2025年辽宁省普兰店市高考考前提分生物仿真卷含解析

2025年辽宁省普兰店市高考考前提分生物仿真卷注意事项：1．答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号、考场号和座位号填写在试题卷和答题卡上。用2B铅笔将试卷类型（B）填涂在答题卡相应位置上。将条形码粘贴在答题卡右上角"条形码粘贴处"。2．作答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目选项的答案信息点涂黑；如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案。答案不能答在试题卷上。3．非选择题必须用黑色字迹的钢笔或签字笔作答，答案必须写在答题卡各题目指定区域内相应位置上；如需改动，先划掉原来的答案，然后再写上新答案；不准使用铅笔和涂改液。不按以上要求作答无效。4．考生必须保证答题卡的整洁。考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．如图是某物质跨膜运输的示意图，据图分析错误的是（）A．该物质跨膜运输的顺序为丙→乙→丁→甲B．葡萄糖进入哺乳动物成熟红细胞的方式与该物质的运输方式相同C．该物质跨膜运输过程中需要消耗ATPD．用药物抑制载体蛋白的活性会影响该物质的运输速率2．2020年2月11日，世卫组织宣布将新型冠状病毒正式命名为COVID-19，新型冠状病毒是一种RNA病毒，下列有关说法正确的是（）A．新型冠状病毒的遗传物质主要为RNA，因此更容易发生变异B．新型冠状病毒颗粒内可以合成mRNA和蛋白质C．新型冠状病毒在进化过程中是独立进化的，与其他物种无关D．感染新型冠状病毒后人体内会产生相应的浆细胞和效应T细胞3．在观察细胞减数分裂图像时，图像中的同源染色体和姐妹染色单体不易区分，还需借助其他结构特点。如植物减数分裂产生的子细胞全部包在胼胝体（由葡聚糖形成的透明包层）内，直到分裂结束，子细胞才分散。以下各图是处于减数分裂不同时期的水仙细胞，下列叙述正确的是（）A．图3所示细胞发生了同源染色体分离B．图9所示细胞发生姐妹染色单体分离C．图1、5、6所示细胞处于减数第一次分裂D．图2、7、8所示细胞处于减数第二次分裂4．唐代诗人曾用“先春抽出黄金芽”的诗句形容早春茶树发芽的美景。茶树经过整形修剪，去掉顶芽，侧芽发育成枝条。研究表明，外源多胺能抑制生长素的极性运输。下列相关叙述错误的是（）A．在侧芽发育成枝条的过程中赤霉素、生长素细胞分裂素发挥了协同作用B．施用适宜浓度的外源多胺能促进侧芽发育C．生长素主要在顶芽合成，细胞分裂素主要在侧芽合成D．光照、温度等环境因子会影响植物激素的合成5．PI是一种核酸染料，能够对坏死或凋亡细胞染色，AnnexinV能够高亲和力结合磷脂酰丝氨酸（PS），研究人员利用两种试剂对三组细胞进行检测，结果如下：以下相关叙述中，错误的是（）A．B4象限内出现细胞的原因是因为细胞正处于凋亡早期B．AnnexinV能够检测细胞凋亡的原因是因为PS在细胞膜上分布的不对称性C．实验结果显示，b组细胞的凋亡率最高D．需要对实验中B2象限内细胞进行镜检，出现炎症反应则确认为细胞凋亡6．下列有关基因工程的说法正确的是（）A．如果某种生物的cDNA文库中的某个基因与该生物的基因组文库中的某个基因控制的性状相同，则这两个基因的结构也完全相同B．一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须有启动子、终止密码子和标记基因C．目的基因进入受体细胞，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化D．将目的基因导入植物细胞和动物细胞的常用方法是显微注射法7．将活的紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞置于蔗糖溶液中，短时间后细胞形态不再发生变化，则此时（）A．细胞必定处于质壁分离状态 B．细胞液中的蔗糖浓度比实验开始时高C．可在光镜下观察到水分子在进出细胞 D．细胞液与蔗糖溶液可能仍存在浓度差8．（10分）下列是应用同位素示踪法进行的几种研究，其中错误的是（）A．用放射性同位素标记某种氨基酸进行示踪，可得出分泌蛋白合成、加工和分泌的途径B．用单细胞绿藻做14CO2示踪实验，不同时间点对放射性碳进行分析可得出暗反应的途径C．给予某人131I通过测定甲状腺的放射性可以反映甲状腺的功能状态D．将某噬箘体的DNA和蛋白质分别用32P和35S标记进而证明DNA是遗传物质二、非选择题9．（10分）抗体的结构如图所示，它有两条H链和两条L链。同一物种C区氨基酸序列恒定，不同抗体的结合抗原的V区氨基酸序列有差异。（1）抗体结构中的肽键数目为p，氨基酸数目为a，二者的关系式为_____________。（2）取免疫后小鼠的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，经筛选得到杂交瘤细胞。将得到的杂交瘤细胞进行克隆化培养和_____________检测以获得具有_____________特点的杂交瘤细胞。将得到的杂交瘤细胞进行体内培养或放入____________培养箱进行体外培养，从细胞培养液中提取出单克隆抗体。（3）由于鼠源性抗体会使人产生免疫反应，导致该抗体失效，科学家制备了嵌合性单克隆抗体，初步解决了这一问题。推测嵌合性抗体应由鼠源性抗体的___________区和人抗体的___________区组合而成。（4）为进一步获得更符合治疗要求的单克隆抗体，科研人员对抗体结构进行精细研究，找到既不影响抗体空间结构又降低免疫反应的__________序列，通过基因工程技术对抗体结构进行人源化改造。这种人源单克隆抗体属于____________工程的产物。10．（14分）破伤风由破伤风杆菌引起，窄而深的皮肤伤口（如刺伤）易营造厌氧环境，有利于破伤风杆菌生长并分泌外毒素，对机体造成损害。请回答下列问题：（1）人体有三道防线，其中皮肤属于保卫人体的第___________道防线。（2）当破伤风杆菌入侵机体时，其分泌的外毒素会使机体产生相应的抗体，这属于特异性免疫反应中的___________免疫。侵入机体的破伤风外毒素被呑噬细胞摄取、处理后，传递给T细胞，进而刺激B细胞增殖分化，引起B细胞增殖分化的两个条件分别是______________________。（3）破伤风是可以通过注射破伤风疫苗预防的。与未接种破伤风疫苗的人体比较，当破伤风外毒素侵入已经接种破伤风疫苗的人体后会更快地被清除掉，其主要原因是______________________。接种破伤风疫苗的人体对破伤风外毒素产免疫力，而对流感病毒没有免疫力，这体现了抗体具有___________性。（4）对于没有接种过破伤风疫苗的伤者，应尽早皮下注射破伤风抗毒血清。破伤风抗毒血清中起关键作用的物质是抗外毒素球蛋白，其作用是______________________。11．（14分）人体内的t-PA蛋白能高效降解由血纤维蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和脑血栓的急救药。（1）为心梗患者注射大剂量的基因工程t-PA会诱发颅内出血。研究证实，将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，能显著降低出血副作用。据此，先对天然的t-PA基因进行改造，再采取传统的基因工程方法表达该突变基因，可制造出性能优异的t-PA突变蛋白，该工程技术称为__________。（2）若获得的t-PA突变基因如图所示，那么质粒pCLY11需用限制酶__________和__________切开，才能与t-PA突变基因高效连接。（3）将连接好的DNA分子导入大肠杄菌中，对大肠杆菌接种培养。在培养基中除了加入水、碳源、氮源等营养物质外，还应加入__________进行选择培养，以筛选成功导入pCLY11的细菌。配置好的培养基通常采用__________法进行灭菌。（4）对培养得到的菌落进行筛选，其中菌落为__________色的即为含t-PA突变基因重组DNA分子的大肠杆菌。得到的大肠杆菌能否分泌t-PA突变蛋白，可通过该细胞产物能否与__________特异性结合进行判定。12．为防治荔枝蝽等植食性害虫，减少农药的使用，有人对比研究了荔枝—山绿豆复合种植园和荔枝单一种植园中各类昆虫所占的百分比（甲图），图乙表示复合种植园生态系统中各成分之间的联系，图丙表示能量流经F营养级的示意图（a、b、c表示能量）。请据图回答：（1）据图甲分析，复合种植园中害虫明显减少，原因是肉食性和寄生性昆虫的比例增加，通过__________等种间关系，降低了植食性昆虫的种群密度。（2）图乙中缺少的箭头是__________（用图中字母表示）。碳在生物群落内以_________的形式进行流动，煤是“高碳”能源，通过燃烧，碳主要以__________的形式进入大气圈。（3）图甲复合种植园中腐生性昆虫对应图乙的__________成分（填字母）。（4）图丙中能量b用于__________。若被F摄入的能量为mkJ，其粪便量中能量为nkJ，c1中的能量为ekJ，b的能量为fkJ，则最终流入最高营养级的能量最多是__________。（5）假设图中的D属于珍稀濒危物种，将其引入某动物园繁育的保护措施属于__________。

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、B【解析】

小分子物质跨膜运输的方式有自由扩散、协助扩散和主动运输：名称运输方向载体能量实例自由扩散高浓度→低浓度不需不需水，CO2，O2，甘油，苯、酒精等协助扩散高浓度→低浓度需要不需红细胞吸收葡萄糖主动运输低浓度→高浓度需要需要小肠绒毛上皮细胞吸收氨基酸，葡萄糖，K+，Na+等【详解】A、初始状态为丙，图示物质运输过程表示被运输的物质先与载体蛋白特异性结合，在有能量供应的条件下载体蛋白发生变形，物质释放出去，故顺序为丙→乙→丁→甲，A正确；B、图示物质运输方式为主动运输，葡萄糖进入哺乳动物成熟红细胞的方式为协助扩散，两者方式不同，B错误；C、由图可知该物质跨膜运输过程中需要消耗能量，主要由ATP提供，C正确；D、该物质运输过程中需要载体蛋白协助，用药物抑制载体蛋白的活性会导致运输速率下降，D正确。故选B。2、D【解析】

1、病毒没有细胞结构，不能独立进行生命活动，必须借助于活细胞才能代谢和繁殖，病毒的成分包括蛋白质和核酸（DNA或RNA）。2、体液免疫过程为：（1）感应阶段：除少数抗原可以直接刺激B细胞外，大多数抗原被吞噬细胞摄取和处理，并暴露出其抗原决定簇；吞噬细胞将抗原呈递给T细胞，再由T细胞呈递给B细胞；（2）反应阶段：B细胞接受抗原刺激后，开始进行一系列的增殖、分化，形成记忆细胞和浆细胞；（3）效应阶段：浆细胞分泌抗体与相应的抗原特异性结合，发挥免疫效应。细胞免疫过程为：（1）感应阶段：吞噬细胞摄取和处理抗原，并暴露出其抗原决定簇，然后将抗原呈递给T细胞；（2）反应阶段：T细胞接受抗原刺激后增殖、分化形成记忆细胞和效应T细胞，同时T细胞能合成并分泌淋巴因子，增强免疫功能。（3）效应阶段：效应T细胞发挥效应。【详解】A、新型冠状病毒不含DNA，其遗传物质为RNA，A错误；B、新型冠状病毒没有细胞结构，所以合成mRNA和蛋白质在宿主细胞内，B错误；C、新型冠状病毒在进化过程中和其他物种可以发生共同进化，C错误；D、感染新型冠状病毒后，会激发人体产生体液免疫和细胞免疫，所以人体内会产生相应的浆细胞和效应T细胞，D正确。故选D。【点睛】本题考查了病毒的有关知识，要求考生识记病毒没有细胞结构，不能独立进行生命活动；识记病毒的组成，即蛋白质和核酸，识记可遗传变异的类型和特点及免疫调节相关知识。3、A【解析】

对题图进行分析可知，图1~9所示细胞所处的时期依次是减数第一次分裂前期、减数第二次分裂后期、减数第一次分裂后期、减数第二次分裂末期、减数第一次分裂间期、减数第二次分裂前期、减数第一次分裂中期、减数第一次分裂末期、减数第二次分裂中期。【详解】A、图3所示细胞处于减数第一次分裂后期，该时期发生了同源染色体分离，A正确；B、图9所示细胞处于减数第二次分裂中期，着丝粒排列在赤道板上，B错误；C、图6所示细胞处于减数第二次分裂前期，C错误；D、图7、8所示细胞分别处于减数第一次分裂中期、减数第一次分裂末期，D错误。故选A。【点睛】识记减数分裂各时期的主要特点，准确图1~9所示细胞所处的时期是解答本题的关键。4、C【解析】

1、生长素的作用表现出两重性：既能促进生长也能抑制生长；既能促进发芽也能抑制发芽；既能防止落花落果也能疏花疏果；生长素的主要合成部位是幼嫩的芽、叶和发育中的种子。在植物的各个器官中都有分布相对集中在生长旺盛的部分。2、赤霉素的主要作用是促进细胞伸长，从而引起植物的增高，促进种子的萌发和果实的发育；合成部位主要是未成熟的种子。3、脱落酸的主要作用是抑制细胞分裂，促进叶和果实的衰老和脱落；合成部位是根冠、萎焉的叶片等；分布在将要脱落的器官和组织中含量多。4、乙烯的主要作用是促进果实成熟；合成部位是植物体各个部位。5、在植物生长发育过程中，各种植物激素不是孤立起作用的，而是多种激素相互作用、共同调节的结果。【详解】A、赤霉素、细胞分裂素、生长素都能促进植物生长，在侧芽发育成枝条的过程中发挥协同作用，A正确；B、施用适宜浓度的外源多胺，抑制生长素的极性运输，侧芽生长素浓度降低，促进侧芽发育，B正确；C、细胞分裂素主要在根尖合成，C错误；D、光照、温度等环境因子的变化会引起植物体内包括植物激素的合成在内的多种变化，进而对基因组的表达进行调节而影响植物的生命活动，D正确。故选C。【点睛】对于生长素作用的两重性、生长素的运输方向、植物激素在植物生长发育过程中的作用的综合理解应用，把握知识点间的内在联系是解题的关键。5、D【解析】

PI是一种核酸染料，它不能穿透完整细胞膜，但对凋亡晚期细胞和坏死细胞的破损细胞膜能够穿透；磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧，细胞发生凋亡早期，膜磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。AnnexinV作为一种磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，它通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此AnnexinV是检测细胞早期凋亡的灵敏指标。【详解】A、B4象限内出现细胞AnnexinV染色的细胞数目很多，但PI染色的细胞数目较少，说明处于凋亡早期，A正确；B、磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧，细胞发生凋亡早期，膜磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧，所以AnnexinV能够检测细胞凋亡的原因是因为PS在细胞膜上分布的不对称性，B正确；C、b组细胞处于B2象限的比例最高，说明AnnexinV和PI染色的细胞最多，因此凋亡率最高，C正确；D、炎症的出现是细胞坏死，不是细胞凋亡，细胞凋亡是出现凋亡小体，D错误。故选D。【点睛】本题需要考生充分理解PI和AnnexinV染色的基本原理，分析好图中各象限的含义。6、C【解析】

基因工程技术的基本步骤：(1)目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；(2)基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；(3)将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因-DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】A、如果某种生物的cDNA文库中的某个基因与该生物的基因组文库中的某个基因控制的性状相同，但这两个基因的结构不完全相同，因为基因组文库中的基因中含有内含子、启动子等结构，而cDNA文库中的基因中不含这些结构，A错误；B、一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须有启动子、终止子和标记基因，终止密码子位于mRNA上，B错误；C、目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化，C正确；D、将目的基因导入植物细胞的常用方法是农杆菌转化法，导入动物细胞的常用方法是显微注射法，D错误；故选C。7、D【解析】

将活的紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞置于蔗糖溶液中，短时间后细胞形态不再发生变化时的状态为渗透平衡状态，由于蔗糖溶液未知，故无法判断处于平衡状态之前的水分子的流动方向，即无法判断该洋葱也外表皮细胞是失水还是吸水。【详解】A、蔗糖溶液浓度未知，洋葱表皮细胞可能失水，也可能吸水，A错误；B、短时间后基本无蔗糖分子进入细胞液内，B错误；C、显微镜下观察不到水分子的运动，C错误；D、植物细胞达到平衡状态时，细胞液与蔗糖溶液可能无浓度差，也可能存在浓度差，D正确。故选D。8、D【解析】

同位素标记法也叫同位素示踪法，同位素可用于追踪物质的运行和变化规律。在生物学研究中，用于研究分泌蛋白的合成过程、噬菌体侵染细菌的实验、光合作用过程中水的来源和二氧化碳的转移途径等方面。【详解】A、用放射性同位素标记某种氨基酸进行示踪，可得出分泌蛋白合成、加工和分泌的途径，即核糖体→内质网→高尔基体→细胞膜，A正确；B、用单细胞绿藻做14CO2示踪实验，不同时间点对放射性碳分析可得出暗反应的途径是14CO2→14C3→（14CH2O），B正确；

C、I是合成甲状腺细胞甲状腺激素的原料，给予某人131I，通过测定甲状腺激素的放射性可以反映甲状腺的功能状态，C正确；

D、噬菌体侵染细菌实验中分别用32P标记DNA、35S标记蛋白质的噬菌体去侵染细菌，观察子代噬菌体的放射性，证明了DNA是遗传物质，D错误。

故选D。二、非选择题9、p=a-4抗体能无限增殖并产生专一（特定）抗体CO2（恒温）VC氨基酸蛋白质【解析】

1、脱去的水分子数=形成的肽键个数=氨基酸个数-肽链条数。

2、在单克隆抗体的制备过程中，需要用浆细胞与骨髓瘤细胞融合；诱导动物细胞融合时，使用聚乙二醇或灭活的病毒作为诱导剂；动物细胞融合后，经过筛选获得的杂交瘤细胞具有既能无限增殖又能分泌单一抗体的特点。

3、动物细胞培养的条件：

（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。

（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。

（3）温度和PH。

（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）。【详解】（1）根据图示信息可知。抗体含有4条肽链组成，所以抗体分子结构中的肽键数目p与氨基酸数目a的关系式为p=a-4（或“a=p+4”）。（2）取免疫后小鼠的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，经筛选得到杂交瘤细胞．将得到的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测以获得具有能无限增殖并产生专一（特定）抗体特点的杂交瘤细胞。将得到的杂交瘤细胞进行体内培养或放入CO2（恒温）培养箱进行体外培养，从细胞培养液中提取出单克隆抗体。

（3）由于鼠源性抗体会使人产生免疫反应，导致该抗体失效，根据题干的信息“同一物种C区氨基酸序列恒定，不同抗体结合抗原的V区氨基酸序列有差异”，推测嵌合性抗体应由鼠源性抗体的V区和人抗体的C区组合而成。

（4）为进一步获得更符合治疗要求的单克隆抗体，科研人员对抗体结构进行精细研究，找到既不影响抗体空间结构又降低免疫反应的氨基酸序列，通过基因工程技术对抗体结构进行人源化改造，这种人源单克隆抗体属于蛋白质工程的产物。【点睛】本题考查的知识点有氨基酸的脱水缩合的计算、蛋白质过程、单克隆抗体的制备、动物细胞的培养，尤其是对题干信息的解读，只有理解“同一物种C区氨基酸序列恒定，不同抗体的结合抗原的V区氨基酸序列有差异”，才能准确的作答第3小题。10、一体液抗原（或破伤风外毒素）的刺激、淋巴因子的作用记忆细胞受到破伤风外毒素的刺激迅速增殖分化形成大量的浆细胞，浆细胞分泌大量的抗体特异（或专一）与破伤风外毒素特异性结合，使破伤风外毒素失去毒性【解析】

1、人体有三道防线，皮肤和黏膜等组成第一道防线，体液中的杀菌物质和吞噬细胞构成第二道防线，这两道防线属于非特异性免疫，第三道防线主要是由免疫器官和免疫细胞借助血液循环和淋巴循环而组成的特异性免疫。2、体液免疫的大致过程：大多数病原体经过吞噬细胞等的摄取和处理，暴露出这种病原体所特有的抗原，将抗原传递给T细胞，刺激T细胞产生淋巴因子。少数抗原直接刺激B细胞。B细胞受到刺激后，在淋巴因子的作用下，开始一系列的增殖、分化，大部分分化为浆细胞，产生抗体，小部分形成记忆细胞。抗体可以与病原体结合，从而抑制病原体的繁殖和对人体细胞的黏附。在大多数情况下，抗原、抗体结合后会发生一系列变化，如形成沉淀或细胞集团，进而被吞噬细胞吞噬消化。记忆细胞可以在抗原消失后很长时间内保持对这种抗原的记忆，当再次接触这种抗原时，能迅速增殖分化，快速产生大量的抗体。3、二次免疫的特点：①强度更强②更迅速③持续时间更长。【详解】（1）人体有三道防线，皮肤和黏膜等组成第一道防线，体液中的杀菌物质和吞噬细胞构成第二道防线，这两道防线属于非特异性免疫。（2）破伤风外毒素会使机体产生相应的抗体，这属于特异性免疫反应中的体液免疫。B细胞增殖分化为浆细胞及记忆细胞，需要抗原的刺激以及淋巴因子的作用。（3）人体接种破伤风疫苗后，体内会产相应记忆细胞，在受到破伤风外毒素的刺激后该记忆细胞会迅速增殖分化形成大量的浆细胞，由浆细胞分泌大量的抗体。抗体具有专一性，故接种破伤风疫苗的人体对破伤风外毒素能够产生免疫力，而不会对流感病毒产生免疫力。（4）破伤风抗毒血清中起关键作用的是抗外毒素球蛋白（抗体），其作用是与破伤风外毒素特异性结合，使破伤风外毒素失去毒性。【点睛】本题以破伤风芽孢杆菌为背景，考查免疫调节的相关知识，旨在考查识记能力与知识的迁移运用能力。11、蛋白质工程XmaIBglII新霉素高压蒸汽灭菌法白t-PA蛋白抗体【解析】

本题考查基因工程和蛋白质工程的相关知识。基因工程的基本操作步骤：获取目的基因→构建基因表达载体→导入受体细胞→得到转基因生物→目的基因检测与鉴定。蛋白质工程可以通过基因修饰或基因合成，对现有的蛋白质进行改造，或制造新的蛋白质以满足人类的生产和生活的需求。【详解】（1）对天然的t-PA基因进行改造，以制造出性能优异的t-PA突变蛋白的技术称为蛋白质工程；（2）如图所示，由于目的基因的两端的碱基序列分别是CCGG、CTAG，所以应用XmaI和BglII两种限制酶切割，以便于把目的基因连接到质粒pCLY11上；（3）由图1可知，将连接好的DNA分子导入大肠杆菌中，含t-PA突变基因重组