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文档简介
生长的菌落我们如何用微生物来制作出这样美丽的艺术作品呢?发酵工程的培养基1认识菌落2培养基的类型3配制培养基本节内容认识菌落前言菌落单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度后形成的肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。观察各种微生物形成的菌落几种菌落及其形态几种菌落及其形态培养基的类型第二部分123培养基都包括哪些成分?培养基都有哪些类型?它们的主要区别在哪里?说一说
培养基(培养液)主要是指为人工培养微生物等而制备的,适合微生物等生长、繁殖或积累代谢产物的营养基质。1.培养基内所含的基本物质最基本的物质(1)水(2)碳源(3)氮源(4)无机盐以及生长因子、氧气、二氧化碳、渗透压、PH等的特殊要求
★碳源★
凡能提供碳元素的物质可作为碳源的物质有:无机碳源:、、有机碳源:蛋白质脂肪酸碳酸盐碳酸氢盐糖类(主要)葡萄糖乳糖二氧化碳不同微生物所利用的碳源不同异养型微生物的碳源为自养型微生物的碳源为含碳有机物(有机碳)含碳无机物(无机碳)作用:构成微生物体的重要成分,也是微生物生命活动的能源物质。★氮源★
凡能提供氮元素的物质可作为氮源的物质有:无机氮源:、、、有机氮源:蛋白胨牛肉膏尿素固氮微生物所利用的氮源是氮气氨气硝酸盐氨盐氮气作用:构成微生物细胞中蛋白质、核酸的主要元素。★生长因子★细菌生长必需,而自身不能合成的微量有机物如:维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶等作用:合成酶和核酸★水★
在生物体内含量很高的无机物作用:不仅是优良的溶剂,而且可维持生物大分子结构的稳定★无机盐★为微生物提供除碳、氮外的各种重要元素作用:细胞的组成成分、生理调节物质、某些化学自养菌的能源、酶的激活剂指出下列培养基配方中的碳源、氮源分别什么?2.培养基的类型和用途(1)按化学成分来分,可分为天然培养基和合成培养基。(2)按物理性质来分:培养基可分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基。其中固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等,而液体培养基一般用于工业生产。(3)按用途来分,可分为基础培养基和特殊培养基(4)按功能(特殊用途)来分,可分为选择培养基、鉴别培养基、加富培养基。按化学成分来分天然培养基有血清、血浆、和组织提取液(如鸡胚和牛胚浸液)。优点:取材便利、营养丰富、配制简便、培养效果好缺点:来源受限、营养成分复杂难以控制、实验结果的重复性差,影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析天然培养基:适用于工业化生产按化学成分来分根据细胞生存所需物质的种类和数量,用人工方法模拟合成的。合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。优点:化学成分和含量明确、实验的可重复性好缺点:成本较高、配制过程繁琐、缺少某些成分,不能完全满足体外细胞生长需要。合成培养基:用于研究和育种液体培养基:表面生长均匀混浊生长沉淀生长按物理状态来分增菌、工业生产固体培养基:菌落,菌苔按物理状态来分纯化(分离)鉴定活菌计数保藏菌种半固体培养基:无动力有动力(弥散)观察细菌的运动、厌氧菌的分离和菌种鉴定、保存按物理状态来分琼脂选择培养基加入10%的酚溶液:抑制细菌和霉菌的生长,分离放线菌加入亚硫酸铋:分离出伤寒沙门氏菌加入青霉素、四环素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基:分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基:分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物按功能来分鉴别培养基1可溶性淀粉培养基一些微生物可以产生胞外淀粉酶,将样品微生物培养在添加可溶性淀粉的培养基中,如果其菌落周围形成淀粉水解圈,可用来鉴定产淀粉酶的菌株。按功能来分鉴别培养基2溴甲基紫培养基一些微生物可以产生乳酸、醋酸或丙酸等代谢产物,与溴甲基紫发生颜色反应由紫色转为黄色。常用溴甲基紫培养基鉴别产酸微生物。鉴别培养基3伊红美蓝培养基当大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成红色,再与美蓝结合形成紫黑色菌落,并带有金属光泽。常用的伊红美蓝乳糖培养基,可用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌。鉴别培养基4尿素为唯一氮源的培养基在以尿素为唯一氮源的培养基加入酚红指示剂,培养某种细菌后,细菌合成的脲酶可以将尿素分解成氨,氨会使培养基的碱性增强,使PH升高,从而使酚红指示剂变红。以鉴定这种细菌能否分解尿素。刚果红是一种染料,能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素分解菌分解后,刚果红-纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。鉴别培养基5刚果红纤维素培养基加富培养基在培养基中加入有利于某些微生物生长和繁殖所需的特殊物质,如血液、血清、酵母浸膏、动植物组织液。一般适用于培养要求比较苛刻的异养微生物。从某种意义上来说,加富培养基类似于选择培养基:加富培养基是增加所需分离的微生物的数量;选择培养基是抑制不需要的微生物生长和繁殖。血清中含有:①多种蛋白质(白蛋白、球蛋白、铁蛋白等)②多种金属离子;③激素;④促贴附物质,如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。⑤各种生长因子⑥转移蛋白⑦不明成分人工合成培养基只能维持细胞生存,要想使细胞生长和繁殖,还需补充一定量的天然培养基(如血清)。3.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方细菌喜荤,真菌喜素大肠杆菌配方酵母提取物:0.25g蛋白胨:0.5gNacl:0.5g琼脂:1g水:50ml酵母菌、霉菌常用培养基麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基☆依据微生物的生长需要确定培养基的成分和含量1.关于配制培养基的有关叙述中,正确的是(
)A.制作固体培养基必须加入琼脂B.一般常用的是固体培养基C.氮源主要是为微生物提供能量D.牛肉膏只为微生物提供氮元素B随堂练习2.下表为某培养基的配方,下列叙述正确的是(
)成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊红美蓝蒸馏水含量10g10g2g0.4g0.065g1000mLA.从物理性质看该培养基属于液体培养基,从用途看该培养基属于选择培养基B.该培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖,属于氮源的物质是蛋白胨C.该培养基缺少提供生长因子的物质D.该培养基调节合适的pH后就可以接种使用B配制马铃薯葡糖糖琼脂培养基第三部分1.培养基配制原则①目的要明确:根据培养的微生物种类、培养的目的等确定培养基的类型和配制量。②营养要协调:培养基中各种营养物质的浓度和比例要适宜。例如:碳氮比4∶1时,谷氨酸棒状杆菌大量繁殖而产生谷氨酸少;碳氮比为3∶1时,菌体繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。③pH要适宜:细菌培养基pH中性或偏碱性,霉菌培养基呈酸性。2.配置培养基的步骤:1.配制培养基2.调节pH3.分装4.包扎5.灭菌6.搁置斜面7.无菌
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