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文档简介
722分光光度计的使用生物化学基本实验技能训练实验目的掌握722分光光度计的构造和原理使用方法掌握722分光光度计使用方法问题:如何测定血清中某一种物质的含量?如,葡萄糖,清蛋白,丙氨酸氨基转移酶,尿素…物质特性物质对光的吸收是选择性的,利用被测物质对某波长的光的吸收来了解物质的特性,是光谱法的基础。I0入射光I透过光比色分析法当一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时,溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比。原理原理I0入射光I透过光透光率(T)=I/I0吸光值(A)=-lgT=-lgI/I0Lamber-Beer定律,是比色分析的基础。定律溶液吸光度溶液吸光系数溶液浓度溶液层厚度A=K✖C✖LI0入射光I透过光吸光度与浓度的关系A=
LcA0.00光源检测器AA0.22光源检测器0.42光源检测器LL推导A标=KC标L,A测=KC测LA标/
C标=KL,A测/C测=KLA标/
C标=
A测/C测722分光光度计结构分光光度计的基本部件样品盖样品架透射比吸光度浓度因子0.543按键MODE功能0%100%波长指示窗口拉杆500520显示屏波长旋钮比色皿(1)接通电源,预热10min。(2)调节波长旋钮至所需波长。(3)比色杯依次放入检测室比色杯架内,空白液对准光路。(4)检查722型分光光度计的旋钮,使选择钮指向透光度“T”,按“0”键,盖上检测室盖(光门打开),按“100”键,重复数次,直至达到稳定。(5)吸光度A的测量:调整选择钮显示“A”,读数显示为“.000”。如果不是此值,调消光零旋钮。再移动拉杆,使标准液和待测液分别置于光路,读取“A”值。(6)打开检测室盖,取出比色杯,倾去比色液,用水冲洗干净,倒置于铺有滤纸的平皿中。仪器操作选择波长拉比色杆时动作要轻。2.手持比色杯的毛面(粗糙面),不可用手或滤纸等摩擦比色杯的透光面;比色杯先用蒸馏水冲洗后,再用比色液润洗才能装比色液。盛装比色液时,约达比色杯2/3体积,不宜过多或过少;若不慎使溶液流至比色杯外,须用棉花或擦镜纸吸干,才能放入比色架。比色杯用后应立即用自来水冲洗干净。3.测定溶液浓度的吸光度值在0.1~0.8之间最符合光吸收定律,线性好、读数误差较小。注意事项
实验报告题目(日期)摘要:目
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