新教材高中生物选择性必修3课件：1 2 2 微生物的选择培养和计数(人教版)

第2课时

微生物的选择培养和计数1.阐明微生物选择培养的原理。2.进行土壤中分解尿素的细菌的分离和计数。学习目标一、选择培养基、微生物的选择培养和数量测定二、探究·

实践——土壤中分解尿素的细菌的分离与计数网络构建课时对点练内容索引一、选择培养基、微生物的选择培养和数量测定1.选择培养基(1)自然界中目的菌的筛选①实例：聚合酶链式反应(PCR)中用到的耐高温的DNA聚合酶，就是从热泉中筛选出来的

中提取出来的。②依据：水生栖热菌能在

的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。教材梳理预习新知夯实基础水生栖热菌70～80℃(2)实验室中目的菌的筛选①原理：人为提供有利于

生长的条件(包括营养、温度和pH等)，同时

其他微生物的生长。②方法：利用选择培养基分离。选择培养基：允许

的微生物生长，同时

其他种类微生物生长的培养基。目的菌抑制或阻止特定种类抑制或阻止2.微生物的选择培养(1)方法：对样品进行充分稀释，然后将

涂布到制备好的

培养基上。(2)稀释涂布平板法的操作过程①系列稀释操作菌液选择a.编号为1×102～1×107试管中分别盛有9mL

。b.将

g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。c.取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。无菌水10②涂布平板操作取菌液：取0.1mL菌液，滴加到

表面

↓涂布器消毒：将涂布器浸在盛有

的烧杯中

↓涂布器灭菌：将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、

涂布器

后，再进行涂布

↓培养基酒精冷却涂布平板：用涂布器将

均匀地涂布在培养基表面。

涂布时可转动培养皿，使涂布均匀菌液(3)培养：待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板

，放入__________中培养1～2d。倒置恒温培养箱3.微生物的数量测定(1)稀释涂布平板法①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个

。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少

。②计数原则：一般选择菌落数为

的平板进行计数。样品的稀释度将直接影响平板上的菌落数目，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养。在一同稀释度下，应至少对

个平板进行重复计数，然后求出

。活菌活菌30～3003平均值③注意事项：统计的菌落数往往比活菌的实际数目

，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是

菌落。因此，统计结果一般用

而不是用活菌数来表示。(2)显微镜直接计数法一种常用的、快速直观的测定微生物数量的方法。该方法利用特定的细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下观察、计数，然后再计算一定体积的样品中微生物的数量，统计的结果一般是

的总和。少一个菌落数活菌数和死菌数(1)选择培养基只允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物的生长(

)(2)以尿素为唯一氮源的培养基是选择培养基(

)(3)脲酶能催化尿素分解产生N2，N2可作为细菌生长的氮源(

)判断正误√√×探讨点微生物的选择培养和计数1.通常1g土壤中有几亿到几百亿个土壤微生物，其中，细菌的数量最多，能分解尿素的细菌是其中的一部分。如何设计培养基的配方，从而将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来？核心探讨突破重难强化素养提示设计一种选择培养基，用尿素作为唯一氮源，可以将分解尿素的细菌分离出来。2.用平板划线法接种培养结果的图片如下。请结合图片分析，平板划线法能否达到对细菌进行计数的目的？为什么？提示不能，平板划线法最开始的划线很可能菌类会长成一片，导致无法计数，此外灼烧接种环的时候也会杀死一部分菌类。3.当菌液稀释倍数足够高时，培养基表面生长的一个单菌落来源于一个活菌。用稀释涂布平板法接种培养结果的图片如下。与平板划线法相比，为什么稀释涂布平板法可以用于细菌的计数？提示稀释涂布平板法会进行等比稀释，在合适的稀释倍数下，均匀涂布得到的菌落互不接触，可以确定菌类的密度，再通过计算可以得知原液的菌落数。4.请计算：4号试管的结果表明每克土壤中的活菌数约为

个。1.1×1085.通过稀释涂布平板法统计的细菌的数目与它的实际数目相同吗？提示统计的细菌数往往比活菌实际数目低。因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。6.对稀释涂布平板法和显微镜直接计数法进行比较项目显微镜直接计数法稀释涂布平板法主要用具显微镜、_____________

等培养基等计数依据菌株本身培养基上的

数优点计数方便、操作简单计数的都是活菌缺点死菌、活菌都计数在内操作复杂、有一定误差血细胞计数板或细菌计数板菌落1.两种纯化方法的比较核心归纳主要方法平板划线法稀释涂布平板法主要步骤接种环在固体培养基表面连续划线系列梯度稀释操作和涂布平板操作接种工具接种环涂布器能否用于计数不能计数可以计数，但是操作复杂，需涂布多个平板培养结果

共同点都能将微生物分散到固体培养基表面，以获得单细胞菌落，达到分离纯化微生物的目的，也可用于观察菌落特征2.稀释涂布平板法操作注意问题(1)稀释操作时：每支试管及其中的9mL水、移液管等均需灭菌；操作时，试管口和移液管应在离火焰1～2cm处。(2)涂布操作中的注意事项①涂布器浸在体积分数为70%的酒精中，取出时，让多余酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在火焰上灼烧。②不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精。(3)同一稀释度的样液加到三个或三个以上的平板上，经涂布、培养，计算出菌落平均数。(4)计算公式每克样品中的菌株数稀释倍数1.(2021·沂源县第二中学高二期中)下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的叙述，正确的是A.实验中采集的土样经高温灭菌后，可以用于制取土壤稀释液B.分离土壤中能分解尿素的细菌时，应选择以尿素为唯一氮源的培养基C.利用显微镜进行直接计数时，可使用普通的载玻片完成计数D.接种土壤微生物稀释液时，平板划线法通过连续划线的操作使微生

物均匀分布典题应用及时反馈知识落实√解析在分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，土样中的微生物被杀死，再制取土壤稀释液接种并培养，不会得到菌落，A错误；利用显微镜进行直接计数时，需要使用细菌计数板或血细胞计数板，C错误；接种土壤微生物稀释液时，稀释涂布平板法通过涂布器的操作使微生物均匀分布，D错误。2.下图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图，下列有关叙述错误的是A.在配制步骤②③的培养基时，应先调pH后湿热灭菌B.步骤③纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散，以获得单菌落C.步骤③采用稀释涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素D.步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较不同种细菌分解尿素的

能力√解析步骤③筛选分解尿素细菌的培养基中，应以尿素为唯一氮源，不能含有其他氮源，C错误。二、探究·实践——土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教材梳理预习新知夯实基础1.实验设计(1)土壤取样①土壤要求：酸碱度接近中性且潮湿。②取样部位：距地表约

的土壤层。(2)样品的稀释测定土壤中细菌的数量，一般选用

倍稀释的稀释液进行平板培养，当第一次做这个实验时可以将稀释的范围放

一点。3～8cm1×104、1×105和1×106宽(3)微生物的培养与观察①培养：根据不同微生物的需要，控制适宜的培养

和培养时间。细菌一般在

℃的温度下培养

d。②观察a.观察方法：每隔

h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。b.记录菌落的特征：包括菌落的

、

和

等。温度30～371～224形状大小颜色2.操作提示(1)无菌操作①取土样的用具在使用前都需要

。②实验操作均应在

进行。(2)做好标记：本实验使用的平板和试管较多，为避免混淆，最好在使用前做好标记。例如，在标记培养皿时应该注明组别、培养日期和平板上培养样品的

等。(3)制定计划：对于耗时较长的生物实验，需要事先规划时间，以便提高

，在操作时有条不紊。灭菌火焰旁稀释度实验效率(1)稀释涂布平板法能分离细菌，也能计数(

)(2)测定不同微生物数量时，接种的土壤稀释液的稀释度相同(

)(3)菌落特征是鉴别菌种的重要依据(

)(4)利用显微镜直接计数法统计的细菌数量就是活菌的数量(

)判断正误√×√×探讨点土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1.甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下两种统计结果。(1)甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230，该同学的统计结果

(填“可靠”或“不可靠”)，若不可靠，应如何改进？核心探讨突破重难强化素养不可靠提示为增加实验的说服力与准确性，应设置重复实验，在同一稀释度下至少涂布3个平板，统计结果后计算平均值。(2)乙同学在该浓度下涂布了3个平板，统计的菌落数分别为21、212、256，该同学将21舍去，然后取平均值。该同学对实验结果的处理____

(填“合理”或“不合理”)。微生物计数时，如果实验中出现重复实验的结果差别很大的情况，应

，找出差异的原因，而不能简单地将结果舍弃后进行计数。不合理分析实验过程中可能的影响因素2.尝试完成下表中对微生物的分离与计数实验结果的分析。目的现象结论是否有杂菌污染的判断_________________________未被杂菌污染培养物中菌落数偏高被杂菌污染培养物中菌落形态多样，菌落数偏高培养物中混入其他杂菌选择培养基是否起筛选作用牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目大于选择培养基上的数目选择培养基

筛选作用对照的培养基中无菌落生长具有3.利用尿素作为唯一氮源的培养基分离出的微生物都是能分解尿素的微生物吗？提示不一定。因为有些微生物可以利用尿素分解菌的代谢产物进行生长繁殖。土壤中分解尿素的细菌的分离与计数操作中需注意的问题(1)为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。(2)恰当的稀释度是成功统计菌落数目的关键。(3)为增强实验说服力与准确性，设计实验时，需要涂布至少三个平板作为重复组，目的是排除实验中偶然因素对实验结果的影响。(4)分析实验结果时，要考虑重复组结果是否接近，如果相差太大，意味着操作有误，需重新实验。(5)为防止培养时间不足导致菌落遗漏，在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。(6)统计的菌落数目往往比活菌实际数目低。核心归纳3.下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验操作的叙述，错误的是A.利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键是有恰当的稀释度B.若要判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置未接种的牛肉膏

蛋白胨培养基作为对照C.该实验应采用稀释涂布平板法D.用以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基来培养该细菌后

不会使酚红指示剂变红典题应用及时反馈知识落实√解析利用稀释涂布平板法估算菌落数目的关键是有恰当的稀释度，若稀释倍数太低、菌落太多，会连在一起，稀释倍数太高，平板上菌落数目过少，都不宜进行计数，A正确；若要判断选择培养基是否起到了选择作用，需设置接种在没有选择作用的牛肉膏蛋白胨培养基上培养作为对照，B错误；分解尿素的细菌能合成脲酶，将尿素分解产生氨，使培养基的碱性增强，用以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基来培养该细菌，能维持pH稳定，不会使酚红指示剂变红，D正确。4.用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中得到以下几种统计结果，其中正确的是A.涂布了1个平板，统计的菌落数是230B.涂布了2个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238C.涂布了3个平板，统计的菌落数分别是13、234和254，取平均值167D.涂布了3个平板，统计的菌落数分别为210、240和250，取平均值233√解析A、B项中只涂布了1个和2个平板，所以A、B错误；C项虽涂布了3个平板，但是，其中1个平板的计数结果与另两个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，数据重复性差，不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值，C错误；D项涂布了3个平板，并且数据接近，可重复性强，D正确。网络构建课时对点练题组一选择培养基和微生物的选择培养1.(2021·山西大同月考)分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是对点训练1234567891011121314151617选项尿素琼脂葡萄糖硝酸盐A＋＋＋＋B－－－－C＋＋＋－D＋－－＋注：“＋”表示加入，“－”表示不加。√解析分离土壤中分解尿素的细菌，应在固体培养基中培养，培养基中要有碳源，且尿素作为唯一的氮源，故不能添加硝酸盐。12345678910111213141516172.尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制选择培养基时A.葡萄糖在培养基中越多越好B.尿素分解菌有固氮能力，故培养基中只需无机氮C.尿素在培养基中越少越好D.尿素分解菌无固氮能力，故培养基中的尿素为化合态氮12345678910111213151617√14解析葡萄糖在培养基中并不是越多越好，葡萄糖过多会使培养基的渗透压过高，不利于尿素分解菌的生长繁殖，A错误；尿素分解菌没有固氮能力，故培养基中需要添加尿素作为氮源，B错误；添加尿素的目的是筛选尿素分解菌，其他微生物不能很好地生活在该培养基上，尿素在培养基中不是越少越好，过少就会失去选择作用，过多又会使细胞失水死亡，C错误。12345678910111213151617143.平板划线法和稀释涂布平板法是接种微生物的两种常用方法，下列描述正确的是A.采用稀释涂布平板法获得的菌落数往往多于实际的活菌数B.平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环连续划在固体培养基表面C.稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基中进行培养D.与平板划线法相比，稀释涂布平板法形成单菌落的效果更好1234567891011121315161714√解析由于两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以利用稀释涂布平板法获得的菌落数往往少于实际的活菌数，A错误；平板划线法不需要稀释菌液，是将菌液通过接种环连续划在固体培养基表面，B错误；稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液涂布到固体培养基中进行培养，C错误。12345678910111213151617144.(2021·夏津第一中学高二月考)尿素分解菌可将土壤中的尿素分解成CO2和NH3供植物利用。下列关于土壤中尿素分解菌的分离和计数的叙述，错误的是A.尿素分解菌能分解尿素是因为能合成脲酶B.培养尿素分解菌时，培养基中需要加入氮源C.用稀释涂布平板法接种后，培养基上会出现单个的尿素分解菌D.利用平板划线法对细菌进行计数1234567891011121315161714√解析平板划线法能对细菌分离纯化，但是不能计数，D错误。5.(2021·夏津第一中学高二月考)下图表示探究高效耐低温原油降解菌YF28－1(8)降解原油的最适温度实验的结果，5组实验中的温度t1～t5逐渐递增。下列相关叙述正确的是1234567891011121315161714A.对本实验中使用的接种工具——接种环采用灼烧灭菌法灭菌B.实验中应注意控制温度、接种的菌液量等无关变量C.温度为t1的培养皿为对照组，其他4组均为实验组D.若要确定更精确的最适温度，应在t2～t4内设置更小的温度梯度√解析分析题图可知，图中平板上的菌落均匀分布，说明使用的接种方法是稀释涂布平板法，使用的接种工具是涂布器而非接种环，A错误；该实验探究原油降解菌降解原油的最适温度，因此温度在本实验中为自变量，接种的菌液量为无关变量，B错误；实验中五组的温度都不同，该五组均为实验组，不同实验组之间相互对照，C错误。12345678910111213151617146.(2021·辽宁高二期中)地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中40%～60%能被土壤中的某些微生物分解利用，这是因为他们能够产生纤维素酶。研究者从牛的瘤胃中筛选产生纤维素酶的纤维素分解菌，其筛选过程如图1所示。将丙中的菌悬液转接于含有纤维素作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用刚果红处理，看到如图2所示情况。下列有关叙述正确的是1234567891011121315161714A.甲试管中的液体是液体培养基，作用是富集培养，②过程是为了筛

选单菌落B.Ⅰ号培养基属于选择培养基，除需加入纤维素外，还需加入硝酸铵为

其提供氮源C.Ⅱ号培养基属于固体培养基，制备时应先灭菌再调节pHD.可挑取图2中周围不出现透明圈的菌落，用平板划线法继续纯化1234567891011121315161714√12345678910111213151617解析甲试管中的液体是无菌水，不是液体培养基，目的是对样品进行稀释，A错误；可挑取图2中周围出现透明圈的菌落，用平板划线法继续纯化，D错误。14题组二微生物的数量测定7.如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验中样品稀释示意图。据图分析错误的是1234567891011121315161714A.3号试管中样品液的稀释倍

数为104倍B.对4号试管中的稀释液进行

平板培养得到的菌落平均

数可能恰为5号试管的10倍C.5号试管的结果表明每克土壤中的活菌数为1.7×108D.该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低√解析5号试管的结果表明每克土壤中活菌数为(168＋175＋167)÷3÷0.1×106＝1.7×109，C错误；1234567891011121315161714用这种计数方法得到的结果往往比活菌的实际数目低，因为有可能多个细菌形成一个菌落，D正确。8.(2021·山东日照高二期中)研究小组利用稀释涂布平板法来探究土壤中分解尿素的细菌的数量。每一个浓度涂布四个平板，并且设置空白对照组。下列关于操作步骤的叙述正确的是A.涂布前，将沾有少量酒精的涂布器在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布

器冷却后，再进行涂布B.涂布完成后，在培养皿的皿盖上做标记，以避免混淆，并将培养皿倒

置培养C.计算平板上的菌落数时，四个培养皿上的菌落数无论多少，都要全部

统计并计算平均值D.若空白对照组上有5个菌落，则实验组数据基础上减去5，以获得最准

确数据1234567891011121315161714√解析涂布完成后，在培养皿的皿底做标记，B错误；若空白对照组上有5个菌落，说明培养基灭菌不彻底，需要重新进行实验，D错误。12345678910111213151617149.(2021·天津静海一中高二月考)下列有关微生物分离、纯化、计数及培养的叙述中，正确的是A.测定土壤中细菌的数量，一般选用1×104、1×105、1×106倍稀释的

稀释液进行平板培养B.菌落的大小、颜色、有无荚膜、隆起程度等特征都可作为菌种鉴定的

依据C.用血细胞计数板计数微生物时，实验结果往往偏小D.将好氧型菌株接种到培养液中需静置培养，防止培养液沾染试管壁

引发污染1234567891011121315161714√解析菌落的大小、颜色、隆起程度等特征都可作为菌种鉴定的依据，但是有无荚膜通过肉眼无法观察，B错误；用血细胞计数板计数微生物时，因死菌、活菌都计算在内，因此，实验结果往往偏大，C错误；将好氧型菌株接种到培养液中需振荡培养，D错误。123456789101112131516171410.(2021·山东泰安高二期中)研究小组为了探究覆盖保鲜膜对西瓜表面微生物的种类和数量的影响，他们将覆盖保鲜膜保存了三天的西瓜的瓜瓤制备成浸出液，再将浸出液接种到培养基平板上进行观察。下列说法正确的是A.应用液体培养基接种浸出液进行培养B.应采用平板划线法对浸出液进行接种C.每组至少设置三个平板，确保实验结果的准确性D.只需要设置未接种瓜瓤浸出液的空白平板作对照1234567891011121315161714√解析要探究微生物种类和数量的变化，应采用固体培养基，用稀释涂布平板法进行接种，液体培养基无法观察到菌落，不便区分微生物种类，平板划线法不能对微生物进行计数，A、B错误；每组至少设置三个平板，避免偶然性，确保实验结果的准确性，C正确；对照组还需要设置接种没有覆盖保鲜膜的西瓜的瓜瓤浸出液，D错误。123456789101112131516171411.(2021·山东潍坊市高二期中)青霉素一般只对革兰氏阳性菌有作用，利用滤纸条法可测定青霉素的抑菌情况，方法如下图。下列分析错误的是综合强化A.青霉素是由青霉菌产生的次级代谢

产物，可分泌到培养基中B.滤纸条周围已被抑制的区域不会再

出现菌落C.青霉素对大肠杆菌几乎不起作用，推测大肠杆菌可能不属于革兰氏

阳性菌D.相对于枯草芽孢杆菌，青霉素对金黄色葡萄球菌的抑制作用更明显1234567891011121315161714√12.图甲所示是稀释涂布平板法中的部分操作，图乙所示是平板划线法的操作结果。下列相关叙述错误的是A.图甲中涂布前要将涂布器

灼烧，冷却后才能涂布菌液B.对于浓度较高的菌液，若

图甲中的最高稀释倍数仅

为102，则所得到的菌落

不一定是由单一的细胞繁殖而成的C.图乙所示培养皿中每个划线区域都可得到符合要求的菌落D.图乙中连续划线的起点是上一次划线的末端(除第一次划线外)1234567891011121315161714√解析平板划线法中多次划线的目的是降低菌种浓度，经过连续划线才有可能得到由单一的细胞繁殖而成的菌落，这种菌落才符合要求，C错误。123456789101112131516171413.下图表示从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。下列与该实验相关的叙述中不正确的是1234567891011121315161714A.实验中所用的培养基①②③④均属于选择培养基B.图中Ⅰ、Ⅱ过程实现了对目标微生物的稀释C.统计⑤处培养基中的菌落数并不一定代表接种到④上的活菌数D.在⑤处培养基上形成菌落的微生物同化作用类型为异养型√1234567891011121315161714图中Ⅰ、Ⅱ过程为选择培养，目的是增大所分离的微生物的浓度，B项错误；⑤处的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，C项正确；所分离的微生物利用现成的有机物生长繁殖，所以该微生物的同化作用类型为异养型，D项正确。解析该实验的目的是从土壤中分离能降解对羟基苯甲酸的微生物，所以使用的培养基为选择培养基，A项正确；14.某生物兴趣小组尝试对土壤中分解尿素的细菌进行分离并计数，下列相关叙述正确的是A.制备选择培养基时，需加入尿素、琼脂、葡萄糖、硝酸盐等物质B.用稀释涂布平板法统计活菌数目时，活菌的实际数目往往比统计的菌

落数低C.脲酶将尿素分解成氨使培养基的pH降低，加入酚红指示剂后变红D.细菌一般在30～37℃的温度下培养1～2d1234567891011121315161714√12345678910111213151617解析分离土壤中分解尿素的细菌，培养基中要加尿素(唯一的氮源)、琼脂(凝固剂)、葡萄糖(提供碳源)，尿素给分解尿素的细菌提供氮源，不能加硝酸盐，A错误；用稀释涂布平板法统计活菌数目时，有的活菌在培养过程中会死亡，而有的菌落是由多个活菌共同形成的，统计的菌落数偏小，故活菌的实际数目往往比统计的菌落数高，B错误；脲酶将尿素分解成氨使培养基的pH升高，加入酚红指示剂后变红，C错误。1415.筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后，若细菌能分解淀粉，培养平板经稀碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈(如图)，实验结果见下表。1234567891011121315161714菌种菌落直径：C(mm)透明圈直径：H(mm)H/C细菌Ⅰ5.111.22.2细菌Ⅱ8.113.01.6下列有关本实验的叙述，错误的是A.培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质B.筛选分解淀粉的细菌时，菌液应稀释后涂布C.以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外D.H/C值反映了两种细菌分解淀粉能力的差异1234567891011121315161714√解析培养基一般含有碳源、氮源、水、无机盐等成分，A正确；筛选淀粉分解菌时，需要对菌液进行一系列的梯度稀释，再将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基上进行培养，B正确；由题意可知，以上两种细菌均会产生透明圈，说明两种细菌均可以产生淀粉酶并分泌到细胞外分解淀粉，C错误；淀粉分解菌的H/C越大，说明其产生的淀粉酶分解的淀粉相对越多，可说明该淀粉分解菌分解淀粉的能力越强，D正确。123456789101112131516171416.奶牛的瘤胃中有大量的尿素分解菌。现有科学小组利用屠宰场提取的奶牛瘤胃内容物，对其进行分离计数，过程如下图。请据图分析并回答下列相关问题：1234567891011121315161714(1)将5g内容物加入

mL无菌水制成滤液，并继续进行系列浓度梯度稀释。取不同浓度稀释液各0.1mL，用稀释涂布平板法接种到培养基上，需在无氧条件下培养，原因是___________________________。若在稀释倍数为105的三个培养基中，菌落数分别是151、164、180，则每克内容物中尿素分解菌的数目为

个。123456789101112131516171445瘤胃中的尿素分解菌为厌氧型1.65×108(2)配制培养基时，除以

作为唯一氮源外，还需加入的营养成分有

，不能利用尿素的微生物不能生长，该培养基属于

，制成培养基一般需要经过_________________________灭菌，倒平板时培养基温度一般冷却至

左右。1234567891011121315161714尿素碳源、水和无机盐选择培养基高压蒸汽灭菌法(湿热灭菌法)50℃(3)上述培养基可以选择分离出尿素分解菌，若要通过实验证明该培养基具有选择作用，请简单说明实验设计思路____________________________________________