2025版高考生物二轮复习8生物技术实践讲义

PAGE38-生物技术实践考纲考频(全国卷)1.微生物的分别和培育5年9考2.培育基对微生物的选择作用5年6考3.某种微生物数量的测定5年0考4.利用微生物进行发酵来生产特定的产物5年8考5.运用发酵加工食品的基本方法5年3考6.微生物在其他方面的应用5年0考7.从生物材料中提取某些特定的成分5年3考8.酶活力测定的一般原理和方法5年0考9.酶在食品制造和洗涤等方面的应用5年0考10.制备和应用固相化酶5年0考基础自查明晰考位[纵引横连建网络]提示：特设长句作答题，训练文字表达实力

[边角扫描全面清]1．微生物利用的相关推断(1)某探讨小组从有机废水中分别微生物用于废水处理，接种后的培育皿须放在光照培育箱中培育(×)(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采纳的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法(√)(3)在琼脂固体培育基上长出的单个菌落含有多种细菌(×)(4)检测土壤中细菌总数试验操作中，确定比照组无菌后，选择菌落数在300以上的试验组平板进行计数(×)(5)培育微生物的培育基分装到培育皿后进行灭菌(×)2．传统发酵技术的相关推断(1)醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸(×)(2)酵母菌在无氧条件下利用葡萄汁产生酒精(√)(3)泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸发酵(√)(4)腐乳制作利用了毛霉等微生物产生的蛋白酶和脂肪酶(√)(5)在制作腐乳时，将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需加大用盐量(×)3．植物有效成分提取的相关推断(1)薄荷油是挥发性物质，提取薄荷油时应选用干薄荷叶作原料，可采纳水蒸气蒸馏法提取(×)(2)用萃取法提取薄荷油时，采纳的溶剂是酒精，原理是薄荷油易溶于有机溶剂酒精中(×)(3)用萃取法提取胡萝卜素的主要步骤是：干燥、粉碎、萃取、浓缩、过滤(×)(4)在胡萝卜颗粒的加热干燥过程中，温度过高和时间过长会导致胡萝卜素分解(√)(5)提取的胡萝卜素可通过纸层析法进行鉴定，在鉴定过程中不须要比照(×)考点梳理整合突破整合考点22微生物的培育与应用及传统发酵技术的应用[考点突破固考基]1．图解识记微生物的培育、分别与计数(填图)2．熟记微生物分别与计数的两个实例(填空)(1)土壤中分解尿素的细菌的分别与计数①筛选菌株：利用选择培育基筛选菌株。②测定微生物数量的常用方法：活菌计数法和显微镜干脆计数。③过程：土壤取样→样品稀释→微生物的培育与视察。④鉴定方法：含酚红指示剂的以尿素为唯一氮源的培育基→细菌→指示剂变红，则该菌能分解尿素。(2)分解纤维素的微生物的分别①试验原理：即：可通过是否产生透亮圈来筛选纤维素分解菌。②流程：土壤取样→选择培育→梯度稀释→涂布平板→选择菌落。3．理清微生物培育的“5”种基本技术(1)培育基的制备：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。(2)无菌技术：主要包括消毒和灭菌。(3)倒平板操作：待培育基冷却至50_℃左右时，在酒精灯火焰旁边倒平板。(4)平板划线操作：平板划线法是通过接种环在琼脂固体培育基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培育基的表面。留意划线的方法(如图)。(5)稀释涂布平板法：先将菌液进行一系列的梯度稀释然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培育基的表面，进行培育。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培育基表面形成单个的菌落。4．把握“2”种微生物的分别与计数方法(1)利用选择培育基分别①筛选尿素分解菌：用以尿素为唯一氮源的培育基。②筛选纤维素分解菌：用富含纤维素、添加刚果红的培育基培育。(2)微生物计数的“2”大方法①稀释涂布平板法；②显微计数法。5．理清“4”种传统发酵食品的技术项目内容果酒和果醋的制作腐乳制作制作泡菜并检测亚硝酸盐含量菌种果酒：酵母菌果醋：醋酸菌毛霉乳酸菌原理(1)酵母菌在无氧条件下将葡萄糖氧化成乙醇(2)醋酸菌在有氧条件下将乙醇氧化为醋酸毛霉将蛋白质、脂肪分解成小分子有机物乳酸菌将糖转化为乳酸原料选择簇新葡萄(或苹果)豆腐大白菜、花椰菜等簇新干净的蔬菜试验流程测亚硝酸盐含量：配制溶液→制备标准显色液→制备样品处理液→比色[题组集训提考能]题组一高考分类练明考向类型1翻阅教材，原味品高考1．[2024·全国卷Ⅰ，37]已知一种有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解，会造成环境污染。某小组用三种培育基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。Ⅰ号培育基：在牛肉膏蛋白胨培育基中加入X(5g/L)。Ⅱ号培育基：氯化钠(5g/L)，硝酸铵(3g/L)，其他无机盐(适量)，X(15g/L)。Ⅲ号培育基：氯化钠(5g/L)，硝酸铵(3g/L)，其他无机盐(适量)，X(45g/L)。回答下列问题。(1)在Ⅰ号培育基中，为微生物供应氮源的是____________________________。Ⅱ、Ⅲ号培育基中为微生物供应碳源的有机物是____________________。(2)若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培育基中，培育一段时间后，不能降解X的细菌比例会____________，其缘由是________________________________________________________________________。(3)Ⅱ号培育基加入琼脂后可以制成固体培育基，若要以该固体培育基培育目标菌并对菌落进行计数，接种时，应采纳的方法是________________。(4)假设从Ⅲ号培育基中得到了能高效降解X的细菌，且该菌能将X代谢为丙酮酸，则在有氧条件下，丙酮酸可为该菌的生长供应____________和____________。解析：本题借助微生物培育与筛选的相关学问，考查对相关操作技能的驾驭以及将试验方法和技能进行敏捷运用的实力；试题通过对高效降解X细菌的筛选，体现了科学探究中的结果分析要素。(1)在I号培育基中，牛肉膏、蛋白胨可以为微生物供应氮源，Ⅱ、Ⅲ号培育基中为微生物供应碳源的是有机物X。(2)Ⅱ号培育基中，碳源只有X，不能降解X的细菌会因缺乏碳源而不能增殖，使该类细菌比例降低。(3)利用固体培育基对菌落进行计数时，需采纳稀释涂布平板法进行接种。(4)在有氧条件下，丙酮酸可被分解为CO2和H2O且释放能量，为该菌的生长供应能量和合成其他物质的原料。答案：(1)牛肉膏、蛋白胨X(2)下降不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的细菌能够增殖(3)稀释涂布平板法(4)能量合成其他物质的原料[高考VS,教材][人教选修1]P15[人教选修1]P22[人教选修1]P22[人教必修1]P942．[2024·全国卷Ⅱ，37]物质W是一种含氮有机物，会污染土壤。W在培育基中达到肯定量时培育基表现为不透亮。某探讨小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌(目标菌)。回答下列问题。(1)要从土壤中分别目标菌，所用选择培育基中的氮源应当是____________。(2)在从土壤中分别目标菌的过程中，发觉培育基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落(如图所示)。假如要得到目标菌，应当选择____________菌落进一步纯化，选择的依据是________________________________________________________________________。(3)土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计试验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出试验思路、预期结果和结论，即________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W的酶(酶E)。为了比较酶E与自然酶降解W实力的差异，该小组拟进行如下试验，请完善相关内容。①在含有肯定浓度W的固体培育基上，A处滴加含有酶E的缓冲液，B处滴加含有相同浓度自然酶的缓冲液，C处滴加____________，三处滴加量相同。②一段时间后，测量透亮圈的直径。若C处没有出现透亮圈，说明________________；若A、B处形成的透亮圈直径大小相近，说明________________________________________________________________________。解析：本题借助微生物的筛选及酶活力对比试验的相关学问，考查考生对试验目的、原理的理解和对试验现象、结果的分析、说明实力。通过对不同种类微生物的筛选、纯化及酶活力试验分析，体现了对科学探究素养中方案探讨、结果分析要素的考查。(1)要从土壤中分别能降解W的细菌，培育基中应以W为唯一氮源。(2)乙菌落四周出现透亮圈，说明乙菌能降解W。(3)要推断甲、乙能否利用空气中的氮气作为氮源，应将甲、乙菌分别接种在无氮源的培育基上，视察细菌能否生长，若细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源，否则不能。(4)①试验设计应遵循单一变量原则，C处应滴加等量不含酶的缓冲液。②C处只滴加等量缓冲液，若C处没有出现透亮圈，说明缓冲液不能降解W，若A、B处形成的透亮圈直径大小相近，说明酶E与自然酶降解W的实力相近。答案：(1)W(2)乙乙菌落四周出现透亮圈，说明乙菌能降解W(3)将甲、乙菌分别接种在无氮源培育基上，若细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源(4)①缓冲液②缓冲液不能降解W酶E与自然酶降解W的实力相近[高考VS,教材][人教选修1]P22[人教选修1]P283．[2024·全国卷Ⅲ，37]回答下列与细菌培育相关的问题。(1)在细菌培育时，培育基中能同时供应碳源、氮源的成分是__________(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”(2)用平板培育细菌时一般须要将平板________________(填“倒置”或“正置”)。(3)单个细菌在平板上会形成菌落，探讨人员通常可依据菌落的形态、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物，缘由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)有些运用后的培育基在丢弃前须要经过____________处理，这种处理可以杀死丢弃物中全部的微生物。解析：本题借助细菌的培育方法与操作的相关学问，考查考生理解试验原理、方法与操作步骤，并对一些生物学问题进行初步探究的实力；试题通过试验分析和方案探究的形式体现了对科学探究素养的考查。(1)细菌培育时须要碳源、氮源、水和无机盐等，蛋白胨能同时供应碳源、氮源，葡萄糖供应碳源，NaNO3不能供应碳源，可供应无机氮源。不同细菌生长繁殖所需的最适pH不同，故制备培育基时须要依据所培育细菌的不同来调整培育基的pH。硝化细菌是自养型细菌，可以利用空气中的CO2作为碳源，故硝化细菌可在没有碳源的培育基上生长。(2)为防止培育皿盖的冷凝水落入培育基造成污染，用平板培育细菌时一般需将平板倒置。(3)在肯定培育条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征，如特定的形态、大小、颜色、隆起程度等，所以依据菌落的特征，可以初步区分不同种的微生物。(4)为防止污染环境，运用后的培育基丢弃前要都经过灭菌处理，以便杀死丢弃物中全部的微生物。答案：(1)蛋白胨不同细菌生长繁殖所需的最适pH不同能够硝化细菌可以利用空气中的CO2作为碳源(2)倒置(3)在肯定的培育条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征(4)灭菌[高考VS,教材][人教选修1]P15[人教选修1]P18[人教选修1]P24[人教选修1]P154．[2024·全国卷Ⅰ，37][生物——选修1：生物技术实践]将马铃薯去皮切块，加水煮沸肯定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入肯定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培育基。回答下列问题：(1)M培育基若用于真菌的筛选，则培育基中应加入链霉素以抑制_____________的生长，加入了链霉素的培育基属于______________培育基。(2)M培育基中的马铃薯浸出液为微生物生长供应了多种养分物质，养分物质类型除氮源外还有____________(答出两点即可)。氮源进入细胞后，可参加合成的生物大分子有____________(答出两点即可)。(3)若在M培育基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培育，平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是______________，该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：甲同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是110、140和149，取平均值133；乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是27、169和176，取平均值124。有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其缘由是________________________________________________________________________。解析：(1)M培育基若用于真菌的筛选，要求M培育基能满意真菌的生长，且能抑制其它微生物的生长，则培育基中应加入链霉素以抑制细菌的生长，加入了链霉素的培育基属于选择培育基。(2)微生物生长须要多种养分物质，除氮源外，还须要碳源、无机盐、水以及特别养分物质等。氮源进入细胞后，可参加合成的生物大分子有蛋白质和核酸。(3)筛选产淀粉酶的微生物，依据淀粉遇碘液显蓝色，产淀粉酶的菌落四周淀粉被水解，形成透亮圈，再依据透亮圈，来筛选产淀粉酶的微生物。(4)乙同学的结果不合理，因为其中1个平板的计数结果与另2个相差悬殊，结果的重复性差，不能简洁的用其平均数作为最终结果。答案：(1)细菌选择(2)碳源、无机盐蛋白质、核酸(3)碘液淀粉遇碘液显蓝色，产淀粉酶的菌落四周淀粉被水解，形成透亮圈(4)乙同学的结果中，1个平板的计数结果与另2个相差悬殊，结果的重复性差[高考VS,教材][人教选修1]P145．[2024·全国卷Ⅱ，37][生物——选修1：生物技术实践]在生产、生活和科研实践中，常常通过消毒和灭菌来避开杂菌的污染。回答下列问题：(1)在试验室中，玻璃和金属材质的试验器具________________________________________________________________________(填“可以”或“不行以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。(2)牛奶的消毒常采纳巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种方法的优点是______________________。(3)密闭空间内的空气可采纳紫外线照耀消毒，其缘由是紫外线能________________________________________________________________________。在照耀前，适量喷洒______________________，可强化消毒效果。(4)水厂供应的自来水通常是经过________(填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。(5)某同学在运用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的缘由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析：(1)能耐高温的、须要保持干燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培育皿)和金属用具等可以放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。(2)煮沸消毒法即在100℃煮沸5～6min可以杀死微生物细胞和一部分芽孢；巴氏消毒法即在70～75℃煮30min或在80℃煮15min，可以杀死微生物，并且保证养分物质不被破坏。因此，与煮沸消毒法相比，牛奶消毒常采纳的巴氏消毒法或高温瞬时消毒法的优点是在达到消毒的同时，养分物质损失较少。(3)因紫外线能破坏DNA结构，所以密闭空间内的空气可采纳紫外线照耀消毒。在照耀前，适量喷洒消毒液，可强化消毒效果。(4)通常乙醇消毒是运用75%的酒精，有气味，影响水质，不相宜消毒自来水；高锰酸钾本身有颜色，消毒后溶液呈紫红色，无法运用；因此水厂供应的自来水通常是经过氯气消毒的。(5)采纳高压蒸汽灭菌时，锅内的水加热煮沸，将其中原有的冷空气彻底解除后才能将锅密闭。假如未将锅内冷空气排尽，则会出现压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度的现象。答案：(1)可以(2)在达到消毒目的的同时，养分物质损失较少(3)破坏DNA结构消毒液(4)氯气(5)未将锅内冷空气排尽[高考VS,教材][人教选修1]P16[人教选修1]P15[人教选修1]P16

【借题发挥】理清教材，突破高考的瓶颈——长句描述类题型问题1：消毒与灭菌有何不同？答案：消毒是指运用较为温柔的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。灭菌则是指运用剧烈的理化因素杀死物体内外全部的微生物，包括芽孢和孢子。问题2：平板划线法和稀释涂布平板法如何选用？答案：微生物的接种方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，依据接种的目的不同选用不同的接种方法。①平板划线法可对混合菌进行分别，这种方法可以视察菌落特征，但不能用于计数。②稀释涂布平板法可对混合菌进行分别，该方法可以计数、可以视察菌落特征，由于长成的一个单菌落也可能来自样品中的2～3或更多个细胞，所以该方法计数的结果往往比实际值偏低。问题3：选用葡萄发酵制葡萄酒时，应当先冲洗葡萄还是先除去枝梗？答案：应先冲洗，再除去枝梗，目的是避开除去枝梗时引起葡萄破损，从而增加杂菌污染的机会。问题4：含有抗生素的牛奶能发酵成酸奶吗？答案：不能。因为酸奶发酵所需菌种为乳酸菌，抗生素会杀死或抑制乳酸菌的生长。类型2整体对比历年同类题，找共性和趋势6．[2024·全国卷Ⅱ，39]苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的，回答下列问题：(1)酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段，在酵母菌细胞的________中进行，其产物乙醇与__________试剂反应呈现灰绿色，这一反应可用于乙醇的检验；过程③在酵母菌细胞的__________中进行。与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增殖速度__________。(2)其次阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，依据醋酸杆菌的呼吸作用类型，该过程须要在__________条件下才能完成。(3)在生产过程中，第一阶段和其次阶段的发酵温度不同，第一阶段的温度__________(填“低于”或“高于”)其次阶段的。(4)醋酸杆菌属于______核生物，其细胞结构中______(填“含有”或“不含有”)线粒体。解析：(1)图示中的过程①和②分别表示无氧呼吸的第一、其次阶段，其场所均为细胞质基质；橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与乙醇(酒精)发生化学反应，变成灰绿色。过程③表示有氧呼吸的其次、三阶段，其场所分别为线粒体基质和线粒体内膜，即在酵母菌细胞的线粒体中进行。与无氧条件相比，有氧条件下酵母菌的增殖速度快。(2)醋酸杆菌是一种好氧菌，在氧气足够的条件下才能进行旺盛的生命活动，因此将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，须要在有氧条件下才能完成。(3)第一阶段即果酒的制作，所限制的温度范围是18～25℃，其次阶段即果醋的制作所限制的温度范围是30～35℃，所以第一阶段的温度低于其次阶段的。(4)醋酸杆菌属于原核生物，其细胞结构中不含线粒体等困难的细胞器。答案：(1)细胞质基质重铬酸钾线粒体快(2)有氧(3)低于(4)原不含有7．[2024·全国卷Ⅲ，39]某同学用簇新的泡菜滤液为试验材料分别纯化乳酸菌。分别纯化所用固体培育基中因含有碳酸钙而不透亮，乳酸菌产生的乳酸能溶解培育基中的碳酸钙。回答下列问题：(1)分别纯化乳酸菌时，首先须要用______________对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是____________________。(2)推想在分别纯化所用的培育基中加入碳酸钙的作用有________________和________________。分别纯化时应选择出____________的菌落作为候选菌。(3)乳酸菌在－20℃长期保存时，菌液中常须要加入肯定量的__________________(填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”)。解析：(1)分别纯化乳酸菌时，首先须要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释；进行梯度稀释的理由是在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌将被分散成单个细胞，通过培育，从而能在培育基表面形成单个的菌落。若干脆培育，由于泡菜滤液中菌的浓度高，则很难分别得到单菌落。(2)由题意可知，分别纯化所用固体培育基中因含有碳酸钙而不透亮，乳酸菌产生的乳酸能溶解培育基中的碳酸钙。由此可推想在分别纯化所用的培育基中加入碳酸钙的作用有中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸和鉴别能产生乳酸的乳酸菌；依据产酸菌在含CaCO3的培育基上产生透亮圈的原理，分别纯化时应选择出具有透亮圈的菌落作为候选菌，然后用平板划线法进一步分别纯化。(3)对于须要长期保存的菌种，可以采纳甘油管藏的方法。即将1mL培育的菌种转移到已灭菌的盛有1mL甘油的甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在－20℃的冷冻箱中保存。所以乳酸菌在－20℃长期保存时，菌液中须要加入肯定量的甘油。答案：(1)无菌水泡菜滤液中菌的浓度高，干脆培育很难分别得到单菌落(2)鉴别乳酸菌中和产生的乳酸(或酸)具有透亮圈(3)甘油8．[全国卷Ⅰ]已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：(1)显微视察时，微生物A菌体中的油脂通常可用________染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用________(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以________为碳源的固体培育基进行培育。(3)若要测定培育液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用________干脆计数；若要测定其活菌数量，可选用________法进行计数。(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，________℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕________℃设计后续试验。解析：(1)脂肪可被苏丹Ⅲ(Ⅳ)染液染成橘黄色(红色)；题干中说明微生物A产生的油脂不易挥发，则可以采纳萃取法提取微生物A中的脂肪。(2)油脂为有机化合物，富含C元素，故为了从自然界获得能够分解油脂的单菌落，应以油脂为唯一碳源来配制培育基。在该培育基上，能分解油脂的微生物可以正常生长，其他微生物不能正常生长，从而实现分别。(3)可利用血球计数板计数法测定菌液中的微生物数量，但计数时活菌和死亡的细菌都会被计数，所以测定培育液中的活菌数应采纳稀释涂布平板法。(4)在45℃时，降解10g油脂所需的酶量最大，则该温度下酶活性最低；由题干可知，40℃时分解10g油脂所需的酶量最少，应在40℃左右范围内设置不同温度梯度来接着探究该酶的最适温度。答案：(1)苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)萃取法(2)油脂(3)血细胞计数板稀释涂布平板(4)45409．[全国卷Ⅰ]植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题：(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将________分解成________。(2)在含纤维素的培育基中加入刚果红(CR)时，CR可与纤维素形成________色复合物。用含有CR的该种培育基培育纤维素分解菌时，培育基上会出现以该菌的菌落为中心的________。(3)为从富含纤维素的土壤中分别获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培育基(成分见下表)：酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培育基甲＋＋＋＋－＋＋培育基乙＋＋＋－＋＋＋注：“＋”表示有，“－”表示无。据表推断，培育基甲________(填“能”或“不能”)用于分别和鉴别纤维素分解菌，缘由是__________________________；培育基乙________(填“能”或“不能”)用于分别和鉴别纤维素分解菌，缘由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析：(1)纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质。纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，如下图：eq\x(纤维素)eq\o(→,\s\up12(纤维素酶))eq\x(纤维二糖)eq\o(→,\s\up12(葡萄糖苷酶))eq\x(葡萄糖)(2)刚果红与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透亮圈，我们可以通过是否产生透亮圈来筛选纤维素分解菌。(3)分别和鉴别纤维素分解菌的培育基为固体培育基，且需以纤维素为唯一碳源。答案：(1)纤维二糖葡萄糖(2)红透亮圈(3)不能液体培育基不能用于分别单菌落不能培育基中没有纤维素，不会形成CR－纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌类型3它山之石——亦可攻玉10．[2024·海南卷]回答下列问题。(1)玫瑰精油可用玫瑰花瓣为原料，采纳水蒸气蒸馏法提取。水蒸气蒸馏法的原理是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。在进行蒸馏时，冷凝管的进水口比出水口________(填“高”或“低”)。蒸馏收集到的乳浊液是玫瑰精油和水的混合物，要得到玫瑰精油，须要向乳浊液中加入NaCl，其目的是________________________________________________________________________；得到的油层还须要加入无水Na2SO4，其目的是________________________________________________________________________________________________。(2)某同学在通过发酵制作果酒时，发觉在制作原料中添加肯定量的糖，可以提高酒精度，缘由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。在家庭以葡萄为原料制作葡萄酒时，可以不添加酵母菌，缘由是________________________________________________________________________；在制作葡萄酒的过程中，假如密封不严混入空气，发酵液会变酸，可能的缘由是________________________________________________________________________。解析：(1)水蒸气蒸馏法是利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，混合物又会重新分别出油层和水层。在进行蒸馏时，为了避开防止冷凝管炸裂，进水口比出水口低。蒸馏收集到的乳浊液是玫瑰精油和水的混合物，要得到玫瑰精油，须要向乳浊液中加入NaCl可以促进油和水的分别；得到的油层还须要加入无水Na2SO4，可以吸去芳香油中残留的水分。(2)糖类是主要的能源物质，可以为酵母菌的生长、繁殖供应能源物质，还可以作为酒精发酵的原料。故在通过发酵制作果酒时，在制作原料中添加肯定量的糖，可以提高酒精度。在家庭以葡萄为原料制作葡萄酒时，由于葡萄皮上附着有野生的酵母菌，故可以不添加酵母菌；在制作葡萄酒的过程中，假如密封不严混入空气，会造成醋酸菌大量增殖，进行醋酸发酵，发酵液会变酸。答案：(1)利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，混合物又会重新分别出油层和水层低促进油和水的分别吸去芳香油中残留的水分(2)糖类是主要的能源物质，可以为酵母菌的生长、繁殖供应能源物质，还可以作为酒精发酵的原料葡萄皮上附着有野生的酵母菌醋酸菌大量增殖，进行醋酸发酵11．[2024·浙江4月选考]回答与果胶和果胶酶有关的问题：(1)通常从腐烂的水果上分别产果胶酶的微生物，其缘由除水果中果胶含量较高外，还有________________________________________________________________________。(2)为了获得高产果胶酶微生物的单菌落，通常对分别或诱变后的微生物悬液进行________________________________________________________________________。(3)在某种果汁生产中，用果胶酶处理显著增加了产量，其主要缘由是果胶酶水解果胶使_________________。果汁生产中的残渣果皮等用于果胶生产，通常将其提取液浓缩后再加入________________使之形成絮状物，然后通过离心、真空干燥等步骤获得果胶制品。(4)常用固定化果胶酶处理含果胶的污水，其主要优点有____________________和可连续处理等。在建立和优化固定化果胶酶处理工艺时，除考虑果胶酶的活性和用量、酶反应的温度、pH、作用时间等因素外，还需考虑的主要有________________和_______________。解析：本题考查果胶和果胶酶，意在考查考生的理解实力和应用实力。(1)通常从腐烂的水果上分别产果胶酶的微生物，其缘由除水果中果胶含量较高外，还有腐烂的水果中含产果胶酶的微生物较多。(2)对微生物悬液进行涂布分别(或划线分别)，培育后可获得单菌落。(3)果胶能将植物细胞粘合在一起，果胶酶水解果胶可以使水果组织软化疏松及细胞受损。果胶不溶于乙醇，所以将其提取液浓缩后再加入95%乙醇使之形成絮状物，然后通过离心、真空干燥等步骤获得果胶制品。(4)固定化酶工艺具有可提高酶的稳定性以及可连续处理等优点。在建立和优化固定化果胶酶处理工艺时，除考虑果胶酶的活性和用量、酶反应的温度、pH、作用时间等因素外，还需考虑的主要有固定化的方法和固定化所用的介质。答案：(1)腐烂的水果中含产果胶酶的微生物较多(2)涂布分别(或划线分别)(3)水果组织软化疏松及细胞受损95%乙醇(4)提高果胶酶的稳定性固定化的方法固定化所用的介质12．[2024·江苏卷，31]酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半，可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培育，这样既可削减污染又可降低生产成本。探讨人员拟从土壤样品中分别该类酵母，并进行大量培育。下图所示为操作流程，请回答下列问题：(1)配制培育基时，依据培育基配方精确称量各组分，将其溶解、定容后，调整培育基的______________，刚好对培育基进行分装，并进行______________灭菌。(2)取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培育皿中，在步骤③中将温度约________(在25℃、50℃或80℃中选择)的培育基倒入培育皿混匀，冷凝后倒置培育。(3)挑取分别平板中长出的单菌落，按步骤④所示进行划线。下列叙述合理的有________________________________________________________________________。a．为保证无菌操作，接种针、接种环运用前都必需灭菌b．划线时应避开划破培育基表面，以免不能形成正常菌落c．挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量d．可以通过逐步提高培育基中甲醇的浓度，可获得甲醇高耐受株(4)步骤⑤中，为使酵母数量快速增加，培育过程中需保证足够的养分和________供应。为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1000倍后，经等体积台盼蓝染液染色，用25×16型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数，理论上________色细胞的个数应不少于________，才能达到每毫升3×109个活细胞的预期密度。解析：(1)配制培育基的操作步骤为称量→溶化→定容→调pH→培育基的分装→包扎→灭菌，因此微生物的培育基配制好后应当先调整pH，再分装。常见的灭菌方法有：干热灭菌、高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌。培育基相宜用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。(2)在步骤③中，待培育基冷却至50℃左右时进行倒平板。(3)在划线过程中，接种针、接种环运用前都必需灭菌，以防止杂菌污染，a正确；划线时应避开划破培育基表面，否则将不能形成正常菌落，b正确；该试验的目的是获得利用工业废甲醇作为碳源的酵母菌，不须要测定酵母菌中的甲醇含量，c错误；培育基中的甲醇浓度越高，此种培育基中得以生存的酵母菌利用甲醇的实力越强，因此可以通过逐步提高培育基中甲醇的浓度，可获得甲醇高耐受株，d正确。(4)酵母菌通过有氧呼吸大量繁殖，因此为使酵母数量快速增加，培育过程中需保证足够的养分和氧气供应；台盼蓝是大分子物质，不能将活细胞染色，再依据25×16型的血球计数板：1毫升悬液中待测标本(菌体)总数＝80小方格内菌体数/80×400×104×稀释倍数。而台盼蓝与菌液等体积加入，因此要达到每毫升3×109个活细胞的预期密度，理论上无色细胞数应当不少于(3×109)÷(1000×2×104×400÷80)＝30个。答案：(1)pH高压蒸汽(2)50℃(3)a、b、d(4)氧气无3013．[2024·江苏卷，31]苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严峻危害。小明同学打算依据下图操作步骤，从处理废水的活性污泥中分别筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题：(1)酚降解菌富集培育基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作为碳源的有________。(2)将采集到的样品接种培育，苯酚用量应随转接次数增加而渐渐________，以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集，应进一步________，以便于菌落计数与分别。制备平板培育基时除了须要水、养分物质外，还必需添加________。(3)下图为连续划线法示意图，在图中________(填图中序号)区域更易获得单菌落。(4)采纳比色测定法(运用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应，下表中1～5号比色管的苯酚浓度应分别为________________________________________________________________________。管号123456苯酚浓度(mg/L)1假如废水为50mg/L苯酚溶液，降解后约有21%的苯酚残留，则需将残留液稀释________(填序号：①5②10③20)倍后，再进行比色。解析：(1)分析富集培育基的成分可知，培育基中蛋白胨、苯酚中含C，可作为碳源。(2)在接种培育时，随转接次数的增加，应渐渐增加培育基中苯酚(碳源)的含量，以达到富集酚降解菌的目的。若接种培育后平板中菌落过于密集，应接着稀释涂布，以降低平板上的菌落密度，便于菌落计数与分别。稀释涂布时所用的培育基为固体培育基，制备平板培育基时除了须要水、养分物质外，还必需添加琼脂等物质作为凝固剂。(3)利用连续划线法接种时，越在最终划线区域，菌落的密度越稀，越简洁获得单菌落，所以，图中③区域更易获得单菌落。(4)依据表中6号比色管中苯酚浓度为1mg/L可以推知，1～5号比色管的苯酚浓度应分别为0mg/L、0.2mg/L、0.4mg/L、0.6mg/L、0.8mg/L。依据题意，废水为50mg/L苯酚溶液，降解后约有21%的苯酚残留，要使稀释后的苯酚残留液浓度介于0～1mg/L之间，需将残留液稀释20倍左右，再进行比色。答案：(1)蛋白胨、苯酚(2)增加稀释涂布凝固剂(3)③(4)0、0.2、0.4、0.6、0.8③14．某探讨小组以紫葡萄为原料制作葡萄酒的基本流程和装置示意图如下。请回答：(1)制作葡萄浆前，对葡萄进行清洗和用__________色的高锰酸钾溶液浸泡。制作酵母悬液时，在干酵母中加入少量温水和极少量蔗糖，待酵母悬液中出现______即可。(2)装瓶后起先一段时间，发酵瓶中溶解氧的含量改变是____________。发酵过程中，发酵瓶中酒精的含量改变是________________。(3)下列关于装置中有水弯管作用的叙述，错误的是________。A．隔绝气体出入B．使发酵瓶内外的压强基本平衡C．削减杂菌污染D．有利于发酵瓶内形成缺氧环境(4)试验中，推断发酵完毕的依据是____________。A．发酵瓶中pH起先下降B．发酵瓶中停止出现气泡C．发酵瓶中酒精浓度达到30%D．发酵瓶中酵母菌数量急剧削减(5)欲利用葡萄酒制作果醋，发酵瓶中应加入的菌种是____________，该菌种在________条件下能将乙醇氧化为醋酸。解析：本题主要考查果酒、果醋制作过程及结果分析。(1)制作葡萄浆前，将成熟的葡萄用水清洗干净，再用红(紫)色的高锰酸钾溶液浸泡约5min。为了使酵母快速发生作用，制作酵母悬液时，在干酵母中加入少量温水和极少量蔗糖，待酵母悬液中出现气泡即可。(2)装瓶后起先一段时间，酵母菌进行需氧呼吸，快速繁殖，消耗发酵瓶内的氧气，瓶内溶解氧的含量削减。氧气耗尽，酵母菌进行厌氧呼吸，生成酒精和二氧化碳，酒精含量渐渐增多。(3)装置中有水弯管可使发酵瓶内外的压强基本平衡，削减杂菌污染，有利于发酵瓶内形成缺氧环境。(4)当发酵瓶中停止出现气泡时，即表示发酵完毕。(5)制作果醋用醋化醋杆菌作为菌种，该菌种在有氧条件下能将乙醇氧化为醋酸。答案：(1)红(紫)气泡(2)削减增加(3)A(4)B(5)醋化醋杆菌有氧[命题揭秘]本考点主要在非选择题中出现，留意科学探究实力的考查，对微生物的分别、计数、培育基灭菌等考查频率较高。高考题常借助生活实例考查微生物培育基的成分、无菌技术的应用以及微生物的接种、计数方法和数量的测定等；考查果酒、果醋及泡菜制作技术、发酵条件限制，相关菌种特点等，对亚硝酸盐测定也偶有考查，近年高考常与细胞结构、细胞呼吸、酒精检测等结合，备考时应多加关注。题目难度一般，但对原理和操作过程识记不牢、不精确，也会导致失分。[命题趋势]仍会对考生的试验探究实力和综合实力进行考查，但对实力的要求并不高，难度改变不大，重在对主干学问的理解和识记。考查将集中在微生物的纯化培育的操作和应用上，可能以环境污染为背景考查微生物的存在条件及微生物的分别、纯化和培育过程，或以几种发酵产物的生产为背景材料进行试验设计，或结合其他专题学问，以多种形式来考查学问的应用实力。题组二模考预料练强实力预料一聚焦微生物的利用1．[2024·吉安市高三模拟]圆褐固氮菌能将大气中的氮气转化为氨，是异养需氧型的微生物。某同学利用稀释涂布平板法从土壤中分别获得圆褐固氮菌。回答下列问题：(1)圆褐固氮菌与硝化细菌在同化作用上的主要区分在于________________________________________________________________________。(2)稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌的数目，这种方法的原理是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。通过统计平板上的________________________________________________________________________就能推想出样品中大约含有多少活菌。分别不同的微生物须要不同的稀释度，缘由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)培育圆褐固氮菌时不能隔绝空气的理由是________________________________________________________________________。(4)简要写出从土壤中分别出能分解纤维素的微生物的试验流程(用“→”连接)：________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析：(1)圆褐固氮菌属于原核生物，其在土壤中能够独立生活，代谢类型是异养需氧型。硝化细菌能利用氨氧化释放的能量将无机物合成有机物，代谢类型为自养需氧型，故圆褐固氮菌与硝化细菌在同化作用上的主要区分在于能否干脆将无机物合成有机物。(2)稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌的数目，这种方法的原理是当样品的稀释度足够高时，培育基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数就能推想出样品中大约含有多少活菌。由于土壤中不同微生物的数量不同，密度有差异，所以分别不同的微生物须要不同的稀释度，一般选择平板上出现30～300个菌落数的稀释度进行培育和计数。(3)圆褐固氮菌为需氧型微生物，且属于固氮生物，须要氮气作为氮源，故培育圆褐固氮菌时不能隔绝空气。(4)从土壤中分别出能分解纤维素的微生物的试验流程为：土壤取样→选择培育→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培育基上→选择产生透亮圈的菌落。答案：(1)能否干脆将无机物合成有机物(2)当样品的稀释度足够高时，培育基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌菌落数土壤中不同微生物的数量不同，密度有差异(3)圆褐固氮菌为需氧型微生物，属于固氮生物，须要氮气作为氮源(4)土壤取样→选择培育→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培育基上→选择产生透亮圈的菌落2．[2024·河南南阳一中高三试题]将没有吃完的西瓜，盖上保鲜膜后放入冰箱，是许多人日常贮存西瓜的方法。但事实上，有时用保鲜膜贮存的西瓜中的细菌种类和数目反而比没有保鲜膜的多。某生物探讨小组用保鲜膜保存三天的西瓜表面的瓜瓤制备浸出液，探讨细菌的种类和数量。(1)该探讨小组需配制用于培育微生物的培育基，配制的培育基一般都含有水、碳源和__________。一般采纳__________法对培育基进行灭菌。(2)为了避开培育基污染，在培育过程中，需将平板________(填“正置”或“倒置”)。为了视察浸出液中微生物的种类和数量，应采纳________法接种。接种时，为了避开环境中微生物的污染，试验操作应在________旁边进行。(3)在培育20小时后，视察到平板上有形态和颜色不同的菌落，说明西瓜的浸出液中有________(填“一种”或“多种”)细菌。细菌总数越多，说明西瓜被细菌污染的程度越________(填“高”或“低”)。解析：(1)用于培育微生物的培育基，一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。一般采纳高压蒸汽灭菌法对培育基进行灭菌。(2)为了避开培育基污染，在培育过程中，需将平板倒置。为了视察浸出液中微生物的种类和数量，应采纳稀释涂布平板法接种。接种时，为了避开环境中微生物的污染，试验操作应在酒精灯火焰旁边进行。(3)若视察到平板上有形态和颜色不同的菌落，说明西瓜的浸出液中有多种细菌。细菌总数越多，说明西瓜被细菌污染的程度越高。答案：(1)氮源、无机盐高压蒸汽灭菌(2)倒置稀释涂布平板酒精灯火焰(3)多种高3．[2024·葫芦岛市模拟]在冬季部分城市出现严峻雾霾，这与秸秆野外焚烧有肯定关系。微生物学家试图通过微生物降解技术使秸秆尽快腐烂，以增加土壤肥力并缓解环境污染。请回答下列有关问题。(1)专家研制的降解秸秆的“催腐剂”是十余种能分解纤维素的霉菌、细菌和酵母菌的组合。其中____________在细胞结构上与其他两者不同。(2)纤维素酶是一种复合酶，其中________可以将纤维素分解为二糖，________可以将二糖分解为葡萄糖。(3)微生物专家为从发黑的树干上分别出有分解纤维素实力的高产菌株制备了选择培育基，将菌液进行一系列________，从而得到单个菌落，再采纳________方法进行鉴定，得到下图所示菌落。那么，图中降解纤维素实力最强的菌株是________(填图中序号)。(4)为确定得到的是纤维素分解菌，还须要进行发酵产纤维素酶的试验，其发酵方法有________和________两种。解析：(1)霉菌和酵母菌是真菌，属于真核生物，而细菌属于原核生物。细菌在细胞结构上与霉菌和酵母菌不同，其中细菌无核膜包被的成形细胞核。(2)纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酶等。其中C1酶、Cx酶可以将纤维素分解为二糖，葡萄糖苷酶可以将二糖分解为葡萄糖。(3)微生物专家为从发黑的树干上分别出有分解纤维素实力的高产菌株制备了选择培育基，将菌液进行一系列梯度稀释，从而得到单个菌落，再采纳刚果红染色方法进行鉴定。当纤维素被纤维素酶分解后，无法与刚果红染色剂形成红色复合物，出现以纤维素分解菌为中心的透亮圈。菌落四周的透亮圈越大，即被分解的纤维素越多，说明菌株降解纤维素实力越强。因此，降解纤维素实力最强的是菌落①。(4)为确定得到的是纤维素分解菌，还须要进行发酵产纤维素酶的试验，其发酵方法有液体发酵和固体发酵。答案：(1)细菌(2)C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶(3)梯度稀释刚果红染色①(4)液体发酵固体发酵4．[2024·烟台诊断性测试]分解尿素的微生物广泛存在于农田等土壤中，某生物试验小组尝试对分解尿素的微生物进行分别与计数，请回答下列问题：(1)分解尿素的微生物含有的酶是________，为筛选出能分解尿素的微生物，配制培育基时应以________作为唯一氮源，因此该培育基属于________培育基。(2)对尿素溶液进行灭菌的最适方法是________________________________________________________________________。常用来统计样品中活菌数目的方法是________________________________________________________________________。(3)该小组对分解尿素的微生物进行计数时，在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先培育一段时间，这样做的目的是________________________，然后将1mL样液稀释10000倍，在3个平板上用涂布法分别涂布0.1mL稀释液；经适当培育后，统计活菌数目，每隔一个“时间间隔”统计一次菌落数目，最终选取________________________作为结果；3个平板的菌落数分别为39、42和45。据此可得出每毫升样液中分解尿素的微生物活菌数为________个。解析：(1)分解尿素的微生物含有脲酶；培育基的成分一般包括水、无机盐、碳源、氮源，利用培育基对分解尿素的微生物进行筛选，应当用选择培育基，配制培育基时应以尿素作为唯一氮源。(2)对尿素溶液进行灭菌的最适方法是高压蒸汽灭菌法；常用的微生物接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可以用于活菌的计数。(3)为了检测培育基平板灭菌是否合格，应当在接种前随机取若干灭菌后的空白平板先培育一段时间。在稀释涂布平板法计数时，应当选择菌落数目稳定时的记录值为结果；3个平板的菌落数的平均值＝(39＋42＋45)/3＝42个，则每毫升样液中分解尿素的微生物活菌数＝42÷0.1×10000＝4.2×106个。答案：(1)脲酶尿素选择(2)高压蒸汽灭菌稀释涂布平板法(3)检测培育基平板灭菌是否合格菌落数目稳定时的记录4.2×106预料二聚焦传统发酵技术的应用5．[2024·广东茂名高三理综]某探讨小组尝试制作蓝莓果酒和蓝莓果醋，并探讨提取花青素的方法。请回答下列问题：(1)为提高果酒的品质，需先获得纯净的酵母菌菌种。吸取1mL酵母菌样液，在105稀释倍数下统计各平板上生长的平均菌落数为32，涂布时所用稀释液体积为0.1mL，则每mL样液中的菌株数＝________个。(2)酿制蓝莓果酒前不须要对蓝莓进行严格的消毒以除去杂菌，这是因为在________条件下，绝大多数微生物因无法适应这一环境而受抑制。发酵时一般要先通气，其目的是________________________________________________________________________。果汁发酵后是否有酒精产生，可在酸性条件下用橙色的____________进行检验，若溶液颜色变成________________________________________________________________________，证明有酒精存在。(3)酿制胜利的蓝莓果酒假如暴露在空气中酒味会渐渐消逝而出现酸味，尤其是气温高的夏天，其缘由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)探讨发觉花青素在pH小于3.0条件下比较稳定，在60℃以下热稳定性较好。溶剂萃取法是最常用提取方法，萃取剂宜选用________，将萃取相关过程的pH限制在3左右可有效地保障萃取胜利。解析：(1)吸取1mL酵母菌样液，在105稀释倍数下统计各平板上生长的平均菌落数为32，涂布时所用稀释液体积为0.1mL，则每mL样液中的菌株数为32÷0.1×105＝3.2×107个。(2)在缺氧、呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数微生物无法适应这一环境而受抑制，所以酿制蓝莓果酒时，并不须要对蓝莓进行严格的消毒处理以除去杂菌。发酵时一般要先通气，让酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸，大量繁殖。橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与酒精发生化学反应，变成灰绿色，因此果汁发酵后是否有酒精产生，可在酸性条件下用橙色的重铬酸钾进行检验，若溶液颜色变成灰绿色，则证明有酒精存在。(3)酿制胜利的蓝莓果酒，假如暴露在空气中酒味会渐渐消逝而出现酸味，其缘由是：在有氧条件下，醋酸菌将乙醇转化成乙醛，再将乙醛变为醋酸，使发酵液中醋酸的积累量渐渐增多。(4)花青素属于水溶性色素。用溶剂萃取法提取花青素时，应选用乙醇等水溶性萃取剂。答案：(1)3.2×107(2)缺氧酵母菌可在有氧条件下大量繁殖重铬酸钾灰绿色(3)醋酸菌在有氧条件下，将乙醇转化成醋酸，醋酸大量积累(4)乙醇6．[2024·河南安阳高三一模]中心电视台《舌尖上的中国》栏目介绍了我国各地的美食，其中利用发酵技术制作的各类特色食品，假如醋、腐乳、泡菜等，很好的呈现了广袤人民群众的才智。请回答下列问题：(1)“天地一号”苹果醋是我国闻名的果醋。工业上酿制苹果醋通常有两条途径，一条途径是向捣碎的苹果汁中干脆接种________________(填微生物名称)。经过一次发酵制成，在发酵过程中须要常常向发酵液中通入________________；另一条途径需经过先后两次发酵获得，即______________________________________________________________________________________。(2)“王致和”腐乳是我国的闻名品牌，通过发酵，豆腐中养分物质的种类________(填“增多”或“削减”)。制作腐乳时加盐腌制后须要加入卤汤，若卤汤中的酒精含量过高，则会导致腐乳________。(3)泡菜具有独特的风味，在我国的泡菜品种中，东北酸菜和四川泡菜都特别出名，它们的制作过程基本类似，都是利用________(微生物名称)发酵。向坛中注入盐水前，煮沸所用盐水的目的是__________________。在泡菜制作过程中，亚硝酸盐含量的改变状况是________________________________________________________________________。解析：苹果醋的制作通常有两条途径：一条途径是向苹果汁中干脆接种醋酸菌，经过一次发酵制成；另一条途径需经过先后两次发酵获得，即先接种酵母菌获得果酒，再在果酒中接种醋酸菌进一步发酵获得果醋。豆腐发酵的原理是利用毛霉等真菌产生的脂肪酶、蛋白酶对豆腐中脂肪、蛋白质进行分解，产生甘油和脂肪酸、小分子肽和氨基酸等，再经后期腌制、加卤汤、密封发酵制成。泡菜是利用乳酸菌在无氧条件下将糖类分解为乳酸制作而成。(1)由于醋酸菌是需氧型微生物，所以它在发酵过程中须要不断向发酵液中通入无菌空气；假如糖源(苹果汁)足够，可干脆接种醋酸菌进行有氧发酵产生苹果醋；假如糖源不足够，可先通过酵母菌发酵制得果酒，再向果酒中接种醋酸菌进行有氧发酵制成苹果醋。(2)依据前面的分析可知，豆腐通过霉菌分泌的酶分解，其中养分物质的种类会增多。制作腐乳时加盐腌制后须要加入卤汤，若卤汤中的酒精含量过高，会破坏霉菌产生的部分发酵酶，进而导致腐乳成熟时间延长。(3)泡菜都是利用乳酸菌发酵制成。向泡菜坛中注入盐水前，煮沸所用盐水的目的主要是杀灭细菌，其次可以除去部分溶解氧。在泡菜制作过程中，亚硝酸盐含量的改变状况是先增加后削减。答案：(1)醋酸菌无菌空气先接种酵母菌获得果酒，再在果酒中接种醋酸菌进一步获得果醋(2)增多成熟时间延长(3)乳酸菌杀灭细菌(或灭菌)先增加后削减7．[2024·湖北省十堰市模拟]多个生物爱好小组围绕微生物发酵绽开探讨。请回答相关问题。(1)爱好小组一进行自制葡萄酒试验。在进行“产品”品尝时，爱好小组一的同学都感到2号装置中的“产品”明显发酸，其缘由最可能是2号装置________，导致最终的产品中含有________。(2)爱好小组二用液体培育基培育能产生胡萝卜素的酵母菌品种。用纸层析法对培育液中获得的“产品”进行鉴定，点样时除了点提取样品外还要点________样品，当视察到________________时，说明产品含有胡萝卜素。(3)爱好小组三进行自制苹果醋试验。自制过程须要接种的发酵菌是________________。某同学用簇新苹果醋为试验材料分别纯化其中的发酵菌，为了保证能获得单菌落，要先对苹果醋________________________________________________________________________。(4)爱好小组三的某同学安排统计苹果醋中某发酵菌的总数，他选用10－4、10－5、10－6稀释液进行涂布，每种稀释液都设置了3个培育皿。从比照试验的角度看，还应设置的一组比照组是________________，设置比照组的目的是________________________________________________________________________。解析：(1)葡萄酒发酵装置中的“产品”明显发酸，其缘由最可能是该装置密封不严，导致最终的产品中含有醋酸。(2)用纸层析法对培育液中获得的“产品”进行鉴定，点样时除了点提取样品外还要点标准样品，当视察到与标准样品对应的层析带时，说明产品含有胡萝卜素。(3)自制苹果醋须要的菌种是酵母菌和醋酸菌，先在酵母菌的作用下产生酒精，再在醋酸菌的作用下产生醋酸；分别菌种时，为了得到单一菌落，须要先对苹果醋用无菌水进行梯度稀释。(4)依据题意分析，该爱好小组选择了三种稀释梯度的试验组，还缺少不接种的空白培育基的比照组，以证明培育基制备过程中是否被杂菌污染。答案：(1)密封不严醋酸(2)标准与标准样品对应的层析带(3)酵母菌和醋酸菌用无菌水进行梯度稀释(4)不接种的空白培育基证明培育基制备过程中是否被杂菌污染8．“每天喝一点，健康多一点”，这是“宁夏红”领先提出的消费理念，将积淀了千百年的枸杞药食文化和中国红文化完备结合起来，更增加了品牌的文化魅力和优势。下图为“宁夏红”枸杞果酒生产工艺流程简图，据图回答下面的问题。选料→？→粉碎→灭菌→接种→发酵→过滤→果酒(1)流程中？处的内容应为____________。(2)果酒酿造过程中假如果汁灭菌不合格，含有醋酸菌，在酒精发酵旺盛时，醋酸菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸并说明理由。________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)写出果酒制作过程中酵母菌进行的有关反应式：________________________________________________________________________。(4)枸杞果酒制作过程中，接种完成后要先向发酵罐中通入一段时间的无菌空气，目的是________________________________________________________________________。(5)若要提高果酒的产量，发酵过程中关键要限制好哪些条件？________________________________________________________________________。(6)果酒制作是否胜利，需发酵后用________来鉴定，在________条件下，该物质与酒精反应呈现________色。解析：(1)果酒生产的工艺流程为：选料→冲洗→粉碎→灭菌→接种→发酵→过滤→果酒。(2)醋酸菌为好氧型细菌，果酒酿制的环境(无氧、温度较低等)不利于醋酸菌发酵。(3)酵母菌产生酒精的反应式：C6H12O6eq\o(→,\s\up7(酶))2CO2＋2C2H5OH(酒精)＋能量。(4)枸杞果酒制作过程中，接种完成后要先向发酵罐中通入一段时间的无菌空气，在有氧条件下，使酵母菌快速繁殖，增加数量，有利于后期发酵。(5)发酵过程中要限制好温度、pH和通气量。(6)酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。答案：(1)冲洗(2)不能。因醋酸菌是好氧型细菌，而果酒发酵是无氧环境(或因醋酸菌须要在有氧且温度是30～35℃条件下，才能将糖转化成醋酸，而此时发酵罐中的条件是无氧且温度是18～25℃)(3)C6H12O6eq\o(→,\s\up7(酶))2CO2＋2C2H5OH(酒精)＋能量(4)在有氧条件下，使酵母菌快速繁殖，增加数量(5)相宜的温度、pH、通气量(6)重铬酸钾溶液酸性灰绿

整合考点23生物技术在其他方面的应用[考点突破固考基]一、酶相关学问整合1．图解酶的应用与固定化2．比较固定化酶与固定化细胞项目固定化酶固定化细胞固定化酶的种类一种一系列适用方法化学结合法、物理吸附法包埋法特点优点酶既可与反应物结合，又可与产物分别，固定在载体上的酶可反复利用成本低，操作简洁缺点一种酶只能催化一种或一类化学反应可能导致反应效率下降实例固定化葡萄糖异构酶固定化酵母细胞二、生物技术在其它方面的应用1．图解生物技术在其他方面的应用2．依据植物有效成分的特性选择提取方法(1)提取挥发性强的植物芳香油：蒸馏法。(2)提取易溶于有机溶剂的植物有效成分：萃取法。(3)提取原料中含量高的植物有效成分：压榨法。[题组集训提考能]题组一高考分类练明考向类型1翻阅教材，原味品高考1．[全国卷Ⅱ，节选]回答与胡萝卜素有关的问题：(3)现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂，应选用其中的________作为胡萝卜素的萃取剂，不选用另外一种的理由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析：(3)乙酸乙酯属于水不溶性有机溶剂，与水不互溶，能够溶解胡萝卜素；乙醇是水溶性有机溶剂，因萃取过程中能与水混溶而影响萃取效果，所以不用它作萃取剂。答案：(3)乙酸乙酯萃取胡萝卜素的有机溶剂应不与水混溶，而乙醇属于水溶性有机溶剂，影响萃取效果[高考VS,教材][人教选修1]P77[人教选修1]P782．[2024·海南卷，30]回答下列问题：(1)蛋白酶甲、乙、丙三者的活性随pH的改变如图所示。通常，用清水洗涤衣服上的簇新血迹时，不应当运用开水，缘由是____________________________________。若要去除衣服上的血渍，应选择含有____________(填“蛋白酶甲”“蛋白酶乙”或“蛋白酶丙”)的碱性洗衣粉，理由是________________________________。(2)某同学为了洗去衣服上的油渍，洗衣时在市售的蛋白酶洗衣液中添加脂肪酶，该同学的做法________(填“合理”或“不合理”)，理由是________________________________________________________________________。(3)已知溶液的pH可以影响酶活性，请推想pH影响某种蛋白酶活性的缘由可能是其影响了酶和底物分子中__________________(填“羧基和氨基”“氨基和甲基”“羧基和甲基”或“甲基和甲基”)等基团的解离状态。解析：本题主要考查加酶洗衣粉的洗涤原理与酶活性的影响因素。(1)簇新血迹中含有蛋白质，开水会使血中的蛋白质变性而沉淀，难以清洗；若要去除衣服上的血渍，应选择含有蛋白酶丙的碱性洗衣粉，因为碱性条件下只有蛋白酶丙具有活性。(2)因为洗衣液中含有的蛋白酶会降解脂肪酶，所以添加脂肪酶无效。(3)只有羧基和氨基可解离，pH通过影响酶和底物分子羧基和氨基的解离状态而影响酶的活性。答案：(1)开水使血中的蛋白质变性而沉淀，难以清洗蛋白酶丙碱性条件下只有蛋白酶丙有活性(2)不合理蛋白酶会降解脂肪酶(3)羧基和氨基[高考VS,教材][人教选修1]P46【借题发挥】理清教材，突破高考的瓶颈——长句描述类题型问题1：植物有效成分提取的方法及适用条件。答案：①蒸馏法：适于提取挥发性强的芳香油。②压榨法：可以解决原料易焦糊问题。③萃取法：提取易溶于有机溶剂的芳香油。问题2：乙醇、丙酮不宜作胡萝卜素萃取剂的缘由是什么？答案：萃取胡萝卜素有机溶剂必备如下特点：具较高的沸点，能够充分溶