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文档简介
细胞工程植物体细胞杂交植物组织培养动物细胞融合动物细胞培养动物体细胞核移植动物细胞工程植物细胞工程胚胎工程胚胎工程的理论基础胚胎工程技术及其应用第1节动物细胞工程(第一课时)动物细胞培养第二章细胞工程从社会中来在治疗大面积烧伤时,通常采用的办法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说,自体健康皮肤非常有限,使用他人皮肤来源又不足,而且产生免疫排斥反应。
那么,怎样才能获得大量的自体健康皮肤?能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤?可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行动物细胞培养、扩增。目前,科学家还在研究对皮肤干细胞进行培养,以获得临床上使用的人造皮肤本节聚焦1、动物细胞培养需要哪些基本条件?2、动物细胞培养的基本操作过程是什么?3、怎样客观分析干细胞在临床上的应用所产生的效益与风险动物细胞培养
从动物体中取出相关组织,将它们分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖。胚胎或幼龄动物(因为细胞代谢旺盛,分裂能力强)动物细胞工程的基本技术细胞增殖地位原理培养对象动物细胞培养动物细胞培养条件动物细胞培养的过程干细胞培养及其应用动物细胞培养动物细胞培养条件:
无菌无毒的环境营养温度、PH和渗透压气体环境·糖类、氨基酸、无
机盐、维生素等·合成培养基·动物血清·无菌操作·培养液定期更换·温度多以36.5±0.5℃·PH为7.2~7.4·所需气体主要有O2和CO2,O2是细胞代谢所必需的,CO2主要维持培养液的PH。·95%空气+5%CO2的CO2培养箱动物细胞培养过程
取动物组织
用培养液制成细胞悬液培养瓶(原代培养)将组织分散成单个细胞机械方法胰蛋白酶胶原蛋白酶
CO2培养箱中培养体外培养的动物细胞分类贴壁生长悬浮生长(出现接触抑制现象)注意:正常细胞在培养瓶的瓶壁上形成的是单层细胞;癌变细胞没有接触抑制现象,可以在培养瓶壁上形成多层细胞思考·可以用胃蛋白酶
吗?·胰蛋白酶长时间
作用可以吗动物细胞生长特性细胞贴壁将动物组织处理后的初次培养(10代内)。
原代培养当原代培养的细胞贴满瓶壁时,重新用胰蛋白酶处理,使细胞从瓶壁脱落,加培养液制成细胞悬液,分装到2个或2个以上的培养瓶中继续培养(10代后)。传代培养分瓶培养10代细胞50代细胞无限增殖保持细胞正常二倍体核型部分细胞核型改变遗传物质改变突破细胞寿限危机1危机2培养危机原代培养传代培养(遗传物质没改变)(遗传物质有的改变)下列对动物细胞培养与植物组织培养的叙述正确的是()A.动物细胞培养所用的培养基的成分与植物的不同B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行C.动物细胞培养过程中可发生基因重组,而植物组织培养不能D.植物组织培养和动物细胞培养都体现了细胞的全能性A试一试动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液胰蛋白酶10代细胞50代细胞无限传代单个细胞加培养液植物组织培养和动物细胞培养的比较离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织根、芽植物体脱分化再分化动物细胞培养植物组织培养比较项目植物组织培养动物细胞培养原理培养基性质培养基特有成分取材培养结果培养目的相同点获得细胞及代谢产物细胞的全能性新的细胞群,不形成个体,不体现动物细胞的全能性完整的植株快速繁殖、培育无病毒植株等葡萄糖、动物血清蔗糖、植物激素液体培养基固体培养基细胞增殖植物幼嫩部位或花药动物组织块①培养过程中都进行有丝分裂,无减数分裂②均需无菌操作,需要适宜的温度、PH等条件干细胞
一定条件下,干细胞可以分化成其他类型的细胞。存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中,包括胚胎干细胞和成体干细胞等。干细胞胚胎干细胞:存在于早期胚胎中,具有分化为成年动物体内的
任何一种类型的细胞,并进一步形成机体的所有
组织和器官甚至个体的潜能成体干细胞造血干细胞:存在骨髓、外周血、脐带血,
可分化为各种血细胞和免疫细胞神经干细胞:存在于神经系统,分化为神经细胞精原干细胞:存在睾丸(只能分化成特定的细胞或组织,不具有发育成完整个体的能力)体外诱导小鼠成纤维细胞诱导多能干细胞(iPS)临床治疗人类疾病,如:白血病、帕金森病、阿而茨海默病、心血管疾病等多种体细胞定向诱导分化胚胎干细胞应用移植取成纤维细胞等iPS细胞转入相关因子细胞发生转化分化病人胰岛细胞神经元血细胞肠上皮细胞心肌细胞肝细胞iPS细胞用于治疗人类疾病示意图思考iPS细胞移植回病人体内,会不会发生免疫排斥反应?科学家将人体皮肤细胞改造成了多能干细胞——“iPS细胞”,人类“iPS细胞”可以形成神经元等人体多种组织细胞。以下有关“iPS细胞”的说法,正确的是 (
)A.“iPS细胞”分化为神经细胞的过程体现了细胞的全能性B.“iPS细胞”有细胞周期,它分化形成的神经细胞一般不具有细胞周期C.“iPS细胞”可分化形成多种组织细胞,说明“iPS细胞”在分裂时很容易发生突变D.“iPS细胞”分化成人体多种
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