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基中造成污染；经高压蒸汽灭菌的培养基所倒平板和接种后培养时的平板均要倒置，以防止杂菌污染，A正确；

B；为使实验结果更准确；同一稀释度下可以多涂布几个平板，至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数，求平均值，B正确；

C；细菌在分裂生殖中也会产生基因突变；虽然一个菌落是由一个活菌繁殖而来，但是个菌落中所有细胞的遗传信息不一定相同，C错误；

D；证明选择培养基没有被杂菌污染的方法是对培养基进行空白培养；即选取未接种的培养皿与接种样品的培养皿同时培养，在相同培养条件下，未接种的培养基表面无菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染，D正确。

故选ABD。10、A:D【分析】【分析】

1；胚胎分割的特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质；胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。

2；胚胎干细胞的特点：具有胚胎细胞的特性；在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。

【详解】

A；精子在获能液中培养的目的是使精子获能；不是获取能量，A错误；

B；注射到囊胚腔中的胚胎干细胞可以分化形成各种组织；因此可以参与个体器官的发育，B正确；

C；小鼠在特定光控周期条件下饲养；注射相关激素（促性腺激素）有促进超数排卵的作用，C正确；

D；分割的胚胎细胞有相同的遗传物质；由于生物体的性状还受环境因素的影响，因此发育成的个体可能会存在形态学差异，D错误。

故选AD。

【点睛】11、A:C:D【分析】【分析】

1；转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

2；治疗性克隆：指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤、神经或肌肉等）用于治疗性移植。

3；生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的；即用于产生人类个体。

4；中国政府：禁止生殖性克隆人；坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆。

【详解】

A；对转基因技术；我们应该趋利避害，理性看待，A正确；

B；中国政府的态度是禁止生殖性克隆人；坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆，B错误；

C；中国在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器；并反对生物武器及其技术和设备的扩散，C正确；

D；对基因检测应该保护个人遗传信息的隐私权；D正确。

故选ACD。12、A:C:D【分析】【分析】

1；动物细胞培养过程：取动物组织块--剪碎组织--用胰蛋白酶处理分散成单个细胞--制成细胞悬液--转入培养液中（原代培养）--放入二氧化碳培养箱培养--贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞；制成细胞悬液--转入培养液（传代培养）--放入二氧化碳培养箱培养。

2；胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术；如体外受精、胚胎分割、胚胎移植、胚胎干细胞培养等技术。

【详解】

A；干扰素是人体的蛋白质；故从酵母菌细胞中提取到人的干扰素，说明目的基因已经完成了在受体细胞中的表达，A正确；

B；在植物细胞和组织培养中；花药可以进行离体培养成单倍体植株，B错误；

C；使用酶解法可以获得单个细胞；故在动物细胞培养中，用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞，C正确；

D；对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术；使体外受精、胚胎移植和胚胎分割成为可能，D正确。

故选ACD。

【点睛】三、填空题(共6题，共12分)13、略

【解析】①.活菌②.培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌14、略

【分析】【分析】

1.基因检测可以把人体内的致病基因和易感基因检测出来；通过采取一定的预防措施预防遗传病的发生，但同时可能会带来基因歧视等伦理道德方面的问题。

2.设计试管婴儿不同于试管婴儿；试管婴儿是为了解决不孕不育的问题，而设计试管婴儿是为了解决器官移植方面的医疗问题。

【详解】

1.（1）基因身份证是指把每个人的致病基因和易感基因都检测出来；并记录在磁卡上，这样到医院看病时，只要带上这种身份证，医生就可以“对证”治疗。

（2）反对基因检测的人认为：目前人类对基因结构及基因间相互作用尚缺乏足够的认识；要想通过基因检测达到预防疾病的目的是困难的；况且人类的多基因病，既与基因有关，又与环境和生活习惯有关，有某种致病基因的人不见得就会患病。但是，基因检测结果本身就已经足以给受检者带来巨大的心理压力。个人基因资讯的泄露所造成的基因歧视，势必造成奇特的失业大军，即遗传性失业大军。个人基因资讯被暴露之后，还会造成个人婚姻困难；人际关系疏远等严重后果。支持基因检测的人认为：通过基因检测可以对遗传性疾病及早采取预防措施，适时进行治疗，达到挽救患者生命的目的。对于基因歧视现象，可以通过正确的科学知识传播、伦理道德教育和立法得以解决。

2.设计试管婴儿需要因而具有特定的性别或遗传性状；因此胚胎移植前需要进行遗传学诊断这一环节，而试管婴儿是为了解决不孕不育问题，不需要考虑婴儿的性别等问题，不需要进行遗传学诊断。二者的共同点是：两者都是体外受精，并进行体外早期胚胎培养，都要经过胚胎移植，都是有性生殖。

【点睛】

1.基因与疾病的关系：具有致病基因的个体不一定患遗传病；因为生物的性状还受到环境因素的影响；没有致病基因也可能患病，因为基因表达的蛋白质，在加工或修饰过程中出现错误，也会出现症状。

2.明确设计试管婴儿和试管婴儿目的的不同是解答本题的关键之一。【解析】致病基因易感基因基因结构预防疾病心理压力预防措施基因歧视伦理道德需要不需要体外有性生殖15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】脲酶氨碱性增强升高pH的变化酚红指示剂红16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】2018～2517、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】胰蛋白酶单个细胞细胞悬液原代传代18、略

【分析】略【解析】目的基因标记基因启动子终止子启动子上游RNA聚合酶终止子下游转录标记四、判断题(共4题，共28分)19、B【分析】【详解】

目前，种植的转基因作物中以大豆和玉米最多，其次是转基因棉花和油菜，所以错误。20、A【分析】【分析】

液体培养基主要是模拟动物体内环境；动物体细胞是生活在组织液当中，而且细胞要直接从组织液里获得营养和排出废物。所以液体培养基相当于组织液的液体环境。

【详解】

为了保证细胞培养时营养物质和生长因子的供给，培养基中需添加一定量的动物血清等天然成分，可以补充合成培养基中缺乏的物质，故该表述正确。21、B【分析】【详解】

胚胎发育早期；细胞数量不断增加，但胚胎总体积不变或略有缩小。

故错误。22、A【分析】【详解】

蛋白质工程是一项难度很大的工程，主要是因为蛋白质发挥功能必须依赖于正确的高级结构，而这种高级结构往往十分复杂，并且蛋白质的结构具有多样性，这也在一定程度上增加了蛋白质工程的难度，故说法正确。五、实验题(共2题，共8分)23、略

【分析】【分析】

分析题干信息；该实验的目的是筛选出高效降解化合物A的细菌，在以化合物A为唯一碳源的培养基中只有能降解化合物A的微生物才能以化合物A为碳源和氮源生长繁殖，不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，无法生长繁殖。

【详解】

（1）由题意可知；本实验是分离出降解的有机化合物A的菌种，所以培养基中加入化合物A的目的是筛选降解的有机化合物A的菌种，这种培养基属于选择培养基。

（2）由于“目的菌”有降解的有机化合物A的作用；所以培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量低的培养基，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量进一步增加。

（3）若研究“目的菌”的群体生长规律；将单个菌落进行液体培养，再采用稀释涂布平板方法进行计数。培养液中目的菌的种群数量在开始一段时间范围内，由于营养充分；空间充裕，种群数量类似于“J”形增长，随着营养物质的消耗，种群增长速率逐渐下降，最终会达到K值，继续培养，由于营养物质缺乏、有害代谢物积累、pH改变等，种群数量将会下降。

（4）将目的菌用于环境保护实践之前；还要对目的菌进行研究，检测其是否会产生对环境有害的代谢物；当使用大量目的菌时会不会使目的菌成为优势菌群，对其他微生物的生存构成威胁，从而打破微生物菌群的平衡等。

（5）可以利用基因工程的方法；将能降解化合物A的基因导入受体菌中来实现。但在使用之前要检验其安全性。

【点睛】

本题考查了微生物分离与培养的有关知识，要求考生能够识记培养基的成分和培养条件，掌握微生物分离与纯化的方法与步骤，再结合所学知识准确判断。【解析】筛选出能降解化合物A的细菌选择低增多稀释涂布平板培养液中目的菌的种群数量在开始一段时间范围内，由于营养充分、空间充裕，种群数量类似于“J”形增长，随着营养物质的消耗，种群增长速率逐渐下降，最终会达到K值，继续培养，由于营养物质缺乏、有害代谢物积累、pH改变等，种群数量将会下降将目的菌用于环境保护实践之前，还要对目的菌进行研究，检测其是否会产生对环境有害的代谢物；当使用大量目的菌时会不会使目的菌成为优势菌群，对其他微生物的生存构成威胁，从而打破微生物菌群的平衡等可以利用基因工程的方法，将能降解化合物A的基因导入受体菌中来实现。但在使用之前要检验其安全性24、略

【分析】【分析】

1；基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等；

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：

①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因DNA分子杂交技术；

②检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；

③检测目的基因是否翻译成蛋白质抗原一抗体杂交技术。

④个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

2；图1中①-④依次为目的基因的获取、表达载体的构建、目的基因导入受体细胞、目的基因的检测。

（1）

PCR是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，需要Taq酶，但Taq酶不能从头开始合成DNA，前提条件是要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物，因此需要根据目的基因fabV基因的两端按碱基互补配对原则设计引物。至少需要经过4次扩增才能获的8个双链等长的目的基因。

（2）

基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，题干信息显示C基因在低温下会抑制P2，R基因在高温下会抑制P1，说明P2启动子在高温下可以启动转录；P1启动子在低温下可以启动转录。题目显示高温下只表达lacz蛋白，则lacZ基因要插在“高温下不被抑制”的启动子的后面，即P2→T2之间；GFP基因要低温下表达，则插入位置要在P1→T1之间；且不破坏C基因和R基因。

（3）

因为fabV（从霍乱弧菌中发现的烯脂酰ACP还原酶）基因可以使大肠杆菌抵抗三氯生；大肠杆菌能在含三氯生的培养基上生长，说明大肠杆菌插入重组质粒，且依据是低温下有绿色荧光高温下无绿色荧光。

【点睛】

本题考查基因工程相关知识点，要求学生熟练掌握基因工程的原理、步骤及相关的目的，形成知识网络，结合题目要求解决相关问题。【解析】(1)目的基因（fabV基因）两端碱基序列4

(2)基因表达载体的构建P2→T2插在P1→T1之间；且不破坏C基因和R基因。

(3)三氯生低温下有绿色荧光，高温下无绿色荧光六、综合题(共4题，共36分)25、略

【分析】【分析】

图示为单克隆抗体的制备过程；分析图示可知，①过程为小鼠体内发生免疫反应，②为已免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，③为经过筛选；克隆化培养和抗体检测后获得产生专一抗体的杂交瘤细胞（X细胞）。

【详解】

（1）通过过程①得到的B淋巴细胞在从小鼠体内脾脏分离出之前；需对小鼠注射特异性抗原，使其发生免疫反应，产生能分泌特定抗体的B淋巴细胞。

（2）该过程利用了动物细胞融合技术；与植物原生质体融合相比，动物细胞融合还可以利用灭活病毒进行诱导融合。

（3）过程③至少需要通过两次筛选和克隆培养；由于经过诱导融合的细胞中还包含同种细胞融合的细胞和未融合的细胞，因此第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞。经过第二次筛选获得的X细胞为能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，由于其含有双亲的遗传物质，具有既能产生特异性抗体，又能无限增殖的特点。单克隆抗体的特点是特异性强；灵敏度高，并可大量制备。

（4）经过筛选和克隆化培养得到杂交瘤细胞后；一般采用体内培养和体外培养两种方式进行培养，可以从细胞培养液或小鼠腹腔提取大量单克隆抗体。动物细胞的体外培养对环境条件的要求比较高，如培养液需适宜的温度；pH、动物血浆、气体环境、无菌、无毒的环境等。

【点睛】

本题考查单克隆抗体的制备相关知识，要求考生能掌握单克隆抗体的制备原理、相关技术，准确识别图示各个过程，明确单克隆抗体的优点和动物细胞培养的条件，能根据要求作答。【解析】注射特异性抗原灭活病毒杂交瘤细胞既能产生特异性抗体，又能无限增殖特异性强、灵敏度高、并可大量制备pH、动物血浆、气体环境、无菌、无毒的环境（答出两项即可）26、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是Ca2+处理法。

（4）目的基因的检测与鉴定：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因；②检测目的基因是否转录出了mRNA；③检测目的基因是否翻译成蛋白质；④个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

（1）由题干“逆转录成cDNA”可知；故应提取RNA（或mRNA）；限制酶酶切位点需只在启动子与终止子之间，排除NdeI和EcoRI，为使目的基因与载体正确连接，要用两种不同限制酶切割质粒，若用XhoⅠ，另一个无论选BamHI或SmaI，都会将T-DNA上唯一的抗性基因潮霉素抗性基因切去，故应选择BamHI和SmaⅠ。

（2）诱导形成愈伤组织；需要培养基的生长素和细胞分裂素比例适中；农杆菌侵染愈伤组织时，Ti质粒只有T-DNA上的基因会转移到受体细胞中，故选用含潮霉素的选择培养基筛选转化的愈伤组织。

（3）实验目的为探究D转录因子对R基因的表达的影响。将R基因的启动子与荧光素酶基因融合形成嵌合基因表达载体（P1），与另一个含有D基因的表达载体（P2）一起导入水稻原生质体；加入荧光素后，出现荧光，说明D基因表达产物能与R基因的启动子结合，并激活R基因表达。

①对照组要排除D基因表达外其他无关变量对实验结果的干扰，应选用P1+不含有D基因的P2导入原生质体中。

②D基因有助于大幅增产的原因是：D基因通过表达D转录因子，同时激活R基因和N基因的表达，分别提高二氧化碳固定酶的含量和活性、促进氮素吸收转运，从而实现水稻大幅增产。【解析】(1)RNA（或mRNA）B