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文档简介
07级《兽医微生物复习题》
一、名词解释
1.微生物:微生物是存在于自然界中的一群个体弱小、结构筒单、肉眼不可见,必须借助显微镜放大数百倍甚至数万倍才
能观察清晰的•类弱小生物的总称。
2.病原微生物:凡是能够引起动、植物疾病的微生物称为病原微生物,有细菌、真菌(包括霉菌和酵母菌)、放线菌、螺
旋体、支原体、立克次体、衣原体、病毒等。
3.病原体:指可造成人或者动物感染疾病的微生物(包括细菌、病毒、立克次氏体、真菌)或者其他媒介(寄生虫、微生
物重组体包括杂交体或者突变体)。
病原菌:是指那些导致机体发病的细菌,是一群高度特化了的微生物,为了自身的生存,己适应而且必须在宿主生物体内
持续存在或者增殖,有时可造成宿主发病,
4.细菌:是一类个体弱小、有细胞壁的单细胞原核微生物。它们的个体弱小,形态结构简单,细胞壁顽强,以二等分分
裂方式繁殖。
5.L型细菌:将遗传稳定的细胞壁缺陷的细菌,包括原生质体及原生质球,称为L型细菌。革兰氏阳性菌L型称为原生
质体,必须生存于高渗环境中。革兰氏阴性菌L型称为原生质球,在低渗环境中仍有一定的反抗力。
6.菌落:即某个细菌在适合生长的固体培养基表而或者内部,在适宜的条件下,经过一定时间的培养,多数为18-24h,
分裂繁殖出巨大数量的菌体,形成一个肉眼可见的,有一定数量的独立群体,称为菌落,又称克隆。
7.间体:是胞膜凹入胞质内形成的一种囊状、管状或者层状的结构。其功能与真核细胞线粒体相似,与呼吸有关,并有
促进细胞分裂的作用。
8.质粒:是指细菌、酵母菌等生物游离在核体以外的小型环状双股DNA份子。是一种独立于体外,能进行自主复制的细
胞质遗传物质。R因子:与抗药性有关:F因子:与有性接合有关;其他质粒:与抗生素,色素合成有关:基因工程中作为
目的基因载体。
9.异染颗粒:是某些细菌细胞质中一种特有的酸性小颗粒。它对碱性染料的亲和力特殊强。
10.英膜:某些细菌在其生活过程中可以在细胞壁的外周产生一层包围整个菌体,边界清晰的黏液样物质,称为英膜。
11.芽泡:某些细菌在其生长发育后期,在细胞内形成一个圆形或者椭圆形、厚壁、含水量极低、抗逆性极强的休眠体。
未形成芽抱的菌体称为繁殖体或者营养体。
12.鞭毛:生长在某些细菌体表的长丝状蛋白质附属物,称为鞭毛,其数目为一至数条,具有运动功能。
13.细菌生长曲线:将细菌培养于适宜的液体培养基中,定时取样测定其细菌总数和活菌数,以活菌数的对数为纵坐标,
以培养时间为横坐标,可描绘出一条细菌生长的典型曲线,该曲线称为细菌生长曲线.细菌的生长曲线分为迟缓期、对数
期、稳定期和衰亡期4个时期。细菌的这种生长曲线是在体外人工培养条件下观察到的,对细菌生长规律的研究有重要意
义。
14.SPF动物:即无特定病原体动物,是指不存在某些特定的具有病原性或者潜在病原性的微生物的动物。
15.无菌法:为防止任何微生物进入人和动物机体以及其他物品而采取方法均叫无菌法,其操作方法叫无菌操作。
16.巴氏消毒法:亦称低温消毒法,冷杀菌法,是一种利用较低的温度杀灭液态食品中的病原菌或者特定微生物,而又不
致严重伤害其营养成份和风味的消毒法。60、65笆作短期加热处理,杀死有害微生物
17.滤过除菌法:是通过机械、物理阻留作用将液体或者空气中的细菌等微生物除去的方法,但滤过除菌常不能除去病毒、
支原体以及细菌L型等小颗粒。
18.细国素:是某种细菌产生的•种具有杀困作用的蛋白质,只能作用于与它不同困株的细密以及与它米源关系相近的细
菌。例如大肠杆菌所产生的大肠杆菌素,除作用于某些型别的大肠杆菌外,还能作用于亲缘关系相近的沙门菌、巴氏杆菌
等,根据其份子量的大小可分为多肽细菌素,蛋白质细菌素和颗粒细菌素三类。
19.毒力:又称致病力,表示病原体致病能力的强弱。对细菌性病原体来说,毒力就是菌体对宿主体表的吸附,向体内侵
入,在体内定居、生长和繁殖,向周围组织的扩散蔓延,对宿主谨防功能的反抗,以及产生伤害宿主的毒素等一系列能力
的总和。同一细菌的不同毒株,其毒力不一样。
20.类毒素:利用外毒素对热和某些化学物质敏感的特点,用0.3-0.4%甲醛处理,使其毒性彻底丧失,但仍保持抗原
性,这种经处理的外毒素为类毒素,常用来预防注射。也可用类毒素注射动物(如马),以制备外毒素的抗体,称为抗毒素,
作治疗用。
21.基因转移:供体细菌间接或者直接地将部份遗传物质单向传递给受体细菌,从而导致受体细菌发生基因重组的现象,
称为基因转移。
22.包涵体:病毒感染宿主细胞后,细泡的胞核或者胞质内有病毒颗粒或者未装配的病毒,病毒成份组成的在光学显微镜
下可见到的团块,称为包涵体。可通过固定染色后在光镜下可见。可单个或者多个,有的较大,有的技小,或者圆形或者
无规律形。
可嗜酸(伊红染成粉红色)或者嗜碱(苏木精染成蓝色)。
23.中珠试脸:在含青绿素0.5IU/mL的培养:基中,幼龄炭疽杆菌因细胞壁的肽聚糖合成受到抑制,原生质体相互连接成
串,称为串珠反应
24.卡介苗:卡氏和介氏二人将牛分支杆菌在培养基上经13年230次传代,使有毒菌株变为毒力减重的菌株,哺育出无
毒的结核分支杆菌,对人、牛无致病性,用来创造疫苗,预防人的结核病,此种疫苗称卡介苗(BCG)。它可以使机体产生
免疫力。
25.病毒:是由蛋白质包裹的只含一种类型的核酸(DNA或者RNA)只能在活的细胞内以复制方式增殖的非细胞微型生物。
26.病毒颗粒(病毒子):成熟的,结构完整的,具有可感染性的单个病毒,等同于病毒粒或者病毒子。病毒颗粒具有一
定的形态结构及传染性,病毒颗粒极其弱小,测定其大小的单位通常用纳米,完整的病毒颗粒主要由核酸和蛋白质组成。
27.肮病毒:是动物与人传染性海绵状脑病的病原,没有核酸,是具有传染性的蛋白颗粒。
28.病毒复制:病毒增殖只在活细胞内进行,是以病毒基因为模板,在筋的作用下,分别合成其基因及蛋白质,再组装成
完整的病毒颗粒,这种方式称为复制。
29.二倍体细胞株:将长成的原代细胞消化分散成单个细胞,继续培养芍代,获得的细胞染色体数与原代细胞一样的二倍
体,又称继代细胞。此种细胞数目可扩大,对病毒的易感性则基本无变化。
30.噬菌体:是感染细菌、支原体、螺旋体、放线菌以及蓝细菌等的一类病毒,亦称细菌病毒。在自然界分布极广,凡是
有上述微生物生长的地方,都有相应种类噬菌体存在,大多数为蝌蚪状。
二、问答题
1、与医学相关的微生物有哪些?
与医学相关的微生物有:病毒、细菌、真函、放线菌、支原体、衣原体、立克次氏体、螺旋体。
2、微生物学的先驱有那些?他们的主要成绩是什么?
先驱有吕文虎克、巴斯德、科赫、贝杰林可等
吕文虎克:十七世纪,荷兰人吕文虎克用自制的、能放大160s200倍的显微镜第一次看到了微生物巴斯德是微生物的
奠基人°
(1)发现并证实发酵是由微生物引起的:
(2)彻底否定了“自然发生”学说:著名的曲颈瓶试验无可辩驳地证实,空气内确实含有微生物,是它们引起有机质的
腐败。
(3)免疫学一一预防接种苜次制成狂犬疫苗
⑷其他贡献巴斯德消毒法;60—65°C作短期加热处理,杀死有害微生物
微生物的另一位奠基人是一位德国医生柯赫
(1)微生物学基本操作技术方面的贡献:①细菌纯培养方法的建立
②设计了各种培养基,实现了在实验室内对各种微生物的培养
(2)对病原细菌的研究作出了突出的贡献:
①具体证实了炭疽杆菌是炭疽病的病原菌;
②发现了肺结核病的病原菌(1905年获诺贝尔奖)
③证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则一一著名的柯赫原则
Lister建立消毒技术
贝杰林可用病毒命名可以通过细菌滤器的史无前例的病原体。
3、微生物有哪些特性?
1、个体弱小、结构简单,大小通常用um(微米)或者nm(纳米)表示;大多数是单细胞结构
2、吸收多、转化快胃I」大:消耗自身分量2000倍食物的时间:大肠杆菌:1小时食谱广:纤维素、木质素、几丁质、角蛋
白、石汨、甲醉、甲烷、天然气、塑料、酚类、割化物、各种有机物均可被微牛•物作为粮食
3、种类繁多,分布广泛:已发现的微生物达20万种以上,新种不断发现,极端环境、土壤、空气、水、动植物体表及某
些器官。
4、群居混杂、相生相克,共生、协同、竞争,维持着生态平衡
5、生长繁殖快:大肠杆菌,20min/代,24h可繁殖72代
6、适应能力强、易变异:抗(逆)性强:抗热抗寒:有些微生物可以在一12c~-30°C的低温生长:抗酸碱:细菌能耐
受并生长的pH范围:pH0.5、13;耐渗透压:蜜饯、腌制品,饱和盐水(NaCl,32%)中都有微生物生长;抗压力:有些细菌
可在1400个大气压下生长;当环境不良时,它们浮现形态、生理、毒力的变异,如芽抱菌产生芽抱、霉菌形成抱子,病原
菌产生抗药性
7、牛物遗传性状典型、实验技术体系完善
4、细菌的基本结构和特殊结构有哪些?
细菌都具有细胞壁、细胞膜、细胞质、核体等基本结构。
有些细菌在一定条件下还具有特殊结构细施的特殊结构包括荚膜、S层、鞭毛、菌毛、芽胞等。
5、细菌形态、结构特征在细菌鉴定中有何作用?
①细菌的大小:在一定条件下,各种细菌的大小是相对稳定而具明显特征性的,可作为鉴定细菌的一个依据。
②细菌的基本形态:细菌有球状、杆状和螺旋状三种基本形态,并因此而将细菌分为球菌、杆菌和螺旋状菌三大类。在
自然界所存在的细菌中,以杆菌为最常见,球菌次之,而螺旋状的细菌则至少。在正常情况下,各种细窗的基本形态和排
列方式是相对稳定而有特征性的,可作为分类和鉴定细菌的一个依据。
(3)菌落:各种细菌菌落的人小、颜色、质地、表面性状、边缘、结构等均有各自的特征,以此来分离、纯化、计数、鉴
定细菌。因此,在进行细菌分离时常需获得单个菌落。
④细菌的特殊结构:有荚膜、S层、鞭毛、菌毛、芽抱等,这些特殊结构,与细菌的致病力有关,也有助于细菌的鉴
定。如芽抱的有无、形态、大小和着生部位是细菌分类和鉴定的重要指标
⑤细菌的内含物,如异染颗粒,伴弛晶体等也有助于细菌的鉴定。
6、绘出细菌的基本结构和特殊结构图。
7、细菌群体生长繁殖分几个时期?各个时期有何特点?
细菌群体的生长繁殖分4个时期:迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期。
迟缓期:是细菌初到新环境的适应期。此时菌体增大、代谢活跃、合成所需他系统。RNA含量明显增多,)NA无变化,
此时细菌数并不增加。这一过程普通需f*4h
对数期:细菌迅速分裂繁殖,活菌数以恒定的几何级数增长,生长曲线接近•条斜的直线。该期病原菌致病力最屈,其形
态染色特性及生理活性均较典型,对抗菌药物等的作用较为敏感。大肠杆菌对数期可持续6-1Oh
稳定期:因营养消耗、代谢产物蓄积等,此时新繁殖的活菌与死菌平衡,活菌数最多。该期形态染色不特异。产生毒素等
代谢产物.普通持续时间8ho
衰亡期:细菌死亡速度加大,繁殖速度变小。如不移植到新培养基,最终可全部死亡。此期菌体变形或者自溶,染色不
典型,难以鉴定。
8、细菌生长繁殖需要哪些条件?
细菌在适宜的环境条件下才干生长繁殖。影响生长的环境因素不少诸如营养、温度、pH、氧及其他气体等等。
1)营养物质细菌生长所需的基本营养物质可分为碳源、氮源、无机盐、生长因子和水分。根据各种细窗不同的营养要
求,选用不同的培养基,以满足其生长的需要。
2)温度不同细菌适应的温度范围不同,细菌有各自的可适温度范围及最适温度。根据细菌适应的温度范围,可将细菌分
为3类:
嗜冷菌,范围5-30°C,最适10-20°C;嗜温菌,范围10-45°C,最适20-40°C:
嗜热菌,范围25-95°C,最适50-60°Cc病原菌均为嗜温菌,最适温度为37。C。
3)pH包种细菌均有可适pH范围及最适pHo大多数细菌可以在pH6-8之间生长,但多数病原菌的最适pH为7.2-7.6。
4)气体微生物对气体的需求根据细菌对氧的需求可分为需氧菌、厌氧筐和兼性厌氧菌。
5)渗透压
9、试述湿热灭菌的原理和种类。原理:高温对微生物具有明显的致死作用,但不同微生物对热的敏感性有明显差异,细菌
的繁殖体最为敏感,其次是真菌和病毒,细菌芽抱对热有很强的反抗力。用高温处理微生物时,可对菌体蛋白质、核酸酶
系统等产生直接破坏作用,热力可使蛋白质中的氢键破坏,使之变性或者凝固,使双股DNA分开为单股,受热而活化的核
酸酶使单股DNA断裂,导致菌体死亡。
1、利用沸水或者水蒸汽消毒灭菌,水分容易穿透物品,热传导快,能迅速提高物品内部的温度;2、蛋白质凝固是
高温杀菌的主要环节,湿热灭菌时蛋白质易于吸收水分,凝固变性;3、蒸汽与物品接触凝结成水,放出潜热,提高温度,
加速微生物的死亡。
种类:①煮沸法②巴氏消毒法(主要用于牛乳等消毒)③流通蒸汽消毒法④流通蒸汽灭菌法⑤高压蒸汽灭菌法
10、试述基因水平的柯赫法则。
①应在制病菌株中检出某些基因或者其产物,而无毒力菌株中没有
②如有毒力菌株的某个基因被破坏,则菌株的毒力应减弱或者消除。或者将此基因克隆到无毒菌株内,后者成为有毒
菌株。
③将细菌接种动物时,这个基因应在感染的过程中表达
④在接种动物检测到这个基因产物的抗体,或者产生免疫保护,该法也合用于细菌以外的微生.物,如病毒。
1k试述内毒素与外毒素的区别。
特性外毒素内毒素
存在部位1细菌细胞在牛长壑殖过程中分泌至周围环境中存在于菌细胞内,为细胞壁结构成份细菌细胞甭解释才解放出来
产牛苗中部为某仕匕苏兰氏阳区菌产牛,也有小粕阳炸苦u氏阻件苗
必学成份
蛋白质脂多健(LPS)
制病特异性不同勺1、毒素各不相同不同病原菌内毒素作用基本相同
毒性作用特异性,为细胞毒索,肠毒索或者神经毒素对特定全身性,致发热、腹泻、呕吐
的细晌或者组如岩僖牯窟作用
毒性程度高,往往致死弱,很少致死
致热性对宿主不致热(致热性,常致宿主发热
抗原性彻底抗原,抗原性强不彻底抗原抗原性弱
制成类毒素旎,用甲醛处理不能
右
热稳定比耐热性强
12、试述细菌毒力减弱的方法。
1)长期在体外连续培养传代病原菌在体外人工培养基上连续多次传代后,毒力普通都能逐渐减弱乃至失去毒力。
2)在高于最适生长温度条件下培养例如炭疽I号和II号疫苗,均是将炭疽杆菌强毒株在42-43笆培养传代育成。
3)在含有特殊化学物质的培养基中培养如广为采用的结核病卡介苗(BCG),是将牛型结核杆菌在含有胆汁的马铃薯培养
基上面.15天传1代,持续传代13年后育成。
4)在特殊气体条件下培养如无能膜炭疽芽抱苗是半强毒菌株在含5胸动物血清的培养基上,在的条件下选育
的。
5)通过非易感动物如猪丹毒弱毒苗(GC42)是将强致病菌株通过豚鼠370代后,又通过鸡42代选育而成。
6)通过基因工程的方法去除毒力基因或者用点突变的方法使毒力基因失活,可获得无毒力菌株或者弱毒菌株。但对多
基因调控的毒力因子较难奏效。
13、常见的细菌变异现象有哪些?
(1)形态和结构变异:细菌外形由杆状一圆球形,有荚膜的变为不产生英膜,有鞭毛的变为无鞭毛的而不能运动,有芽
抱的变为失去芽抱的能力等。
(2)茴落形态变异:a.S-R变异正常的光滑型菌落可能变成粗糙型称为S-R变异,它往往伴有着其他重要特性
的改变,包括毒力的丧失和抗原结构的改变
b.粗糙型转变为光滑性称为R-S回归变异
(3)毒力变异:病原菌的毒力可以由强变弱或者由弱变强,在自然情况下和人工诱变都可以发生
(4)耐药性变异:临床上选用敏感药物,合理使用抗生素
(5)代谢变异:细菌在代谢过程中原来能合成某种营养成份的特性,会变异失去这种能力,成为所谓营养缺陷型,有利
于人为提供该种营养成份
(6)抗原性变异:在环境条件的影响下,一些细菌失去某种抗原或者增添某种抗原
14、何谓基因重组?细菌基因转移和重组有几种方式?
两个不同性状个体之间的遗传物质转移到一起,经过重新组合形成遗传型个体的方式叫基因重组。细菌基因转移和重组的
主要形式有转化、转导、接合、原生质体融合和转染。
①转化受体菌直接摄取供体菌的游离DNA片段,使受体菌获得新的遗传性状的过程。
②转导以温和噬菌体为媒介,把供体菌的DNA小片段携带到受体菌中,通过交换与整合,使受体菌获得供体菌的部分遗
传性状,称为转导。获得新遗传性状的受体菌细胞称为转导子。细菌的转导分普遍性转导和局限性转导。
③接合是两个完整的细菌细胞通过性菌毛直接接触,由供体细菌将质粒DNA转移给受体细菌的过程。接合性质粒有F质
粒、R质粒等。
④原生质体融合:选择具有优良性状的两个菌株细胞作为亲本,用人工方法去除其细胞壁,成为原生质体,使原生质体
发生融合,形成带有双亲本菌株优良性状、遗传稳定的融合子,这种技术称为原生质体融合。
⑤转染:受体菌获得从噬菌体而非从其他供体菌提取的DNA的过程,称为转染。另•方面,转染•词更广泛地用于真核
细胞,其含义有差别,指真核细胞通过病毒感染,获得某一段DNA或者RNA的过程。转染通常多用于哺乳动物细胞,往往
为了获得重组病毒而设计。
15、试述人工培养细菌的用途及其意义。
用人工的方法提供细菌在动物体内生长繁殖需要的基木条件,达到培养细菌,进行鉴定及进一步利用的目的。因此,细菌
的人工培养技术是微生物学研究和实践的十分重要的手段。表现在医学中的应用,在工农业生产中的应月,在基因工程中
的应用。
1)在医学中的应用
细菌培养对疾病的诊断、预防、治疗和科学研究等多方面都具有重要的作用。
①传染性疾病的病原学诊断取患者标本,进行细菌分离培养、鉴定和药物敏感试验。是诊断传染性疾病最可靠的依据,同
时也可指导临床治疗用药。
②细菌学研究研究细菌的生理、遗传变弁、致病性、免疫性和耐药性等,均需人工培养细菌。人工培养细菌还是人类发
现尚不知道的新病原菌的先决条件之一。
③生物制品的制备将分离培养出来的纯种细菌,制成诊断菌液,供传染病诊断使用。制备疫苗、类毒素以供预防传染病
使用。将制备的疫苗或者类毒素注入动物体内,获取免疫血清或者抗毒素,用于传染病治疗。上述制备的制剂统称生物制
品,在医学上有广泛用途。
2)在工农业生产中的应用
细菌在培养过程产生多种代谢产物,经过加工处理,可制成抗生素、维生素、氨基酸、有机溶剂、酒、酱油、味精等产品。
细菌培养物还可用于处理废水和垃圾、创造菌肥和农药,以及生产酷制剂等。
3)在基因工程中的应用
因为细菌具有繁殖快、易培养的特点,所以大多数基因工程的实验和生产先在细菌中进行。如将带有外源性基因的重组DNA
转化给受体菌,使其在菌体内获得表达,现在用此方法已成功制备出胰岛素和干扰素等生物制剂。
16、试述正常菌群对机体的作用。
广义而言,正常菌群与宿主之间形成为了一个共生关系,具体表现在营养,免疫和生物拮抗三个方面。
①营养,’乍用:消化道正常菌群不仅从宿主消化道获取营养,同时通过匡助消化,合成维生素等对宿主远营养作用,胃肠
道的消化菌参预营养物质的消化,如纤维素只能在微生物消化酶的作用下被分解为挥发性脂肪酸等,蛋白质和其他物质受
微生物消化酶的作用而降解,以利于机体吸收,肠道细菌能利用非蛋白氮合成蛋白质,有的合成B族维生素和维生素K,并
参预脂肪的代谢,此外消化道的正常菌群有助于破坏某些有害物质并阻挠其吸收。
②免疫作用:正常菌群对宿主的体液免疫,细胞免疫和局部免疫均有一定影响,特别对局部免疫影响更大。
③生物拮抗作用:正常菌群对包括致病菌在内的外籍菌入侵动物体有一定程度的拮抗作用,生物拮抗作用的原因是由于
厌氧菌、细菌素、及免疫结合的复杂作用以及特殊的生物物理和生物化学环境。
菌群失调;如果宿主患病、外科手术.环境改变和滥用抗菌药物等,宿主机体某个部位的正常菌群中微生物种类、数量和
栖居处将会发生改变,即成为菌群失调。
17、细菌性病料如何进行微生物学诊断?
1)病料采集原则
①无菌概念②采取有病变部位③采取时间,濒临死亡,普通不超过6小时④适当保存⑤及时送检
2)微生物诊断步骤
①形态观察病料触片、涂片,瑞氏染色、姬姆萨染色,镜检
②分离培养适宜培养基培养与分离观镖菌落形态、革兰氏染色观测形态
③生化鉴定
④血清学鉴定(凝集反应、琼扩试脸、标记抗体技术等)
⑤动物忒验:选择敏感动物接种。
18、金黄色葡萄球菌的致病因素及所致疾病。
葡萄球菌的某些细胞壁结构具有毒力因子的作用,如葡萄球菌蛋白A、荚膜、纤连素结合蛋白等,后者属于微生物表层成份
识别黏附基质,包括其他至少12种蛋白,最主要的毒力因子是毒素及酶°
毒力因子:毒素(a毒素•、肠毒素)密(凝固酶、耐热核酸酶)
①a毒素:对多种哺乳动物红细胞有溶血作用,其原理是毒素份子插入红细胞膜疏水区,形成微孔,红细胞溶解。
引起小血管收缩,导致局部缺血、坏死。
②肠港素:引起人类中毒,大多数动物对此毒素又很强的反抗力,外毒素,耐热100。C30min,反抗消化道蛋白酶的水
解作用,血清型A.B.C1.C2.C3.D.E均可引起急性胃肠炎即食物中毒。常污染食物有牛奶、肉类等
③凝固酶:凝固酶是鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标。作用:能使含有抗凝剂的人’%血浆发生凝集。特点:耐热:
易被蛋白酶分解破坏分类:1.游离凝固酶一类似凝血酶原样物质,经激活后可使血浆中纤维蛋白原变成纤维蛋白。保护病
菌免受血清中杀菌物质的破坏,同时可使葡萄球菌感染易于局限化。2.结合凝固酎•结合在菌体表面,与血浆中纤维蛋白
结合后使血浆凝固在菌体表面,阻挠存噬细胞的吞噬,即使被吞噬也不易被杀灭
④耐热核酸能:1.此酹能迅速分解核酸,利于病原菌扩散2.目前也将该前•的检测作为鉴定致病菌株的重要指标之•.
⑤其他毒素及酎:细胞毒素(a、y、5,杀白细胞素)、表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素T,纤维蛋白溶酷、透明质
酸的、脂酶等。
常引起两类疾病:
①化脓性疾病例如创伤感染、脓肿、蜂窝织炎、乳腺炎、关节炎、败血症和脓毒败血症等。
②毒素性疾病被葡萄球菌污染的食物或者饲料引起人或者动物的中毒性呕吐、肠炎及人的毒素休克综合征等。
19、试述肠杆菌科细菌的特性。
肠杆菌科细菌的特性:
①形态与结构:中等大小的两端钝圆的革兰氏阴性杆菌,多数有鞭毛、菌毛,少数行英膜,无芽抱
②培养特性:本菌为兼性厌氧菌,在普通培养基上生K良好,最适生K温度为37oC,最适生KPH为7.2-7.4,麦康凯
上形成红色菌落;在伊红美蓝上呈黑色带金属闪光的菌落;在SS琼脂上普通不生长或者生长较差,生长者呈红色。一些致
病菌在绵阳血平板上呈8溶血
③发醉葡萄糖产酸或者兼产气,接触酶试验、硝酸盐还原试验阳性,氧化酶阴性。
④除欧文菌,均有本科细菌的共同抗原0抗原、H抗原和K抗原
⑤反抗力:非抗酸性等
20、猪丹毒杆菌的微生物学诊断要点有哪些?
1显微镜检查:可采取高热期病猪耳静脉血作涂片,染色、镜检。死后可采取心血及新鲜肝、脾、肾、淋巴结等制成涂片,
可革兰氏染色镜检,革兰氏阳性,蓝色c如发现少量典型杆菌,可初步确诊。如为慢性心内膜炎病例,可用心脏瓣膜增生
物涂片,境检。羔羊患关节炎病时,可检查关节滑膜囊液。
2.分离培养分离培养时可用含有0.2%1W/V)的葡萄糖或者5%s10%无菌马血清(谭/V)的半固体琼脂培养基。在血琼脂平
皿经37。C,24h培养可形成透明、灰白色、露珠样小菌落,并形成a溶血环。在麦糠凯上不生长,明胶穿刺生长特殊,
沿着穿刺线向四周生长,如试管刷状,不液化明胶。
3细菌鉴定:主要考虑与李氏杆菌鉴别诊断。
4.血清型鉴定:将待鉴定菌株的纯培养物加入陶甲醛灭活,经洗涤、高压、离心处理后制成沉淀原,与模式菌株的高免血
清做琼脂扩散试验。
21、试述炭疽芽泡杆菌的生物学特性。
⑴形态及染色特性
①本菌为G+大型杆菌;无鞭毛不能运动,芽胞椭圆形。
②动物组织内,此菌单在或者连成2-5个的短链,相连的菌端平截而呈竹节状。炭疽杆菌在组织内可形成荚膜。
③炭疽杆菌惟独当暴露空气中的后,方能形成芽胞。在人工培养基中,本菌常形成长链。
⑵培养特性:
①需氧,对营养要求不高,普通培养中即能生长良好。
②在固体培养基表而:强毒菌株的菌落表现为粗糙型,菌落大而扁平,灰白色,不透明,表面较干而粗糙,边缘呈卷发
状。在血琼脂上普通不溶血
③在普通肉汤中培养24h后,培养液仍然透明,管底有白色絮状沉淀。液面无菌膜或者菌环形成。
⑶生化特性:发醉葡萄糖,产酸而不产气,不发醉阿拉伯糖、甘露糖、木糖、VP试验阳性、不产生呵噪和硫化氢。
⑷反抗力:
①炭疽杆菌繁殖体的反抗力不大,60笆经30-60分钟,普通浓度的常用消毒剂,能于短时内将其杀死。在未解剖的尸
体中,细菌可随腐败而迅速死亡。
②芽胞的反抗力特殊强大,在干燥状态下可长期存活。炭疽芽胞需经煮沸1—2h,121笆高压灭菌5-10min,或者
160°C干热灭菌2h方被杀死。
③常用的有效消毒剂是新配的20%石灰乳或者20%漂白粉作用48
h»⑸抗原结构:炭疽杆菌有下列四种主要抗原成份。
①菌体多糖抗原:这是细胞壁内存在的一种半抗原,与细菌毒力无关,性质稳定,经高温高压后,抗原性不被破坏,用
于此菌鉴定和诊断。
②荚膜多肽抗原:仅见于有毒菌株,与毒力有关。
③保护性蛋白质抗原:这是炭疽杆菌生活过程中产生的细胞外蛋白质之一,具有免疫原性,能使机体产生抗炭疽感染的
保护力。
④芽抱抗原:是芽抱的外膜层含有的抗原决定簇,构成特异性抗原,具有免疫原性和血清学诊断价值
⑹致病性:炭疽杆菌可引起各种家畜、野兽和人类的炭疽,牛、绵羊、鹿等易感性最强,引起败血症。犬猫食肉动物等有
相当大的反抗力,禽类普通不感染。
毒力主要与荚膜和毒素有关。毒素由水肿因子、致死因子、以及保护性抗原3种亚单位构成。
22、病毒的基本特征有哪些?
病毒的基本特征:
①病毒普通以病毒颗粒或者病毒子的形式存在,具有一定的形态、结构以及传染性。病毒粒子极其弱小,测定其大小的
单位通常用纳米(nm),在电镜下才干观察。
②病毒的形态:多形性。各种病毒颗粒形态不一,但都具有蛋白质的衣壳及其包裹的核酸芯糊,衣壳与芯摘共同构成核
衣壳。有的病毒核衣壳外还有囊膜及纤突衣壳由壳粒组成,呈20面体对称或者螺旋状对称,少数为复合对称。
③结构:完整的病毒主要由核酸和蛋白质组成。每种病毒只含•种核酸,或者是DNA,或者是RNA;每种核酸有双股与单
股、线状与环状、分节段与不分节段之分。病毒的蛋白质也有结构蛋白和非结构蛋白之分。脂质与糖是构成是囊膜与纤
突的组分,可被氯仿或者乙醒等脂溶剂破坏。
④寄生生.活没有核糖体和酶系统,不能独立进行代谢活动,必须在易感活细胞内寄生,利用宿主细胞的代谢系统,有严
格的细胞内寄生性。
⑤不能进行二等分分裂,通过特有的复制方法进行繁殖。
⑥病毒对抗生素不敏感、干扰素能抑制其增殖
⑦病毒无细胞结构
23、试述病毒与其他微生物的主要区别。
细菌支原体单立克次体螺旋体放线菌直菌单、
种类/性状结构病毒非单衣原体单于细菌与原虫之介于细菌与真菌之间多
核酸DNA/RNAD、ARNAJA、NRNADA、NRNADAN、RNADANsRNADAN,RNADAN,
繁殖方式复制二分裂分裂苹二分契二分裂二分裂二分裂公舞拌A殉
希细随培养+++
对抗生素的敏屈一++++十++
肃午扰豪的敏屈+----一+—
24、画出病毒颗粒的基本结构模式图。
25、试述病毒分离培养的方法。
①实验动物:病毒必须在活细胞中方能进行生命活动,因此早期对病毒生物学特性的研究主要通过动物接种(小嗣、
大鼠、家兔、家禽等。)以培养病毒。目前动物接种仅限于研究病毒或者甫株的致病性或者为切当诊断某种病毒为病原体。
②鸡胚接种,个别病毒(如流感病毒)必须在鸡胚中进行分离培养。受精鸡胚的羊膜腔和尿囊腔均可用以分离流感病
毒C
③组织细胞培养:静置培养和旋转培养。其中细胞培养是培养病毒最常见的技术。
26、何为病毒的一步生长曲线?
一步生长曲线即以感染时间为横坐标,病毒效价为纵坐标,绘制出的病毒特征曲线。感染比(MOD是指在一个系统中感染
病毒的细胞数与细胞总数之比。在人工培养的细胞中,接种高VOI的病等,所有细胞几乎同时受到病毒感染,如分析该培
养系统的单个细胞,就可以代表病声在整个体系中所有细胞的生长情况。应用这一方法,就可获得病毒一步生长曲线的姑
果,观察到病毒具有复制周期。一个完整的复制周期包括吸附、传入与脱壳、生物合成、组装与释放等步骤。
27、病毒的复制周期包括哪些步骤?
①吸附:吸附敏感的宿主细胞是病毒复制的第一步。此过程包含静电吸附和特异性受体吸附两个阶段。病毒的配体位
点与细胞表面的特异受体的结合
②穿入与脱壳:动物病毒穿入宿主细胞并脱壳的过程可分为:在胞浆膜穿入并脱壳、在内吞小体脱壳、在核膜脱壳
③生物合成:病毒的生物合成发生在隐蔽期,非常活跃,包括mRNA的转录、蛋白质或者RNA的合成等
④组装与释放:无囊膜病毒:简单的20面体病毒产生的壳粒可自我组装形成衣壳,进而包装核酸形成核衣壳。大多
数无囊膜的病毒蓄枳在胞浆或者核内,当细胞彻底裂解时,释放出病毒颗粒。
有囊膜病甫:有囊膜的病毒以出芽的方式成熟,白细胞膜出芽及胞吐两种形式。
28、试述细胞培养的特点。
①细胞培养中的每一个细胞的生理特性基本一致,对病毒的易感性也相等。
②一块很小的组织可以制备多个细胞培养瓶,每瓶代表一个实验动物或者鸡胚,而且有标准的一致性,无实验动物的个
体差异性,从而对病毒的生长具有高度的准确性和可重复性。
③细胞培养本身就能显示病毒的生长特性(如细胞产生病变)因此在不少情况卜不需要用其他系统来证明病毒的确实生长。
④细胞培养可以排除特异性抗体或者非特异性抑制因子的干扰。
⑤细胞培养技术可以严格执行无菌操作。
⑥在细胞培养中可以进行许多实验项目。
⑦应用细胞培养的空斑技术可以进行病毒的克隆化。
29、病毒的分离与鉴定包括哪些内容?
一、病毒的分离培养
(-)标本的采集、运送及处理
⑴标本的采集
①采样的时间(发病的初期)②采集标本的容器(无菌)③标本的选择(感染的部位)
⑵标本的运送和处理
及早送到实验室,并即将处理和接种。较长期冻存的标本,置于-70。Co研磨法处理细胞以释放病毒
⑶检样接种与感染表现
将处理好的标本以适当途径接种宿主、鸡胚或者培养细胞。观察噬菌斑或者细胞病变效应(CPE)
经第一次接种未浮现病变时,需进行重复接种,即盲传,若盲传多代仍无表现,可判定为阴性。
(-)君养方法
①组织培养:将人或者动物离体或者组织或者分散的活细胞,翦拟体内的生理条件在试管或者培养瓶加以培养,使之生存
和生长,称为组织培养。(目前多指单层细胞培养)
传代细胞系:这是能在体外无限期传代的细胞系,来源与肿瘤细胞或者细胞株传代过程中变异的细胞系。
②鸡胚接种:鸡胚对多种病毒敏感。普通采用孵化9s14天的鸡胚,根据病毒种类不同,将病毒标本接种于鸡胚的不同
部位,最常用的鸡胚接种部位有:羊膜腔、尿囊腔、绒毛尿囊膜和卵黄囊等。
二、病毒的感染性测定①噬斑计数(用于噬菌体的感染性测定)②蚀斑测定③终点法(TCID50)
三、病毒的纯化与鉴定
⑴形态学鉴定:电镜观察
⑵纯化:超速离心、电泳、免疫学方法对病毒进行纯化
⑶理化特性测定:如病毒的囊膜可用氯仿、乙限等有机溶剂溶解使病毒失去活性
⑷免疫学分断
①补体结合试验②中和试验③血凝抑制试验④间接免疫荧光检测⑤酶联免疫吸附试验
⑸份子生物学方法:聚合酶链式反应、核酸杂交、DNA芯片
30、举例说明痘病毒感染的宿主谱类型。
①天花病毒,主要宿主:人,宿主范围窄,全球已泯灭;
②痘苗病毒,主要宿主:人、牛、水牛、猪、兔,宿主范围宽,全世界均有分布;
③牛痘病毒,主要宿主:牛、人、大鼠、猫、沙鼠、大型猫科动物、象、犀牛宿主范围宽。分布于欧洲、亚洲:
④山羊痘病毒,主要宿主:绵羊、山羊,宿主范围窄,分布于亚非洲。
31、试述新城疫病毒的检测手段和预防措施。
①诊断:必须作病毒分离及血清学试验或者RT-PCRo可取脾、脑或者肺匀浆,接种10日龄鸡胚尿囊腔分离病毒,病毒能
凝集鸡、人及小鼠等红细胞,再作血吸附及HI试验鉴别。当存在循环抗体时,可以从肠道分离病毒。气管切片或者抹片做
免疫荧光染色诊断快速,但不太敏感。抗体检测只合用于对未进行免疫接种鸡群的诊断,可用H1试验。在慢性新城疫流行
的地区,可用III实验作为监测手段。分离株有必要进一步测定其毒力,如ICPD0.7,必须向0IE申报疫情。
②预防与控制:新城疫是01E规定的A类疫病,许多国家都有相应的立法。控制措施包括良好卫生及免疫。
③免疫通常采用由天然弱毒活毒苗及强毒株的油乳剂灭活苗。弱毒只可采用饮水、气雾、滴眼或者滴鼻途径。小鸡7-10d
一免、20-25(1二免、50-60(1三免,免疫后约3-7d可产生免疫保护,产蛋母鸡应每4个月免一次,实际生产中,弱毒苗
与灭活荏配合使用,方能收到较好的免按效果。由于鸡在免疫接种后15d仍能排除疫苗毒,因此有些国家规定在免疫接种
后21d后才可调运。
32、试述狂犬病毒的致病机理及综合性的预防措施。
致病机理:
①传播:主要传播途径为被带毒动物咬伤,是否发病取决于咬伤的部位与程度以及带毒动物的种类,病犬唾液具有高度
传染性。
②病毒复制:病毒特异结合神经肌肉结合处的乙酰胆碱受体及神经节普脂等受体。在伤口附近的肌细胞内复制,而后侵
入外周神经系统,沿神经轴索上行至中枢神经系统,在脑的边缘系统大量复制,导致脑组织损伤,行为失控浮现症状。病
毒从脑沿传出神经扩散至唾液腺等器官,在其内复制,并以很高的滴度分泌到唾液中。在浮现狂暴症状乱咬时,唾液具有
高度感染性。
③免疫原性:病毒蛋白有很强的免疫原性。但在病毒从咬伤部位向中枢系统扩散的过程中,既不浮现体液免疫应答,也
不浮现细胞免疫应答。
综合性预防措施:采取“管、免、灭”的方针
①管理家犬-一登记
②对家养犬、猫进行弱毒疫苗免疫接种。注意监测带毒的野生动物。发达国家投放含弱毒疫苗的食饵控制狐狸和狼的狂
犬病,对臭鼬和浣熊,则计划使用金丝雀痘病毒为载体表达狂犬病毒糖蛋白的基因工程重组疫苗。
③应及时扑灭狂犬病患畜。
33、试述流感病毒的主要生物学特性。
主要特性:
①病毒颗粒多形性,多球形,直径80-120nm
②核酸类型为单股负股RNA,分八个节段(丙型为七个节段),每一段RNA为一个基因,复制时发生节段之间的基因重组
而导致变界,浮现新的亚型。
③病毒结构由内向外分三层,内层是核心,中层为内膜蛋白,外层为脂质双层包膜,此间插有血凝素和神经氨酸的两种
刺突。
④反抗
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