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文档简介
一、名词解释
1、顺式作用元件:是转录调整因子的结合位点或DNA序列,包括启动子、增强子和克制子。
2、增强子:就是远离转录起始点、决定组织特异性体现、增强启动子转录活性的特异DNA序列,其发挥作用的方式与
方向、距尚无关。
3、同位酶:识别相似的序列但切割位点不一样样的陶。
4、顺反手:产生一条多肽链或功能RNA所必需的所有核甘酸序列。
5、答复突变:一种等位基因可以突变为其相对的另一种等位基因,反之,另一种等位基因也可以突变为本来的基因,
这种突变叫作答复突变。
6、衰减子:在色氨酸操纵子中的一种区域,此区域以形成不一样二级构造的方式,运用原核生物转录与翻译的偶联对
转录进行调整。此区域只存在于原核生物合成代谢的操纵子中。
7、切刻平移:用DNA聚合酶I在有旗刻的NA双链上•而进行5'f3'的外切.•而进行DNA合成.使缺刻在DNA上
发生平移的过程。此过程也是制备放射性探针的•种措施。
8、减色效应:变性DNA夏性后,在260nm的吸取值减少的现象称为减色效应。
9、巢式PCR:是指运用两套PCR引物(巢式引物)对进行两轮PCR扩增反应。在第一轮扩增中,外引物用以产生扩增产
物,此产物在在内引物的存在卜.进行第二轮扩增。
10、核受体:细胞内受体分布于胞浆或核内,本质上都是配体调控的转录因子,均在核内启动信号转导并膨响基因转录,
统称核受体。
11、增色效应:当核酸变性后、其260nm的紫外吸取增长的现象。
12、负超螺旋:两股以右旋方向缠绕的螺旋在外力向松缠的方向捻转时,产生一种右旋的超螺旋以解除外力捻转导致的
胁迫,这样形成的超螺旋为负超螺旋。
13、限制性内切核酸的;是一类能识别和切割双链DNA分子中特定碱基次疗的核酸内切旃。
14、复制子:具有一种起点的复制单位。其长度等于相邻两个复制起点间的距离。
15、半保留复制:在DNA复制过程中亲代DNA分子的两条链首先解螺旋和分离,然后以每条链为模板,按碱基互补配对
原则,合成两条与模板链互补的新桂。这样从亲代的一种双螺旋DNA分子形成了两个♦原先的碱基序列完全相似的两个子代
DNA分子。每个子代DNA分子中有一条链来自亲代,另一条链是新合成的,这种的复制方式称为半保留复制。
16、密码子:mRNA上每3个相邻的核苜酸编码蛋白质多肽锌中的一种氨基酸,这三个核甘酸就称为一种密码子或三联
体密码。
17、质粒:细胞染色体以外的,能自主复制的遗传单位,包括真核生物的细胞器和细菌细胞中染色体以外的脱氧核糖核
酸(DNA)分子。
18.Holliday构造:是以英国生物学家RobinHolliday的姓氏命名的一种发牛.在DNA分子之间的“交叉
”(Crossing-Over)构造。
19、Pribnowbox:在细菌启动子构造中,从起点上游约一10处找到6bp的保守区域,其保守序列为TATAAT。
20、转录:以DNA分子中的一条链为模板,按照碱基配对原则,合成出一条与模板DNA链互补的RNA分子的过程。
21、RNA拼接:是指把hnRNA中的内含子切除而把外显子连接起来产生成熟的mRNA分子的过程。
22、分子杂交:互补的核甘酸序列通过Walson-Crick碱基配对形成稳定的杂合双链分子DNA分子的过程称为杂交。杂
交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针己知序列进行特异性的靶序列检测。
23、同源重组:同源重组又称一般性重组。由两条同源区的DNA分子,通过配对、链断裂和再连接,而产生的片段间互
换过程。
24、基因组:基因组是指生物体或细胞中,一套完整单体的遗传物质的总和:或指原核生物染色体、质粒、真核生物的
单倍体染色体组、细胞器、病毒中,所具有的一整套基因,包括基因和基因之间区域的所有DNA。
25.逆转荥转座子:一类移动为子在转座过程中需要以RNA为中间体,通过逆转录过程冉分散到基因组中。
26.断裂基因:断裂基因是指基因的编码序列在DNA分子上不是持续排列的,而是被不编码的序列所隔开。
27.C值:真核生物单倍体基因组所包括的所有DNA量称为该物种的C值。
28.内含子:存在于初始转录产物hnRNA中,但在成熟的RXA中并不存在的DNA序列。或者说在不持续基因中无编码功
能的区段称为内含子
29.Klen。骑片段:DNA聚合陶I被蛋白梅切开得到的大片段称为Klenow片段。
30.终止因子:协助RNA聚合酶识别终止信号的蛋白因子称为终止因子。
31.操纵基因:编码合成那些参与基因体现调控的RNA和蛋白质的特异D\A序列。
32.翻译跳灰:核糖体跳过一大段mRNA后继续翻译称为翻译跳跃。
33.构造基因:构造基因是编码蛋白质或RNA的基因。
34.回环模型:当两条链同步复制时,后随链模板通过复制叉的部位就形成种回环,以适应双链同步向前行进,这种
复制模型称为回环模型。
35.阻遏蛋白:阻遏蛋白是负调控系统中由调解基因编码的调解蛋白,它自身或与辅阻遏物一起结合于操纵基因,阻遏
操纵子构造基因的转录。
36.启动子:启动子指保证转录精确而有效地起始的DNA序列。
37.复制子:基因组内可以独立进行复制的单位称为复制子或复制单位
38.外显子:在不持续基因中有编码功能的区段称为外显子
39.转座子:转座子(Tn)是在基因组中可以移动的•段DNA序列。
40.转座:转座子由基因组的•种位置转移到另一种位置称为转座。
41.核酰:具有催化功能的RM分子称为核前
42.可读框(0RF):从起始密码子起到终止密码子的区域,由计算机识别出也许的编码区域。当没有已知蛋白产物时,
称可读框(潜在的编码区)。
43.基因突变:基因突变是在基因内的遗传物质发生可遗传的构造和数量的变化,一般产生一定的表型。
44.抑癌因子:也叫抑痛基因,是•类克制细胞过度生长、增殖从而遏制肿瘤形成的基因.对于正常湘胞.调控生长的
基因(如原癌基因等)和调控克制生长的基因(如抑癌基因等)的协调体现是控制细胞生长的重要机制之一。常见的抑癌基因:
P53、Rb,P16、APC、DCC等。
45.受体:受体是细胞表面或亚细胞组分中的一种分子,可以识别并特异地与有生物活性的化学信号物质(配体)结合,
从而激活或启动一系列生物化学反应,最终导致该信号物质特定的生物效应。
二、填空题
1.DNA是由脱氧核糖核昔酸为基本构成单元以3',5'-磷酸..酯键连接形成的长链分了。
2.转一f基因可编码转座懒,该醐可以使转座F从DMA跳到另一DNA位置。
3.真核生物翻译时,起始凝基酸为甲硫亚酸,核糖体为墩S。
4.DNA复制时,一条链持续合成,称之为前导链,另一条椎间断合成叫随即处。
5.基因工程常用载体有质粒和噬菌体.
6.真核生物RNA转录后加工包括5'端形成特殊的帽子构造和3'端添加多聚腺喋吟背险(polyA)尾巴.
7.原核生物启动子的T0区的功能是紧密结合部位;-35区的功能为R\A聚合酶的识别部位.
8.DNA变性后紫外线吸取值增长称为暨竺效应。变性后氢键键断裂。
9.核糖体从匕端到3二端持续阅读mRNA上的密码子,从而决定蛋白质从N端到C端的序列。
10.证明DNA是遗传物质的著名试验有肺炎球菌感染小鼠和T2噬菌体感染大肠杆菌.
11.光复活作用能直接修复DNA损伤,它需要在光条件下,由光激活酶参与完毕修复。
12.DNA双螺旋构造中碱基配对方式是八-T、G-Co
13.动物体含量最多的蛋白质是胶原蛋白,它具有较多的丙氨酸,因此有很好的弹性。
14.原核牛.物启动子具有TO序列和-35序列,前者为解旋序列,后者是启动子识别序列。
15.蛋白上是由宓基限为基本构造单元以肽犍在接起来的长池人分子。
16.转化试验证明了DNA是遗传物质.它采用肺炎双球菌在小鼠体内接种。
17.基因组是指一种生物体整套单体的的遗传物质。二倍体细胞的基因组是能维持配子和配子体王常功能的圾低数
目的•套染色体(或全套基因)。
18.位点特异性重组和转座均需特异性酶参叮,分别称为整合醉和转―酶。
19.真核生物mRNA需要加工后才能进行翻译,加工方式包括5'加帽、3'端添加多聚腺嚓吟仔酸(polyA)尾巴、剪
切内含子,拼接外显子三种。
20.tRNA依托自身的_£密码王识别mRNA上的密码子来特异性转运氨基酸。
21.原核细胞核糖体的小亚基上的16SrRNA协助识别起始密码子。
22.B-DNA为右手螺旋,Z-DNA为左手螺旋。
23.在大肠杆菌中,DNA聚合陶II防要参叮DNA损伤修复。DNA聚合酶III里.要变与DNA复制。
24.环状DNA双链的免制方K裁要可以分为0型复制:滚动式复制;D环复制三种类型。
25.直核生物核糖体由40s小亚基和60s大亚基构成。
26.原核细胞的起始氨基酸是甲酰甲硫氨酸,起始氨酰-tRNA也fMet-tRNA"。
27.原核生物的核糖体由_组兄小亚基和迦大亚基构成。
28.蛋白质合成的起始密码子是AUG_»
29.当DNA受制时,一条链是持续的,另一条链是不持续的,称为半不持续第制。
30.豆制得到的子代分子,一条链来自亲代DNA,另一条链是新合成的,这种方式叫半保留复制。
31.DNA的Tm值与DNA的均一性,G—C碱基对的含量和介质中离子强度等原因有关。
32.根据对DNA序列和所需蛋白质因子的规定,可以把重组分为4类同源重组,位点特异重组,转座重组,
和异常重组。
33.RNA聚合超在RNA转录中起重要作用,它是在DNA模板的指导下,以脱氧二磷酸核甘酸(dNTP)为底物,沿5'一
3'方向催化合成新生的RNA链。
34.大肠杆菌有两类终止了,一类是不依赖P因r的终止r(荷朴终止了)另一类是依赖『因广的终止广。
35.原核生物翻译终止时有邪一1、RF—2和RF—3三种释放因子。
36.肽链的延伸过程由3个环节,①进位反应,②转肽反应,③移位反应。
37.蛋白质的生物合成是以合NA为模板,以铝酰一IRNA为原料直按供体,以核糖体为合成杨所。
38.生物界共有里个密码子,其中编码氨基酸的有立个。
三、单项选择题(每题1分,共10分)
1.紫外线引起的DW损伤可直接修复,该修复机制称为[A]
A.光旦活B.切除修夏C.重组修第D.S0S作用
2.真核生物基因组中的高度反豆序列是[D]
A.构造基因B.外显子C.调整基因D.卫星DNA
3.DNA复制时的引物是[D]
A.蛋白质B.核酶C.DNAD.RNA
4.乳糖操纵子中直接控制构造基因转录的DNA构造是[C]
A.启动子B.调整基因C.操纵序列D.乳糖
5.RNA合成的特性不包括[A]
A.以4利YYTPs为原料B.RNA聚合酶催化
C.只需要一条DNA链为模板D.从5'向3',端延伸
6.天然DNA的重要构造是[3]
A.A双螺旋B.B双螺旋C.C双螺旋D.Z双螺旋
7.识别RNA上的密码子重要能哪种RNA」2的反密码子[C]
A.mRNAB.rRNAC.tRNAD.snRNA
8.原核生物转录终止时重要依托[A]
A.P蛋白对终止区的识别B,终止的茎环构造C.。因子的作用D.RNA与DNA的互相作用
9.下面哪种分子的紫外吸取值最大[D]
A.单链DNAB.双链DNAC.RNAD.核甘酸混合物
10.密码子的性质不包括[D]
A.不一样位置碱基有特异性B.不间断阅读C.通用D.阅读方向与mRNA编码方向相反
11.如下哪一种具有260nm的最大吸取值[B]
A.双链DNAB.单核甘酸C.RNAD.蛋白质
12.大肠杆菌和真核生物染色体的共同点是[D]
A.环状DNAB.有.核小体C.位于核内D.DNA形成负超螺旋
13.大肠杆菌梵制的原点是[B]
A.RecAB.OriCC.attPD.DnaB
14.遗传密码的特性是[A]
A.简并性、无逗点、几乎通用B.简并性、重叠、通用
C.不简并、无逗点、通用D.不简并、无逗点、几乎通用
15.大肠杆菌释放因子识别[A]
A.LAAB.AUGC.GUUD.UUA
16.RNA转录不需要[D]
A.模板B.NTPC.RW\聚合酶D,引物
17.卫星DNA属于LD」
A.单拷贝序列B.少许反复序列C.中度反复序列D.高度反受序列
18.核酶的化学成分是[A]
A.DNAB.RNAC.蛋白质D.多融
19.如下哪个是亚氨基酸[A]
A.肺氨酸B.赖氨酸C.色氨酸D.组氨酸
20.在真核细胞中肽链合成的终止原因是[D]
A.已到达mRNA分子的尽头B.具有特异的(RNA识别终止密码子
C.终止密码子自身具有酯施作用,可水解肽酰与iRNA之间的酷键
D.终止密码子被终止因子(RF)所识别
21.严格来说,下列哪种氨基酸属于亚氨基酸[C]
A.天冬氨酸B.谷氨酸C肺氨酸D.亮氨酸
22.组蛋白和非组蛋白与DNA结合方式分别是[C]
A.特异性结合特异性结合B.非特异性结合非特异性结合
C.特异性结合非特异性结合D.非特异性结合特异性结合
23.Waison和Crick提出的经典DNA双螺旋构造属于[B]
A.A型B.B型C.Z型D.E型
24.真核DNA和原核DNA的复制方式分别是[A]
A.半保留方式半保留方式B.半保留方式全保留方式
C.全保留方式半保留方式D.全保留方式全保留方式
25.噬菌体中X174的DNA复制模型是[D]
A.0单向B.0双向C.D环D.滚环
26.DNA变性后,如下哪条键断裂[D]
A.肽键B.糖昔键C.磷酸二酯键.D.氢键
27.胶原蛋白重要的氨基酸构成是[A]
A.丙氨酸B.脯氨酸C色氨酸D.蛋氨酸
28.测定DNA序列的施法又叫[B]
A.水解法B.末端终止法C化学法D.外切法
29.下列属于原核生物基因特点的是[A]
A.单一序列B有核小体C.有内含子D.构造复杂
30.Shine—Dalgarno次序(SD-次序)是指[D]
A.在mRNA分子的起始码上游4T3个核甘酸处的次序
B.在DNA分子上转录起始点前4T3个核管酸处的次序
C.16srRNA3,端富含喀腕的互补次序D.启动基因的次序特性
31.E.coliDWV复制时重要的聚合施是[C]
A.DNA聚合酶IB.DNA聚合酶IIC.DNA聚合胸HID.拓扑异构酶II
32.紫外线对DNA的损伤可通过哪种方式直接修复[A]
A.光激活作用B.切除修复C.重组修复I).SOS作用
33.RNA聚合酶B亚基的作用重要是[C]
A.识别启动子B.结合DNAC.催化聚合D.与聚合酶形成全菊有关
34.乳糖存在时,有关酶的浓度的变化为[B]
A.增大B.减少C.不变D.无法确定
35.下列点突变中,不属于碱基替代中的颠换[C]
A.T-CB.G-*TC.C-*GD.A-C
36.在E.coli的RNA聚合旃中,负责识别DNA分子上RNA合成起始信•号的亚基是[D]
A.QB.6C.B'D.o
37.在真核生物基因组中,卫星DNA屈于[D]
A.单拷贝序列B.低度反复序列C.中度反复序列D.高度反复序列
38.在真核基因体现调控中,增强子和沉默子属于哪一水平调控[B]
A.DNA水平B.转录水平C.转录后水平D.睛译水平
39.通过转基因发明动植物优良新品种过程中,常采用的载体是B]
A.克隆载体B.体现载体C.转移载体D.探针载体
40.DNA限制性内切酶酶切片段的排列次序是[B]
A.遗传图谱B.物理图谱C.转录图谱D.全长序列图
41.核糖核酸酶H作用的对象是[C]
A.双链DNA分子B.双链RNA分子
C.DNA-RNA杂合分中的RNAD.DNA-RNA杂合分子中的D\A
42.在有而无存在状况下,末端转移酶能在如下哪种分子末端加上单核甘酸[C]
A.双链DNA分子缩进去的3'-OHB.双链DNA分子平头末端的3'-0H
C.双链DNA分子凸出的3'-OHD.以上均可
43.多种密码子编码一种氨基酸的现象,称为密码子的[B]
A.复杂性B.简并性C.多形性D.不可知性
44.下列有关TATA盒(Hognessbox)的论述,哪个是对的的[B]
A.它位于第一种构造基因处B.它和RNA聚合酶结合C.它编码阻退蛋白D.它和反密码子结合
45.有关DNA链的描述哪条不对?(D)
A.DNA是由诸多脱氧单核昔限形成的多核甘酸B.DNA的5'端是-0H基,3'端是磷酸
C.单核甘酸之间通过磷酸;酯键相连D.DNA的一级构造是指dAMP,dGMP,dCMP,dTMP的排列
46.真核细胞mRNA的加工修饰不包括:(A)
A.除去非构造信息部分B.在mRNA的3'末端加polyA尾巴
C.通过较多的甲基化过程D.在mRNA的5'末端形成帖子构造
47.基因体现产物是(D)。
A.是DNAB.是RNAC.是蛋白质D.大多走蛋白质,有些是RNA
48.下面哪些原因可防止DNA上的一种点突变表目前蛋白质的一级构造?(D)
A.DNA的修夏作用B.密科的简并性C.核糖体对mRNA的校正I).以上都对的
49.蛋白质生物合成中多肽的氨基峻排列次序取决于(C)
A.对应tRNA的专一性B.对应氨酰tRNA合成前的专一性
C.对应mRNA中核昔酸排列次序D.对应tRNA上的反密码子
50.对应于mRNA中密码子AGG的tRNA反密码子三联体是(B)
A.AGTB.CCUC.GCAD.TGC
51.tRNA参与的反应有(D
A.转录B.复制C.反转录D.翻译
52.细菌核糖体由(B)亚基构成
A.20S,40SB.30S,50SC.40S,60SD.50S,70S
53.如下哪个不是遗传密码的特性?(A)
A.密码子与氨基酸的数量相似B.密码子并非在任何物种中都通用
C.某些级基酸由多种密码子编码D.密码子是简并的
54.基因组是(D)
A.一种生物体内所有基因的分子总量B.一种二倍体细胞中的染色体数
C.遗传单位D.生物体或细胞中,一套完整单体的遗传物质的总和
55.从一种复制起点可以分出几种复制叉?(A)
A.2B.3C.4D.4个以上
56.下列哪种氨基酸的密码子可作为起始密码子?(C)
A.苯丙氨酸:B.酪氨酸:C.甲硫氨酸:D.S-腺昔蛋氨酸
四、多选题
1.DNA复制包括[ABC]
A.引物形成B.有冈埼片段产生C.半保留其制
D.一条链沿5'向3'方向合成,另一条傩则相反E.DNA聚合旃II是重要聚合酶
2.位点特异性重组的特性有[ABDE]
A.有同源序列B.在特定位点重组C.RecA蛋白参与
D.整合朝是重要的重组酶E.有Holliday构造形成
3.真核生物的多聚A尾有多种功能[ABCD]
A.稳定RNAB.与RNA穿过核膜有关C.与翻译调控有关
D.与翻译起始时核糖体的结合有关E.保证RNA的活性
4.核糖体的成分包括[AD]
A.蛋白质B.多糖C.DNAD.RNAE.脂肪
5.有美病毒的遗传物质,不对的UJ是LABCEJ
A.蛋白质B.DNAC.?NAD.DNA和RNAE.DNA或RNA
6.细胞膜具有[ABCDE]
A.瞬脂双层构造B.丰富蚩白质C.流动性D.不对祢性E.选择性通透
7.DNA变性波及[ABE]
A.氢键断裂B.分开为两条单链C.DNA骨架分解D.变为单核甘酸E.紫外吸取增长
8.载体应具有[ABCE]
A.能自我夏制B.有识别标志C.尽量小D.特性明确E.有克隆位点
9.Z-DNA的特点有[ABE]
A.呈锯齿状B.嗦吟嗜咤单一交替序列C.螺旋每圈有11个核昔酸
D.天然DNA中不含Z-DNAE.也许与基因调控有关
10.cDNA:[ABDE]
A.不含内含子B.可用mRNA反转录合成C.有割裂基因
D.合成时需要dNTPE.克隆时两端需要加接头
11.Crick最初提出的中心法则包括[ACE]
A.DNA梵制B.RNA复制C.转录D.逆转录E.翻译
12.DNA生物合成中需要如下哪些诲参与[ABCDE]
A.引物合成酶B.解旋前C.解链酶D.DNA连接酶E.DNA聚合幅
13.目的基因的制备措施有[CDE]
A.DNA复制B.RNA转录C.mRNA逆转录D.化学合成法E.限制性内切陶切取
14.真核细胞mRNA的加工修饰包括如下内容[ABDE]
A.切除内含子,连接外显子B.5'端接上“帽子”
C.3'端接上CCAD.3'端添加多聚(A)尾E.碱基甲基化
15.蛋白质生物合成中的终止密码子是[ADE]
A.IAAB.UAUC.U/\CD.UAGE.UGA
16.如下哪些是遗传密码的特性?(BCDE)
A.密码子与宓基酸的数量相似B.密码子并非在任何物种中都通用
C.某些氨基酸由多种密码子编码D.密码子是简并的E.阅读是有方向性的
17.下面哪些碱基对能在双链DNA中发现?(CE)
A.U-AB.G-AC.G-CD.G-TE.T-A
18.滚环复制:(BDE)
A.是细菌中重要的复制机制。B.容许起始复制子的扩增。C.总是生成原初复制子的双链环状拷贝。D.是
细菌噬菌体DNA复制的通用机制。E.在复制子内存在切口的蛋白的基因是自调控的。
19.同功受体是;(CD)
A.多种tRNA可以识别同义的书码子(第二个碱基简并)。B.多种IRNA可与一密码子作用。
C.对应同一氨基酸的多种tRNA。D.可被同一氨酰-tRNA合成酶识别的多种tRNA。
E.识别同一终止密码的多种tRNA,由此导致通读。
20.选出所有对的的论述。(AC)
A.外显子在基因组和cDNA中次序相似。B.内含子一般被翻译。
C.人体中的所有细胞具有相似的一套基因。D.人体中的所有细胞体现着相似的一套基因。
E.人体中的所有细胞均按相似的方式拼接每个基因的mRNAo
五、简答题
1、简述(原核生物)蛋白质生物合成的重要过程。
苔:蛋白质的合成人体分为四个阶段:
<1)氨基酸的活化。在氨酰一tRNA合成酹的催化卜°,级基酸与对应的tR'A结合生成级酰一tRNA。
(2)肽链合成的起始。在起始因子的参与下识别mRNA上的起始信号,并与核糖体亚基和起始氨酰一tRNA组装成70s
的起始复合物。
<3)肽链的延伸。通过进位、转肽和移位三个环节的循环延长肽处。
<4)肽链合成的终止与释放。当碰到终止密码子时,肽链从核糖体上释放出来。然后,tRNA脱落,核糖体解离。
2、简述(双脱氧)末端终止法测定DNA序列的原理。
答:运用双脱氧末端终止法测定DNA序列,首先要合成与其互补的带标识末端的单链DNA。
合成DNA所用的底物是4种2'-脱氧核昔三磷酸,在DNA链中核昔酸以3',5'-磷酸二酯键连接。2',3'ddNTP的核
糖3'位缺乏羟基,因此当ddNTP通过三磷酸基团掺入到延伸的DNA链中时,由于没有3'羟基,不能同后续的dNTP形成磷
酸二酯键,即发生碱基特异性链终止。因此,在4组独立幽反境中分别米用4种小一样的ddNTP,成果将产生4组长皮小一
的、相差一种碱基的冻核甘酸链,它们将分别终止于模板链的A、C、G或T位置。
用聚丙烯酰胺凝胶电泳,使相差一种碱基的单链DNA分离,读出待测模板DNA的核甘酸序列。
3、写出5种参与DNA复制的酶或蛋白质(或蛋白因子)及其作用。
答:(1)DNA聚合酶:当有底物和模板存在时,DNA聚合酶可将脱氧核糖核酸逐•地加上具有3'-0H末端的多核昔酸
链上形成3',5'-磷酸二酯键。
<2)引物的和引起体:引物合成酶也叫引起酶,以DNA为模板合成一段RNA,这段RMA作为合成DNA的引物。引起前
体与引起酶结合组装成引起体,识别起始位点。
(3)DNA连接酶:连接旃催化双链DNA中一条链上的缺口共价连接。缺口上的3,-0H与5,-磷酰基必须相邻。它是
DNA复制、损伤修复和重组中不可缺乏的重要酶类。
(4)DNA解螺旋酶:将DNA的两条链打开。
(5)拓扑异构酒:兼具内切酣和连接的活力,能使DNA超螺旋紧张状态与松驰状态互相转化。
(6)单链结合蛋白:结合在解开的DNA单链上,防止市新形成双螺旋。
4、写出5种体外扩增技术所有聚合酶及其特点。
答:(1)聚合酶锌式反应(PC?)。TaqDNA聚合酶,耐热。特点有特异强:敏捷度高;简便、迅速;对标本的纯度
规定低等。
(2)链替代扩增技术。用DNA聚合幅(如cxo-KIcnow)。特点:①无外切核酸酶活性:②于缺口处后动反应:③可运
用dNTPas;④具有链置换活性。
(3)连接酶链式反应(LCR).Taq连接酶具有特异性,即Taq连接酶与否仅连接与靶序列完全互补的引物。Taq连接
酹的非特异活性是较低的(1%)。、
(4)依赖核酸序列的扩增技术(NASBA)是一项持续、等温、基于幅反应的核酸扩增技术。该技术使用反转录醉、核糖
核酸的H、库黄体T7核糖核限聚合醉三种酶。特点:扩增效率高于PCR,特异性好。
(5)QB复制。Qp复制酶是一种RNA指导的RNA聚合酶。特点:①不需引物就可启动RNA的合成。②能特异地识
别RNA的折叠构造.③在Qp复制酹天然模板的非折叠构造区插入核酸探针不影响该的的复制.
5、简述cDNA文库的概念及其构建过程。
答:某生物基因组经转录和逆转录产牛•的多种cDNA片段分别与克隆载体连接,通过转化(转导)贮存在一种受体菌的
群体中。把这种某生物基因组所有基因cDNA的受体菌群落(一套克隆)称为该生物的cDNA文库。
构建过程:
(1)从生物体或细胞中获取mRNA。提取总RNA,然后进行mRNA的分离与纯化。是构建一种高质量的cDNA文库的关
键。
(2)cDNA第•链的合成。用反转录酶合成cDNA第•链。
(3)cDNA第二链的合成。在)NA聚合酶的作用下,以第一条链为模板,用合适引物合成第二条链。
(4)cDNA与载体构成重组分子,并导入宿主进行扩增。
6、简述原核生物基因组的特点。
答:①基因组较小,为一条环状双链DNA。
②只有一种复制起点,一种基为组就是一种复制子。
③染色质是裸露的DNA,不与组蛋白结合。
④反受序列和不编码序列较少。
⑤功能亲密有关的基因常高度集中。
⑥基因一般是持续的,无内含子。
7、怎样证明DMA是半保留复制?
答:用同位素15N标识大肠杆菌DNA示踪加氯化的密度梯度离心技术试验,证明DNA是半保留复制。
将‘和标识的大肠杆菌转移到含"NH4C1的培养基中培养,取每一代细胞抽提的DNAo
用氯化饱密度悌度离心技术,可使"N-DNA和“N-DNA分离成两个区带,然后用紫外吸取检测分离成果。
把每一代细胞抽提的DNA,进行氯化葩密度梯度离心,成果表明,培养一代之后,DNA只出现一条带,位置在”WD\A
与“N-DNA之间,表明这是"N-DNA/N-DXA杂合分子。培养二代后,DNA出现两条带,一条带为弧-DNA/“N-DNA杂合分子,
另一条带为“N-DNA,两条带等量出现。继续培养,“N-DM分子逐渐增多,15NRNA/“N-DNA杂合分子对应地减少。该试验
证明了DNA的半保留复制。
8、真核生物基因体现调控的方式有哪些?
答:(1)基因体现DNA水平的调控:(2)基因体现转录水平的调控;
(3)转录后水平的调控;(4)翻译水平的调控:
(5)翻译后水平的调控
9、DNA双螺旋构造特点及生物学意义是什么?
答:特点:(1)两条反向平行的多核甘酸链绕同一种“中心轴”形成有规律的双螺旋构造。
<2)碱基位于螺旋的内恻,碱基平面与中心轴垂直;磷酸和脱氧核糖位于螺旋的外侧,糖环平面与中心轴平行。
(3)双螺旋直径为2nm,相用碱基平面间的垂直距离为0.34nm,每10对碱基沿中心轴旋转一周,螺距为3.4nm。
<4)碱基互补配对。即按A—T,G—C配对:A与T之间形成二个氢键,G与C形成三个氢键。
生物学意义:该模型揭示了DNA作为遗传物质的稳定性特性,最有价值的是确认「碱基配对原则,这是DNA复制、转录
和反转录的分子基础,亦是遗传信息传递和体现的分子基础。该模型的提出是本世纪生命科学的重大突破之一,它奠定了生
物化学、分子生物学和分子遗传学乃至整个生命科学飞速发展的基石。
10、简述癌症发出的机制。
科学家们在癌症发生的机理上提出了4种假说:即基因突变说、免疫监视说、细胞反分化说及根据。书态理论的幼稚
细胞分化受阻说。目前比较公认的是基因突变致使细胞反分化说,获得重大进展的便是癌基因的发现。
癌基因首先发现于致癌逆转录病毒,因此又将病毒中的癌基因叫作病毒癌基因,将存在于人及生物正常细胞中的癌基因
称为原癌基因或细胞癌基因。近年来不停有新癌基因发现。据报道,「前发现的人癌基因已达百余个。在正常状况下,虽然
每个人体内都具有相基因,但处在静止或低体现实状况态,不仅对细胞无害,并且对维持细胞正常功能具有市要作用,并不
会使人患癌症。假如外来原因,诸如环境原因(腑食和营养原因、化学致癌物质)、某些病毒、放射线等致癌原因侵入人体,
就会激活细胞中的癌基因,致使正常细胞恶化变成癌细胞。
11、大肠杆菌RNA聚合诲亚基的构成及功能。
答:构成:大肠杆菌RNA聚合所的全酹由五个亚基构成(a2B6'。),即2个。亚基、1个B亚基、1个B'亚基
和1个。亚基。
功能:B'亚基可与DNA模板结合,还与转录的终止有关:B亚基有与\TP单体结合部位,与RNA合成的引起和链延
伸有关:a亚基具有P亚基结合位点,详细功能不详;。亚基有启动子结合部位,参与特定基因转录的起始。
12、简要阐明基因工程的操作环节。
答:(1)目的基因的获取(2)DNA分子的体外币组(3)DNA重组体的导入
(4)受体细胞的筛选(5)基因体现。
13、分子生物学信息数据库里要有哪4大类?
答:①基因组数据库②核酸和蛋白质•级构造序列数据库③生物大分子三维构象数据库
④由以上三种数据库和文献资料为基础构建的二级数据库
14、转座子转座的特性有.哪些方面?
答:①转座不依赖靶序列的同源性②转座后靶序列反第③转座子的插入具有专一性④转座具有排它性⑤转
座具有极性效应(指一种基因上发生的突变可克制操纵子内邻近的非突变基因的体现)⑥活化临近的沉默基因⑦区域
性优先
15、分子生物学的研究内容包括哪些?
答:①基因与基因组的构造与功能②DNA的复制、转录和翻译③基因体现调控的研究④DNA重组技术⑤构
造分子生物学
16、克核生物基因组与原核基因组相比,有何特点?
答:①分子量大。②有多条呈线状的染色体,每条上有多种复制起点。③细胞核DNA与蛋白质稳定结合,形成染色
体的复杂高级构造。④真核细胞被核膜分开,转录在核内,翻译在细胞质内。⑤基因组DMA有大量重度序列。⑥蛋
白质基因一般以单拷贝形式存在,转录产物为单顺反子。⑦存在可以移动的DNA序列⑧绝大数真核基因具有内含了,
基因编码是不持续的。
17、什么是RNA编辑?RNA编辑有什么重要的生物学意义?
RNA的编辑(RNAediting)是变化RNA分子序列的一种转录后修饰现象,包括插入、缺失或核甘酸的替代.
RNA编辑的生物学意义:
①变化和补充遗传信息②增长基因产物的多样性③和生物细胞发育与分化有关,是基因调控的•种模式④也许使
基因产物获得新的构造和功能,有助于生物进化。⑤也许与学习和记忆有关
18.什么是C值或C值矛盾?C值矛盾里要表FI前哪些?(5分)
真核生物单倍体基因组所包括的所有DNA量称为该物种的C值。
C值悖理(C值矛盾)是指真核生物中DNA含量的反常现象.
重要表目前:
①C值不随生物的进化程度和复杂性而增长;②亲缘关系亲密的生物C值相差甚大;③真核生物DNA的量远远不小于
编码蛋白质等物质所需的量。
19.什么是Pribnow框?什么是一35区?它们的保守序列是什么?
在细菌启动子构造中,从起点上游约一10处找到6bp的保守区域.称为pribno常框,或称为一10序列。
对原核生物基因来说,RNA聚合酶的结合位点要向上游延伸很长一段区域,在上游一35区域,有一段保守区域,称为一
35区。
pribnow框的保守序列为TATAATo
-35区的保守序列为TTGACAo
20.mRNA的5'端帽子构造的功能有哪些?
①增长mR\A的稳定性,对mRM的保护作用,使mR\A免受核酸酹仄5'端开始
②使mR\A具有可翻译能力。5'端帽子构造是翻译起始的必要构造,为IFIH(起始因子)和核糖体对mR\A的识别提供
信号,
③运送,有助于mRNA越过核膜,进入胞质;
21.内含子的功能有哪些?
①增进重组②增长基因组的复杂性③具有可读框(0RF)④基因组中内含子与外显子是相对的,有些内含子具有
编码序列,能产生蛋白质或功能RNA。
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