TNAIA 0345-2024 鸡蛋中地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利砜、妥曲珠利亚砜的测定 高效液相色谱-串联质谱法

ICS67.050CCSA032T/NAIA团 体 标 准T/NAIA0345—2024鸡蛋中地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利砜、妥曲珠利亚砜的测定 高效液相色谱-串联质谱法DeterminationofdiclazurilandtoltrazurilponazurilToltrazurilsulfoxideineggsHPLC-MS/MS2024-12-03发布 2024-12-15实施宁夏化学分析测试协会 发布II前 言GB/T1.1-20201编写。本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。（监管重点实验室（枸杞及葡萄酒质量安全中心、宁夏化学分析测试协会。本文件主要起草人：马雪梅、汤丽华、朱燕燕、王鹏、孙少忆、吕晓东、王芳焕、王紫昕、王泽岚、龚慧、谢芳、李强、张小飞。PAGEPAGE1鸡蛋中地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利砜、妥曲珠利亚砜的测定高效液相色谱-串联质谱法范围-谱检测方法。本文件适用于鸡蛋中地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利砜、妥曲珠利亚砜的测定和确证。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法SN/T2318-2009高效液相色谱-质谱/质谱法术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。原理试样经乙酸乙酯提取，反相色谱柱分离，以保留时间定性，供高效液相色谱-串联质谱仪测定和确证，内标法定量。试剂和材料本方法所用的试剂，除另有规定外，均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。试剂乙酸乙酯：色谱纯。乙腈：色谱纯。甲醇：色谱纯。50%50mL100mL，混合均匀。氯化钠：优级纯标准品标准品：地克珠利（Diclazuril，CAS101831-37-2）、妥曲珠利（Toltrazuril，CAS号69004-03-1）、妥曲珠利砜（PonazurilCAS69004-04-2）、妥曲珠利亚砜（ToltrazurilSulfoxide，CAS69004-15-5）、妥曲珠利-D3（Toltrazuril-D3，CAS1353867-75-0）。T/NAIA0345—2024T/NAIA0345—2024PAGEPAGE2标准储备液（100.0μg/mL）：分别准确移取地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利砜、妥曲珠利亚10mg（100.0μg/mL冷冻避光贮存。1.0mL10mL10.0μg/mL妥曲珠利-D3储备液：准确移取妥曲珠利-D3标准物质适量，用甲醇溶解并定容,配制成10.0μg/mL的妥曲珠利-D3内标储备溶液，于冷冻避光贮存。妥曲珠利-D3工作液：准确移取妥曲珠利-D31mL，用甲醇溶解并定容,配制成1.0μg/mL的妥曲珠利-D3内标工作液，于冷冻避光贮存。仪器和设备液相色谱-串联质谱仪：配备电喷雾离子源。0.1mg0.01g。涡旋混合器。10000r/min。氮吹仪。分析步骤试样的制备0.5kg鸡蛋，去壳，匀浆，均分成两份，分别装入洁净容器中，密封，并标明标记，于-18℃以下冷冻避光保存。试样的提取5g（0.01g）样品准确加入适量妥曲珠利-D310mL2g5min后，49000rpm/min5min,5mLN2流下缓慢吹1mL50%0.22μm滤膜，供超高效液相色谱串联质谱仪测定。仪器参考条件液相色谱参考条件色谱柱:C18，2.1mm×100mm1.8μm或性能相当。柱温：40℃。流动相：A：水，B1。流速：0.3mL/min。进样量：10μL。表1 流动相及梯度洗脱条件时间/min流速/（mL/min）流动相A/%流动相B/%0.000.360404.000.320805.000.301006.000.301006.100.360408.000.36040质谱参考条件离子源：电喷雾离子源（ESI）。扫描方式：负离子扫描。检测方式：多反应监测（MRM）。。7L/min。雾化器压力：30psi定性离子对、定量离子对、碰撞能量等参数参见附录A。基质匹配标准工作曲线7.1同体积混合标准溶液，加入相同体积的妥曲珠利-D31.0mL1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0、100.0、200.0ng/mL线。定性测定许偏差之内（3），则可判定样品中存在对应的被测物。表2 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差离子丰度比%＞50＞20~50＞10~20≤10允许相对偏差%±20±25±30±50定量测定7.2.17.2.2B内标法定量。空白试验除不加试样外，均按上述步骤进行。平行试验按以上步骤对同一试样进行平行实验测定。分析结果的表述试样中地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利砜、妥曲珠利亚砜的含量按式（1）进行计算：X cV f

式中：

m 1000

（1）X──试样中各种化合物含量，单位为微克每千克（μg/kg）；c──由标准曲线计算出的试样溶液浓度，单位为纳克每毫升V──试样的最后定容体积，单位为毫升（mL）；m──试样质量，单位为克f──试样的稀释倍数。注：测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留三位有效数字。精密度在重复性测定条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%，在3.0μg/kg~40μg/kg范围内，加标回收率范围60~120%。其他当称样量为5.0g,定容体积为1.0mL时，地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利砜、妥曲珠利亚砜的定量限为3.0μg/kg，检出限为1.0μg/kg。附录A(资料性)地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利砜、妥曲珠利亚砜的质谱参数被测物名称母离子(m/z)子离子(m/z)碎裂电压/V碰撞电压/被测物名称母离子(m/z)子离子(m/z)碎裂电压/V碰撞电压/V地克珠利40733613520405334*13520妥曲珠利4244241200425425*1200妥曲珠利-D34284281200427427*1200妥曲珠利砜457457*13004564561300妥曲珠利亚砜44038313016371*13018注：对于不同质谱仪器，仪器参数可