霍乱检测试题及答案2025

霍乱检测试题及答案2025一、单项选择题（每题2分，共30分）1.霍乱弧菌的主要致病血清群是（）A.O22群B.O1群和O139群C.O157群D.O111群2.霍乱弧菌在TCBS培养基上的典型菌落特征是（）A.黑色菌落B.绿色菌落C.黄色菌落D.无色透明菌落3.霍乱快速检测常用的胶体金免疫层析法主要检测的目标物是（）A.霍乱弧菌16SrRNAB.霍乱肠毒素（CT）C.脂多糖（LPS）D.鞭毛抗原4.疑似霍乱患者粪便样本采集后，若不能立即送检，应保存于（）A.生理盐水B.10%甲醛溶液C.CaryBlair运送培养基D.无菌蒸馏水5.实时荧光PCR检测霍乱弧菌时，通常选择的靶基因不包括（）A.ctxA（霍乱肠毒素A亚单位基因）B.ompW（外膜蛋白基因）C.rfbO1（O1群特异性基因）D.invA（侵袭素基因）6.霍乱弧菌的典型形态为（）A.革兰氏阳性球菌B.革兰氏阴性直杆菌C.革兰氏阴性弧形菌D.革兰氏阳性分枝杆菌7.下列哪项不属于霍乱实验室检测的生物安全要求？（）A.在BSL2级实验室操作B.样本处理时佩戴N95口罩C.废弃物经高压蒸汽灭菌后处理D.实验人员无需进行免疫接种8.霍乱弧菌增菌培养常用的培养基是（）A.血琼脂培养基B.碱性蛋白胨水（APW）C.SS琼脂培养基D.麦康凯培养基9.胶体金法检测霍乱的优点不包括（）A.操作简单，1530分钟出结果B.灵敏度可达10⁵CFU/mLC.可区分O1群与O139群D.适合现场快速筛查10.确诊霍乱的金标准是（）A.胶体金免疫层析阳性B.粪便涂片镜检见弧形菌C.分离培养出O1/O139群霍乱弧菌D.血清抗体检测IgG升高11.环境水样中霍乱弧菌检测时，富集培养的关键步骤是（）A.4℃冷藏24小时B.37℃碱性蛋白胨水增菌68小时C.加入抗生素抑制杂菌D.调节pH至5.5酸性环境12.霍乱弧菌的主要致病机制是（）A.侵袭肠黏膜上皮细胞B.产生霍乱肠毒素（CT）导致肠液大量分泌C.释放内毒素引起全身炎症反应D.形成生物膜黏附肠道13.对霍乱患者进行肛拭子采样时，正确的操作是（）A.插入肛门12cm，旋转后立即取出B.插入肛门35cm，接触直肠黏膜后旋转C.用干燥棉拭子直接采样D.采样前需用碘伏消毒肛门周围14.下列哪项不是霍乱快速检测试剂的质量评价指标？（）A.批间重复性B.与培养法的符合率C.对非O1/O139群弧菌的交叉反应D.试剂的包装颜色15.霍乱疫情爆发时，实验室需在多长时间内向疾控部门报告阳性结果？（）A.2小时B.6小时C.12小时D.24小时二、填空题（每空1分，共20分）1.霍乱弧菌属于______科，革兰氏染色呈______性。2.霍乱弧菌的两个主要生物型是______和______（O1群）。3.霍乱患者典型粪便性状为______，镜检可见______运动（用术语描述）。4.霍乱检测中，培养法的流程通常包括______、______、______三个步骤。5.实时荧光PCR检测霍乱时，常用的探针标记技术是______，结果判读的关键参数是______。6.环境水样检测时，需先经______（方法）浓缩，再进行增菌培养；若样本量较大，可使用______（设备）过滤富集。7.霍乱快速检测试剂的性能验证需包括______、______、______（至少3项）。8.实验室检测霍乱弧菌时，生物安全柜的等级应为______级；离心操作需使用______（设备）防止气溶胶泄漏。三、简答题（每题8分，共40分）1.简述霍乱弧菌培养法的操作步骤及各步骤的目的。2.比较胶体金免疫层析法与实时荧光PCR法在霍乱检测中的优缺点。3.试述霍乱患者粪便样本采集的注意事项（包括采样时机、方法、保存与运输）。4.实验室检测到O139群霍乱弧菌时，需额外关注哪些问题？5.请列举3种霍乱实验室检测的质量控制措施，并说明其意义。四、案例分析题（共10分）2025年7月，某沿海城市报告5例急性腹泻病例，主要症状为剧烈水样便（每日10次以上）、无明显腹痛，其中2例出现脱水症状。患者均有食用未煮熟海鲜史。当地疾控中心采集患者粪便样本送实验室检测。问题：（1）实验室应优先选择哪些检测方法？请说明理由。（4分）（2）若培养结果显示TCBS培养基上有黄色菌落，氧化酶试验阳性，涂片镜检为革兰氏阴性弧形菌，下一步应进行哪些鉴定试验？（3分）（3）若最终确认为O1群埃尔托生物型霍乱弧菌，需采取哪些防控措施？（3分）答案一、单项选择题1.B2.C3.B4.C5.D6.C7.D8.B9.C10.C11.B12.B13.B14.D15.A二、填空题1.弧菌；阴2.古典生物型；埃尔托生物型3.米泔水样便；穿梭样（或流星样）4.增菌培养（碱性蛋白胨水）；分离培养（TCBS等选择性培养基）；生化及血清学鉴定5.TaqMan探针；Ct值（循环阈值）6.滤膜过滤法；无菌滤器（或膜滤器）7.灵敏度；特异性；稳定性（或重复性、准确性）8.Ⅱ；密封离心管（或安全离心杯）三、简答题1.培养法操作步骤及目的：（1）增菌培养：将样本接种于碱性蛋白胨水（pH8.48.6），37℃培养68小时。目的是利用霍乱弧菌在碱性环境中生长优势，抑制杂菌，提高阳性检出率。（2）分离培养：取增菌液划线接种于TCBS培养基（硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂），37℃培养1824小时。TCBS含蔗糖，霍乱弧菌分解蔗糖产酸，形成黄色菌落（其他弧菌多为绿色或蓝色），可初步分离目标菌。（3）鉴定：挑取可疑菌落进行氧化酶试验（霍乱弧菌阳性）、生化反应（如发酵葡萄糖产酸不产气、靛基质试验阳性），并用O1群和O139群诊断血清进行玻片凝集试验。目的是确认菌株血清群，完成最终鉴定。2.胶体金法与实时荧光PCR法的比较：胶体金法优点：操作简单（无需仪器）、快速（1530分钟出结果）、适合现场筛查；缺点：灵敏度较低（约10⁵CFU/mL），无法区分生物型，可能出现假阴性（样本中菌量不足时），不能提供菌株用于耐药性分析。实时荧光PCR法优点：灵敏度高（可检测10²10³CFU/mL）、特异性强（通过靶基因区分血清群和生物型）、24小时出结果；缺点：需PCR仪等设备，对实验室条件要求高，无法直接获得活的菌株（需结合培养），可能因抑制物导致假阴性。3.粪便样本采集注意事项：（1）采样时机：发病早期（病程3天内）、未使用抗生素前，此时排菌量最大。（2）采样方法：取新鲜粪便的黏液或脓血部分（无黏液时取510g）；无法自行排便者用肛拭子（插入肛门35cm，旋转接触直肠黏膜）。（3）保存与运输：样本需立即送检；若延迟（≤2小时），可暂存4℃；超过2小时需加入CaryBlair运送培养基（保持弧菌活力）；运输时使用生物安全运输箱（28℃），防止泄漏。4.检测到O139群时的注意事项：（1）O139群是1992年新发现的流行株，可引起与O1群类似的霍乱，需同等重视。（2）需确认是否携带ctxA基因（产毒能力），因部分O139群可能不产毒。（3）O139群与O1群无交叉免疫，人群普遍易感，疫情控制需更严格（如加强疫苗接种评估）。（4）需监测其耐药性（如对四环素、复方新诺明的耐药情况），指导临床治疗。5.质量控制措施及意义：（1）阳性对照：使用已知O1/O139群霍乱弧菌标准菌株，验证检测方法的有效性，避免假阴性。（2）阴性对照：使用无菌生理盐水或非目标菌株（如副溶血性弧菌），排除试剂污染或交叉反应，避免假阳性。（3）室内质控：定期校准仪器（如PCR仪温度）、检查培养基性能（如TCBS的pH和蔗糖含量），确保检测结果的准确性和重复性。（4）人员培训：定期进行操作考核，减少人为误差（如样本混淆、加样错误）。四、案例分析题（1）优先检测方法及理由：①胶体金免疫层析法：操作简单快速，可在现场20分钟内初筛，指导早期防控；②碱性蛋白胨水增菌+TCBS分离培养：培养法是确诊金标准，可获得菌株用于血清型和耐药性分析；③实时荧光PCR：检测ctxA、rfbO1等基因，快速确认是否为产毒O1群，辅助诊断。（2）下一步鉴定试验：①血清凝集试验：用O1群多价诊断血清进行玻片凝集（阳性可确认O1群）；若阴性，需用O139群诊断血清检测；②生物型鉴定：通过溶血试验（埃尔托生物型可溶解羊红细胞）、噬菌体裂解试验等区分古典生物型与埃尔托生物型；③毒力基因检测（如ctxA、tcpA）：确认是否为产毒株（非产毒株不引起霍乱）。（3）防控措施：①患者隔离治疗：使用抗生素（如多西环素）+补液（口服补液盐或静脉输液），