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文档简介

专题二课题1微生物的实验室培养一一、选择题(共24小题,每小题2分,共48分)1.微生物在哪种培养基上生长会形成肉眼可见的菌落()A.液体培养基B.固体培养基C.选择培养基D.鉴别培养基2.下表是某同学培养微生物时配制的培养基,关于此培养基的说法中,错误的是()A.此培养基可用来培养自养型微生物B.此表中的营养成分共有三类,即水、无机盐、氮源C.表中各成分的含量按照所培养的微生物的营养需要来确定D.若除去①,此培养基可用于培养大肠杆菌3.同学在①②③三种条件下培养大肠杆菌,这三种条件是:①以葡萄糖为碳源的培养基,不断补充培养基,及时去除代谢产物②以葡萄糖为碳源的培养基,不补充培养基,不去除代谢产物③以葡萄糖和乳糖为碳源的培养基,不补充培养基,不去除代谢产物根据培养结果绘制的一段时间内菌体数的对数随时间变化的趋势图如下:假设三种培养基中初始总糖量相等,则①②③三种条件依次对应的趋势图是()A.甲、乙、丙B.乙、丙、甲C.丙、甲、乙D.丙、乙、甲4.无菌技术包括以下几个方面的叙述,其中正确的是()A.紫外线照射前,适量喷洒石碳酸等消毒液,可以加强消毒效果B.高压灭菌加热结束时,打开放气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖C.为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D.在微生物接种的实验中,用95%酒精对实验者的双手和超净工作台进行消毒5.在三个培养皿中各加入等量但不同种的大肠杆菌培养基,在培养皿中培养36小时后,统计大肠杆菌的菌落数(如表)。下列表述错误的是()A.对照培养皿Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ,表明琼脂是培养基中必需的营养成分B.对照培养皿Ⅰ和Ⅱ,说明维生素是大肠杆菌需要的生长因子C.对照培养皿Ⅱ和Ⅲ,说明糖类是大肠杆菌需要的碳源D.本实验使用的是固体培养基6.下列有关培养基的叙述正确的是()A.培养基中必须含有琼脂B.不同培养基的具体配方一般不同C.固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D.微生物在液体培养基上生长时也可形成菌落7.将配制好的培养基进行灭菌,应用()A.灼烧灭菌B.高压蒸汽灭菌C.干热灭菌D.煮沸灭菌8.含C、H、O、N的大分子化合物可以作为()A.异养微生物的氮源、能源B.异养微生物的碳源、氮源C.自养微生物的氮源、能源、碳源D.异养微生物的氮源、能源、碳源9.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长;在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌;在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出()①大肠杆菌②霉菌③放线菌④固氮细菌A.④②③B.①②③C.①③④D.③④①10.在一个“淀粉-琼脂”培养基的5个圆点位置,分别用不同方法处理,将此实验装置放在37℃恒温箱中,保温处理24h后,将碘液滴在培养基的5个圆点上,其实验结果记录于下表:④和⑤所发生的颜色反应,以及③接种的面包霉的分泌物分别是()A.棕黄色、棕黄色、淀粉酶B.蓝黑色、棕黄色、麦芽糖酶C.棕黄色、蓝黑色、淀粉酶D.棕黄色、蓝黑色、麦芽糖酶11.防止杂菌入侵,获得纯净的培养物,是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是()A.实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒B.接种环、接种针等金属用具,直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌C.在实验室中,切不可吃东西、喝水,离开实验室时一定要洗手,以防止被微生物感染D.使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理,以免污染环境12.金黄色葡萄球菌有很强的致病力,常引起骨髓炎等,还可能引起食物中毒,下述实验结束后的做法错误的是()A.对接种环进行灼烧处理B.带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉C.带菌培养基必须经加热后才能倒掉D.接种后双手必须用肥皂洗净,再用75%的酒精棉球擦拭13.下列常用的无菌操作中,错误的是()A.无菌操作不要求杀死培养基中的一切细菌B.用酒精擦拭双手的方法是对操作者进行消毒C.实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行D.玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭14.获得纯净培养物的关键是()A.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌B.接种纯种细菌C.适宜环境条件下培养D.防止外来微生物的入侵15.在微生物培养过程中,需要对培养基等进行灭菌,其标准是()A.杀死所有的病原微生物B.杀死所有的微生物C.杀死所有微生物的细胞、芽孢和孢子D.使病原菌不生长16.含氨苄青霉素的LB培养基在基因工程中有很重要的应用。该培养基能杀死一切不抗氨苄青霉素的细菌,只有对氨苄青霉素具有抗性的细菌才能正常生长繁殖。由其作用可知该培养基是一种()A.固体培养基B.合成培养基C.天然培养基D.选择培养基17.关于微生物的营养,说法正确的是()A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源B.凡是碳源都能提供能量C.除水以外的无机物仅提供无机盐D.无机氮源也可能提供能量18.在分解尿素菌的分离和鉴定中,对先后用到的两种培养基,叙述正确的是()A.加入酚红指示剂作为选择培养基,再加入唯一碳源作为鉴别培养基B.加入唯一氮源作为鉴别培养基,再加入酚红指示剂作为选择培养基C.加入唯一氮源作为选择培养基,再加入酚红指示剂作为鉴别培养基D.加入酚红指示剂作为选择培养基,再加入唯一碳源作为鉴别培养基19.有关培养基配制原则表述正确的是()A.任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水及生长因子B.碳源和氮源必须具有一定比例,碳元素的含量最多,其次为氮元素C.微生物的生长除受营养因素影响外,还受到温度、pH、氧、渗透压等的影响D.营养物质的浓度越高越好20.在培养基的配制过程中,具有如下步骤,其正确顺序为()①溶化②调pH③加棉塞④包扎⑤分装⑥称量A.①②⑥⑤③④B.⑥①②⑤③④C.⑥①②⑤④③D.①②⑤④⑥③21.下表是关于几种微生物能利用的碳源物质和氮源物质的描述,描述准确的微生物有几种()A.1种B.2种C.3种D.4种22.某混合样品中微生物R含量极少,要得到大量的R,比较理想的方法是采用()A.天然培养基B.稀释涂布平板法C.利用适合R生长但同时抑制或阻止其他种类微生物生长的选择培养基D.用显微镜直接观察、寻找,再培养23.下图表为鉴别纤维素分解菌的培养基配方,关于其成分的叙述,错误的是()A.该培养基为固体培养基B.CMC-Na提供氮源C.酵母膏和土豆汁中含有生长因子D.蒸馏水使用前无需灭菌24.高温灭菌的原理是()A.每种微生物生长的最适温度是一定的B.微生物对高温环境不适应C.高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸,影响其生命活动D.高温降低了环境中氧的浓度二、非选择题(共3小题,共52分)25.炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病。炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列,菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者,可根据噬菌体的宿主专一性,通过实验确诊。(1)细菌培养:采集疑似患者的样本,分离培养,获得可疑菌落。(2)细菌鉴定:实验流程如下图所示:①对配制的液体培养基等需采取________________方法灭菌;实验所用液体培养基的碳源为________(填“无机碳源”或“有机碳源”)。②挑选可疑菌落制片后,用____________观察,可看到呈竹节状排列的杆菌。③接种可疑菌后,35℃培养24h,液体培养基变浑浊,原因是_________________。对照组试管中应加入__________________,与实验组同时培养6h后,若实验组液体培养基的浑浊度比对照组________(填“高”或“低”),则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染;反之则排除。④对排除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相应抗体,与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外,还有______________________。26.为了检测饮用水中是否含有某种微生物,配制的培养基的配方如下,请分析回答下列问题(注:伊红美蓝是由两种染色剂组成的细胞染料):(1)该培养基所含碳源有____________________________________________________,其功能是__________________________________。(2)该培养基所含氮源有__________,其功能是________________________________。(3)该培养基除含碳源、氮源外,还有微生物需要的营养物质是________________。(4)该细菌在同化作用上的代谢类型是__________型。(5)该培养基可用来培养________(填“霉菌”或“细菌”)。27.根据微生物的分离和培养的知识,回答下列问题:(1)分离纯化大肠杆菌的关键步骤是__________;该步骤常用的方法有两种:__________和______________,其中一种方法是将菌液进行一系列的______________,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。(2)在微生物的实验室培养过程中,获得纯净培养物的关键是__________________,因此需要对培养基和培养皿进行__________处理,操作者的双手需要进行清洁和____________。(3)分离分解尿素的细菌的培养基中要以尿素为唯一________(填“碳源”或“氮源”)。

答案解析1.B【解析】微生物在固体培养基表面生长会形成肉眼可见的菌落。2.D【解析】由表格可知,该培养基不含有机物,且无碳源,因此可培养自养型微生物,大肠杆菌为异养型,除去①之后,培养基中缺少碳源和氮源,大肠杆菌无法生长。3.C【解析】①以葡萄糖为碳源的培养基,不断补充培养基,及时去除代谢产物,该条件可以认为是一种理想条件,菌体的种群数量将呈“J”型曲线增长,对应曲线丙;②以葡萄糖为碳源的培养基,不补充培养基,不去除代谢产物,会导致培养基中营养物质越来越少,同时代谢废物的积累会导致菌体种群数量上升到一定程度后可能会有减少的趋势,对应图象甲;③在用葡萄糖和乳糖作碳源的培养基上培养大肠杆菌,开始时,大肠杆菌只利用葡萄糖而不利用乳糖,只有当葡萄糖被消耗完毕后,大肠杆菌才开始利用乳糖,所以在③条件下,大肠杆菌的数量开始时会增多,当葡萄糖被消耗完毕后,大肠杆菌由于没有碳源而使得数量暂不变化,当其开始利用乳糖时,其数量又开始增多,当乳糖消耗完毕后,大肠杆菌的数量将开始减少,对应图乙。4.A【解析】用紫外线照射30min,可以杀死物体表面或空气中的微生物,在照射前,适量喷洒石碳酸等消毒液,可以加强消毒效果,A正确;高压灭菌加热结束时,待压力表指针回到零后,才能开启锅盖,不能打开放气阀使压力表指针回到零,B错误;为了防止污染,接种环经火焰灭菌、冷却后才可以快速挑取菌落,C错误;在微生物接种的实验中,一般用75%酒精对实验者的双手进行消毒,用紫外线照射30min对超净工作台进行消毒,D错误。5.A【解析】培养基的基本成分包括水、无机盐、碳源、氮源等,琼脂不是培养基中必需的营养成分,A项错误;Ⅰ和Ⅱ对照,说明维生素是大肠杆菌需要的生长因子,B项正确;Ⅱ和Ⅲ对照,说明大肠杆菌的生长需要糖类,C项正确;由于三个培养皿中都加入了凝固剂——琼脂,因此都是固体培养基,D项正确。6.B【解析】固体培养基往往含有凝固剂琼脂,液体培养基不含有琼脂,A错误;不同的微生物营养需求不同,培养基的具体配方也一般不同,B正确;固体培养基中往往含有凝固剂,液体培养基不含有凝固剂,固体培养基中加入少量水得不到液体培养基,C错误;微生物在固体培养基表面生长才能够形成菌落,D错误。7.B【解析】为保证各种成分的比例不受影响,配制好的培养基应用高压蒸汽灭菌。8.D【解析】根据题干信息可知该大分子化合物含有C、H、O、N元素,可能是蛋白质类的物质,可以为异养微生物提供碳源、氮源和能源,A、B错误,D正确;自养微生物不需要有机碳源,C错误。9.A【解析】固氮细菌不需要专门添加氮源,在缺乏氮源的培养基上可从多种细菌中分离得到自生固氮细菌④;在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长,从而可以分离出霉菌②;10%酚可以抑制细菌和霉菌,但放线菌③可生存,故选A。10.C【解析】④是在“淀粉-琼脂”做成的培养基上加新鲜的唾液,新鲜的唾液中含有唾液淀粉酶,能催化淀粉水解,因此将此实验装置放在37℃恒温箱中,保温处理24h后,加上碘液后不出现蓝黑色而出现棕黄色;⑤是在“淀粉-琼脂”做成的培养基上加蔗糖酶溶液,蔗糖酶催化蔗糖水解,但不能催化淀粉水解,因此将此实验装置放在37℃恒温箱中,保温处理24h后,加上碘液后出现蓝黑色;③是在“淀粉-琼脂”做成的培养基上接种面包霉,将此实验装置放在37℃恒温箱中,保温处理24h后,加碘液出现棕黄色,说明淀粉被水解,推知面包霉的分泌物是淀粉酶。C正确。11.B【解析】对接种环等金属用具进行灼烧灭菌,应放在酒精灯火焰的充分燃烧层即外焰处灼烧灭菌。12.C【解析】金黄色葡萄球菌有很强的致病力,所以在操作时一定要做到安全防范,接种后双手用肥皂洗净,再用75%的酒精棉球擦拭,以起到杀菌的作用;对接种环进行灼烧也可以杀灭细菌,防止污染环境;高压蒸汽灭菌也可杀死培养基中的金黄色葡萄球菌;如果只对带菌培养基进行加热,杀不尽其中的致病菌,因为此菌的耐高温能力很强,会污染环境。13.D【解析】本题考查微生物培养过程中的无菌操作,应从无菌操作的概念和基本方法入手解答,对于不同的对象要用不同的消毒或灭菌方法。无菌技术是用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染,而不是杀死培养基中的一切细菌。对操作者应用较温和的方法进行消毒。实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行,防止瓶口的微生物污染培养基。对无菌操作用到的玻璃器皿要用干热灭菌的方法彻底消灭其中的微生物,用酒精擦拭不能达到目的。14.D【解析】获得纯净培养物的关键是防止外来微生物入侵,即在各步操作中都应做到无菌操作。15.C【解析】灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程,常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌.16.D【解析】该培养基由于含有氨苄青霉素,能杀死一切不抗氨苄青霉素的细菌。只有对氨苄青霉素具有抗性的细菌才能正常生长繁殖。因此氨苄青霉素起到了选择作用。D正确17.D【解析】此题考查我们对微生物的营养和能源的理解。对一些微生物来说,含C、H、O、N的化合物既是碳源,又是氮源。CO2是光能自养细菌的碳源,但不能提供能量。CO2和N2是无机物,也是微生物的碳源和氮源。硝化细菌所利用的氮源是无机氮源氨,同时氨也为硝化细菌提供用以化能合成作用的能源。18.C【解析】在分解尿素菌的分离和鉴定中,应该先加入尿素作为分解尿素菌的唯一氮源,让其合成脲酶,分解尿素,产生氨,氨呈碱性;然后加入酚红指示剂培养细菌,呈红色。19.C【解析】培养基中碳源和氮源必须具有一定比例,但含量最多的元素不应是碳,应是氧。营养物质的浓度并不是越多越好,浓度过高会导致培养物细胞失水。20.B【解析】上述步骤中,培养基的配制顺序为称量→溶化→调pH→分装→加棉塞→包扎。21.A【解析】硝化细菌为化能自养型,以CO2为碳源,以NH3为氮源。圆褐固氮菌为异养固氮菌,碳源为含碳有机物,氮源为分子态氮。甲烷氧化菌对碳源要求严格,只能是甲烷或甲醇。乳酸菌不能固氮,其氮源不可能是N2。22.C【解析】天然培养基,营养丰富,多种生物均可大量繁殖,主要用于工业生产,A错误;稀释涂布平板法在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个菌落,是分离菌种的方法,但该混合样品中R极少,应该先富集培养再分离,B错误;利用适合R生长但同时抑制或阻止其他种类微生物生长的选择培养基,R微生物可以先富集,再分离就可以得到大量的R,C正确;不宜用显微观察法再培养,D错误。23.B【解析】培养基成分中含有凝固剂(琼脂),说明该培养基是固体培养基;A正确。CMC-Na提供碳源;B错误。酵母膏和土豆汁中含有生长因子;C正确。蒸馏水使用前无需灭菌。D正确。培养基的成分24.C【解析】相对于动植物来说,微生物的耐高温能力是很强的。灭菌即杀死各种微生物及其他生命形态(如芽孢),所以要采用更高温度以破坏微生物体内蛋白质、核酸的分

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