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文档简介
薄层色谱分离原理Separationprincipleofthinlayerchromatography一、分离理论
薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法。吸附剂对各组分具有不同的吸附能力,展开剂对各组分的溶解、解吸能力也不相同。因此在不断展开的过程中,各组分在两相吸附-解吸过程中行进速度不同,而最终被分离开来。二、吸附剂(固定相)吸附剂的选择从两方面考虑:被分离物质的性质和吸附剂的吸附能力的强弱若被分离的物质极性强,应选择吸附能力弱的吸附剂;若被分离的物质极性弱,则应选择吸附能力强的吸附剂;最常用的吸附剂是硅胶、氧化铝和聚酰胺1.硅胶
硅胶表面带有的硅醇基(-Si-OH),与极性基团形成氢键而表现其吸附性能。硅胶的活性与含水量有关,含水量高,活度级数高,吸附力弱。薄层色谱常用硅胶有硅胶H(不加粘合剂)、硅胶G(加煅石膏)、硅胶HF254(加无机荧光剂)等品种。2.氧化铝氧化铝H、氧化铝G、氧化铝HFz等型号氧化铝又可分为碱性氧化铝、酸性氧化铝和中性氧化铝氧化铝的吸附性比硅胶弱,但它能显示出与硅胶不同的分离能力。3.聚酰胺聚酰胺为有机吸附剂,聚酰胺分子内的配胺基能与酚类、酸类、醌类及硝基化合物等形成氢键,由于这些化合物中酚羟基数目及位置的不同,而导致聚酰胺对其产生不同的吸附力,遂使其分离。三、展开剂(流动相)选择展开剂的一般原则应根据被分离物质的极性、吸附剂的活性以及展开剂本身的极性来决定。例如:使用硅胶做为固定相(极性)的话,此时加入两不同极性的化合物,极性较强的化合物与硅胶间会有较强作用力,因此,更能抵抗流动相并与硅胶结合;极性较弱的化合物与硅胶的作用能力较差,因此更容易流动。薄层色谱法中常用的溶剂,按极性由强到弱的顺序排列是:水>酸>吡啶>甲醇>乙醇>丙醇>丙酮>乙酸乙酯>乙醚>氯仿>二氯甲烷>甲苯>苯>三氯乙烷>四氯化碳>环已烷>石油醚选择展开剂时,除参照溶剂极性来选择外,更多地采用试验的方法。
当一种溶剂不能很好地展开各组分时,常选择用混合溶剂作为展开剂。
对普通酸性组分,特别是离解度较大的弱酸性组分应在展开剂中加入一定比例的酸,可防止拖尾现象。对碱性组分(如某些生物碱),多数情况是选用氧化铝为吸附剂,选用中性溶剂为展开剂。混合展
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