《临床基本技能》临床血液学检验

《临床基本技能》临床血液学检验血液样本采集与处理静脉采血法通常采用肘部静脉、手背静脉、内踝静脉或股静脉等。成人多取肘部静脉，婴幼儿可用颈外静脉采血。采血时，先在采血部位上方约5-7cm处系上止血带，嘱患者握拳使静脉充盈显露，常规消毒皮肤，以左手拇指固定静脉穿刺部位下端，右手持注射器针头斜面向上与皮肤呈15°-30°角刺入静脉，见回血后，将针头略放平，再沿静脉走向深入少许，然后抽取所需血量。采血完毕，松开止血带，嘱患者松拳，用消毒棉球按压穿刺点，拔出针头。毛细血管采血法适用于仅需微量血液的检验项目，如血常规、血型鉴定等。常用部位为手指或耳垂。以手指采血为例，先用75%乙醇消毒采血部位皮肤，待干后，用采血针迅速刺入皮肤2-3mm，深度以能自然流出少量血液为宜，勿用力挤压，用干净的微量吸管吸取血液，将血液注入相应的抗凝管或检测容器中。采血后，用消毒棉球压迫止血。抗凝剂的选择与使用不同的检验项目需要使用不同的抗凝剂。如血常规检验常用乙二胺四乙酸（EDTA）盐抗凝，它能与血液中的钙离子结合形成螯合物，从而阻止血液凝固。一般每毫升血液需加入1.5-2.2mg的EDTA-K₂。凝血功能检查常用枸橼酸钠抗凝，其与血液的比例为1:9，它通过与钙离子结合，起到抗凝作用。标本的运送与保存采集好的血液标本应尽快送往实验室进行检测。运送过程中要注意避免剧烈震荡，防止标本溶血。对于不能及时检测的标本，应根据不同的检验项目采取适当的保存方法。如血常规标本室温下可保存数小时，而凝血功能标本应在采集后1小时内检测，若不能及时检测，可将标本置于4℃冰箱保存，但保存时间不宜过长。红细胞检验红细胞计数原理是将一定体积的全血经等渗稀释液稀释后，充入计数池，在显微镜下计数一定体积内的红细胞数量，然后换算成每升血液中的红细胞数。参考值男性为（4.0-5.5）×10¹²/L，女性为（3.5-5.0）×10¹²/L。红细胞增多可见于相对性增多，如严重呕吐、腹泻、大量出汗等导致的血液浓缩；绝对性增多，如真性红细胞增多症等。红细胞减少常见于各种贫血，如缺铁性贫血、巨幼细胞贫血等。血红蛋白测定常用氰化高铁血红蛋白法，血液中的血红蛋白被高铁氰化钾氧化为高铁血红蛋白，再与氰离子结合形成稳定的氰化高铁血红蛋白，在特定波长下比色，根据吸光度计算出血红蛋白含量。参考值男性为120-160g/L，女性为110-150g/L。血红蛋白测定结果与红细胞计数有密切关系，但在某些情况下，两者的变化并不完全平行，如缺铁性贫血时，血红蛋白降低比红细胞计数降低更为明显。血细胞比容测定是指一定体积的全血中红细胞所占的百分比。常用温氏法，将抗凝血注入温氏管中，以一定的速度离心一定时间后，读取红细胞层的高度，计算出血细胞比容。参考值男性为0.40-0.50L/L，女性为0.35-0.45L/L。血细胞比容的变化与红细胞数量和血浆量有关，可用于诊断贫血及判断贫血的类型。红细胞平均值参数计算包括平均红细胞容积（MCV）、平均红细胞血红蛋白量（MCH）和平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）。MCV是指每个红细胞的平均体积，计算公式为MCV（fl）=每升血液中红细胞比容/每升血液中红细胞数×10¹⁵。MCH是指每个红细胞内所含血红蛋白的平均量，计算公式为MCH（pg）=每升血液中血红蛋白含量/每升血液中红细胞数×10¹²。MCHC是指每升血液中平均所含血红蛋白浓度，计算公式为MCHC（g/L）=每升血液中血红蛋白含量/每升血液中红细胞比容。根据这些参数可以对贫血进行形态学分类，如MCV、MCH、MCHC均降低常见于缺铁性贫血；MCV升高，MCH升高，MCHC正常常见于巨幼细胞贫血。红细胞形态检查在显微镜下观察红细胞的大小、形态、染色性及内含物等。正常红细胞呈双凹圆盘形，大小较为一致，直径约6-9μm，染淡红色，中央淡染区约为直径的1/3。异常红细胞形态包括大小异常，如小红细胞（直径＜6μm）常见于缺铁性贫血，大红细胞（直径＞10μm）常见于巨幼细胞贫血；形态异常，如球形红细胞常见于遗传性球形细胞增多症，椭圆形红细胞常见于遗传性椭圆形细胞增多症；染色异常，如低色素性红细胞常见于缺铁性贫血；内含物异常，如嗜碱性点彩红细胞、豪-焦小体等可见于某些贫血及造血异常疾病。白细胞检验白细胞计数原理与红细胞计数相似，将血液用白细胞稀释液稀释后，充入计数池，在显微镜下计数一定体积内的白细胞数量，然后换算成每升血液中的白细胞数。参考值成人（4-10）×10⁹/L。白细胞增多常见于感染、炎症、组织损伤等；白细胞减少常见于病毒感染、血液系统疾病、物理化学因素损伤等。白细胞分类计数是将血液制成涂片，经染色后在显微镜下观察各类白细胞的形态，并计数各类白细胞所占的百分比。正常情况下，中性粒细胞占50%-70%，淋巴细胞占20%-40%，单核细胞占3%-8%，嗜酸性粒细胞占0.5%-5%，嗜碱性粒细胞占0-1%。中性粒细胞增多常见于急性感染、严重组织损伤等；淋巴细胞增多常见于病毒感染、淋巴细胞白血病等；嗜酸性粒细胞增多常见于过敏性疾病、寄生虫感染等。白细胞形态检查正常白细胞有各自的形态特征。中性粒细胞呈圆形，直径10-15μm，核分叶状，一般2-5叶，胞质内含有淡紫红色的细小颗粒。淋巴细胞可分为大淋巴细胞和小淋巴细胞，小淋巴细胞直径6-9μm，核圆形，染色质致密呈块状，胞质少，呈天蓝色；大淋巴细胞直径10-15μm，核圆形或椭圆形，染色质较疏松，胞质较多，可有少量嗜天青颗粒。单核细胞体积较大，直径12-20μm，核呈肾形、马蹄形或不规则形，染色质疏松呈网状，胞质丰富，呈淡灰蓝色，含有细小的嗜天青颗粒。嗜酸性粒细胞直径13-15μm，核多为两叶，胞质内充满粗大、均匀的嗜酸性颗粒，呈橘红色。嗜碱性粒细胞直径10-12μm，核分叶不明显，胞质内含有大小不等、分布不均的嗜碱性颗粒，呈紫黑色。异常白细胞形态包括中毒颗粒，常见于严重感染；空泡变性，可见于感染、中毒等；核左移，指外周血中杆状核粒细胞增多或出现晚幼粒、中幼粒、早幼粒等细胞，常见于急性感染；核右移，指中性粒细胞核分叶过多，常见于巨幼细胞贫血等。血小板检验血小板计数常用的方法有显微镜计数法和血细胞分析仪法。显微镜计数法是将血液用血小板稀释液稀释后，充入计数池，在显微镜下计数一定体积内的血小板数量，然后换算成每升血液中的血小板数。参考值（100-300）×10⁹/L。血小板减少常见于血小板生成减少，如再生障碍性贫血；血小板破坏增多，如特发性血小板减少性紫癜；血小板消耗过多，如弥散性血管内凝血等。血小板增多可见于原发性增多，如原发性血小板增多症；反应性增多，如急性感染、出血后等。血小板形态检查正常血小板呈双凸圆盘状，直径2-4μm，无细胞核，胞质内含有紫红色颗粒。在涂片上，血小板常聚集成群。异常血小板形态包括大小异常，如巨大血小板可见于某些血液系统疾病；形态异常，如血小板卫星现象，指血小板黏附于中性粒细胞表面，常见于某些药物影响等。血小板功能检查包括血小板聚集功能测定和血小板黏附功能测定。血小板聚集功能测定是通过加入诱导剂，如ADP、胶原等，观察血小板的聚集情况。血小板黏附功能测定是通过让血液与一定的异物表面接触，测定黏附于异物表面的血小板数量。血小板功能异常可导致出血倾向，如血小板无力症患者血小板聚集功能和黏附功能均降低。血型鉴定与交叉配血ABO血型系统根据红细胞表面是否存在A抗原和B抗原，将血型分为A型、B型、AB型和O型。A型血红细胞表面有A抗原，血清中有抗B抗体；B型血红细胞表面有B抗原，血清中有抗A抗体；AB型血红细胞表面有A抗原和B抗原，血清中无抗A和抗B抗体；O型血红细胞表面无A抗原和B抗原，血清中有抗A和抗B抗体。血型鉴定采用正定型和反定型相结合的方法，正定型是用已知的抗A和抗B血清与受检者红细胞反应，反定型是用已知的A型和B型红细胞与受检者血清反应，两者结果相符才能确定血型。Rh血型系统主要有D、C、c、E、e五种抗原，其中D抗原的抗原性最强。临床上通常将红细胞表面含有D抗原的称为Rh阳性，不含D抗原的称为Rh阴性。Rh血型鉴定常用抗D血清与受检者红细胞反应。Rh阴性的个体在输入Rh阳性血液或Rh阴性孕妇怀有Rh阳性胎儿时，可产生抗D抗体，再次接触Rh阳性血液时可发生溶血反应。交叉配血试验是确保输血安全的重要措施。包括主侧配血和次侧配血，主侧配血是将供血者的红细胞与受血者的血清混合，观察有无凝集反应；次侧配血是将受血者的红细胞与供血者的血清混合，观察有无凝集反应。如果主侧和次侧均无凝集反应，称为配血相合，可以输血；如果主侧有凝集反应，称为配血不合，绝对不能输血；如果主侧无凝集反应，次侧有凝集反应，可根据情况少量缓慢输血，并密切观察受血者的反应。凝血功能检验活化部分凝血活酶时间（APTT）测定是内源性凝血系统的筛选试验。在受检血浆中加入活化剂和部分凝血活酶，再加入钙离子，观察血浆凝固所需的时间。参考值为25-37秒。APTT延长常见于凝血因子缺乏，如血友病A、血友病B等；APTT缩短可见于血栓前状态和血栓性疾病。血浆凝血酶原时间（PT）测定是外源性凝血系统的筛选试验。在受检血浆中加入组织凝血活酶和钙离子，观察血浆凝固所需的时间。参考值为11-13秒。PT延长常见于先天性凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ缺乏及维生素K缺乏等；PT缩短可见于血液高凝状态。纤维蛋白原测定常用凝血酶法，在受检血浆中加入凝血酶，使纤维蛋白原转变为纤维蛋白，根据凝固时间计算纤维蛋白原含量。参考值为2-4g/L。纤维蛋白原降低常见于先天性纤维蛋白原缺乏症、弥散性血管内凝血等；纤维蛋白原升高可见于急性感染、急性心肌梗死等。凝血酶时间（TT）测定在受检血浆中加入标准化的凝血酶溶液，观察血浆凝固所需的时间。参考值为16-18秒。TT延长常见于肝素增多或类肝素物质存在、纤维蛋白原降解产物增多等。常见血液学疾病的检验诊断缺铁性贫血是由于体内铁缺乏导致血红蛋白合成减少而引起的贫血。检验特点为：血常规表现为小细胞低色素性贫血，MCV、MCH、MCHC均降低；血清铁降低，总铁结合力升高，转铁蛋白饱和度降低；血清铁蛋白降低，是诊断缺铁性贫血的敏感指标；骨髓象表现为增生活跃，以中、晚幼红细胞增生为主，铁染色显示细胞外铁消失，细胞内铁减少。巨幼细胞贫血是由于缺乏维生素B₁₂或（和）叶酸导致DNA合成障碍而引起的贫血。检验特点为：血常规表现为大细胞性贫血，MCV升高，MCH升高，MCHC正常；血清维生素B₁₂和叶酸水平降低；骨髓象表现为增生活跃，以红系增生为主，可见巨幼红细胞，巨幼红细胞的特点是细胞体积增大，核染色质疏松，呈细网状。再生障碍性贫血是一种由于多种原因引起的骨髓造血功能衰竭症。检验特点为：血常规表现为全血细胞减少，网织红细胞绝对值减少；骨髓象表现为多部位骨髓增生减低或重度减低，造血细胞减少，非造血细胞增多。白血病是一类造血干细胞的恶性克隆性疾病。根据白血病细胞的分化程度和自然病程，可分为急性白血病和慢性白血病。急性白血病的检验特点为：血常规表现为白细胞计数可升高、正常或降低，可见原始和幼稚细胞；骨髓象表现为骨髓增生极度活跃或明显活跃，原始细胞占非红系细胞的30%以上。慢性白血病的检验特点为：慢性粒细胞白血病血常规表现为白细胞计数显著升高，以中性中幼粒、晚幼粒和杆状核粒细胞增多为主，可见嗜酸、嗜碱性粒细胞增多；骨髓象表现为骨髓增生极度活跃，以粒细胞系增生为主，中、晚幼粒细胞增多明显。慢性淋巴细胞白血病血常规表现为白细胞计数升高，以成熟淋巴细胞增多为主；骨髓象表现为骨髓增生明显活跃或极度活跃，淋巴细胞比例≥40%，以成熟淋巴细胞为主。临床血液学检验相关习题1.成人静脉采血时，常用的采血部位是（）A.手背静脉B.肘部静脉C.内踝静脉D.股静脉答案：B2.血常规检验常用的抗凝剂是（）A.枸橼酸钠B.肝素C.草酸盐D.EDTA盐答案：D3.正常男性红细胞计数的参考值是（）A.（3.5-5.0）×10¹²/LB.（4.0-5.5）×10¹²/LC.（5.0-6.0）×10¹²/LD.（6.0-7.0）×10¹²/L答案：B4.氰化高铁血红蛋白法测定血红蛋白时，血红蛋白被氧化为（）A.高铁血红蛋白B.氧合血红蛋白C.碳氧血红蛋白D.硫化血红蛋白答案：A5.血细胞比容是指（）A.一定体积的全血中红细胞所占的百分比B.一定体积的全血中白细胞所占的百分比C.一定体积的全血中血小板所占的百分比D.一定体积的全血中血浆所占的百分比答案：A6.计算平均红细胞容积（MCV）的公式是（）A.MCV（fl）=每升血液中红细胞比容/每升血液中红细胞数×10¹⁵B.MCV（fl）=每升血液中血红蛋白含量/每升血液中红细胞数×10¹²C.MCV（fl）=每升血液中血红蛋白含量/每升血液中红细胞比容D.MCV（fl）=每升血液中红细胞数/每升血液中红细胞比容×10¹⁵答案：A7.缺铁性贫血时，红细胞的形态特点是（）A.正细胞正色素性B.小细胞低色素性C.大细胞性D.巨幼细胞性答案：B8.正常成人白细胞计数的参考值是（）A.（4-10）×10⁹/LB.（5-12）×10⁹/LC.（10-20）×10⁹/LD.（20-30）×10⁹/L答案：A9.中性粒细胞增多常见于（）A.病毒感染B.寄生虫感染C.急性感染D.过敏性疾病答案：C10.淋巴细胞增多常见于（）A.急性感染B.病毒感染C.严重组织损伤D.急性失血答案：B11.嗜酸性粒细胞增多常见于（）A.病毒感染B.细菌感染C.过敏性疾病D.白血病答案：C12.核左移是指（）A.外周血中杆状核粒细胞增多或出现晚幼粒、中幼粒、早幼粒等细胞B.外周血中核分叶过多的中性粒细胞增多C.外周血中淋巴细胞增多D.外周血中单核细胞增多答案：A13.正常血小板计数的参考值是（）A.（50-100）×10⁹/LB.（100-300）×10⁹/LC.（300-500）×10⁹/LD.（500-1000）×10⁹/L答案：B14.血小板减少常见于（）A.原发性血小板增多症B.特发性血小板减少性紫癜C.急性感染D.出血后答案：B15.血小板聚集功能测定常用的诱导剂是（）A.ADPB.肝素C.枸橼酸钠D.草酸盐答案：A16.ABO血型系统中，A型血红细胞表面有（）A.A抗原B.B抗原C.A抗原和B抗原D.无A抗原和B抗原答案：A17.ABO血型系统中，O型血血清中有（）A.抗A抗体B.抗B抗体C.抗A和抗B抗体D.无抗A和抗B抗体答案：C18.Rh血型系统中，Rh阳性是指红细胞表面含有（）A.D抗原B.C抗原C.c抗原D.E抗原答案：A19.交叉配血试验中，主侧配血是指（）A.将供血者的红细胞与受血者的血清混合B.将受血者的红细胞与供血者的血清混合C.将供血者的血清与受血者的血清混合D.将供血者的红细胞与受血者的红细胞混合答案：A20.活化部分凝血活酶时间（APTT）测定是检测（）A.内源性凝血系统B.外源性凝血系统C.共同凝血系统D.纤溶系统答案：A21.血浆凝血酶原时间（PT）测定是检测（）A.内源性凝血系统B.外源性凝血系统C.共同凝血系统D.纤溶系统答案：B22.纤维蛋白原测定常用的方法是（）A.比色法B.免疫法C.凝血酶法D.电泳法答案：C23.凝血酶时间（TT）延长常见于（）A.凝血因子缺乏B.血液高凝状态C.肝素增多或类肝素物质存在D.维生素K缺乏答案：C24.缺铁性贫血时，血清铁（）A.升高B.降低C.正常D.先升高后降低答案：B25.缺铁性贫血时，总铁结合力（）A.升高B.降低C.正常D.先升高后降低答案：A26.巨幼细胞贫血时，血清维生素B₁₂水平（）A.升高B.降低C.正常D.先升高后降低答案：B27.再生障碍性贫血的血常规表现为（）A.全血细胞减少B.白细胞增多C.红细胞增多D.血小板增多答案：A28.急性白血病的骨髓象表现为（）A.骨髓增生减低B.骨髓增生极度活跃或明显活跃，原始细胞占非红系细胞的30%以上C.骨髓增生正常D.骨髓增生明显活跃，以中、晚幼粒细胞增多为主答案：B29.慢性粒细胞白血病的血常规表现为（）A.白细胞计数显著升高，以中性中幼粒、晚幼粒和杆状核粒细胞增多为主，可见嗜酸、嗜碱性粒细胞增多B.白细胞计数正常，以淋巴细胞增多为主C.白细胞计数降低，以单核细胞增多为主D.白细胞计数升高，以原始细胞增多为主答案：A30.慢性淋巴细胞白血病的骨髓象表现为（）A.骨髓增生减低B.骨髓增生极度活跃或明显活跃，淋巴细胞比例≥40%，以成熟淋巴细胞为主C.骨髓增生正常D.骨髓增生明显活跃，以中、晚幼粒细胞增多为主答案：B31.成人静脉采血时，止血带应系在采血部位上方约（）A.3-5cmB.5-7cmC.7-9cmD.9-11cm答案：B32.毛细血管采血法常用的部位是（）A.手指B.耳垂C.足跟D.以上都是答案：D33.以下哪种抗凝剂不适合用于凝血功能检查（）A.枸橼酸钠B.肝素C.EDTA盐D.草酸盐答案：C34.红细胞计数时，稀释液的作用是（）A.固定红细胞B.破坏白细胞C.调节渗透压D.以上都是答案：D35.血红蛋白测定时，比色波长一般选择（）A.500nmB.540nmC.570nmD.600nm答案：B36.血细胞比容测定时，离心速度和时间一般为（）A.2000r/min，10分钟B.3000r/min，15分钟C.4000r/min，20分钟D.5000r/min，25分钟答案：B37.平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）的参考值是（）A.200-300g/LB.300-350g/LC.350-400g/LD.400-450g/L答案：B38.小红细胞的直径小于（）A.6μmB.8μmC.10μmD.12μm答案：A39.球形红细胞常见于（）A.缺铁性贫血B.巨幼细胞贫血C.遗传性球形细胞增多症D.再生障碍性贫血答案：C40.嗜碱性点彩红细胞可见于（）A.缺铁性贫血B.巨幼细胞贫血C.铅中毒D.再生障碍性贫血答案：C41.白细胞分类计数时，应计数的白细胞数量一般为（）A.100个B.200个C.300个D.400个答案：A42.正常中性粒细胞核分叶一般为（）A.1-2叶B.2-5叶C.5-7叶D.7-9叶答案：B43.淋巴细胞的直径一般为（）A.6-9μmB.9-12μmC.12-15μmD.15-18μm答案：A44.单核细胞的核形态一般为（）A.圆形B.椭圆形C.肾形、马蹄形或不规则形D.分叶状答案：C45.嗜酸性粒细胞的胞质内含有（）A.粗大、均匀的嗜酸性颗粒B.细小、均匀的嗜酸性颗粒C.粗大、不均匀的嗜酸性颗粒D.细小、不均匀的嗜酸性颗粒答案：A46.嗜碱性粒细胞的胞质内含有（）A.粗大、均匀的嗜碱性颗粒B.细小、均匀的嗜碱性颗粒C.粗大、不均匀的嗜碱性颗粒D.细小、不均匀的嗜碱性颗粒答案：C47.血小板卫星现象常见于（）A.血小板增多症B.血小板减少症C.某些药物影响D.感染答案：C48.ABO血型鉴定时，正定型是用（）A.已知的抗A和抗B血清与受检者红细胞反应B.已知的A型和B型红细胞与受检者血清反应C.已知的抗A和抗B血清与受检者血清反应D.已知的A型和B型红细胞与受检者红细胞反应答案：A49.Rh血型鉴定常用的