清热润燥口服液治疗地区感冒后咳嗽的临床及实验研究

第第页清热润燥口服液治疗**地区感冒后咳嗽的临床及实验研究项目工作总结**市中医医院**医科大学202*年2月一、立项背景、目的和意义(一)立项背景咳嗽是常见呼吸道症状，现代医学认为这是机体的一种保护性反射，有利于清除呼吸道分泌物和有害因子，阻止外来物进入气道。但过于频繁的咳嗽则给机体带来不适，对患者的工作生活和社会活动造成严重的影响。“感冒后咳嗽”又称为感染后咳嗽(post-infectionscough,PIC)，是指由上呼吸道感染引起，感染控制以后仍迁延不愈的一类咳嗽。2005年中华医学会颁布的《咳嗽的诊断和治疗指南》[1]中指出感冒后咳嗽大约占慢性咳嗽病因的6%-10%。具有上呼吸道感染病史患者，大约11%-25%会发生感染后咳嗽，在流行季节发生率可达25%-50%。其致病机理目前认为可能与呼吸道广泛的炎症及气道高反应(AHR)密切相关[2]。经常被误诊为慢性支气管炎或支气管炎，而大量使用抗菌药物[3]，治疗延误后往往转变为慢性持续性咳嗽，严重影响患者的日常工作和生活。西医多选用β2受体激动剂(如舒喘灵)，H2受体拮抗剂(如赛庚啶)或镇咳药等治疗，但效果并不理想。“感冒后咳嗽”通常认为属于中医“外感咳嗽”范畴。崔红生[4]认为感染后咳嗽辨证规律应从表邪未尽、咳嗽不止，正虚邪恋、迁延不愈，伤津化燥、变生他病之三个规律入手;周兰[5]对感染后咳嗽从宣肺疏表，祛邪为先;潘善余[6]认为对感染后咳嗽的治疗应早期宣透肺气，慢性迁延期期扶正祛邪，始终兼顾活血化瘀。单淑贤[7]从感染后气道高反应性咳嗽来辨证治疗(以辛润宣肺止咳为治法，根据症状辨证加减用药，方药：蝉蜕、桑叶、沙参、麦冬、石斛、杏仁、桃仁、紫菀、款冬花各15g。痰稠难咳者加瓜蒌、川贝母各15g，肺气虚者加西洋参15g，兼咽痛加金银花30g，连翘30g，重楼15g，久咳不愈，咳嗽2个月以上者加乌梅、柯子各15g)。朱佳[8]自拟桑叶止咳颗粒方(桑叶10g，杏仁10g，桔梗10g，前胡10g，枇杷叶10g，浙贝母10g，百部15g，蜜炙麻黄5g，黄芩10g，金银花15g，甘草3g)对夏秋季节感冒后咳嗽患者进行观察;唐猛[9]用清润祛风中药(百部15g，白前10g，桔梗6g，橘红10g，紫苑10g，荆芥6g，玄参15g，麦冬10g，代赭石20g，旋复花6g，甘草3g)配合常规西医治疗;史利卿等[10]用宣肺止咳方(方中以麻黄、青风藤宣肺祛风，佐以款冬花、黄连、黄芩、炒山栀等药清热化痰)治疗呼吸道病毒感染后咳嗽;刘晓萍[11]用中医宣肺止咳加凉血活血药物(桔梗、白前、百部、紫菀、桑白皮、当归各10g，紫草、莪术、地龙、桃仁各6g，生草3g)水煎口服，证明该方为治疗肺炎支原体感染后咳嗽的较为有效的方法。综上所述，不管是现代医学还是中医学，对“感冒后咳嗽”的认识目前均尚无一个明确的学术思想及有效的治疗方法，辨证施治的中医中药治疗体现了一定的优势。#p#副标题#e#在一定的地域环境及生活习惯下，其疾病的发生、发展和变化也会呈现一些普遍的、共同的规律。**地处云贵高原中部，属北纬亚热带季风气候，三面环山，南濒滇池，四季不明显，具有典型的温带气候特点，即①春季温暖，干燥少雨，风高，蒸发旺盛，日温变化大;②夏无酷暑;③秋季温凉，天高气爽，雨水减少，霜期开始;④冬无严寒，日照充足，天晴少雨[12]。加之居民们素来喜食辛辣香燥，故体质多有气阴不足，不分年龄均易感冒，均有感冒后咳嗽难愈的特点。“因地制宜”是指根据不同的地域环境特点，来制定适宜的治疗原则[13]，它是中医治疗的基本原则之一。云南省名老中医陆家龙教授经过了30年临床不断的摸索总结，从“因地制宜”着手，治疗**地区感冒后咳嗽取得了较好疗效，深受当地居民的认可。2009年我们根据以上背景作为立项依据，设计了本项目，通过继承与发展，将名老中医陆家龙教授多年的学术思想及临证用药经验进行系统的整理、研究，开发出一种治疗**地区感冒后咳嗽的特色药物——清热润燥口服液。时隔3年，国内对“感冒后咳嗽”的治疗也有了一些新的研究，例如：较多的学者运用止嗽散治疗[14];亦有一些学者运用其他经方[15]，如：麦门冬汤、泻白散、沙参麦冬汤、小柴胡汤、玉屏风散、桂枝厚朴汤等。综合文献报道，不管是现代医学还是中医药学，对“感冒后咳嗽”的治疗目前仍无一个明确的学术思想及有效的治疗方法，感冒后咳嗽仍是一临床常见病、多发病，仍然没有较好的治疗方法。通过该项目系统的研究，证实了名老中医陆家龙教授对**地区感冒后咳嗽的学术思想确实具有一定的新颖性，其基本处方加工制成的清热润燥口服液疗效确切、安全，值得在临床推广应用，而且能进一步更好地为当地居民服务。参考文献：[1]中华医学会呼吸病学分会哮喘学组.咳嗽的诊断与治疗指南(2009版)[J].中华结核和呼吸杂志.2009,32(6):407-413.[2]BramanSS.Postinfectiouscough:ACCPevidence-basedclinicalpracticeguidelines[J].Chest.2006,129(1_Suppl):138S-146S.[3]曹照龙.感染后咳嗽[J].中国临床医生杂志.2007,35(1):13-14.[4]崔红生,武维屏.感染后咳嗽证治规律探析[J].中国医药学报.2003,18(8):479-480.[5]周兰.感染后咳嗽辨治心得[J].蚌埠医学院学报.2003,28(6):533-534.[6]潘善余.感染后咳嗽的中医治法探讨[J].浙江中医杂志.2005,10(6):488-489.[7]单淑贤.中药治疗感染后气道高反应性咳嗽120例临床观察[J].吉林中医药.2001,12(5):15.[8]朱佳,刘海燕.桑叶止咳颗粒治疗感冒后咳嗽30例[J].中医药学刊.2001,19(3):596-597.[9]唐猛.中西医结合治疗感冒后咳嗽疗效分析[J].现代中西医结合杂志.2003,12(21):2307-2308.[10]史利卿,刘志国,席宁等.宣肺止咳方治疗呼吸道病毒感染后咳嗽临床观察[J].北京中医药大学学报.2004,11(3):9-10.[11]刘晓萍,王炎,李静.凉血活血法治疗肺炎支原体感染后咳30例[J].现代中医药,2005,25(5):39.[12]施晓晖,顾本文.**城市气候特征[J].气象.2001,27(3):38-41[13]孙广仁.中医基础理论[M].北京:中国中医药出版社.2007:297.[14]朱艺.止嗽散治疗感冒后咳嗽疗效观察[J].内蒙古中医药.2012,31(6):30-30[15]王强,张弦,孙增涛.辨证治疗感冒后咳嗽[J].吉林中医药.2012,32(6):575-576#p#副标题#e#(二)立项目的按照普遍规律的原则，我们拟定了本课题，希望抓住该疾病的本质，通过整理、总结云南省名老中医陆家龙教授“因地制宜”辨治感冒后咳嗽30余年的学术思想与处方，进一步筛选药物提练、优化出一个普遍适用于**地区感冒后咳嗽的基础方，并将处方药物进行现代制备工艺研究，加工生产成为“清热润燥口服液”，完成该制剂的的止咳、平喘药效学实验及安全性评价试验。为该制剂的顺利研发及其在临床上推广应用提供有力依据。以更好的为**地区广大感冒后咳嗽患者提供一种使用方便、费用低廉、安全有效的纯中药制剂。(三)立项意义目前虽然临床用于治疗咳嗽病的西药及中成药较多，但尚无有效针对**地区咳嗽特点的中成药。本项目通过整理、研究名老中医陆家龙教授的学术思想及临证经验，揭示其对**地区感冒后咳嗽疾病的本质的认识，阐明**地区感冒后咳嗽的基本证候特点，因地治宜，完成清热润燥口服液的临床及实验研究，项目具有非常好的社会意义。能够为清热润燥口服液成为当地的一个能普遍适应于**地区感冒后咳嗽的中成药，成为当地的一个特色药物提供可靠的依据。二、研究的主要目标、主要内容及完成情况(一)主要目标及完成情况1、主要目标：通过整理、总结云南省名老中医陆家龙教授“因地制宜”辨治感冒后咳嗽30余年的学术思想与处方;优化出一个普遍适用于**地区感冒后咳嗽的基础方“清热润燥方”;通过临床随机对照试验，评价“清热润燥方”治疗**地区感冒后咳嗽的初步临床疗效;将该处方药物进行现代制备工艺研究，加工生产成为“清热润燥口服液”，通过动物实验，完成“清热润燥口服液”止咳、平喘药效学及急性毒理研究，为该制剂的顺利研发及其在临床上推广应用提供有力依据。2、主要目标完成情况完成了名老中医陆家龙教授“因地制宜”辨治感冒后咳嗽30余年的学术思想的整理;优化出了一个普遍适用于**地区感冒后咳嗽的基础方“清热润燥方”;临床“清热润燥方”治疗该病证具有确切的疗效;完成了“清热润燥口服液”的制备工艺的研究;“清热润燥口服液”药效学实验证明其具有止咳、平喘作用，急性毒性试验证明了其拟用日常剂量是安全的。#p#副标题#e#(二)主要研究内容及完成情况1、主要研究内容1.1云南省名老中医陆家龙教授“因地制宜”辨治感冒后咳嗽30余年的学术思想整理、研究;1.2**地区感冒后咳嗽的基础方“清热润燥方”的筛选优化及临床观察;1.3“清热润燥口服液”现代制备工艺研究;1.4清热润燥口服液的止咳、平喘药效学实验及急性毒性试验。2、主要研究内容的完成情况：2.1云南省名老中医陆家龙教授“因地制宜”辨治感冒后咳嗽30余年的学术思想整理、研究：2.1.1完成了“感冒后咳嗽的中医药治疗综述”的文献整理工作，及“**地区地理气象因素与感冒后咳嗽相关性机理探讨”的子课题的研究。发表了2篇论文;2.1.2通过与名老中医陆家龙教授的讨论，对**地区感冒后咳嗽的中医药辨治研究进行了探讨。完成学术论文1篇;2.1.3得出名老中医陆家龙教授的**地区感冒后咳嗽的经验诊断标准、证候特点的标准及证候分型、治疗原则的学术思想总结：通过整理了2007年8月至2009年9月名老中医陆家龙教授被聘我院急诊科指导专家及省级师带徒指导老师的所有带教、门诊的诊治咳嗽患者的病历记录245例，将具体病历资料录入电脑excel工作表，清楚地记录每位患者的病史、症状、用药经过及名老中医陆家龙教授的辨证思路、处方用药、精确到每一味药、每一味药的剂量。用统计软件SPSS11.5为工具，进行频数分析，得出结果并与名老中医陆家龙教授反复讨论，综合了中华中医药学会2008年发布的《中医内科常见病诊疗指南中医病诊部分》[1]的外感咳嗽中的“燥邪伤肺证”、“风盛挛急证”及内伤咳嗽中的“肺阴亏虚证”三个辨证分型标准及证候特点。得出了以下具体标准及学术思想总结：2.1.3.1名老中医陆家龙教授的**地区感冒后咳嗽经验诊断标准及证候特点：(1)**地区当地区民(常年生活在**地区2年以上);(2)平素喜食辛辣香燥之品;(3)有抽烟史，甚至嗜烟者(吸烟者纳入);(4)呼吸道感染的急性期症状消失后，咳嗽仍迁延不愈(持续时间3-8周);(5)有服用抗菌素或其它药物症状不减者;(6)证候特点：咳嗽濒作、剧烈，咽痒不适，气逆上冲，口干苦，痰少、粘而难咯，色微黄，大便干结，舌质微红，苔薄黄、少津，脉细稍数;(7)X线胸片检查无异常。其中，(1)、(4)、(6)条必须具备。2.1.3.2名老中医陆家龙教授的**地区感冒后咳嗽中医辨证思路的精髓名老中医陆家龙教授认为，**地区感冒后咳嗽内外因均同时存在，提出了“气阴不足，燥热难除”为基本证型辨证思想，治疗本着扶正驱邪的原则，明确了该病的基本治则为“养阴清热，润肺止咳”。从而能够有效地实现通过中医辨证论治的“三因制宜”而提高了临床疗效。本研究从学术理论上来说具有一定的自主创新性。#p#副标题#e#2.2完成了**地区感冒后咳嗽的基础方“清热润燥方”的组成药味的筛选及临床观察2.2.1统计分析其治疗咳嗽的最常用的处方及组方用药、剂量，进行频数分析，再反复征求名老中医陆家龙教授的意见，筛选出了**地区感冒后咳嗽的基本方“清热润燥方”：药物组成：桑叶10g，苦杏仁6g，芦根15g，南沙参12g，麦冬10g，浙贝母10g，薏苡仁15g，冬瓜仁15g，陈皮3g，茯苓10g，京半夏10g，炒谷麦芽各15g。共13味药。2.2.3完成了清热润燥方治疗**地区感冒后咳嗽的临床观察50例，同期随机采用《中医内科常见病诊疗指南中医病证部分》咳嗽篇中外感咳嗽燥邪犯肺证的桑杏汤50例对比。结果显示：清热润燥方治疗7d天总有效率为94.00%，与桑杏汤治疗对比有显著性意义(P<0.01)。治疗7天症状疗效比较显示治疗组咽痒有非常显著性意义(P<0.01);口干口苦有显著性意义(P<0.05)。结论：清热润燥方为治疗**地区感冒后咳嗽的有效处方，具有起效快，疗效好，尤其对口干苦、咽痒疗效甚佳，临床运用安全的特点，具有临床开发运用前景。2.3“清热润燥口服液”现代制备工艺研究完成情况：根据《医疗机构制剂注册管理办法》的要求，项目组余晓玲、张韶湘在我院制剂室现有条件下，完成了“清热润燥口服液”制剂的工艺设计实验及质量标准草案的实验研究。2.3.1按照国家药典对制剂处方剂量的要求，将临床汤药处方扩大10倍得到制剂标准处方。桑叶100g，苦杏仁60g，芦根150g，南沙参120g，麦冬100g，浙贝母100g，薏苡仁150g，冬瓜仁150g，陈皮30g，茯苓100g，京半夏100g，炒谷麦芽各150g，制成1000ml。京半夏符合《云南省中药饮片标准》2005年版第一册，冬瓜仁符合《云南省中药饮片炮制规范》1986年版，其余药材均符合《中国药典》标准。2.3.2确定了制备方法：结合药材性质和参考文献，以提取物浸膏为指标，选定影响多糖提取的3个主要因素：提取次数、提取时间和加水量，每个因素选择三个水平，按L(34)正交表设计安排实验，最后将提取工艺最终确定为A2B2C2，即：药物的提取条件为加10倍量水，煮提2次，每次1.5小时。传统的口服液制备多以乙醇为除杂剂，醇沉后药物中的有效成分损失严重;影响药物疗效。ZTC1+1天然澄清剂用于中药制剂生产，澄清速度快，有效成分损失少，制剂稳定性优于水醇法，同时省去了使用乙醇的费用及浓缩药液与回收乙醇的能源消耗，降低了成本，具有绿色、低碳、环保的优势。故在药液的澄清实验中选择澄清剂加入量、加入顺序、反应温度、静置时间，进行L934正交实验。最终得到最佳澄清工艺为在药液温度80℃时，先加入ZTC1+1澄清剂中B组分，再加A，其中澄清剂中的A组分浓度为2%，B组分浓度为4%，混匀后静置2小时，过滤后得澄清液。澄清液加入炼蜜，甜味素，薄荷脑、尼泊金乙酯适量，滤液浓缩至相对密度1.03左右，得口服液1000毫升。2.3.3拟定了质量控制方法：定性鉴别：对处方中的苦杏仁、浙贝母、陈皮进行了薄层鉴别的实验探索，其中苦杏仁苷及贝母碱的结果受到干扰，最终选择陈皮中有效成分的薄层鉴别作为定性鉴别指标项目。由于处方组成中的药材含大量的多糖，如：沙参、芦根、薏仁、麦冬、冬瓜等。而多糖具有增强机体免疫力，促进康复的作用。因此，选择此类成分作为处方含量测定的控制指标较为合理。本实验采用苯酚-硫酸比色法测定了制剂中总含糖量含量(紫外分光光度法)，得口服液含糖量应不低于9.5%。#p#副标题#e#2.4清热润燥口服液的止咳、平喘药效学实验及急性毒性试验完成情况：按照《新药审批方法》有关中药制剂的规定，项目组利用**医科大学实验动物学部(**医学院实验动物中心)的资源和条件，按照《中药新药研究的技术要求》的实验操作规范，由张荣平、陈丽玲和赵玉雪具体负责试验的开展。试验采用浓氨水喷雾诱咳法建立小鼠咳嗽模型、2%氯化乙酰胆碱和0.1%磷酸组胺等容积混合液喷雾引喘法建立豚鼠诱喘模型、以及通过测量小鼠的最大耐受量(MTD)的方法，完成了清热润燥口服液的止咳作用和平喘作用药效学实验及急性毒性试验。结果显示：清热润燥口服液高剂量组(19.50ml/kg,即57.3g/kg)给小鼠连续灌胃给药6天，能延长小鼠咳嗽潜伏期，减少咳嗽次数，与空白对照组比较，有显著性差异(P<0.05和P<0.01);连续给豚鼠灌胃6天后，清热润燥口服液高剂量(13.75ml/kg,即40.4g/kg)组豚鼠引喘出现潜伏期明显长于同期正常对照组(P<0.05);清热润燥口服液中剂量(6.875ml/kg,即20.2g/kg)组和清热润燥口服液低剂量(2.73ml/kg,即8g/kg)组豚鼠引喘出现潜伏期与正常对照组比较有一定延长趋势,但统计学未见显著性差异。与阳性对照组豚鼠引喘出现潜伏期比较,清热润燥口服液的平喘作用明显弱于氨茶碱;连续观察14d后，未发生动物死亡，小鼠体重均有所增长，观察未见异常反应，小鼠口服给药的最大耐受量是生药量为117.6g生药/kg/d，相当于临床人用量的187倍。结论：清热润燥口服液具有止咳和平喘作用。拟用日剂量在临床应用上是安全的。(二)主要考核的技术指标及完成情况1、主要考核的技术指标：1.1完成清热润燥口服液的临床及实验研究工作，形成研究报告、技术总结报告各1份;1.2发表2-3篇专业论文;1.3培养硕士研究生1名;2、主要考核的技术指标完成情况：1.1完成了清热润燥口服液的临床及实验研究工作，形成了研究报告、技术总结报告各1份;1.2撰写了研究相关论文8篇，正式刊发了6篇，还有2篇待发表;1.3通过项目的实施，**市中医医院完成了1名硕士研究生的培养，**医科大学完成了2名在读研究生的培养;同时，双方共有6名人员获得了职称的提升。三、技术路线#p#副标题#e#四、项目的主要责任和主要负责承担人员情况：序号姓名性别出生年月技术职称文化程度工

作

单

位对项目作出的贡献1**女**主任医师本科双学士**市中医医院项目设计及主持研究2**男**主任医师本科**市中医医院提供处方、临床观察及理论整理3**女**主任药师本科**市中医医院制剂工艺研究、生产4**男**主治医师本科**市中医医院协助临床资料整理及临床研究5**男**副主任医师硕士研究生**市中医医院负责项目资料的整理6**男**教授博士研究生**医科大学药效学及安全性研究方案设计及督查7**女**高级实验师硕士研究生**医科大学负责药效学及安全性实验工作8**男**主治医师硕士研究生**市中医医院协助临床资料整理及临床研究9**女**主管药师硕士研究生**市中医医院协助制剂工艺研究10**女**主任医师在读博士研究生**市中医医院协助临床资料整理及临床研究11**女**无在读硕士研究生**医科大学协助动物方案的设计及资料的整理12**女**无在读硕士研究生**医科大学协助动物方案的设计及资料的整理13**女**副主任医师本科**市中医医院协助临床方案的设计及资料的整理14陈云山女1970.3副主任医师本科**市中医医院协助临床方案的设计及资料的整理15**男**住院医师硕士研究生**市中医医院协助临床方案的设计及资料的整理五、项目的经费预算经费预算支出项目合计（万元）科室自筹经费第一年第二年第三年设备购置费

试验材料费10.500.5试验外协费734

临床观察费10.50.5

论文版面费0.50.10.20.2资料打印、复印、装订费0.50.10.10.3鉴定、验收费1

1管

理

费0.60.20.20.2其他费用0.40.10.10.2总

计124.55.12.4#p#副标题#e#六、项目时限(2009.10-2010.04)：云南省名老中医陆家龙教授“因地制宜”辨治感冒后咳嗽30余年的学术思想整理、研究及基本处方药物组成、剂量等的确定;(2010.04-2011.01)：清热润燥方的筛选及临床疗效观察;(2011.01-2011.05)：清热润燥口服液现代制备工艺研究;(2011.06-2012.04)：清热润燥口服液药效学实验及急性毒性试验;(2012.05-2012.12)：资料整理、数据统计分析，撰写并发相关论文，总结汇报，结题。七、本研究的特色与创新点1、基于云南省名老中医陆家龙多年的学术思想及临证经验，首次从**地区气候特点、地域因素等对人体禀赋体质作用的影响入手，认为**地区感冒后咳嗽内、外因同时存在，提出了“气阴不足，燥热难除”为基本证型辨证思想，治疗本着扶正驱邪的原则，明确了该病的基本治则为“养阴清热，润肺止咳”。从而能够有效地实现通过中医辨证论治的“三因制宜”而提高了临床疗效。本研究从学术理论上来说具有一定的自主创新性。2、秉承“继承、创新、现代化、科学化”将名老中医经验瑰宝科学规划、开发利用服务于社会的宗旨，将名老中医陆家龙教授多年的学术思想及临证用药经验进行系统的整理、研究，开发出一种治疗**地区感冒后咳嗽的特色药物——“清热润燥口服液”，是首次针对**地区感冒后咳嗽，研发具有地域特色的一个中成药。国家一级科技查新咨询单位——云南省科学技术情报研究院202*年2月结题查新报告结论：1、针对**地区多“燥”的气候特点研发院内制剂“清热润燥”口服液，进行现代制备工艺、药效学及安全性评价等研究未见文献报道;2、药物处方：桑叶10g苦杏仁6g南沙参12g麦冬10g浙贝母10g芦根15g薏苡仁15g冬瓜仁15g陈皮3g茯苓10g京半夏10g炒谷麦芽各15g等未见文献报道。八、科研及人才培养通过本项目的实施，负责人2010年成为了第八批**市学术和技术后备人选，2012年成为了**市卫生系统省内知名专家培养对象、全国优秀中医临床研修人才培养对象、云南中医学院硕士研究生导师;以名老中医陆家龙教授为指导专家的团队2012年获全国名老中医传承工作室;项目组主要成员所在的重症医学科成为了国家中医药管理局“十二五”重点专科培育建设单位。同时，课题组主要成员还获得了云南省应用基础研究云南省应用基础研究计划项目(面上项目)1项、计划项目(青年基金项目)1项;**市中医医院完成了1名硕士研究生的培养，**医科大学完成了2名在读研究生的培养;同时，双方共有6名人员获得了职称的提升。#p#副标题#e#九、发表科研论文情况