2025年湘师大新版选修1生物上册阶段测试试卷含答案

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。洗涤浓度。

去污力（%）

洗衣粉品种。

0.2%0.4%0.6%0.8%加酶洗衣粉甲71.578.980.079.9加酶洗衣粉乙69.580.480.680.5A.加酶洗衣粉中的酶制剂是通过基因工程生产出来的，并使用了包埋法固定B.若洗涤的是相同污布，则两种加酶洗衣粉的洗涤效果相似C.相同pH时，加酶洗衣粉洗涤效果比普通洗衣粉好D.所有加酶洗衣粉最适洗涤浓度都为0．4%，浓度过大是不必要的8、分析图内某种洗衣液盒上的资料；理解正确的是（）

A.这种洗衣液较易清除衣服上的蛋清污渍B.在60℃以上的水中，蛋白酶会失去活性C.这种洗衣液对衣服上油渍也能较易清除D.该洗衣液不适合洗涤丝绸面料衣物9、固定化酶是从20世纪60年代迅速发展起来的一种技术。科研人员用海藻酸钠作为包埋剂来固定化酯酶；以研究固定化酶的相关性质和最佳固定条件。酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率，包括酶活性和酶的数量。图甲；乙、丙为部分研究结果。下列有关叙述中，正确的是（）

A.由甲图可知，固定化酯酶比游离酯酶对温度变化适应性更强B.由乙图可知，浓度为3%的海藻酸钠包埋效果最好C.由丙图可知，固定化酯酶一般可重复使用3次，之后若继续使用则酶活力明显下降D.固定化酶的酶活力较高，主要原因是增加了酶与底物的接触面积10、日前微信传言手机屏幕细菌比马桶按钮上的多。两个兴趣小组分别展开如下图的实验过程。下列分析正确的是。

A.通过观察菌落的形态、大小，可知手机屏幕和马桶按钮上都存在多种微生物B.以上两组实验在接种过程中均需要用到酒精灯、接种环等C.两组实验操作均正确且完全一致，但结果截然不同，原因可能是取样部位不同D.该实验对照组可以设置为取相同培养基接种等量无菌水进行培养11、如图是围绕加酶洗衣粉洗涤效果进行的研究结果；下列有关叙述，正确的是（）

A.两类洗衣粉的最佳使用温度都为t1B.温度超过t2后加酶洗衣粉中的酶可能失活C.本研究的自变量分别是温度和洗衣粉是否加酶D.图中的纵坐标可以是污渍的残留量12、下列实验过程中，出现的正常现象有（）A.制作果酒时，发酵瓶中溶液产生较多泡沫B.用果酒制作果醋过程中，液面出现一层褐色菌膜C.制作腐乳过程中，豆腐表面发黏且长有白色菌丝D.用固定化酵母进行酒精发酵，凝胶珠浮在液面评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)13、判断纯化的蛋白质是否达标，需要进行____________的鉴定，使用最多的是__________________14、在测定蛋白质分子质量时，通常使用_________________电泳。15、凝胶色谱法实验使用的缓冲液一般是________________缓冲液。16、本实验用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养，可分成________________和______________两个阶段进行。17、为防止发酵液被污染，发酵瓶要清洗干净，用体积分数为_______________的酒精消毒。18、将豆腐块平放在笼屉内，将笼屉中的温度控制在___________________C。19、测定亚硝酸盐含量的原理：在___________________酸化的条件下，亚硝酸盐与______________________发生重氮化反应后，与____________________结合形成_______________色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，可以大致估算出亚硝酸盐的含量。评卷人得分四、实验题(共3题，共24分)20、除草剂在现代农业生产中有广泛的应用；有机农药苯磺隆是其中之—，但是长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解，但对具体的微生物及其降解机制并不明确，为此，科研人员进行了相关实验：

（1）实验一:分离土壤中降解苯磺隆的菌株。

①微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、___________四类，选择培养所用的培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是___________。

②纯化菌株时，通常使用的划线工具是___________。接种过程需在酒精灯火焰旁进行，其达到的目的是___________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有___________。

（2）实验二：探究苯磺隆的降解机制。具体操作为：将该菌种的培养液过滤离心；取上清液做下图所示实验。

该实验的假设是___________，该实验设计是否合理？为什么？___________。21、青霉素酰化酶；又称为青霉素酰胺酶或青霉素氨基水解酶。该酶主要从大肠埃希菌胞内酶和巨大芽孢杆菌胞外酶中获得，该酶已大规模应用于工业生产头孢类抗生素。某制药厂致力开发新产品，生产头孢类抗生素药物。欲通过人工诱变的方法获得高产青霉素酰化酶的微生物，制备并固定化青霉素酰化酶。根据相关信息回答问题：

（1）在获得髙产青霉素酰化酶的微生物时，从理论上分析选择对______进行诱变处理后，筛选出的髙产菌株更有利于生产，原因是______；而菌体可以继续进行发酵培养。

（2）在研究中发现，髙产菌株会产生多种分子量不同的酶，且均不会被RNA酶降解。在分离纯化青霉素酰化酶时，适合采用______法；之后需要对其纯度进一步鉴定，使用最多的方法是______。

（3）除显微镜直接计数法外，还常用______法进行活菌计数，其原理是______。为防止人员感染和污染环境，实验人员离开实验室时，一定要做的事情是______。22、生物技术与人类生活息息相关；比如利用微生物发酵制作的腐乳味道鲜美，易于消化和吸收，泡菜酸甜香脆，能令人胃口大开：利用酶技术大规模地应用于食品；医药等各个领域，降低成本，提高品质。回答下列问题：

(l)豆腐乳足通过微生物发酵而成，与发酵前相比，发酵后的腐乳营养价值____（填“提高”或“降低”）了，影响豆腐乳风味和品质的因素有___（答出两点即可）。

(2)在测定泡菜亚硝酸盐含量的实验中，通常运用的方法是比色法，其中在配置溶液时氢氧化铝乳液的作用是____。

(3)海藻酸钠是固定化细胞中常用的载体，在固定化酵母细胞的实验中，如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，则说明_____。

(4)酶活性是指_____，目前，还没有一种固定化技术普遍适用于所有酶，原因是___（答出两点即可）。评卷人得分五、非选择题(共4题，共28分)23、豆浆是深受中国百姓喜爱的饮品；但易变质，保质期较短。科研人员对变质豆浆中的腐败细菌进行分离，并研究了乳酸链球菌素（多肽，天然食品防腐剂）对腐败细菌的抑制效果，为生产豆浆时优化保质方法提供依据。主要研究过程如下：

①豆浆变质处理：将2种市售豆浆A；B和自制豆浆在无菌操作台上分别装入已灭菌的250mL三角瓶中；密封、37℃条件下放置7d后，豆浆发生变质。

②腐败细菌的初步分离和计数：取变质的豆浆在无菌条件下接种到细菌培养基上；培养一段时间后，统计各培养基上菌落种类和数量。结果如表：

③比较乳酸链球菌素添加量对腐败细菌的抑制效果：以自制的新鲜豆浆为材料；经相应处理后，在37℃下放置35d后，统计豆浆中腐败细菌数量，结果如图：

（1）日常生活中常用的消毒方法是__________，步骤②中培养基的灭菌方法是__________。

（2）步骤②中适宜采用的接种方法是_____________，固体培养基制备的步骤为________。培养中统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止__________________。

（3）乳酸链球菌素是一种天然食品防腐剂，它是由34个氨基酸组成的多肽。步骤③结果表明，最能耐受乳酸链球菌素的细菌是_______，为有效防止豆浆腐败，在生产中乳酸链球菌素的添加量应控制在________左右。

（4）与用抗生素防腐相比，使用乳酸链球菌素防腐的优点是_________________。24、下表是某种微生物培养基的配方表；请据表回答：

。牛肉膏。

蛋白胨。

NaCl

琼脂。

水。

0.5g

1g

0.5g

2g

200mL

（1）此培养基的营养成分有五类；其中蛋白胨提供的营养物质是________________。

（2）在培养基制备过程中；各种成分溶化后分装前，必须的操作是______________。

（3）微生物培养最基本的要求是无菌操作；下列对培养基；培养皿、接种环、双手、空气、牛奶所采用的灭菌消毒方法的正确顺序依次是______________。（填序号）

①化学消毒②高压蒸汽灭菌③干热灭菌④紫外灭菌⑤灼烧灭菌⑥巴氏消毒法。

（4）巴氏消毒法与煮沸消毒法相比；其优点是___________________。

（5）用稀释涂布平板法统计菌落数目时，最好选择群落在__________的平板进行计数。若统计出在一稀释倍数为105的平板上的平均菌落数为30个；所用稀释液的体积为0.2mL，则每毫升样品中的细菌数为_______________________________________。

（6）纯化菌株时，通常使用的划线工具是_____________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有______________。25、成都七中的生物兴趣小组在寒假以“蛋白质的提取和分离”和“泡菜中亚硝酸盐含量的测定”为课题进行了研究性学习。分析并回答以下问题：

(1)样品处理中红细胞的洗涤要用____反复冲洗；离心。影响红细胞洗涤效果的因素包括___________。

(2)血红蛋白粗分离阶段,透析的目的是_______,若要尽快达到理想的透析效果,可以________(写出一种方法)。

(3)蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率主要取决于__________因素。

(4)装填凝胶色谱柱时,要注意色谱柱内不能有气泡存在,一旦发现气泡必须重装。这是因为__________。

(5)亚硝酸盐的定量测定可以用______法,在制备样品处理液过程中加入氢氧化铝乳液的作用是___________。26、生物柴油是一种可再生的清洁能源；其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如图）。

（1）用于生产生物柴油的植物油不易发挥，宜选用_________、___________方法从油料作物中提取。

（2）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中的添加的植物油为微生物生长提供__________，培养基灭菌采用的最适方法是______________法。

（3）测定培养液中微生物数量，可选用_________法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测____________，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产技术，可利用______________技术使脂肪酶能够重复使用。

（4）若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的_______________技术。参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、C【分析】【分析】

固定化没的反应实例--生产高果糖浆（1）高果糖浆的生产原理。

（2）葡萄糖异构酶的固定：将葡萄糖异构酶固定在颗粒状载体上；装入反应柱中。（3）高果糖浆的生产操作：（如图）从反应柱上端注入葡萄糖溶液，从下端流出果糖溶液，一个反应拄可连续使用半年。

【详解】

高果糖浆的生产需要使用葡萄糖异构酶；A错误；在反应柱内的底端装上分布着许多小孔的筛板，防止固定化酶漏出，B错误；将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入，果糖从反应柱下端流出，C正确；固定化酶成本较低，D错误；故选C。

【点睛】

本题考查固定化技术，要求考生识记固定化酶和固定化细胞的相关知识，能对两者进行比较，再结合所学的知识准确判断各选项。2、C【分析】【分析】

本题考查实验室的微生物培养；解题关键是要掌握硝化细菌的代谢类型。

【详解】

硝化细菌的同化作用类型为自养型，因而所需碳源不是现成的有机物，而应是无机物即二氧化碳；硝化细菌合成有机物时需把氨氧化成亚硝酸所释放的能量，故硝化细菌形成有机物的环境条件是具有NH3和O2；能源则来源于氧化氨气释放的能量，故选C。

【点睛】

硝化细菌属于自养型细菌，原核生物，广泛存在于自然环境中。其存活需要水分及氧气，只有同时满足水分与氧气的供应才能存活。3、B【分析】【分析】

植物组织培养技术利用了植物细胞的全能性；培养过程中除给外植体提供必要的营养物质；植物激素外，应注意避免杂菌感染。

【详解】

A；为获得无菌培养物；同时也为了避免感染杂菌，外植体要消毒处理后才可接种培养，A错误；

B；解剖刀在火焰上灼烧后需冷却才能用于切割外植体；避免高温导致细胞死亡，B正确；

C；接种操作要再接种室或接种台的酒精灯火焰旁边进行；C错误；

D；将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间；等幼苗长壮后再移栽到土壤中，D错误。

故选B。4、D【分析】1；制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：

（1）计算：依据是培养基配方的比例；

（2）称量：牛肉膏比较黏稠；可同称量纸一块称取。牛肉膏和蛋白胨易吸潮，称取时动作要迅速，称后及时盖上瓶盖；

（3）溶化：牛肉膏和称量纸+水加热取出称量纸→加蛋白胨和氯化钠→加琼脂（注意：要不断用玻璃棒搅拌；防止琼脂糊底而导致烧杯破裂）→补加蒸馏水至100mL；

（4）调pH；

（5）灭菌：培养基采用高压蒸汽灭菌；培养皿采用干热灭菌。

（6）倒平板。

2；无菌技术的主要内容：

①对实验操作的空间；操作者的衣着和手；进行清洁和消毒；

②将用于微生物培养的器皿；接种用具和培养基等器具进行灭菌；

③为避免周围环境中微生物的污染；实验操作应在酒精灯火焰附近进行；

④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

【详解】

A；涂布接种时；涂布器应在酒精灯火焰灼烧灭菌冷却后再使用，A错误；

B；摇床应对液体培养基培养微生物时操作；培养皿中的是固体培养基，B错误；

C；菌落肉眼可见；不需要借助于显微镜，C错误；

D；牛肉膏比较黏稠；溶化牛肉膏时，称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，D正确。

故选D。5、B【分析】【分析】

果胶是植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一.它是由半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合物；不溶于水，果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得更容易。果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶和果胶酯酶等。

【详解】

A；尿素固体培养基上只有能利用尿素的微生物可以正常生长；但不能迅速杀死其他微生物，A错误；

B；酵母菌酿酒时；只能利用糯米淀粉分解产生的葡萄糖发酵得到糯米酒，B正确；

C；果胶经过果胶酶和果胶甲酯酶水解后的产物是半乳糖醛酸和甲醇；C错误；

D；制备尿素固体培养基时；在加入尿素溶液后再灭菌，D错误。

故选B。

【点睛】6、A【分析】【分析】

毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。

【详解】

A；霉菌产生的多种酶；尤其是蛋白酶和脂肪酶等可将蛋白质和脂肪分解成小分子物质，A正确；

B；霉菌发酵过程中；保持湿润有利于霉菌的生长与繁殖，B错误；

C；霉菌为需氧菌；但乳酸菌为厌氧菌，乳酸发酵应在无氧条件下进行，C错误；

D；在微生物的作用下；大豆所含的蛋白质、脂肪等大分子物质被分解形成易于被吸收的小分子物质，同时微生物的呼吸要消耗大豆中的营养物质，并形成多种中间产物，所以酱豆中有机物的种类增加，含量减少，营养价值增加，D错误；

故选A。二、多选题(共6题，共12分)7、A:C:D【分析】【分析】

分析题干和表格信息可知；该实验的目的是探究不同酶；不同洗涤浓度对洗涤效果的影响，实验的自变量是酶的种类和浓度，因变量是洗涤效果，洗涤的温度、洗涤时间、洗涤方式、洗涤材料和污物的种类及污染程度等属于无关变量，无关变量应该保持一致且适宜。

【详解】

A；加酶洗衣粉是将通过基因工程生产的酶通过特殊物质层层包裹；与洗衣粉的其他成分隔离，遇水后包裹层很快溶解，释放出来的酶迅速发挥催化作用，并没有运用到固定化酶技术，因为酶未固定在不溶于水的载体上，也不能重复利用，A错误；

B；分析表格中的信息可知；相同浓度条件下，两种洗衣粉的洗涤效果无显著差异，因此若洗涤的是相同污布，两种加酶洗衣粉的洗涤效果相似，B正确；

C；pH会影响酶的活性；pH过高或过低时都会使酶变性失活，因此相同pH时，加酶洗衣粉洗涤效果不一定好于普通洗衣粉，C错误；

D；该表格显示甲、乙两种洗衣粉的最适洗涤浓度相同；都为0.6%左右，但是不能说明所有加酶洗衣粉最适洗涤浓度都相同，D错误。

故选ACD。

【点睛】8、A:B:D【分析】【分析】

加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉；目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶；脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶，其中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽，使污迹从衣物上脱落。脂肪酶、淀粉酶也能分别将大分子的脂肪、淀粉水解为小分子物质，使洗衣粉具有更好的去污能力。

【详解】

A；蛋清污渍的主要成分是蛋白质；该洗衣粉中含有蛋白酶，因此这种洗衣粉较易清除衣服上的蛋清污渍，A正确；

B；高温会使酶变性失活；使用该洗衣粉时不能用60℃以上的水，说明在60℃以上的水中，蛋白酶会失去活性，B正确；

C；根据酶的专一性原理可知；蛋白酶能够水解蛋白质污渍，但是不能水解油渍，C错误；

D；该洗衣粉中含有蛋白酶；能水解蛋白质，因此不能洗涤毛料、丝绸等富含蛋白质的衣料，D正确。

故选ABD。9、A:B:C【分析】【分析】

1；分析甲图；随着温度的升高固定化酯酶和游离酯酶的活力均先升高后下降，游离酯酶的酶活力比固定化酯酶在下降阶段变化明显，说明游离酯酶的酶活力更容易受高温的影响。

2；分析乙图；随着海藻酸钠浓度的增加，固定化酯酶的活力先增加后下降，当海藻酸钠浓度为3%时酶的活力最高。

3；分析丙图；固定化酯酶的活力随使用次数的增多而下降，且在使用3次以后酶活力显著下降。

【详解】

A；据分析可知；游离酯酶的酶活力比固定化酯酶在下降阶段变化明显，说明游离酯酶的酶活力更容易受高温的影响，即固定化酯酶比游离酯酶对温度变化适应性更强，A正确；

B；由乙图可知；浓度为3%的海藻酸钠时，酶活力最强，即包埋效果最好，B正确；

C；由丙图可知；固定化酯酶的活力随使用次数的增多而下降，且在使用3次以后，若继续使用则酶活力显著下降，C正确；

D；固定化酶的优点是易于产物分离；可反复使用，能连续化生产且稳定性好，而不是增加了和底物接触的面积，D错误。

故选ABC。

【点睛】10、A:C:D【分析】【分析】

由图可知；该实验是对照实验，自变量是手机屏幕和马桶按钮，因变量是细菌的数目。实验过程中细菌的计数用到了稀释涂布平板法。

【详解】

A；据图可知；通过观察菌落的形态、大小，可知手机屏幕和马桶按钮上都存在多种微生物，A正确；

B；微生物的接种最常用的是平板划线法和稀释涂布法；只有平板划线法会用到接种环，而根据图示中菌落的分布特点可知，本实验采用的是稀释涂布平板法，需用涂布器，B错误；

C；通过观察菌落的形态、大小可以看出；两组实验操作均正确，但结果截然不同，原因可能是手机的取样部位和马桶的取样部位都不相同，C正确；

D；该实验缺少对照实验；可以设置取相同培养基接种等量无菌水的组进行培养作为对照组，D正确。

故选ACD。11、B:C:D【分析】【分析】

1；加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉；目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶，其中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。

2；影响加酶洗衣粉洗涤效果的因素有水温、水量、水质、洗衣粉的用量；衣物的质料、大小及浸泡时间和洗涤的时间等。在这些因素中，水温是要研究的对象，而其他因素应在实验中保持不变。

3；据图分析：该实验的自变量是温度和洗衣粉的种类；因变量是洗衣粉的去污效果。

【详解】

A、加酶洗衣粉的最佳使用温度都为t1，而普通洗衣粉在t1时的洗涤效果没有t2时好；A错误；

B、由于温度过高，加酶洗衣粉中的酶可能失活，由图可知，温度超过t2后加酶洗衣粉中的酶可能失活；B正确；

C；图中曲线显示本实验的自变量有温度和洗衣粉的种类；即洗衣粉是否加酶，C正确；

D；本实验研究的因变量可能是污渍的残留量或污渍消失所需的时间长短等；D正确。

故选BCD。

【点睛】12、A:C:D【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，进行有氧呼吸大量繁殖；（2）在无氧条件下，产生酒精和二氧化碳。

2；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

3；参与腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【详解】

A；果酒制作时；除了产生酒精，还会产生大量二氧化碳，因此发酵瓶中容易产生较多泡沫，A正确；

B；用果酒制作果醋过程中；液面出现一层白色菌膜，而不是褐色菌膜，B错误；

C；制作腐乳过程中；豆腐表面发黏且长有白色菌丝，C正确；

D；用固定化酵母进行酒精发酵；酒精浓度越来越高，因此凝胶珠逐渐浮上液面，D正确。

故选ACD。

【点睛】三、填空题(共7题，共14分)13、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质纯度SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳14、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】SDS—聚丙烯酰胺15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】磷酸16、略

【解析】①.制备培养基②.纯化大肠杆菌17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】70%18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】15～1819、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】盐酸对氨基苯磺酸N-1-萘基乙二胺盐酸盐玖瑰红四、实验题(共3题，共24分)20、略

【分析】【试题分析】

本题主要考查微生物的筛选与培养及相关实验探究；要求考生识记培养基的成分；种类及作用；掌握分离微生物常用的两种方法及操作过程；掌握探究实验的原则，能结合图中信息知识答题。

（1）①微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源；水、氮源和无机盐四类；选择培养所用的培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源；是因为只有能利用苯磺隆的微生物才能正常生长繁殖。

②纯化菌株时；通常使用的划线工具是接种环；为避免周围环境中微生物的污染，接种过程需在酒精灯火焰旁进行，以达到防止外来微生物的污染的目的；平板划线法要求灼热的接种环冷却后再划线，否则会灼伤菌株甚至死亡。划线时要从上一次划线的末端开始划线，这样接种环上才有菌株。因此造成划线无菌落可能的操作失误有接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始。

（2）图中实验为将该菌种的培养液过滤离心，取上清液，加入蛋白酶处理后，测得其对苯磺隆的降解率，意为假设目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质类酶，若用蛋白酶处理后，可使该酶分解，苯磺隆降解率下降，则假设成立。但由于缺少空白对照，不能比较蛋白酶处理后是否降低苯磺隆降解率，故该实验设计不合理。【解析】氮源和无机盐只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长繁殖接种环防止外来微生物的污染接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质不合理，缺少空白对照21、略

【分析】【分析】

1；“一个菌落”是同种细菌的群体；在生态学中属于一个种群。稀释涂布平板法依据的原理是在稀释度足够高的菌液里，将聚集在一起的菌种分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。在进行菌种纯化时，还可以采用平板划线法进行。

2；分离计数微生物的方法：显微镜直接计数法和稀释涂布平板法。

3；分离纯化蛋白质的方法：凝胶色谱法和凝胶电泳法。

【详解】

（1）在获得髙产青霉素酰化酶的微生物时；从理论上分析选择对巨大芽孢杆菌进行诱变处理后，筛选出的髙产菌株更有利于生产，原因是巨大芽孢杆菌产生的青霉素酰胺酶是胞外酶，对发酵液进行分离提纯即可获得青霉素酰化酶，而菌体可以继续进行发酵培养。

（2）在研究中发现；髙产菌株会产生多种分子量不同的酶，且均不会被RNA酶降解。在分离纯化青霉素酰化酶时，适合采用透析和凝胶色谱法；之后需要对其纯度进一步鉴定，使用最多的方法是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。

（3）除显微镜直接计数法外；还常用稀释涂布平板法进行活菌计数，其原理是在稀释度足够高时，培养基表面的一个菌落来源于（稀释液中的）一个活菌。为防止人员感染和污染环境，实验人员离开实验室时，一定要做的事情是洗手或用酒精对双手消毒等；使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，防止被细菌感染。

【点睛】

本题综合考查了微生物的培养、分离、纯化的方法步骤等内容，同时考查了学生的识记能力和分析问题的能力，运用所学的知识解决实际问题的能力。【解析】巨大芽孢杆菌巨大芽孢杆菌产生的青霉素酰胺酶是胞外酶，对发酵液进行分离提纯即可获得青霉素酰化酶透析和凝胶色谱SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳稀释涂布平板在稀释度足够高时，培养基表面的一个菌落来源于（稀释液中的）一个活菌洗手或用酒精对双手消毒等、使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理22、略

【分析】【分析】

腐乳制作的主要菌种是毛霉；毛酶等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。制作泡菜需要测定亚硝酸盐的含量，方法是比色法，其原理是：在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N﹣1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，将显色反应后的样品与已知浓度的标准液目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。凝胶珠的颜色和形状：如果制作的凝胶珠颜色过浅；呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试。

【详解】

（1）由于毛霉产生的蛋白酶和脂肪酶可以将蛋白质和脂肪水解成氨基酸；多肽、脂肪酸和甘油等小分子有机物；有利于吸收和利用，因此提高了腐乳的营养价值；影响腐乳风味的因素有很多，如盐的用量、发酵时间、发酵温度、豆腐的含水量、香辛料的种类和用量、酒的种类和用量等。

（2）测定泡菜样品中亚硝酸盐的含量时；氢氧化铝乳液的作用是在制作泡菜溶液时，吸附泡菜滤液中的杂质，使泡菜液变得澄清透明。

（3）在固定化酵母细胞的实验中；如果制作的凝胶珠颜色过浅；呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少。

（4）酶活性是指酶催化一定化学反应的能力；由于不同的酶的分子结构不同；理化性质不同；因此还没有一种固定化技术普遍适用于所有酶。

【点睛】

解答本题的关键是掌握腐乳的制作原理、泡菜的制作原理和亚硝酸盐含量的检测、固定化酶和固定化细胞的相关知识点，能够分析影响腐乳营养价值和风味的原因以及固定化细胞过程中的评价机制。【解析】高盐的用量、发酵时间、发酵温度、豆腐的含水量、香辛料的种类和用量、酒的种类和用量等除去滤液中的杂质，使滤液变得无色透明海藻酸钠浓度过低，固定的酵母细胞过少酶催化一定化学反应的能力不同酶的分结构不同；不同酶理化性质不同（或不同酶对理化因素的耐受程度不同）五、非选择题(共4题，共28分)23、略

【分析】【分析】

由题文描述可知：该题综合考查学生对微生物的实验室培养基；微生物的分离和计数等相关知识的识记和理解能力以及对实验结果的分析能力。

【详解】

(1)日常生活中经常用到煮沸消毒法。对培养基进行灭菌；常用高压蒸汽灭菌法。

(2)步骤②需要对“腐败细菌进行的初步分离和计数”；因此适宜采用的接种方法稀释涂布平板法。固体培养基制备的步骤为：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。为了防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的种类和数目，统计菌落的种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定为止。

(3)分析曲线图可知，随着乳酸链球菌素添加量的增大，S1细菌数量的相对值最高，由此表明最能耐受乳酸链球菌素的细菌是S1。当乳酸链球菌素添加量为250mg．kg-1后，细菌数量的相对数值不再随乳酸链球菌素添加量的增大而降低；可见，为有效防止豆浆腐败，在生产中乳酸链球菌素的添加量应控制在250mg．kg-1左右。

(4)乳酸链球菌素是一种由34个氨基酸组成的多肽；食用后会被人体消化，不会改变人体肠道内正常菌群，这正是使用乳酸链球菌素防腐比使用抗生素防腐的优点所在。

【点睛】

解答本题的关键是识记并理解实验室常用的灭菌方法、固体培养基的配制流程、纯化微生物时常用的接种方法等相关知识、形成清晰的知识网络。在此基础上，结合问题情境，从题意和曲线图中提取有效信息进行相关问题的解答。【解析】煮沸消毒法高压蒸汽灭菌法稀释涂布平板法计算→称量→溶化→灭菌→倒平板因培养时间不足而导致遗漏菌落的种类和数目S1250mg．kg-1食用后会被人体消化，不会改变人体肠道内正常菌群24、略

【分析】【分析】

1；培养基的成分包括碳源、氮源、水、无机盐和生长因子．

2；制备牛肉膏蛋白胨培养基的步骤为计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板．

3；消毒和灭菌。

4；微生物常见的接种的方法。

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

（1）微生物培养基的成分包括碳源；氮源、水、无机盐和生长因子。蛋白胨在培养基可以为微生物提供碳源、氮源和生长因子。

（2）配制培养基时为保证无菌；各种成分在溶化后分装前必须进行调节pH，然后再灭菌。

（3）培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌；培养皿常用干热灭菌法灭菌，接种环常用灼烧灭菌，双手应用化学药剂消毒，空气可用紫外线杀菌，牛奶常用巴氏消毒法消毒，故对培养基；培养皿、接种环、双手、空气、牛奶所采用的灭菌消毒方法的正确顺序依次是②③⑤①④⑥。

（4）与煮沸消毒法相比；巴氏消毒法在较低温度下，既可以杀死病菌，又能保持物品中营养物质损失较少和风味不变。

（5）使用稀释涂布平板法统计活菌数目时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。若统计出在一稀释倍数为105的平板上的平均菌落数为30个，所用稀释液的体积为0.2mL，则每毫升样品中的细菌数为30÷0.2×105=1.5×107个。

（6）纯化菌株时，通常使用的划线工具是接种环。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长