重组DNA技术的基本工具课件-高二下学期生物人教版选择性必修33

第3章基因工程第1节重组DNA技术的基本工具1944年艾弗里等人通过肺炎链球菌的转化实验，不仅证明了遗传物质是DNA，还证明了DNA可以在同种生物个体间转移。1961年尼伦伯格和马太破译了第一个编码氨基酸的密码子。截至19666年，64个密码子均被破译成功。1970年科学家在细菌中发现了第一个限制性内切核酸酶（简称限制酶）1972年，伯格首先在体外进行了DNA的改造，成功构建了第一个体外重组DNA分子。1982年，第一个基因工程药物-重组人胰岛素被批准上市。基因工程药物成为世界各国研究和投资开发的热点。1953年沃森和克里克建立了DNA双螺旋结构模型并提出了遗传物质自我复制的假说。1967年，科学家发现，在细菌拟核DNA之外的质粒有自我复制能力，并可以在细菌细胞间转移。20世纪70年代初，多种限制酶、DNA连接酶和逆转录酶被相继发现。这些发现为DNA的切割、连接以及功能基因的获得创造了条件。1973年，科学家证明了质粒可以作为基因工程的载体，并实现了物种间的基因交流。至此，基因工程正式问世。1985年，穆里斯等人发明PCR,为获取目的基因提供了有效手段。

基因工程的发展历程项目S型细菌R型细菌菌落菌体有无毒性表面光滑

表面粗糙

有无多糖类的荚膜肺炎链球菌基因工程基因工程第一组有R型细菌的培养基S型细菌的细胞提取物+第二至四组有R型细菌的培养液S型细菌的细胞提取物+混合混合第五组有R型细菌的培养液S型细菌的细胞提取物+混合DNA酶蛋白酶（或RNA酶、酯酶）S型细菌R型细菌S型细菌R型细菌只长R型细菌实验结论（1）DNA才是使R型细菌产生稳定遗传变化的物质。（2）蛋白质等其他物质不是遗传物质。基因工程基因重组R型细菌转化为S型细菌的实质：S型细菌荚膜控制荚膜形成的X基因加热杀死被破坏的S型细菌X基因吸附在R型细菌表面X基因进入R型细菌重组R型细菌转化成S型细菌DNA具有热稳定性。加热使蛋白质变性失去活性，DNA的结构也会被破坏，但当温度降低到55℃左右时，DNA的结构会恢复，但蛋白质却不能恢复。

基因工程1.基因工程概念：指按照人们的愿望,进行严格的设计并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫作DNA重组技术。操作对象：操作水平：原理：结果：意义：基因（DNA）DNA分子水平基因重组创造出人类需要的新的生物类型和生物产品定向改造生物遗传特性；克服远缘杂交不亲和障碍水母的绿色荧光蛋白基因基因工程2.图解“基因工程实质”转移A生物B生物萤火虫普通动植物发光基因基因工程【问题】为什么不同生物的DNA分子能拼接起来？①DNA分子的基本组成单位相同，都是4种脱氧核苷酸；②空间结构相同，都是规则的双螺旋结构。③都遵循碱基互补配对原则脱氧核糖含氮碱基磷酸DNA平面结构DNA立体结构①基因是控制生物性状的独立遗传单位。②遗传信息的传递都遵循中心法则。③生物界共用一套遗传密码。基因工程【问题】为什么一种生物的基因可以在另一种生物细胞内表达？相同的遗传信息在不同生物体内表达出相同的蛋白质。

转基因木瓜（视频）

番木瓜容易受番木瓜环斑病毒的侵袭。当番木瓜被这种病毒感染后，产量会大大下降。科学家通过精心设计，用“分子工具”培育出了转基因番木瓜，它可以抵御番木瓜环斑病毒。DNA双螺旋的直径只有2nm,对如此微小的分子进行操作，是一项非常精细的工作，更需要专门的“分子工具”。问题:解决培育番木瓜的关键步骤需要哪些分子工具呢？这些“分子工具”各具有什么特征呢？转基因番木瓜基因工程思考：

DNA双螺旋的直径只有2nm,对如此微小的分子进行操作，是一项非常精细的工作，更需要专门的“分子工具”。“分子手术刀”准确切割DNA分子“分子缝合针”“分子运输车”将DNA片段连接起来将体外重组好的DNA分子导入受体细胞二、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”切割DNA分子的工具是限制性内切核酸酶，又称

。限制酶1.来源：主要来自原核生物，可人工合成2.种类：数千种限制酶不是一种酶，而是一类酶。3.作用特点：专一性

能识别

的特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。作用部位一般为4~8个或其他数量的核苷酸，最常见的为6个核苷酸。双链DNA分子二、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”3.作用特点：能识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的

磷酸二酯键断开。限制酶TGCCGTAA5'3'5'3'磷酸二酯键氢键二、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”1’2’3’4’5’

G限制酶1’2’3’4’5’

A磷酸二酯键TGCCGTAA5'3'5'3'二、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”【问题】

你能根据所掌握的知识，推测限制酶存在于原核生物中的主要作用是什么吗？原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，所以它在长期的进化过程中形成了套完善的防御机制。限制酶就是它的一种防御性工具。当外源DNA入侵时，它会利用限制酶来切割外源DNA，使之失效，以保证自身的安全。【思考】为什么限制酶不切割细菌本身的DNA分子含某种限制酶的细菌的DNA分子不具备这种限制酶的识别序列，或者甲基化酶将甲基转移到了限制酶所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。EcoRⅠ5’…G-A-A-T-T-C…3’3’…C-T-T-A-A-G…5’SmaⅠ5’…C-C-C-G-G-G…3’3’…G-G-G-C-C-C…5’BamHⅠ5’…G-G-A-T-C-C…3’3’…C-C-T-A-G-G…5’TaqⅠ5’……T-C-G-A……3’3’……A-G-C-T……5’二、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”在切割部位，一条链正向读的碱基顺序与另一条链反向读的顺序完全一致。4.识别序列：特点1：都可以找到一条中心轴线；特点2：中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向、对称、重复排列的，称为回文序列。思考：四种限制酶识别的特定序列有何特点？总结：能被限制酶所识别的序列一般都有回文序列二、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”5.识别结果：形成黏性末端或平末端(1)产生黏性末端EcoRI识别序列为GAATTC切割部位为GA之间当限制酶在它识别序列的中轴线两侧将DNA分子的两条链分别切开时，产生的是黏性末端。GCAATTTATACG5'3'3'5'GCTTAAAATTCG黏性末端错位切二、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”5.识别结果：形成黏性末端或平末端(1)产生平末端SmaI识别序列为CCCGGG切割部位为CG之间平末端当限制酶在它识别序列的中轴线处将DNA分子的两条链分别切开时，产生的是平末端。CGCCGGGCGCGC5'3'3'5'CGCCGGGCGCGC平切二、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”

EcoRⅠ属名Escherichia首字母种名coli前两个字母R型菌株从中分离的第一个限制酶例如：流感嗜血杆菌(Haemophilusinfluenzae)d株中先后分离到3种限制酶，则分别命名为:HindIHindIIHindIII限制酶的命名【练习1】写出下列限制酶切割形成的黏性末端BamHⅠ________EcoRⅠ________HindⅢ________BglⅡ________

GATCAATTAGCTGATC思考：同种限制酶切割的黏性末端一定相同吗？不同种限制酶切出的黏性末端一定不同吗？①不同DNA分子用同一种限制酶切割形成的黏性末端都相同。【解析：酶具有专一性，识别的序列相同】②不同的限制酶切割可能产生相同的黏性末端。（比如BamHⅠ、BglⅡ）即时练习【练习2】下面哪项不具有限制酶识别序列的特征（）A．GAATTC

CTTAAG

B．GGGGCCCC

CCCCGGGG

C．CTGCAG

GACGTC

D．CTAAATC

GATTTAG

D【练习3】下侧黏性末端是由______种限制酶作用产生的。3即时练习1不能，限制酶只能识别并切开双链DNA分子。（2）限制酶切一次可断开

个磷酸二酯键，产生

个游离的磷酸基团，产生

个黏性末端。要想获得某个特定性状的目的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性(平)末端？222（1）限制酶能切开RNA分子的磷酸二酯键？【练习4】请结合限制酶的作用特点，回答以下问题：要切2个切口，产生4个黏性(平)末端即时练习1二、DNA连接酶——“分子缝合针”用同种限制酶切割(EcoRⅠ)TGAATTCGACTTAAGCAGAATTCTTCTTAAGA把两种来源不同的DNA进行重组，应该怎样处理？缺口怎么办二、DNA连接酶——“分子缝合针”1.概念：将两个双链DNA片段“连接”起来的酶2.作用：将两个DNA片段连接起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。5′3′TACGTACTGAAT5′3′5′3′CGCGCG5′3′CGCGCG切口切口切口CT5′3′5′3′TAGCAGATTA5′3′5′3′CGCGCGCGCGCG注意：1、DNA连接酶可连接双链DNA中的两条单链缺口，但不能连接单链DNA!2、DNA连接酶作用没有特异性。种类来源大肠杆菌T4噬菌体作用注意二、DNA连接酶——“分子缝合针”E.coli

DNA连接酶T4DNA连接酶都能将双链DNA片段“缝合“起来，恢复被限制酶切开的磷酸二酯键。两种连接酶都可连接互补黏性末端与平末端，但E.coliDNA连接酶连接平末端效率远低于T4DNA连接酶二、DNA连接酶——“分子缝合针”AGTCATTCGATA(1)可把平末端或者黏性末端之间的缝隙“缝合”起来；(2)“缝合”黏性末端时两DNA片段要具有互补的黏性末端才能拼起来。TCGATC3.1EcoliDNA连接酶：二、DNA连接酶——“分子缝合针”3.2T4DNA连接酶：既可把黏性末端“缝合”起来，又可把平末端“缝合”起来，连接平末端效率较远高于EcoliDNA连接酶。CCCGGGGGGCCC二、DNA连接酶——“分子缝合针”旁栏思考（P72）：DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？为什么？DNA聚合酶相同点：不同点：都是催化磷酸二酯键形成的酶。DNA聚合酶连接的是游离的脱氧核苷酸，需要模板；DNA连接酶连接的是DNA片段，不需要模板。AATT

GCAATTDNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶二、DNA连接酶——“分子缝合针”旁栏思考（P72）：DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？为什么？DNA聚合酶AATT

GCAATTAATTDNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶只能将单个核苷酸连接到已有的核苷酸链上，形成磷酸二酯键。相同点：不同点：都是催化磷酸二酯键形成的酶。DNA聚合酶连接的是游离的脱氧核苷酸，需要模板；DNA连接酶连接的是DNA片段，不需要模板。二、DNA连接酶——“分子缝合针”4.DNA连接酶与DNA聚合酶比较DNA连接酶DNA聚合酶相同作用实质化学本质不同点模板作用对象作用结果用途都能催化形成磷酸二酯键都是蛋白质

不需要需要DNA的一条链作模板形成完整的重组DNA分子形成DNA的一条链基因工程DNA复制在两个DNA片段间形成磷酸二酯键将单个核苷酸连接到已有DNA片段，形成磷酸二酯键二、DNA连接酶——“分子缝合针”5.几种相关酶的比较名称作用部位作用结果限制酶

DNA连接酶DNA聚合酶DNA(水解)酶解旋酶磷酸二酯键碱基对之间的氢键将DNA切成两个片段磷酸二酯键将两个DNA片段连接为一个DNA分子磷酸二酯键将单个脱氧核苷酸依次连接到单链末端磷酸二酯键将DNA片段水解为单个脱氧核苷酸将双链DNA分子局部解旋为单链1.以下是几种不同限制酶切割DNA分子后形成的部分片段。下列叙述正确的是A.以上DNA片段是由4种限制酶切割后产生的B.②片段是在识别序列为

的限制酶作用下形成的C.①和④两个片段在DNA聚合酶的作用下可形成重组DNA分子D.限制酶和DNA连接酶作用的部位都是磷酸二酯键√①和④相同DNA连接酶即时练习2.DNA连接酶是重组DNA技术中常用的一种工具酶。下列相关叙述正确的是A.能连接DNA分子双链碱基对之间的氢键B.能将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的末端，形成磷酸二酯键C.能连接用同种限制酶切开的两条DNA片段，重新形成磷酸二酯键D.DNA连接酶只能连接双链DNA片段互补的黏性末端√磷酸二酯键DNA片段T4DNA连接酶能连接平末端即时练习三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”为什么需要载体？直接将目的基因导入受体细胞可以吗？不行第一：外源基因不能自己进入细胞，需要载体帮忙。第二：即便能直接把外源基因导入受体细胞，外源基因在细胞内不能进行复制、转录和稳定存在，需要载体帮忙。第三：载体带有标记基因（如抗生素抗性基因），可以帮助科学家找到成功接收外源基因的细胞。三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”请同学们自主阅读教材P72，小组合作思考讨论完成问题。

载体的作用载体的必要条件载体的种类三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”1.作用：2.种类：质粒:动植物病毒:将外源基因导入大肠杆菌等受体细胞将外源基因导入动植物细胞将外源基因导入大肠杆菌等细胞动物病毒噬菌体噬菌体:它们来源不同，在大小、结构、复制方式以及可以插入外源DNA片段的大小上也有很大的差别。（1）将外源基因送入受体细胞，（2）在受体细胞内对目的基因进行大量复制在细胞中自主复制整合至受体DNA上，随受体DNA同步复制。三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”条件①：具有一个或多个限制酶切割位点；条件②：能在受体细胞中进行自我复制，或整合到受体DNA上，随受体DNA同步复制；条件③：具有标记基因，便于重组DNA分子的筛选。条件④：对受体细胞无害。问题3：我们用肉眼看不到载体是否进入受体细胞，为了便于筛选重组DNA分子，载体需要具备什么条件？问题2：要使携带的外源基因在受体细胞中稳定存在，载体需要具备什么条件？问题1：载体要与外源基因连接，需要具备什么条件？供外源基因插入其中使外源基因在受体细胞中稳定存在并复制，以扩增外源基因的数量如四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因等或者荧光蛋白基因3.运载体需具备的条件：三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”质粒含目的基因的DNA片段重组质粒受体细胞导入目的基因分析1：质粒一定能成功导入受体细胞吗？答案：不一定能成功导入，因为载体携带目的基因导入受体细胞的成功率不高。因此需要筛选出导入目的基因的受体细胞。分析2：如何筛选？【模拟】载体将外源基因送入受体细胞的过程三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”载体上的标记基因一般是某种抗生素的抗性基因，而受体细胞没有抵抗该抗生素的能力。将含有某抗生素抗性基因的载体导入受体细胞，抗性基因在受体细胞内表达，受体细胞对该抗生素产生抗性。在含有该抗生素的培养基上，导入了载体并成功表达了的受体细胞才能够生存。如图所示：拓展延伸：标记基因的筛选原理【注意】抗生素抗性基因≠抗生素基因三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”简言之一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的环状双链DNA分子4.最常用的载体——质粒：三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”简言之一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的环状双链DNA分子01在基因工程中真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行人工改造的经过人工改造特殊的标记基因

复制原点

启动子

终止子

目的基因插入位点质粒的组成要素质粒02质粒3.最常用的载体——质粒：三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”请同学们自主阅读教材P72，小组合作思考讨论完成问题。

载体的作用载体的必要条件载体的种类①作为运载工具，将目的基因导入受体细胞中②在受体细胞内对目的基因进行大量复制①能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。②具一个或多个限制酶切点，供外源DNA片段（目的基因）插入其中。③具有某些标记基因，便于进行鉴定和选择。④必须是安全的，对受体细胞无害。①细菌的质粒：质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的环状双链DNA分子。②病毒：λ噬菌体衍生物、动植物病毒等。三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”…TATCGTACGATAGGTACTTAA…ATAGCATGCTATCCATGAATTCGGCATAC…GCCGTATG……TCCTAG…AGGATCTTAAGAGCCATACTTAAAATTCTCGGTATGAATTCCATAC…GGTATG…GAGCCATACTTAAAATTCTCGGTATG5′3′5′3′5′3′5′3′问题:剪刀和透明胶条分别代表哪种“分子工具”？

剪刀代表限制酶；透明胶条代表DNA连接酶。探究‧活动

P73思考讨论

重组DNA分子的模拟操作三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”问题:你制作的黏性末端的碱基能不能互补配对?如果不能，可能是什么原因造成的？可能是剪切位点或连接位点的选择不对（也可能是其他原因）。比如在书写将要重组的两个DNA分子时，一般要求有同一种限制酶的识别和切割位点，这样切割后才会露出相同的黏性末端，否则黏性末端不同，碱基就无法配对。问题:你插入的DNA片段能称得上一个基因吗？

不能。真正的基因是有遗传效应的DNA片段，且含有几百至几千个不等的碱基对。探究‧活动

P73思考讨论

重组DNA分子的模拟操作三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”用相同的限制酶切割目的基因和运载体。产生相同末端，便于连接。问题：目的基因是要与运载体结合的，那如何处理质粒？用DNA连接酶处理后会出现几种产物？(只考虑两两结合)目的基因与目的基因相连质粒与质粒相连三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”正向连接反向连接三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”正向连接反向连接转录方向转录方向模板链模板链反向连接将导致最终表达产物不相同！小结(1)获取目的基因和切割载体时,通常使用同种限制酶,目的是为了：

。但是使用该法缺点是容易发生

以及

，为了避免上述情况发生，可采取的措施是

。产生相同的黏性末端，便于连接目的基因与质粒反向连接目的基因、质粒的自身环化分别使用两种限制酶（双酶切法）去切割目的基因和运载体三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”小结不破坏目的基因至少保留一个完整的标记基因，便于筛选(2)选择限制酶切割位点的基本原则：①切割目的基因时：

。②切割质粒时：

。③切割目的基因和质粒时：

。理由：防止目的基因和质粒自身环化和目的基因反向连接最好选用不同的限制酶切割三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”限制酶作用部位：种类E.coliDNA连接酶运载工具条件③

有一个至多个限制酶切割位点质粒、噬菌体、动植物病毒DNA连接酶作用部位：切开DNA分子的磷酸二酯键来源：主要存在于原核生物中特点：具有专一性（能识别双链DNA分子的特定核苷酸序列）T4DNA连接酶①

对受体细胞无害②

能自我复制或整合到宿主DNA上。④

常有特殊的标记基因种类：磷酸二酯键作用结果：产生黏性末端或平末端课堂小结四、探究•实践：DNA的粗提取与鉴定利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精DNA能溶于物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液在一定温度下，DNA被二苯胺试剂染成蓝色初步分离DNA和蛋白质溶解DNA鉴定DNA一、实验原理00.14NaCI浓度（mol/L）DNA溶解度四、探究•实践：DNA的粗提取与鉴定二、实验材料及用具DNA含量相对较高的生物组织，如新鲜洋葱、香蕉、菠菜、菜花和猪肝等。1.选材：问题:能否选用牛、羊、马、猪等哺乳动物的红细胞做实验材料？

不能选择哺乳动物成熟的红细胞，因为哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核和线粒体，几乎不含DNA。。

（1）选什么样的材料实验更易成功？（2）猪血和鸡血，哪个适合用作提取DNA的材料？操作时如何防止血液凝固？猪血（哺乳动物的成熟红细胞）无细胞核和线粒体，几乎不含DNA，不适合；鸡血中红细胞有核DNA，且核DNA的量较多，适合。含DNA的生物材料都可以，选取DNA含量相对较高的生物组织，成功率更大。鸡血中加入柠檬酸钠，可防止血液凝固。四、探究•实践：DNA的粗提取与鉴定二、实验材料及用具1.选材：四、探究•实践：DNA的粗提取与鉴定二、实验材料及用具1.选材：试剂研磨液体积分数为95%的酒精二苯胺2mol/L的NaCl溶液

蒸馏水溶解并提取DNA析出DNA溶解DNA鉴定DNA，要现配现用研磨液成分作用SDS使蛋白质变性EDTA抑制DNA酶Tris-HCl缓冲液稳定DNA四、探究•实践：DNA的粗提取与鉴定三、实验步骤四、探究•实践：DNA的粗提取与鉴定三、实验步骤研磨加酒精析出溶解与鉴定提取上清液取上清液充分研磨纱布过滤95%冷酒精离心离心丝状物沉淀物四、探究•实践：DNA的粗提取与鉴定三、实验步骤1.破碎细胞——称取

，切碎，放入研钵，倒入

，

研磨。洋葱研磨液充分问题:若研磨不充分会对实验结果产生怎样的影响研磨不充分，会使DNA分子不能从细胞核中释放出来，从而使研磨液中的DNA含量较低，影响最终提取的DNA量。四、探究•实践：DNA的粗提取与鉴定三、实验步骤2.去除杂质——在漏斗中垫上

过滤研磨液，4℃冰箱中静置后取

；或将研磨液倒入塑料离心管中离心，取

。纱布上清液上清液问题:过滤能否用滤纸代替纱布？不可以。因为DNA会被吸附到滤纸上而大量损失，影响最终提取的DNA量。问题:获得的上清液中可能含有哪些细胞成分？可能含有DNA、RNA以及蛋白质、脂质、糖类等。四、探究•实践：DNA的粗提取与鉴定三、实验步骤3.DNA的粗提取——在上清液中加入体积相等的

溶液,静置2~3min，溶液中出现的

就是粗提取的DNA。预冷的酒精白色丝状物用冷却的酒精析出DNA问题:此步骤的目的是？使蛋白质等溶解在酒精中，DNA不溶于酒精而析出。预冷的酒精的优点①可抑制核酸水解酶的活性，进而抑制DNA降解；②抑制分子运动，使DNA易形成沉淀析出；③低温有利于增加DNA分子的柔韧性，减少其断裂。四、探究•实践：DNA的粗提取与鉴定三、实验步骤3.DNA的粗提取——用玻璃棒沿

搅拌，卷起

，并用滤纸吸去上面的水分：或将溶液倒入塑料离心管中离心，取

晾干。一个方向沉淀物丝状物问题:搅拌时应轻缓、并沿一个方向目的？减少DNA断裂，以便获得较完整的DNA分子析出DNA四、探究•实践：DNA的粗提取与鉴定三、实验步骤4.DNA的鉴定——将丝状物或沉淀物溶于

溶液中，加入

试剂，混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min。二苯胺2mol/L的NaCl空白对照组：

在等体积的NaCl溶液中加入二苯胺试剂，将试管置于同等沸水浴中加热5min。加入2mol/L氯化钠溶液不加入丝状物加入4mL二苯胺试剂加入2mol/L氯化钠溶液加入丝状物加入4mL二苯胺试剂实验组对照组水浴加热四、探究•实践：DNA的粗提取与鉴定三、实验步骤4.DNA的鉴定——试管编号A（对照组）B（实验组）步骤12mol/L的NaC1溶液5mL步骤2不进行任何处理步骤3步骤4沸水浴加热5min实验现象实验结论加丝状物或沉淀物加4mL的二苯胺试剂四、探究•实践：DNA的粗提取与鉴定三、实验步骤4.DNA的鉴定——将丝状物或沉淀物溶于

溶液中，加入

试剂，混合均匀