天然药物成分分离精制和鉴定的方法与技术44课件

天然药物成分

分离精制和鉴定的方法与技术滨州职业学院天然药物提取液：1、混合物→需要分离、精制、纯化2、体积大→浓缩，提高浓度（实验室常用的减压蒸馏装置：旋转蒸发仪）本节内容一、系统溶剂分离法是一种按极性由小到大的顺序，选用不同极性的溶剂组成溶剂系统，依次提取分离提取液中各种不同成分，使各溶解度有差异的成分得到分离的方法。此法是早年研究天然产物有效成分的一种最主要的方法，目前仍是研究不明成分最为常用的方法。操作技术：适当浓缩总提取液，或拌入适量惰性吸附剂如：粗硅胶、纤维粉及硅藻土等，低温或自然干燥后粉碎，然后依次用石油醚（或苯）、乙醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、乙醇和水分步进行抽提，使溶解度不同的各种成分得到分段分离。也可以选择其中三、四种不同极性的溶剂组成溶剂系统，如石油醚→苯→乙醚→三氯甲烷→乙酸乙酯→正丁醇或戊醇，极性由低到高分步进行抽提，分成若干部位。一、系统溶剂分离法生物碱强心苷黄酮类皂苷生物碱盐等挥发油蛋白质等石油醚、苯乙醚、三氯甲烷三氯甲烷-乙醇乙酸乙酯正丁醇甲醇、乙醇、丙酮水一、系统溶剂分离法二、两相溶剂萃取法是指往提取液中加入一种与其互不相溶的溶剂配成两相溶剂系统，利用混合物中各种成分分配系数的差异而将所需成分萃取出来的分离方法。基本原理：利用混合物中各种成分在两相互不相溶的溶剂中分配系数的差异而达到分离的目的。混合物中各种成分在同一两相溶剂系统中分别有不同的分配系数，若各种成分的分配系数差异越大，则分离效果越好。二、两相溶剂萃取法分配系数：一定温度和压力下，某物质溶解在两相互不相溶的溶剂中，当达到动态平衡时，根据分配定律，该物质在两相溶剂中的浓度之比为一常数，称为分配系数K。K=Cu/CLK表示分配系数；Cu表示溶质在上相溶剂中的浓度；CL表示溶质在下相溶剂中的浓度。二、两相溶剂萃取法（一）简单萃取法

二、两相溶剂萃取法待萃取物和溶剂装入分液漏斗振摇，重复数次静置，使两液分层开启活塞使下层液放出从分液漏斗的上端倒出上层液操作技术：这是一种常用的简便萃取技术，小量萃取一般在分液漏斗中进行。（二）逆流连续萃取法

是利用互不相溶的溶剂的相对密度不同，使相对密度小的相液作为移动相（或分散相），从下部逆流连续穿过相对密度大的固定相（或连续相），以此交换溶质而达到分离的一种连续萃取技术。二、两相溶剂萃取法（三）逆流分溶法

逆流分溶法（countercurrentdistribution，CCD）是一种高效、多次、连续的两相溶剂萃取分离方法，亦称为逆流分配法。二、两相溶剂萃取法三、沉淀法是指在天然药物的提取液中加入某些试剂，使产生沉淀或降低溶解性而从溶液中析出，从而获得有效成分或去除杂质的方法。（一）酸碱沉淀法是一种利用某些成分能在酸（或碱）中溶解，继而又在碱（或酸）中生成沉淀而实现分离的方法。

三、沉淀法碱溶酸沉酸溶碱沉（二）试剂沉淀法是利用一些成分能与某些试剂产生沉淀的性质，或利用某些成分在不同溶剂中溶解度的差异，通过加入特定试剂或溶剂，使生成沉淀，与其他成分分离的方法。

三、沉淀法四、结晶与重结晶法是利用混合物中各种成分，在溶剂中溶解度的差别，使所需成分以结晶状态析出，再进一步纯化处理，以达到分离精制目的的分离方法。选择合适的溶剂，是结晶法的关键。

理想的溶剂必须具备以下条件：（1）不与结晶物质发生化学反应；（2）对结晶物质的溶解度随温度不同有显著差异，热时溶解度大，冷时溶解度小；（3）对可能存在的杂质溶解度非常大或非常小（即冷热均溶或均不溶）；（4）沸点适中，不宜过高或过低；（5）能给出较好的结晶。常用的溶剂有水、乙酸、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、三氯甲烷等。当不能选择到一种合适的溶剂时，通常选用两种或两种以上溶剂组成的混合溶剂。四、结晶与重结晶法操作技术：四、结晶与重结晶法制备结晶饱和溶液趁热滤过，除去不溶性杂质将滤液放冷，使析出结晶抽滤，将结晶从母液中分出再次重结晶得精制的晶体难点释疑结晶法如何选择合适的混合溶剂？

选用混合溶剂，最好选择结晶成分能在低沸点溶剂中易溶解，而在高沸点溶剂中难溶解的两种混合溶剂，因为低沸点溶剂较易挥发而逐渐减少在混合溶剂中的比例，结晶即可慢慢析出。五、透析法是利用透析膜具有选择性透过的特点，使提取液中小分子物质可通过透析膜，而大分子物质不能通过，则分子量差异较大的物质获得分离的方法。操作技术：如图所示，将提取液置透析膜中，扎紧口，外面护以尼龙网袋，放入清水缸中。不断更换缸内的水，使膜内外的浓度差增加，或稍加搅拌或适当加温处理；也可以在近透析膜两旁处放置两个电极，称电透析，通电后使带电荷离子的透析速度增加10倍以上，以加快透析的速度。透析过程中，用定性反应对膜内药液有效成分或指标成分进行检查分析，判断透析是否完全。五、透析法六、分馏法是利用各沸点不同的化合物组成的混合物，在分馏过程中产生高低不同的蒸气压，从而收集到不同沸点温度的馏分，达到分离目的的方法。操作技术：实验室常用简单分馏装置如图所示，操作时将待分馏的试样放入圆底烧瓶中，加入沸石，安装好装置后，在分馏柱的外围尽量用石棉绳包住，选择合适的热浴加热。当瓶内液体一开始沸腾时，就要注意调节温度，使蒸气缓慢升入分馏柱。当蒸气进入分流柱时，由于柱外空气的冷却，部分蒸气凝成液体，显然高沸点的组分较易被冷凝，随着分流柱管的升高，愈向上混合蒸气中所含高沸点的组分愈少，到了一定高度时可获得某一纯的组分。待低沸点组分蒸完后，再逐渐升温，如此进行操作，使不同沸点的组分逐一分馏出来。六、分馏法应用实例：工业上先将石油加热至400℃~500℃之间，使其变成蒸气后输进分馏塔。在分馏塔中，位置愈高，温度愈低。石油蒸气在上升途中会逐步液化，冷却及凝结成液体馏份。分子较小、沸点较低的气态馏份则慢慢地沿塔上升，在塔的高层凝结，例如燃料气(FuelGas)、液化石油气(LPG.)、轻油(Naphtha)、煤油(Kerosene)等。

六、分馏法分子较大、沸点较高的液态馏份在塔底凝结，例如柴油(Diesel)、润滑油及蜡等。

在塔底的残余物为沥青及重油(HeavyOil)，可作为焦化和制取沥青的原料，也可作为锅炉燃料。不同馏份在各层收集起来，作为石油化学原料，可制成许多的化学品。其属于物理变化。六、分馏法课堂活动

天然药物提取液为混合物，根据成分性质的不同，请用连线选择相适应的分离方法。系统溶剂萃取法从某天然药物的水提液中加入戊醇获取皂苷两相溶剂萃取法分离未知成分的天然药物提取液沉淀法去除盐酸小檗碱粗制品中的杂质（已知盐酸小檗碱热水易溶，冷水难溶）结晶法加入雷氏铵盐从某天然药物水提