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文档简介
[转帖]临床检验答辩复习题(基础理论部
分)
『34在下面的回帖里!
35联合治疗革兰氏阴性感染的理论是什么?
答:协同杀菌作用:体外试验证明,联合使用细胞壁活性的抗生素(青霉
素类和头抱菌素类)氨基糖昔类抗生素对许多革兰氏阴性细菌,包括铜
绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、粘质沙雷氏菌及大肠埃希氏菌均有杀菌作用。
预防耐药性的意外出现:理论上已引起注意,有资料证明联合治疗能达到
预防耐药性的意外出现。
36哪种革兰氏阴性对亚胺培南存在天然耐药性?最好的治疗措施是什
么?
答:嗜芽假单胞菌能产生水解碳青霉烯类抗生素的B内酰胺酶。长时间接
受亚胺培南治疗的患者,黄杆菌属细菌感染常见耐药。
最好的治疗措施是复方新诺明或替卡西林/克拉维酸。
37与输血相关性败血症有关的最常见的革兰氏阴性菌有哪两种?
答:小肠结肠炎耶尔森氏菌与输入被污染的袋装血液后发生的致死性败血
症有关。认为献血员是无症菌血症患者或胃肠型的恢复期。该菌在4。。繁
殖好,产生大量的细菌和内毒素,然后被输入患者体内。荧光假单胞菌也
与输血后败血症有关。认为通过被污染的皮肤进入血袋。该菌在4℃繁殖
好,产生大量的内毒素,然后被输入患者体内。
38哪种革兰氏阴性杆菌可引起类似肺结核样的疾病?
答:由假鼻疽杆菌引起的类鼻疽可产生潜在性感染,后者可在原发感染若
干年后以空洞性肺炎的形式出现。临床表现为急性化脓性淋巴结炎、急
性脓毒血症、各种器官慢性化脓性感染。
39变形杆菌感染在肾结石中起什么作用?
答:变形杆菌具有尿素酶,可将尿素分解为氢氧化筱,碱化尿液,促使结
石形成。由结石产生的尿路梗阻可进一步引起慢性感染。
40狗、猫、人咬伤后分别可出现哪些不同的革兰氏阴性菌感染?应用哪
些抗生素进行治疗?
答:猫咬伤后出现出血败血巴斯德菌引起的局部感染。狗咬伤与生长不良
发酵菌一2感染有关。人咬伤后可并发侵蚀艾肯感染有关。
上述菌均为革兰氏阴性菌,一般对青霉素或阿莫西林敏感,但常合并厌氧
感染,用阿莫西林/克拉维酸治疗有较好的疗效。
41试述肠球菌的抗菌用药治疗方法。
答:肠球菌有三种耐药形式,抗菌治疗也分三种情况,具体如下:
对青霉素或氨莘青霉素敏感,用青霉素或氨茶青霉素治疗;对青霉素或氨
苇青霉素中度敏感或处于中介,用青霉素或氨莘青霉素加一种氨基糖首
类抗生素联合用药治疗。高耐氨基糖昔类抗生素的肠球菌,用青霉素或氨
苇青霉素加一种氨基糖甘类抗生素联合用药治疗无效,须用万古霉素治
疗。耐万古霉素肠球菌,治疗较困难,选药无规律,依具体的药敏结果而
定,可选用四环素、氯霉素、喳诺酮类,泌尿系可选用吠喃妥因、磺胺
类药物进行治疗。
42列出抗菌药物耐药的常见机制并举例。
答:降低细胞内的药物浓度:四环素增加药物消散,B内酰胺类增加膜外
通透性。
药物失活:6内酰胺类产B内酰胺酶,氨基糖首类产修饰酶,氯霉素通过
乙酰转移酶的灭活作用。
靶位改变:6内酰胺类降低青霉素与蛋白的亲和力,喳诺酮类出现DNA酶
出现改变,大环内酯类出现rRNA甲基化改变。
靶向转移:糖肽类、甲氧茶咤。
43列出作用于细胞内致病菌的抗菌药物。
答:药物为了在细胞内发挥活性作用,必须进入细胞内达到相应的浓度并
穿透到细菌的微小环境中去,同时细胞内的微小环境应具备一定条件。
这些药物有:四环素类、氯霉素类、磺胺甲基异恶唾、唾诺酮类、红霉素
类/大环内酯类、克林霉素类、利福霉素等。
44什么是B内酰胺酶抑制剂?
答:克拉维酸、舒巴坦、他哇巴坦能抑制6内酰胺酶,细菌若产B内酰胺
酶能水解8内酰胺类抗生素,使药物治疗失效。当将某些B内酰胺类抗生
素与6内酰胺酶抑制剂组合起来,如阿莫西林/克拉维酸、哌拉西林/他晚
巴坦、氨莘西林/舒巴坦等,这些药物如果能抵抗靶细菌产生的一种或多
种B内酰胺酶,就能恢复抗菌活性。
45患者念珠感染的易感因素是什么?
答:当机体正常的防御机制因某些因素如糖尿病、恶性肿瘤、慢性肉芽肿
病、营养不良、早产等遭破坏时,念珠菌可成为致病菌。
医源性因素如广谱抗生素的使用、静脉插管、导尿管插入、皮质激素、细
菌毒素药物的使用、食物含糖量过高致营养过度,念珠菌可成为致病菌。
烧伤、外伤、手术、滥用静脉药念珠菌可成为致病菌。
46试述临床中常见的酵母菌。
答:白色念珠菌、热带念珠菌、假热带念珠菌、克柔氏念珠菌、近平滑念
珠菌、类星形念珠菌、季也蒙念珠菌、光滑球拟酵母菌、葡萄牙念珠菌、
新型隐球菌、红色红酵母菌、啤酒酵母菌、异常汉逊酵母菌等。
47对血源性念珠菌感染患者,采取什么措施可以改善预后?
答:拔除血管内导管,去除持续感染的可能原因。总的说来,依据患者具
体情况应将导管拔除。
48MRSA常见的传播方式是什么?
答:MRSA最常见的传播方式是经手传播。手上带菌是因为与患者直接接触
或接触了受污染物体表面,而未认真洗手。空气传播可能是气管切开、
大面积烧伤病人、皮肤炎患者的主要传播方式。经慢性携带者传播不常见。
鼻腔中带MRSA的医生或护士是潜在的传染源,要引起注意。
49试述喳诺酮类药物的抗菌谱。
答:作用大多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。提高MRSA和铜绿假单胞
菌的耐药性。也可作用于不典型细菌,如分枝杆菌、军团菌等。
早期研制的药物如环丙沙星、氧氟沙星、依诺沙星、诺氟沙星无抗厌氧菌
活性。新近研制的药物如左旋氧氟沙星、司帕沙星、格里沙星等具有良好
的抗厌氧菌和青霉素耐药肺炎双球菌的作用活性。
50试述发热腹泻的常见致病菌,对这些细菌哪些抗菌最有效。
答:常见致病菌为志贺氏菌、沙门氏菌、空肠弯曲菌、小肠结肠炎耶尔森
氏菌。喳诺酮类类药物是现行最有效的治疗药物,但也有细菌对此耐药,
常见于空肠弯曲菌。
51现代免疫学的基本概念是什么?
现代免疫学认为免疫是一种保护性反应,是指生物体能“识别异已”和“排
斥异己物质”的一切免疫作用;免疫学是研究生物体“非自体”物质之
间进行对立统一的原理、原因、作用和应用的科学。它包括免疫防护作用
和免疫病理作用两方面,亦即是抗感染免疫与变态反应性两大范畴。1.
抗感染免疫引起免疫防护反应:可消除病原体及其毒性产物的传染侵害。
2.变态反应导致免疫病理反应:可引起免疫性疾病及损害。
52简述现代免疫学检验的特点。
1.检测方法改进:科学家们把新的物理和化学手段引进了免疫学实验中。
应用新的分离技术可以得到高纯度的抗原和抗体,尤其是单克隆抗体的
出现,把免疫反应的特异性大大地向前推进了一步。免疫电泳、间接凝集、
激光浊度测定、免疫转印法等实验技术的进步,使免疫检测的敏感性大
大提高。2.标记技术建立:免疫荧光技术、放射免疫测定和酶标免疫技术
等三大免疫标记方法的建立,使抗体反应的敏感性产生了新的飞跃。近
年发展的亲和素-生物素复合标记技术、化学发光和生物化学技术以及分
子探针技术又使免疫检测的敏感性和实用性大有改进。3.实验领域扩展:
现代方法则较前大为扩展,淋巴细胞转化试验、细胞毒试验、溶血空斑形
成试验、淋巴因子测定等一系列实验技术使得全面检测免疫系统及其功
能成为可能。4.应用范围广阔:例如可用于传染病及变态反应病和自身免
疫病等的实验诊断、器官移植中的组织配型、微量物质的测定、免疫状
态评价等,在法医学、老年病学等诸多方面也有广泛的应用。
53简述免疫球蛋白的生物活性。
1.结合抗原:抗体的最主要功能是与相应的抗原特异性结合,从而在体内
导致免疫反应,产生生理和病理效应,在体外引起各种抗原抗体反应。
2.激活补体:抗体(IgG3,IGgKIGg2,Igm)与相应抗原结合后,抗体
变构,其重链恒定区上的补体结合点暴露,Clq逐与之结合,从而使补体
各成份激活。3.亲细胞作用:巨唾细胞、淋巴细胞、肥大细胞、中性粒细
胞和血小板等表面都有有FC受体,不同类别的免疫球蛋白可与不同的细
胞结合,产生不同的后果,如变态反应等。4.调理作用:某些免疫球蛋白
覆盖于颗粒性抗原表面,使其更易被吞噬细胞吞噬。5.膜传递作用:免
疫球蛋白可通过上皮层传递,这对向胎儿传递抗体及向体表提供抗体具有
重要意义。
54简述变态反应的防治原则。
1.脱敏注射:采用小剂量、短间隔、连续多次注射变应原的方法,逐渐消
耗体内已形成的IgE,以便可大量注射抗毒素血清而不致发病。2.减敏疗
法:皮下多次,小剂量注射变应原后,循环中出现IgG封闭抗体,阻断变
应原与IgE结合,可防止支气管哮喘等疾病的复发。3.免疫抑制剂的应
用:如肾上腺皮质激素类,其作用有:①抗炎作用;②稳定溶酶体;③减
少淋巴细胞数量;④抑制单核-吞噬细胞系统功能。4.阻止活性介质释放:
如采用色甘酸二钠,阿司匹林和儿茶酚胺类药物等。5.对抗活性介质的作
用,临床上常用苯海拉明,扑尔敏等抗组织胺药物。
55何谓自身免疫?自身免疫病有哪些特征?
自身免疫是指机体免疫系统对自身抗原发生免疫应答,产生自身抗体和
(或)自身致敏淋巴细胞的现象。自身免疫性疾病往往同时具有以下特
征:1.患者血液中可测得高效价自身抗体和(或)自身组织成份起反应的
致敏淋巴细胞.2.自身抗体和(或)自身致敏淋巴细胞作用于靶抗原所在
组织、细胞造成相应组织器官的病理性损伤和功能障碍。动物实验中可复
制出相似的病理模型,并能通过患者的血清或淋巴细胞使疾病被动转移。
3.病情转归与自身免疫反应强度密切相关。4.除一些病因明了的继发性自
身免疫性疾病可随原发疾病的治愈而消退外,多数原因不明的自身免疫
病常反复发作和慢性迁延。5.疾病的发生有一定的遗传倾向。
56细胞因子在抗体产生应答过程中的作用有哪些?
L细胞因子的作用既无抗原特异性,也无组织相容性基因(MHC)限制性。
当TH细胞受刺激活化后,它所分泌的细胞因子就可作用于任何抗原特异
性的B细胞或任何MHC单倍型的B细胞。2.在B细胞产生免疫应答的不同
时期有不同的细胞因子起作用。即B细胞的增殖期与分化期,或Ig的分
泌期可有不同的细胞因子起作用。如IL-1可促进B细胞活化与增殖,IL-6
可促进B细胞分化。此外,不同的细胞因子间的组合有的起拮抗作用,
有的起协同作用,如ILT与IL-2组合可起协同作用。3.细胞因子可作用
于旁路B细胞使之活化。这些B细胞是非抗原特异性B细胞;它们存在于
抗原刺激的特异B细胞周围,在抗原活化特异B细胞时,因产生细胞因子
而被活化并产生非特异抗体。4.在刺激B细胞增殖分化的细胞因子中,有
些是由巨噬细胞或其它非T细胞(如粒细胞、肥大细胞等)所产生。
57什么叫癌基因、抗癌基因?
癌基因是指细胞内或病毒内存在的,能诱导正常细胞发生转化,使正常细
胞获得一个或更多的新生物特性的基因。通常人们又根据癌基因的来源、
特性等将其分为病毒癌基因、细胞癌基因及原癌基因。病毒癌基因是指病
毒所携带的或病毒所含有的能使细胞转化的基因。细胞癌基因是指在正
常细胞内存在的,与逆转录病毒癌基因具有同源序列,通常参与细胞生物、
代谢的基因。原癌基因是指正常细胞基因在一定条件下可被激活,参与
细胞转化及肿瘤发生过程的基因。病毒癌基因又分为RNA病毒癌基因及
DNA病毒癌基因,而细胞癌基因和原癌基因与RNA病毒癌基因密切相关。
抗癌基因或癌阻遏基因是指正常细胞存在的,能抑制细胞转化和肿瘤发
生的基因,它们的丢失或失活与肿瘤的发生密切相关。
58何谓M蛋白?何谓重链病、轻链病?
M蛋白是单克隆性浆细胞或淋巴细胞大量增殖而产生的一种在氨基酸组成
及排列顺序上十分均一的异常球蛋白,其本质为免疫球蛋白或其片段(轻
链、重链等)。因常出现于骨髓瘤、巨球蛋白血症或恶性淋巴瘤病人的血
和尿中,是由单克隆性抗体生成细胞产生,故称M蛋白。重链病为骨髓
瘤的变型,患者血清中的M蛋白为不完全的免疫球蛋白,只有重链而无轻
链,故名重链病,目前只发现V、a和口三种类型。轻链病也是骨髓瘤
的一种特定类型,在患者血或尿中出现大量均一的异常免疫球蛋白及游离
的K或人轻链,故命名为轻链病。
59简述组织相容性抗原(HLA)研究在医学实践中的意义?
1.HLA与疾病:目前能确定的与HLA有关的疾病有50余种。有些HLA型别
的人群往往与免疫性疾病的发生相关,HLA与疾病关联的研究在于阐明疾
病与遗传因素的关系。根据HLA预测疾病及针对性预防疾病等方面均十分
重要。2.HLA与器官移植:为降低器官移植排斥反应程度和频度,移植前
应对供、受者进行血型及组织配型,应尽量选择与受者HLA相同或部分相
同的供体移植物,以延长移植物存活的时间。3.HLA与输血反应:多次输
血的病人可发现有非红细胞溶血性输血反应,临床上表现发热、粒细胞和
血小板减少或尊麻疹等。这类病人血流中均可查到抗白细胞或抗血小板
HLA抗原的抗体。因此对多次接受输血者应警惕输血反应的发生。4.HLA
的鉴定:HLA在淋巴细胞膜上存在密度最大,因此HLA鉴定取材以人外周
血淋巴细胞为主。
60简述主要组织相容性复合体(MHC)的概念及其研究的临床意义。
MHC是指某一种某一号染色体上的一组紧密连锁的基因群,它编码的基因
产物(HLA、H-2)位于所有有核细胞的表面,主要与移植排斥反应、免
疫应答的调控、疾病的易感性有关。许多实验资料证实机体的很多免疫应
答特性也是受MHC控制的。人类HLA系统位于第6号染色体短臂上,第8
届国际组织相容性复合体会议,确定HLA抗原有92个,分属于A、B、C、
D和DR五个位点。研究MHC的临床意义有:1.疾病分类。2.疾病诊断。
3.预测疾病发展趋势。4.疾病治疗。5.优生等。此外,HLA研究尚有移植
配型、亲子鉴定、法医上的个人确定和人类学研究等用途。
61简述白细胞分化抗原(CD分子)的概念及其参与的机体重要生理和病理
过程。
CD分子是白细胞(还包括血小板和血管内皮细胞等)在正常分化成熟不同
谱系和不同阶段以及活化过程中出现或消失的细胞表面标记。它们大都
是穿膜的蛋白或糖蛋白,含胞膜外区、穿膜区和胞内区。少数CD分子是
碳水化合物半抗原。许多CD分子是有功能的分子,有些是酶,有些是受
体,有些是信号传导分子、离子通道或调节分子。CD分子参于机体一些重
要的生理和病理的过程,例如:1.免疫应答过程中免疫细胞的相互识别,
免疫细胞抗原识别、活化、增殖和分化,免疫效应功能的发挥。2.造血细
胞的分化和造血过程的调控。3.炎症发生。4.细胞的迁移,如肿瘤细胞
的转移等。
62简述白细胞分化抗原(CD分子)的应用。
CD抗原及其相应的单克隆抗体在基础和临床免疫学研究中已得到广泛的
应用。基础免疫学研究中CD主要应用于:LCD抗原的基因克隆,新CD
抗原及新配体的发现。2.CD抗原结构与功能关系。3.细胞激活途径和膜信
号的传导。4.细胞分化过程中的调控。5.细胞亚群的功能。在临床免疫
学研究中,CD单克隆抗体可用于:1.机体免疫功能的检测。2.白血病、淋
巴瘤免疫分型。3.免疫毒素用于肿瘤治疗、骨髓移植及移植排斥反应的
防治。4.体内免疫调节治疗。
63简述移植排斥反应发生的过程。
移植排斥反应过程比较复杂,体液免疫和细胞免疫反应均参与,但以细胞
免疫为主。排斥反应主要分三个阶段:1.抗原的识别及摄取阶段:移植
物细胞表面有移植抗原(主要为HLA),宿主的免疫细胞随血流进入移植物
与移植抗原接触。2.反应阶段:T淋巴细胞接受抗原信息,分化增殖形成
致敏淋巴细胞,产生许多淋巴因子;B淋巴细胞接受抗原信息,分化增殖
形成浆细胞,分泌IgG、IgA、IgM抗体。3.效应阶段:①细胞免疫:杀
伤T细胞(Tc)一旦形成,Tc就与靶细胞上抗原结合,使靶细胞膜受损
害致靶细胞崩解;②体液免疫:抗原和抗体在局部结合,激活补体,通过
凝血及激肽系统发挥作用,引起局部血管充血,通透性增力口,白细胞浸
润等炎症现象,加重组织损伤。此外K细胞、巨噬细胞也参与“损害”靶
细胞的作用。
64临床测定患者血清补体水平有何意义?
仅有少数病例如某些恶性肿瘤患者,血清补体总量增高,某些传染病中可
见到代偿性增高;与补体有关的疾病多数情况是由于补体水平降低造成
低补体血症。例如1.补体成分消耗增:多可见于血清病、链球菌感染后
的肾小球肾炎、系统性红斑狼疮、自身免疫性溶血性贫血、类风湿性关节
炎、同种异体移植排斥反应等。2.补体大失:补体大量丧失见于肾病综
合征或大面积烧伤。外伤、手术和失血亦可使补体总量下降。3.补体合成
不足:主要见于肝病患者,如肝硬化、慢性活动性肝炎和急性肝炎的重症
病例等。
65简述C-反应蛋白检测的临床意义。
1.作为检查炎症和组织损伤的非特异性指标:一般在炎症反应和组织损伤
的急性期含量急剧升高,而且几乎与组织损伤程度成正比。当病理状态
恢复时,含量也下降。2.手术后继发感染的检测:手术后6h-8hC-反应蛋
白(CRP)很快上升,到48h-72h达到高峰,术后如果无并发症,则3-4
天后迅速下降。CRP是手术后并发症或进行性组织损伤坏死的一个很有意
义的早期指标。3.用于鉴别细菌与非细菌感染:在一般情况下,细菌性
感染CRP浓度上升,而非细菌性感染上升不明显。4.用于某些疾病的鉴别
诊断:如肾盂肾炎与膀胱炎,细菌性肺炎与支气管炎等,一般前者高于
后者。5.作为多种疾病的辅助诊断:如:急性风湿热CRP均升高,急性期
过后逐渐转为正常。6.可作为烧伤病人和肾移植后排异现象的检测指标。
66简述补体系统的生物学作用。
1.溶菌、杀菌及细胞毒作用:协助抗体杀灭或溶解某些革兰氏阴性菌及某
些细胞等。2.调理作用:补体裂解产物(C3b、CI)与细菌或其它颗粒物
质结合,可促进吞噬细胞的吞噬。3.免疫粘附作用:抗原与抗体形成免疫
复合物激活补体之后,可通过C3b而粘附到表面有C3b受体的红细胞、血
小板或某些淋巴细胞上,形成较大的聚合物,然后被吞噬细胞吞噬,对抗
感染免疫有重要作用。免疫粘附在一些免疫性疾病和自身免疫性疾病的
发病机制中起着重要作用。4.中和及解毒作用:补体能明显增强抗体对病
毒的中和作用,从而阻止病毒对靶细胞的吸附及穿入。5.补体裂解片段
的炎性介质作用:C3a的补体激肽作用,可增加血管通透性,引起炎症;
C3a、C5a的过敏毒素作用,使肥大细胞释放组织胺引起血管扩张,毛细血
管通透性增加、平滑肌痉挛等;C3a、C5a、C567的趋化作用,吸引吞噬细
胞游走至炎症局部发挥吞噬作用。
67何谓人群免疫毒理学?外界因素对人体免疫功能影响的特点有哪些?
人群免疫毒理学是研究外界因素(化学性的、物理性的和生物性的)对人
体免疫系统的不良影响及其作用的一门科学。外界因素对人体免疫功
能的影响的特点有:1.反应较为灵敏:许多外来物作用机体后可以单独影
响免疫系统,而出现功能异常,而不使人体产生其它中毒性改变。2.对
免疫系统的影响是广泛的:一种因素常作用于免疫应答过程的多个环节,
使机体的多种免疫功能受影响,产生多种效应。3.对免疫反应的影响具
有复杂性:主要表现为,对免疫系统可以有增强或抑制作用。不仅不同物
质可以产生不同的增强或抑制作用,同一因素有时也会表现不同的作用。
这主要取决于外来物质的剂量、机体状态、作用方式等多种因素。4.有些
具有可逆性:有些因素作用机体后引起免疫系统的改变,可以在该因素
去除后而恢复。
68简述ILT2的抗肿瘤机制。
根据现有材料,一般认为ILT2的抗肿瘤机制有以下几个方面。1.ILT2
通过激发抗肿瘤效应细胞分泌干扰素而发挥作用。2.一些实验表明IL-12
能诱导激发巨噬细胞产生大量一氧化氮(NO),NO是一种细胞毒性分子,
能引起肿瘤细胞的程序化死亡,被认为是巨噬细胞抗肿瘤作用中的关键
分子。3.诱导NK/LAK细胞和T细胞的增殖,增强它们的溶解细胞作用。
同时刺激NK细胞和T细胞分泌IF"r等细胞因子,发挥抗肿瘤作用。
4.IL-12能通过抑制血管形成而限制肿瘤生长,这种作用是通过一种IF"r
诱生蛋白(IP-10)实现的。5.促进CD8+细胞向Tel型转换,Tel型可分
泌TH1型细胞因子,发挥抗肿瘤作用。6.与其它细胞因子有协同作用,如
与GM-CSF(粒一巨一集落刺激因子)或与B7-1联合应用,其效果比单独
应用其中一种因子显著。
69简述IL-18的功能。
1.刺激T细胞增殖:ILT8可在抗CD3单抗、伴刀豆球蛋白A、IL-2存在
的条件下,刺激小鼠T细胞增殖,经抗CD3单抗作用的人T细胞,经ILT8
刺激后可增殖,并呈剂量依赖性。2.增强TH1及NK细胞毒活性:ILT8选
择性地扩增TH1克隆Fasl介导的细胞毒作用,而对THO及TH2细胞不起
作用。IL-12可以和IL-18起协同作用,IL-18刺激T细胞的产物IFN-r
可以增加Fasl表达。因此IL-18在免疫系统和某些疾病状态的自身调节
中起作用。当ILT8作用于NK细胞时,NK细胞也可上调Fasl表达,并对
Fasl阳性靶细胞表现出更强的杀伤作用。3.参于细胞因子的生成:应用
富集的人T细胞,经抗CD3单抗刺激,ILT8可使IFN-r和GM-CSF产生
显著增加,并呈现剂量依赖性,也可增加IL-2的产生。由于IFN-r和
GM-CSF与TH1型免疫反应相关,提示IL-18在TH1型免疫反应中起重要作
用。
70简述基因表达的基本概念、过程及意义。
1.概念:生物体的全部遗传信息均储存于DNA分子中。信息从DNA向蛋白
质的流动称为基因表达。2.过程:基因表达的第一步为转录,即DNA将
其遗传信息原原本本转录成mRNAomRNA的合成是按照碱基配对的原则,
将DNA分子中的信息转录至mRNA分子上。随着分子生物学的进展、发现
某些情况下遗传信息还可以由RMA向DNA方向流动,即逆转录现象。基因
表达的第二步是遗传信息从mRNA流向蛋白质,此过程是通过解释遗传密
码子来完成的,所以称为翻译。3.意义:一般而言,不同生物的遗传密码
是相同的,这种通用性正是基因工程的基础。如分子杂交,CDNA库的建
立,DNA序列分析,重组质粒的构建等。
71何谓基因组、基因组库、cNA和cDNA库?
1.基因组:系指一个生命体或染色体中含有的全部DNA。将基因组DNA切
成片数,与载体拼接成一重组DNA,并引入宿主细胞,这种含有同一特定
基因组片段的重组分子亦称基因组克隆。2.基因组库:所谓基因组库乃指
含一个机体中的全套基因组克隆。3.cDNA根据碱基配对原则:在体外将
某些mRNA由逆转录酶催化而合成互补的DNA,即为cDNA。将cDNA与载体
拼接成一重组分子,并引入宿主细胞即成cDNA克隆。4.cDNA库:cDNA
库乃指包含某特定细胞的全部cDNA克隆。
72简述免疫学治疗方法。
1.特异性抗体疗法:(1)抗毒素,如白喉、破伤风等中毒疾病的治疗。(2)
抗肿瘤,如抗肿瘤单克隆抗体的临床应用。(3)其它,如抗同种异型抗
体在器管移植中的应用。2.非特异性免疫调节:(1)细菌性制剂,如卡介
苗、短小棒杆菌和革兰氏阴性菌的脂多糖,可以活化巨噬细胞,提高抗
感染,抗肿瘤的免疫效应。(2)免疫分子制剂,如胸腺激素,转移因子,
免疫核糖核酸、干扰素和白细胞介素等,可促进T细胞成熟,具有抗病
素、抗肿瘤和免疫调节作用。(3)化学合成剂:如左旋咪陛、多聚核甘酸
已用于感染、肿瘤、免疫缺陷和自身免疫病的治疗。3.人工免疫抑制:
如肾上腺皮质激素,烷化剂,抗代谢药物和抗淋巴细胞血清等。可控制自
身免疫病和延长移植物存活时间。4.替代疗法与免疫重建:应用丙种球
蛋白、胎儿胸腺移植、骨髓或胎肝移植,对严重的原发性免疫缺陷进行免
疫重建。
73简要说明非经典的HLA-I类分子在诱导母胎耐受中的作用。
胎盘滋养细胞上表达有HLA-E,HLA-G分子,而母体蜕膜NK细胞表面存在
CD94/NKG杀伤抑制受体,HLA-E/HLA-G-胎儿抗原复合物作为配体与
CD94/NKG受体发生作用后,通过跨膜分子NKG胞内段上的ITIM传递抑制
性信号,抑制NK细胞的杀伤活性,从而抑制了母体NK细胞对滋养层细
胞的杀伤而保护了胎儿。
74简要说明形成自身免疫耐受的机制。
自身免疫耐受形成的机制主要有:①克隆清除(clonaldeletion):中枢
耐受:未成熟的T细胞在胸腺内发育过程中识别胸腺基质细胞上的MHC-
自身抗原复合物后,通过凋亡机制被清除;②克隆无能(clonalanergy):
自身抗原缺乏抗原递呈分子或协同刺激分子,不能有效激活自身反应性T
细胞,而致克隆无能;③克隆重排:自身反应性B细胞克隆在发育成熟的
过程中会发生克隆重排,成为对自身抗原不起反应的B细胞;④抑制性
细胞的作用:如抑制性T细胞、自然抑制细胞、抑制性单核巨噬细胞等;
⑤抗独特性网络对免疫应答的自限作用;⑥免疫忽视:自身抗原表达量
低,不能有效激活免疫效应细胞;⑦免疫特许部位:如睾丸、脑、胎盘等。
75刺激产生移植物抗白血病反应(GVLR)的主要抗原有哪些。
移植物抗白血病反应是骨髓移植物中的免疫细胞可向残留的白血病细胞
发动进攻,从而防止白血病的复发。刺激移植物抗白血病产生的主要抗
原有:①广泛分布的次要组织相容性抗原,如HA-3、HA-4、HA-6、H-Y等;
②相对特异的白细胞抗原,如HAT、HA-2、(淋巴细胞或髓细胞系)、CD19
(淋巴细胞)、CD45(淋巴细胞或髓细胞);③白血病特异性抗原,如
BCR-ABLp210,pl90(慢性髓细胞性白血病)、PML/RARA(急性髓细胞性白
血病、突变的Ras蛋白(髓性白血病)等;④某些在白血病时表达增高的
正常蛋白。
76说明双缩服法成为测定血清总蛋白参考方法的理由?并解释其标化法
计算公式中的0.298是什么含义?
(1)我国卫生部医政司推荐的双缩月尿法试剂配方是Doumas1981年推荐
的优化配方,此配方的精密度和准确度优于其它生化专著中介绍的不同配
方;本方法简便、准确、重复性好,试剂与蛋白质肽键反应专一,不受
蛋白质分子量和氨基酸组成的影响,干扰因素较少,故成为公认的测定血
清总蛋白的参考方法。
(2)Doumas等确定0.298为纯蛋白一双缩月尿复合物的吸光系数。即按照
Doumas的标准试剂配方,在波长540nm,比色杯光径1.0cm,分光光度计
波长带宽W2nm等标化条件下,双缩胭反应液中蛋白质浓度为1.Og/L时的
吸光度。
77血清白蛋白澳甲酚绿(BCG)法为什么在反应5s时读取A值,而澳甲酚
紫(BCP)法为什么定在60s以后?
因为血清白蛋白与BCG呈现即刻反应后反应液颜色即不再加深,但是所测
定的血清样品中,除白蛋白外尚有相当数量的ab抗胰蛋白酶、al-酸性
糖蛋白、转铁蛋白、触珠蛋白、c反应蛋白和铜蓝蛋白等所谓“慢反应蛋
白质”,它们与BCG的反应要在15min甚至lh才能完成。为了防止这种
非特异性反应的干扰,故将BCG法的读取A值时间定在5s(或10s),这
样所测得的结果与免疫火箭电泳法高度一致。BCP试剂只与白蛋白反应,
不与白蛋白以外的其它蛋白质显色。故此法测定A值的时间可放在呈色后
lh以内,不影响测定值的准确性。
78何谓真血糖?判断一项血糖测定方法的测定结果是否接近血糖真值,主
要依靠方法的什么性能?试举例加以说明。
所谓真血糖是指血液中的葡萄糖。测定方法的特性越高其血糖测定结果越
接近真值。例如同位素稀释一质谱法所测得的血糖值没有偏差,是公认的
决定性血糖测定方法;已糖激酶(HK)法试剂两个工具酶对底物高度专一,
故其测定结果准确性很高,是公认的血糖测定的参考性方法;而葡萄糖氧
化酶(GOD)法中GOD对葡萄糖的专一性是很高的,但其第二步反应的过
氧化物酶(POD)特异性差,维生素C、胆红素、尿酸等多种物质能使H202
还原,使测定结果偏低。所以GOD法只能用于常规分析。
79何谓Trinder反应?试说明此反应的分析特性。
Trinder反应是指对氧化酶催化底物氧化过程中产生的H202在过氧化物
酶作用下,与4—氨基安替匹林及苯酚生成红色色素的反应。此反应首先
由Trinder于1969年提出,故名。Trinder反应最初使用苯酚作生色剂,
后来有许多作者提出十余种化合物替代苯酚(如2.4—二氯酚等),使反应
的灵敏度得以显著提高。Trinder反应构成了葡萄糖、胆固醇、甘油三脂
及尿酸等酶法测定的基础,有较为重要的使用价值。但是由于催化Trinder
反应的过氧化物酶对底物专一性差,维生素C、尿酸、谷胱甘肽及胆红素
等还原性物质也与色原性物质竞争H202,从而使氧化过程中产生的H202
被消耗,导致色素形成减少,测定结果偏低。此外,工具酶中如夹杂有较
多的过氧化氢酶,也能消耗氧化产物H202,使被测物的测定值偏低。
80评述K、Na、Li元素原子火焰发射光谱的发生原理。
火焰光度分析法是一种发射光谱分析方法。样品中的K、Na、Li原子受
火焰的热能作用而被激发处于高能级的激发态。处于激发态的原子不稳
定,要跃迁回到低能级的基态。当此电子跃迁回到基态时就放出能量,
发射出元素特有波长的辐射谱线,利用此原理可进行火焰光度分析。Na原
子的3s基态电子经火焰激发可跃迁到3P、3d或4P亚层中。当此电子由
3p返回到3s亚层时.则产生589nm波长的辐射(黄色火焰)。K原子受火
焰激发时,4s电子可跃迁到4p、4d或5P亚层,若由4P返回4s基态时,
可辐射出767nm波长的深红色光谱。Li原子的2s电子受火焰激发可跃迁
到2p、3P或3d亚层,若由2P返回2s基态时,发射出光谱波长为671nm
(红色火焰)。
81说明Fe、Zn、Cu、Mg的原子吸收光谱特征?
原子吸收分光光度法是基于从光源辐射出具有待测元素特征谱线的单色
光,通过试样蒸气时被蒸气中待测元素基态原子所吸收,由辐射谱线被
减弱的程度来测定试样中待测元素含量的方法。该方法的技术关键是采用
由被测元素作阴极的空心阴极灯作光源,光源灯发出含有被测元素共振
线的线光谱通过原子化器时,其中的共振线被待测元素所吸收,吸收的多
少与待测元素的含量有关。Fe、Zn、Cu、Mg等元素强烈的特征性吸收
谱线是:Fe:248.3nmZn:213.8nm(空气一乙快火焰)Cu:
324.5nmMg:285.2nm(空气一乙快火焰)
82何谓血浆功能酶?举例加以说明。
血浆功能酶是指在血浆中有确定的和特异生理生化功能的一类酶,它们不
仅在血浆中发挥催化作用,而且酶在血浆中的浓度也明显高于其它组织。
血浆功能酶包括:(1)大多数凝血因子和纤溶酶原:如凝血酶原(第II因
子)、前激肽释放酶、纤维蛋白溶酶原等。(2)参与血浆脂蛋白代谢的两
种酶:脂蛋白脂肪酶(LPL)和卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)。(3)铜
蓝蛋白(亦称亚铁氧化酶)。(4)肾素(即血管紧张肽原酶):肾素是由肾
小球旁器的颗粒细胞合成并释放进入血液的一种蛋白水解酶,催化血管紧
张素原转变成血管紧张素I。(5)血浆胆碱脂酶,等。
83何谓酶的催化活性浓度?酶的活性单位如何表示?
(1)酶的催化活性浓度是酶含量测定的一种表示方法。它是利用酶的催
化特性,通过测定被加速的反应速度来间接的算出酶含量的高低,此法
的结果不能用质量单位,只能用反应速度单位(umol・min-1)来表示
酶量的多少,并计算出一定体积(L)标本中酶的含量(活性单位数)。这
种表示酶浓度的确切名称是酶的催化活性浓度,简称为酶活性浓度。
(2)酶活性单位有:①国际单位(在特定条件下每min催化lumol底物
转化的酶量);②催量(katal,简称Kat):它的定义是在最适条件下每s
催化Imol底物转化的酶量。Kat对血清酶活性测定而言显得过大,故用口
katal或nkatalo两者可换算1IU=1umol•min-1=16.67nmol,s-1
=16.67nkatal
84解释连续监测法。说明本法为什么要在线性反应期进行测定?
(1)连续监测法是指在适当的仪器上,在不终止酶反应的条件下,多点
监测整个酶促反应过程中某一反应引起的产物或底物随时间变化的情
况,在反应速度恒定期间,以单位时间酶反应初速度计算酶的活性浓度。
由于本方法测定的是反应速率,故又名“速率法”;又由于测定是在酶促
反应动态期进行的,故又称“动力学法”(也曾称为“动态法”)。但IFCC
文件建议避免将本法称为“动态法”,而应称为“连续监测法:我国卫生
部临床检验中心亦推荐使用“连续监测法”。
(2)酶促反应的线性反应期是指在最佳条件下,酶促反应速度保持恒定
(零级反应期)的时间内进行的反应。此时反应产物的生成量与反应时
间呈正比例,单位时间内吸光度的变化值亦与酶活性成正比例。这样就能
保证测定结果较为准确可靠。85解释非结合胆红素(Bu)、结合胆红素(Be)
和6胆红素(B8)?
(1)非结合胆红素(Bu)是指游离胆红素,是血红素的代谢产物,分子
式为C33H36N40,分子量584.7,金黄色,不溶于水,易溶于有机溶剂,
不与重氮试剂直接显色,是正常血清中的主要胆色素。
(2)结合胆红素(Be):在一分子非结合型胆红素的两个丙酸基侧链上结
合二个葡萄糖醛酸残基即构成胆红素葡萄糖醛酸二酯,称为结合胆红素
(Be)。它是在肝细胞内合成的,是胆汁中的主要胆红素。水溶性,能与
重氮试剂直接显色,无毒性。
(3)3一胆红素(B6);在长期高胆红素血症病人血浆中存在3一胆红
素。B3有两种形式:一种是脂型的B3,是一个丙酸基侧链以共价键与
Alb结合,另一个丙酸基侧链结合着糖醛酸;未酯化型B3只有一个丙酸
基与Alb结合。85%的B6能与重氮试剂直接显色。B6既不被肝细胞摄取.
也不能被肾小球滤过,致使它在循环血液中有较长的停留时间。
86何谓肾清除率和内生肌酎清除率?说明其判断指标。
(1)肾清除率是指单位时间内(min)经肾小球滤出的血浆滤液量
(ml/min)o
(2)内生肌酎清除率(ccr)是指单位时间(min)内,肾脏清除血浆内生肌
酎的血浆体积,其结果以ml/min表示。
(3)内生肌酎清除率试验是判断肾小球滤过功能的敏感指标,其判断指
标主要有:
①参考值:男105±20ml/min女95±20ml/min
②初步估计肾小球滤过功能损害的程度:
若Ccr70—51ml/min轻度损害
50-31ml/min中度损害
<30ml/min重度损害
慢性肾功能衰竭的病人:
若Ccr20-llml/min为早期肾功能衰竭
10—6ml/min为晚期肾功能衰竭
<5ml/min为终末期肾功能衰竭
③指导治疗:Ccr<30ml/min限制蛋白质摄入〈30ml/min曝嗪类利尿
药治疗无效<10ml/min应结合临床进行透析治疗
87解释Jaffe反应及“假肌酎”两个名词,并说明如何消除“假肌酎”对
Jaffe反应的干扰?
(1)Jaffe反应是指血浆中的肌酎与碱性苦味酸盐反应,生成黄红色的苦
味酸肌酎复合物的反应。
(2)Jaffe反应特异性不高,标本中的维生素C、丙酮酸、丙酮、乙酰乙
酸、甲基多巴、高浓度的葡萄糖、蛋白质和一些抗菌素如青霉素G、头抱
曝吩、头抱西丁、头抱隆琳等也都能与碱性苦味酸生成红色复合物。这些
不是肌酎但能起显色反应的物质称为“假肌酎”。
(3)消除“假肌酎”干扰,主要采取两种办法:
①用吸附剂(硅酸铝或纯化漂白土)吸附或用离子交换树脂除去“假肌酎”。
②在速率法测定中,设置20s延迟期,即在样品与碱性苦味酸试剂混匀后
的20—80S之间(此时期中肌肝与苦味酸反应占主导地位,称为“窗口
期”进行测定,可得到较准确的测定结果。
88试述ApoAI、ApoBlOO和ApoCII的合成部位及其主要功能?
(1)ApoAI由肝细胞合成,是HDL的主要结构蛋白,其功能是激活LCAT
(卵磷脂胆固醇酰基转移酶),在胆固醇的逆向运转中起重要作用。
(2)ApoBlOO由肝脏合成,是LDL.VLDL的结构蛋白(肝脏合成的每一个
VLDL颗粒中只含1分子apoBlOO,LDL由VLDL转变,每个LDL颗粒中只
含1分子apoBlOO),也是LDL受体的配体。
(3)ApoCII主要来源于肝脏.其主要功能是激活脂蛋白脂酶(LPL),启动
LPL对乳糜微粒和VLDL中甘油三脂的水解反应。
89何谓基质效应?试述它对血脂测定结果准确性的影响。
(1)“基质”是指标本中除分析物以外的一切组份。对血清胆固醇测定而
言,就是指胆固醇以外血清中的一切成份及其物理化学性质。
(2)“基质效应”是指:①标本中除分析物以外的其它成分对分析物测定
值的影响;②基质对分析方法准确测定分析物能力的干扰。广义说来,
基质效应也应包括已知的干扰物(如胆固醇测定中的胆红素、血红蛋白、
抗坏血酸等都是干扰物),但目前只将基质效应限于生物材料中未知或未
定性的物质或因素(如粘度、pH等)的影响。基质效应所致分析结果的偏
差称为基质偏差(matrixbias)。
(3)基质效应对血脂测定结果准确性的影响:以总胆固醇测定为例,1979
年由Cooper证实,在胆固醇酶法测定中,由于校准液与病人血清的反应
性不同,可使总胆固醇的测定值偏低5%-7%O80年代也有不少报告指出
校准液中的胆固醇用酶法测定回收率偏低。在甘油三脂、HDL-C及LDL-C
酶法测定中也出现了不同程度的基质效应。因此采用定值人血清做校准物
来克服基质效应对血脂分析结果准确性的影响是十分重要的。
90说明2.3-DPG对Hb与02结合的影响?
2.3-DPG是2.3-二磷酸甘油酸的缩写,它是红细胞糖酵解支路的产物。在
成熟红细胞内,2.3-DPG的含量在动脉血中为3400umol/L,静脉血中为
4940umol/L,比糖酵解中间产物(如3一磷酸甘油酸等)高出数百倍。研
究确定2.3-DPG在红细胞内有重要生理功能,即能降低Hb和02的亲和
力,促使Hb02释放02以适应组织对氧的需求。2.3-DPG在近中性pH环境
中与Hb(脱氧血红蛋白)以等分子(L1)结合,结合常数为105mo「l;
但是它与Hb02(氧合血红蛋白)的结合常数相比只有前者的1/100,可见
2.3-DPG主要与脱氧Hb结合。当它与Hb02的二条B链形成盐键结合后,
使Hb变成T型(紧密型),降低了Hb与02的亲和力,从而促进Hb02解
离释放02。这种作用在P02较高的肺部影响较小,但血液流经组织时,红
细胞内存在的2.3-DPG就发挥作用,使Hb02大量分解释放出02、供组织
利用。
91何谓Bohr效应?说明其发生的机理及生理意义。
(1)Bohr效应:血液pH对Hb与02亲和力的影响称为Bohr效应。
(2)Bohr效应的发生机制与pH改变引起Hb构象改变有关。即当H+浓度
增加或PC02增加时,可促进Hb的a链氨基端缀氨酸的氨基和a链122、
8链146组氨酸残基的异咪隆基与H+结合,使其带正电荷,从而促进盐键
的形成,使Hb变成T型(紧密型)结构,导致Hb对02的亲和力降低。
反之,盐键断裂,Hb变成R型(松弛型),增大了Hb对02的亲和力。
(3)Bohr效应具有重要生理意义:当血液流经肺部时,C02从血液向肺
泡扩散,血液PC02下降,[H+]也降低,均使Hb对02的亲和力增加,氧
离曲线左移,在任一P02下Hb氧饱和度增加,血液运氧量加大;当血液
流经组织时,C02从组织进入血液,血液PC02和[H+]升高,Hb对02亲和
力降低,曲线右移,促进Hb02解离向组织释放更多的02。
92什么是Porter—Silber反应和Zimmermann反应?说明它们的用途?
(1)Porter和Silber的比色法是测定尿17羟类固醇(17-0HCS)的常用
方法。用提取剂提取酸性尿(pH2.4-2.6)中的17-0HCS,在提取相中加
入Porter-Silber试剂,在60℃水浴中保温30min.完成Porter-Silber
氏颜色反应。此反应的实质是17-0HCS与盐酸苯脱的硫酸溶液作用,生成
一种能产生黄色腺的2b醛),通过与同样处理标准比色,计算出尿液中
17-0HCS的含量。
(2)Zimmermann反应是测定尿中17-酮类固醇(17-KS)的方法学基础。
尿中17-KS结合物在酸性(pH2.0)环境中,经加热水解,用乙醛提取水
解后游离的17-KS,洗涤后使17-KS与碱性间二硝基苯反应,生成特征性
紫色反应,即Zimmermann反应。
93什么是0CV和RCV?说明实验室进行0CV和RCV的工作条件?
(I)ocv是“最佳条件下的变异”的英文缩写。它表示本室在目前条件下
该检验项目所能达到的最好的精密度水平。各种不同方法中OCV的测定必
须遵循一条基本原则,即ocv的测定应使用与常规工作相同的检验方法、
试剂和仪器。但对仪器必须重新进行校正;试剂应新鲜配制并进行标定;
由技术熟练的工作人员操作;在全部测定过程中应严格控制温度、光照、
反应时间等一切可能影响检验结果的因素,并正确的计算检验结果。
(2)RCV是“常规条件下的变异”的英文缩写。它表示本室目前条件下,
常规工作中该检验项目的精密度水平。做RCV的基本要求是把质控样品
完全当病人标本,每天由作常规检验的操作者随同病人样品同批测定,而
不要有任何特殊照顾,以便能真实反映常规检验的精密度。
94什么是任选式全自动生化分析仪?在生化自动分析工作中采取哪些抗
交叉污染的措施?
(1)任选式全自动生化分析仪具有在一个通道中任意选择测定多种项目
(一般可高达60项以上)。所谓任选有两种方式。其一是输入样品的顺
序,测定完一个样品的所有项目后再做下一个样品。另一种方式是按做批
量测定的方式,将输入的所有样品按欲测项目进行组合分类.相同的项目
一起测定,测完一种项目再测另外一种项目。
(2)全自动生化分析仪在工作中防止交叉污染的主要措施有:
①加样探针、试剂探针的自动清洗与冲洗功能;
②比色皿的自动冲洗功能;
③自动光扫描比色皿,剔除不合格的比色皿;
④计算机自动降低具有相似测定方法的测定项目间的交叉污染概率。
95解释真值、误差、精密度和准确度?
(1)真值:标本中被测物的真实浓度称为真值。
(2)误差:误差是实验误差的简称,是某量值的给出值与其客观真值之
差。
(3)精密度:精密度是表征测定结果中随机误差大小程度的指标,即同
一标本在一定条件下多次重复测定所得到的一系列单次测定值的符合程
度叫做精密度。
(4)准确度:准确度是指测定结果与真值接近的程度。准确度主要受测
定系统中系统误差的支配(系统误差越小准确度越高),也受随机误差的
影响.所以准确度是表示测定结果中系统误差和随机误差的综合。
96如何区分一个分析方法的特异性差和受干扰物质的干扰?举例加以说
明。
(1)某些非分析物与试剂发生反应,影响了测定结果的准确性,说明该
方法特异性差。例如在用澳甲酚绿法测定血清白蛋白(Alb)时,BCG除
了与Alb发生“快反应”外,还与血清中的al酸性糖蛋白、转铁蛋白、
触珠蛋白、C反应蛋白和铜蓝蛋白等进行所谓的“慢反应”,使该法Alb测
定值偏高,表明BCG方法用于血清白蛋白测定时其特异性差。
(2)所谓干扰是指某些非分析物改变了被测定物和试剂间的反应,从旁
影响了分析物被该方法检测的正确度。例如在GOD—PAP法测定葡萄糖的
试验中,维生素C、尿酸等还原性物质也能使H202还原,导致血糖测定结
果偏低。
97解释PCR、DNA—PCR、RT—PCR、原位PCR和定量PCR?
(1)PCR是聚合酶链反应(Polymerasechainreaction)的英文缩写,
是近年来发展起来的一种在体外特异扩增某一目的DNA片段的技术。
(2)DNA—PCR:以DNA为模板,扩增特定核昔酸序列。主要用于检测特
定基因或DNA片段的存在,并常与核酸分子杂交结合,分析检定基因突
变。
(3)RT—PCR:用提取的mRNA或总RNA(含有mRNA)为模板,通过逆转
录扩增cDNA。是检测特定基因表达水平的主要方法之一,也是用于鉴别、
诊断RNA病毒的重要技术。
(4)原位PCR:与原位杂交一样,原位PCR也无需提取DNA/RNA,直接用
组织切片和细胞进行PCR或RT—PCRo它既能鉴定含有靶DNA/RNA序列的
细胞,又能确定靶DNA/RNA序列在细胞内或染色体上的位置。
(5)定量PCR:PCR产物经凝胶电泳分离转移膜上,与放射性核素或化学
发光标记的核酸探针杂交。根据放射自显影或化学发光后底板爆光的强
弱,用密度计扫描定量。此法在基因诊断中应用甚广。
98简述胆固醇在体内的转化途径.
⑴转变为胆酸和脱氧胆酸;
⑵合成胆固醇脂;
⑶在肠道内转变为粪固醇随粪便排出体外;
(4)合成皮质类固醇和性激素;
⑸转变为维生素D.
99试列举五种主要在肝脏进行的代谢.
(1)可利用糖原提供血糖;
(2)进行糖异生;
(3)在脂类代谢过程中生成酮体;
(4)尿素的生成;
⑸进行生物转化作用.
100试述a1-微球蛋白(a1-m),B2-微球蛋白(B2-m)的生化特点及其
测定对早期肾损伤的诊断价值?
(1)a1-m:a-m是一种糖蛋白(含糖量为20%),分子量较小(3KD),
pI4.5~5.0oa1-m由肝脏产生。血液中的a1-m有游离型和与IgA结合
型两种存在形式,其游离型可通过肾小球滤过,绝大部分在肾小管重吸收
降解,故在各类肾病引起的肾小球滤过功能降低时,血清abm浓度升高。
此时血清a1-m浓度与血清肌酎、血尿和B2-m等呈正相关(r=0.7以上)。
(2)32-m:B2-m存在于除红细胞和胎盘滋养层细胞以外所有有核细胞,
尤其在单核细胞和淋巴细胞中含量丰富,在免疫应答中起重要作用。62-m
分子量约为11.8KD,由100个氨基酸组成的单链多肽,pI5.70。它可被肾
小球滤过,肾小球的滤过系数达0.90,又可被近端肾小管全部重吸收降
解。血中B2-m的半衰期为L8h。血中82-m浓度主要受肾小球滤过功能
的影响。故血清82-m能早期判断肾小球滤过功能,较测定血清肌酎更灵
敏。肾移植成功后血清62-m很快下降,当发生排斥反应时,由于肾滤过率
下降,并且因排斥引起淋巴细胞增多(82-m合成增多),血清82』常增
高。
101、.试述血清乳酸脱氢酶的临床意义
临床意义:(1)心肌梗塞发病后12〜24H,血中LDH开始上升,48〜96h达高峰,
1014d恢复正常,高峰平均值为正常的七~4倍,对发病己数天,AST已恢
复正常的患者,LDH测定仍有较大意义.(2)诊断急性心肌梗塞,LDH缺乏
特异性。在白血病,癌肿,肌营养不良,粘液性水肿、胰腺炎和肺粳塞等
患者,血清LDH均可升高,其中宦幼细胞性贫血升高尤为明显。(3)任何
原因致使肝细胞损害均可引起血清LDH升高,如急性肝炎或慢性肝炎活动
期,其临床意义为ALT、AST相一致,肝炎恢复期,LDH是最早恢复的酶
之一,肝癌时血清LDH活性明显升高,通常原发性肝癌多在lOOOu以内,
而转移性肝癌可达1000u以上。肝癌患者血清LDH升高是由于肿瘤组织
中糖酵解速度高于正常组织之故。
102.试述血清a-羟丁酸脱氢酶(HBDH)测定及真临床意义HBDH能催化
a-羟丁酸氧化为a-酮丁酸。它主要存在于心肌内,肝细胞内含量很少。
当心肌受损时,HBDH就释放入血中。
临床意义:
⑴急性心肌梗塞时,HBDH波动幅度与AST相似,发病2〜3d时活跃性达最
高峰,其后逐渐下降,.l「16d后恢复正常,在AST和CPK己恢复正常的
心肌梗塞患者,测定HBDH可以提高阳性检出率。HBDH有助于心肌梗塞预
后估计,血清HBDH超过750u者预后不良。此外HBDH升高还见于心肌炎。
⑵肝脏病患者HBDH不升高,急性心肌梗塞时HBDH/LDH>0.8,肝病则之
0.6,故当LDH升高而难于确定为心肌梗塞或肝病时,测定HBDH有助鉴
别。
103、试述血液中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)测定及其临床意义
GSH-Px存在于牛、羊、人等哺乳动物的红细胞及肝脏中,它能催化还原型
谷胱甘肽(GSH)氧化与过氧化物(如H202)还原的反应。
正常参考值:91~155u(平均123)临床意义:减少:遗传性GSH-Px缺乏症。
104、试述血清铜蓝蛋白氧化酶(CP)临床意义
临床意义:血清铜氧化酶测定主要用于肝豆状核变性的诊断。该病患者血
清铜氧化酶水平显著降低,可能由于铜过多地沉积于肝脏及基底核等组
织,或是铜氧化酶合成障碍所致。止匕外,肾病综合征和营养不良时,血清
铜氧化酶也减少。重症感染、贫血、妊娠、口服雌激素或某些避孕药、胆
道梗阻、胆汁性肝硬化、肾癌和肺癌等患者,血清铜氧化酶可增高。
105、试述肌酸.激酶(CK)测定及真临床意义
CPK主要存在于心肌、骨胳肌和脑内。在胃肠道、肺和肾内也含有少量。
临床意义:(D心肌梗塞发病后3〜4h时,CPK水平开始上升,24〜36h时达
高峰,2〜4d后恢复正常,高峰平均值可为正常的20倍。CPK升高程度与
梗塞面积成正比。因
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