TCACM1326.34-2019姜花种子超低温保存技术规程_第1页
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文档简介

ICSC T/CACM1326.34—TechnicalcodeofpracticeforcryopreservationofHedychiumcoronariumKoen. 中华中医药学会T/CACMT/CACM1326.34—目前 范 附录A（规范性附录）试剂的配置和保存方 前——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM ——T/CACM GB/T1.1—20091部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。T/CACMT/CACM1326.34—本标准规定了姜花（HedychiumcoronariumKoen.）种子超低温保存过程中的术语和定义、种子GB/T3543.6GB/T3543.7姜花Hedychiumcoronarium种子超低温保存seedof℃4（1）GB/T3543.72，3，5-三苯基氯化四氮唑(TTC)302内侧面向下，滴入TTC溶液浸没种子，室温（25℃)避光放置4h后观察染色结果。TTCAA.1A.270

𝐴

×100%⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯（1）3h～6h75%～8045%～

𝑀1−

×100%……….900的冻存管（每管50）置于4℃冰箱中0.5h，取出立即放入-201h，之后迅速PVS2AA.3液氮中至少冻存24h后，取出2个冻存管，立即放入402min洗涤液（DS）35min，并用纯净水冲洗干净。DS的配置方法见附录A的A.4。取出1管解冻后的种子，按照5.1活力检测方法进行超低温保存后的初始生活力检测。当种子生活力≥20％时视为保存成功。将剩下1管解冻后的姜花种子，播种到带有无菌滤纸的带盖发芽盒中，温度25℃～30℃，湿度70％～85％条件下培养。附录TTC1.00g100mL1TTCpH6.5～7.54溶液I：9.08g磷酸二氢钾溶于1L无菌水中；II：35.81g1LI﹕II2﹕3精密量取甘油23.8mL、乙二醇13.6mL、二甲亚砜13.6mL，称取蔗糖13.7g，溶于MS溶液中，定容至100mL，调pH值至5.8，高温高压灭菌，4℃冷藏。41.1gMS100mLpH5.8，高温高压灭菌，4国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草（苗药卷）[M].上海科学技术出版16(2)M].WuTe-lin.KaiLarsen.Zingiberaceae[M]//FloraOfChinaBeijing:SciencePress/St.Louis:MissouriBotanicalGardenPress.200

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