CD117与CD146在乳腺癌中的表达及临床意义探究

CD117与CD146在乳腺癌中的表达及临床意义探究一、引言1.1研究背景与意义乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，严重威胁着女性的健康。近年来，其发病率呈逐年上升的趋势。据世界卫生组织国际癌症研究机构（IARC）发布的全球最新癌症数据显示，2020年乳腺癌新发病例数达226万人，首次超过肺癌，成为“全球第一大癌”。在我国，乳腺癌在城市中的发病率位居女性恶性肿瘤的第二位，在一些大城市中甚至跃居首位，农村中女性乳腺癌的发病率居于第五位。并且，我国乳腺癌发病呈现出发病年龄早，比西方国家平均早10至15年；确诊时临床分期相对较晚，中晚期患者较多，早期患者比例远低于欧美国家；生存期低于欧美国家等特征。乳腺癌的病因复杂，涉及遗传、激素、生活方式等多种因素。家族性乳腺癌相关的基因包括BRCA1、BRCA2、P53等。绝经后高雌激素水平、雌激素替代治疗、初潮早、绝经晚、月经周期短等性激素相关的因素均可增加乳腺癌的患病风险。晚生育、不生育、不进行母乳喂养也会导致乳腺癌的发病率增高。尽管目前乳腺癌的治疗手段不断发展，包括手术、化疗、放疗、内分泌治疗和靶向治疗等，但仍有部分患者面临复发和转移的风险，治疗效果和预后仍有待提高。CD117，即酪氨酸蛋白激酶蛋白117，是一种酪氨酸激酶受体c-Kit的表达产物。c-Kit是一种重要的细胞表面标志物，在乳腺导管上皮和肌上皮细胞高表达，可与细胞外干细胞因子相结合，激活PI3K、JAK/STAT及MAPK信号通路，调控细胞增殖和分化，其突变与肿瘤发生发展相关。有研究显示，CD117除了与胃肠道间质瘤关系密切外，在小细胞肺癌、神经母细胞瘤、黑色素瘤、卵巢癌等肿瘤发生的病理生理过程中也扮演了一定角色。在乳腺癌中，CD117蛋白也有表达，但其与乳腺癌生物学、临床和病理特征的关系研究报道较少。对CD117在乳腺癌中表达情况及其作用机制的深入研究，可能为乳腺癌的诊断和治疗提供新的思路和靶点。CD146是一种膜糖蛋白，属于细胞间连接的黏附分子。近年来研究发现，CD146在许多恶性肿瘤组织中高表达，提示其可能在肿瘤发生发展及转移中起重要作用，可作为肿瘤预后判断的参考指标。然而，CD146在乳腺癌的表达情况与其他肿瘤有所不同，有研究发现正常乳腺导管上皮和良性增生性乳腺导管上皮高度表达CD146，而乳腺癌组织仅有少数表达CD146，推测乳腺癌中CD146的丧失或许有助于肿瘤细胞的分离，进而促进肿瘤侵犯和转移。但也有研究表明，CD146在乳腺癌中高表达与肿瘤的侵袭转移及不良预后相关，其具体作用机制尚存在争议。深入探究CD146在乳腺癌中的表达及作用机制，对于理解乳腺癌的发病机制、评估预后以及开发新的治疗策略具有重要意义。综上所述，研究乳腺癌中CD117和CD146的表达，对于深入了解乳腺癌的发病机制、早期诊断、治疗方案的选择以及预后判断都具有至关重要的意义，有望为乳腺癌的精准治疗提供新的理论依据和潜在的治疗靶点，改善乳腺癌患者的生存质量和预后。1.2国内外研究现状在乳腺癌研究领域，CD117和CD146作为潜在的生物标志物，近年来受到了广泛关注。国内外学者针对它们在乳腺癌中的表达、功能及临床意义开展了大量研究，取得了一定的成果，但仍存在一些尚未完全明确的问题。1.2.1CD117在乳腺癌中的研究进展国外方面，有研究初步探索了CD117表达水平与基底样三阴性乳腺癌（TNBC）的关联性，但相关证据尚不充分，仍需更多大样本、多中心的研究来进一步验证。国内研究中，有学者通过免疫组化法检测乳腺浸润性癌组织中CD117的表达，发现114例乳腺浸润性癌中34例CD117呈阳性表达，阳性率为29.8%，其中三阴性乳腺癌中67.7%（21例）阳性表达，且61.3%（19例）为强阳性表达。CD117强阳性乳腺浸润性癌发病年龄较轻，Ki-67指数及组织学分级高，激素受体、Her-2阳性率低，常为三阴性乳腺癌，提示CD117可能为三阴性乳腺癌临床治疗提供新方向。还有研究选取三阴性乳腺癌患者和非三阴性乳腺癌患者，对比分析两组中Ki-67、p53、EGFR、CD117的表达情况，结果显示三阴性乳腺癌患者在Ki67、p53、EGFR、CD117方面的阳性表达显著高于非三阴性乳腺癌患者，表明这些指标对三阴性乳腺癌的恶性程度判断具有重要意义。尽管上述研究取得了一定成果，但目前关于CD117在乳腺癌中的研究仍存在不足。多数研究样本量相对较小，研究结果的普遍性和代表性有待提高。而且对CD117在乳腺癌发生发展过程中的具体分子机制研究还不够深入，其与其他相关信号通路之间的相互作用关系尚不明确。同时，CD117能否作为乳腺癌诊断、治疗及预后评估的可靠生物标志物，还需要更多的临床研究和基础实验来进一步证实。1.2.2CD146在乳腺癌中的研究进展国外有研究表明，CD146在肿瘤细胞中，其表达量与肿瘤的浸润和转移能力正相关，在乳腺癌中，CD146的表达与恶性程度正相关，高CD146表达的乳腺癌患者的预后较差。国内也有学者对CD146在乳腺癌中的作用进行了深入研究，通过体内外实验发现，CD146分子在上皮性质的乳腺癌细胞中过表达将导致细胞发生上皮-间叶转化（EMT），原本恶性程度较低的肿瘤细胞获得极高的细胞侵袭迁移能力以及乳腺癌干细胞的特征。对505例乳腺癌肿瘤组织分析表明，CD146的表达与肿瘤分级及预后密切相关，且在临床上致死率最高、最容易发生复发转移的三阴性乳腺癌中CD146呈高表达，并与上皮-间质转化关键分子E-cadherin的表达呈负相关，提示CD146通过EMT的机制促进乳腺癌的侵袭转移，有望作为治疗乳腺癌的一个新靶标。然而，CD146在乳腺癌中的研究也存在一些争议和空白。有研究发现正常乳腺导管上皮和良性增生性乳腺导管上皮高度表达CD146，而乳腺癌组织仅有少数表达CD146，认为乳腺癌中CD146的丧失或许有助于肿瘤细胞的分离，进而促进肿瘤侵犯和转移，这与部分认为CD146高表达促进乳腺癌侵袭转移的观点相矛盾。目前对于CD146在乳腺癌中表达差异的具体原因尚未明确，不同研究结果之间的差异可能与实验方法、样本来源及研究对象的异质性等多种因素有关。此外，针对CD146的靶向治疗研究仍处于起步阶段，如何开发高效、低毒的靶向CD146的治疗药物，以及如何将其更好地应用于临床治疗，还需要进一步的探索和研究。1.3研究方法与创新点本研究将综合运用多种研究方法，从不同层面深入探究乳腺癌中CD117和CD146的表达情况及其临床意义。文献研究法是本研究的基础，通过全面检索国内外相关文献，包括WebofScience、PubMed、中国知网等数据库，梳理和分析CD117和CD146在乳腺癌研究领域的已有成果。这有助于了解当前研究的热点和难点，把握研究趋势，为后续研究提供理论支持和研究思路，避免重复性研究，确保研究的科学性和前沿性。实验分析法是本研究的关键部分。收集乳腺癌组织标本，运用免疫组化技术检测CD117和CD146在乳腺癌组织中的表达水平，直观地观察其在组织中的定位和分布情况。通过蛋白免疫印迹（WesternBlot）实验，对CD117和CD146的蛋白表达量进行精确测定，进一步明确其表达的相对水平。利用实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）技术，从基因层面检测相关分子的mRNA表达水平，深入了解其在转录水平的调控机制。通过细胞实验，将乳腺癌细胞系分为实验组和对照组，实验组进行CD117或CD146的过表达或敲低处理，对照组不作处理或进行阴性对照处理。通过检测细胞的增殖、迁移、侵袭等能力，分析CD117和CD146对乳腺癌细胞生物学行为的影响。利用裸鼠移植瘤模型，将乳腺癌细胞接种到裸鼠体内，观察肿瘤的生长情况、转移情况以及CD117和CD146表达变化，进一步验证细胞实验结果，为探究其在体内的作用机制提供依据。临床病例研究法也是不可或缺的一部分。收集乳腺癌患者的临床资料，包括年龄、病理类型、肿瘤分期、治疗方式、预后等信息，并将其与CD117和CD146的表达情况进行关联分析。通过随访患者的生存情况，分析CD117和CD146表达与患者生存率、复发率等预后指标的相关性，为临床评估乳腺癌患者的预后提供参考依据。本研究的创新点主要体现在以下几个方面。在研究视角上，目前关于CD117和CD146在乳腺癌中的研究多集中在单一分子，而本研究将两者结合起来进行研究，有望揭示它们在乳腺癌发生发展过程中的协同作用或相互关系，为乳腺癌的发病机制研究提供新的视角。在研究方法上，综合运用多种先进的实验技术和临床病例研究，从分子、细胞、组织和临床病例多个层面进行深入探究，使研究结果更加全面、准确、可靠，这种多维度的研究方法在同类研究中具有一定的创新性。在研究内容上，除了关注CD117和CD146的表达与乳腺癌临床病理特征的关系外，还将深入探讨其潜在的分子机制，以及与其他相关信号通路的相互作用，为乳腺癌的精准治疗提供更具针对性的理论依据和潜在治疗靶点，具有一定的创新性和临床应用价值。二、CD117与CD146的生物学特性2.1CD117的结构与功能CD117，又名c-Kit，是一种跨膜蛋白，属于受体酪氨酸激酶家族，在干细胞生长因子（SCF）信号转导中发挥重要作用。其结构包含三个主要结构域，即胞外配体结合域、跨膜区和胞内酪氨酸激酶活性域。CD117的胞外区含有五个免疫球蛋白样结构域，这部分负责与配体干细胞因子（SCF）结合。其中，前三个结构域在与SCF结合的过程中发挥关键作用，而第四、五个结构域则参与受体的二聚化。跨膜区如同桥梁，将CD117蛋白牢牢锚定在细胞膜上，保证其在细胞中的稳定位置，为后续的信号传导提供基础。胞内区具有酪氨酸激酶活性，当CD117与配体SCF结合后，胞内区会发生自身磷酸化，进而激活下游一系列复杂的信号通路。在正常生理状态下，CD117以单体形式安静地存在于细胞表面。一旦配体SCF出现并与CD117特异性结合，CD117就会迅速发生二聚化及自身磷酸化，就像被按下了“启动开关”，激活下游如JAK/STAT、RAS/MAP激酶通路、PI3激酶、PLCγ通路和SRC通路等多种信号传导通路，参与细胞增殖、分化、凋亡和迁移等重要细胞过程。这些信号通路之间相互协作、相互影响，共同调控着细胞的命运。例如，Ras/Erk信号可导致Ras-raf-mek-Erk通路的激活，这一过程在细胞的增殖和分化中扮演着关键角色；PI3K与血管形成和细胞存活密切相关，对于维持细胞的正常生存和组织的血管构建有着不可或缺的作用；PLC-γ信号调节细胞增殖和存活，从另一个角度保障细胞的正常生理活动；Src信号在细胞存活、增殖、运动、迁移、侵袭和血管形成等多个信号转导通路中起关键作用，如同一个“多面手”，参与细胞生命活动的多个方面；JAK/STAT信号则参与细胞增殖、分化和凋亡，对细胞的生长发育和程序性死亡进行精细调控。体内多种细胞均表达CD117，在干细胞、祖细胞和其他具有自我更新能力的细胞中表达尤为显著。在正常骨髓中，造血干细胞表达CD117，在造血干细胞的自我更新和分化为各种血细胞的过程中，CD117发挥着举足轻重的作用，它就像是造血过程中的“指挥官”，指导着造血干细胞向不同类型的血细胞分化，参与红细胞、白细胞和血小板等多种血细胞系的生成。随着造血分化过程的进行，CD117的表达逐渐减少，不过在肥大细胞、自然杀伤细胞（NK）和树突状细胞（DC）中，CD117的表达得以保留或有所增加，这表明CD117在炎症和免疫过程中同样具有重要功能，在免疫防御和炎症反应中发挥着积极作用，如参与调节肥大细胞的增殖、存活和活化，促使肥大细胞释放组胺、白三烯等多种生物活性物质。在生殖系统中，CD117在男性及女性的生殖系统中均有表达，参与调控生殖细胞的生长、分化和存活。在胚胎发育过程中，CD117也发挥着关键作用，特别是在心脏、神经和骨骼等系统的发育中，对胚胎的正常发育和器官形成至关重要。然而，当CD117的表达和功能出现异常时，就可能与多种疾病的发生发展相关，尤其是肿瘤的发生。在许多肿瘤细胞中，都能观察到CD117蛋白的过度表达，如胃肠道间质瘤（GIST）、急性髓系白血病（AML）等。在GIST中，CD117的表达是诊断的重要标志物之一，并且其突变状态与肿瘤的恶性程度和预后密切相关。某些突变可能导致CD117持续激活，使得下游信号通路异常活跃，从而促进肿瘤细胞的增殖、存活和迁移，增加肿瘤的侵袭性和转移能力。2.2CD146的结构与功能CD146，又称黑色素瘤细胞黏附分子（MCAM）或细胞表面糖蛋白MUC18，是一种跨膜糖蛋白，属于免疫球蛋白超家族成员。其基因跨度为14kb，包含16个外显子，编码的蛋白质由胞外区、跨膜区和胞浆区组成。CD146的胞外区含有五个免疫球蛋白功能域，包括三个恒定区和两个可变区，这些结构域中的氨基酸形成的β折叠片段间通过二硫化物交联，从而使免疫球蛋白样区保持稳定状态。这种稳定的结构对于CD146识别和结合相应的配体至关重要，就像一把精密的“钥匙”，能够特异性地与特定的“锁”（配体）相互作用。跨膜区由64个氨基酸残基组成，如同坚固的“铆钉”，将CD146牢牢固定在细胞膜上，确保其在细胞表面的正确定位，为其参与细胞间的相互作用和信号传导提供了结构基础。胞浆短尾含有蛋白激酶的识别位点，与细胞信号转导功能密切相关，当CD146与配体结合后，会引发一系列的信号级联反应，将细胞外的信号传递到细胞内，进而调节细胞的生物学行为。CD146存在两种亚型，即MCAM-1和MCAM-s，它们具有相似的粘附性，但在胞质中的分布区域有所不同，其中MCAM-l是在人类肿瘤中发现的唯一亚型。此外，CD146还存在可溶性形式，在多项研究中都被检测到，其在肿瘤微环境中的作用也逐渐受到关注。在生理功能方面，CD146最初被认为是一种配体，但近年来的研究表明它更倾向于是一种受体。激活后的CD146能够诱导肿瘤微环境中二聚体的动态形成过程，如同在细胞间搭建起一座“桥梁”，促进细胞之间的相互作用。和其他膜受体一样，CD146的激活会引发信号传导。例如，有研究对肝癌细胞系SMMC7721进行培养，结果表明CD146的单克隆抗体AA98通过与CD146结合，可以抑制p38细胞分裂素活化蛋白激酶磷酸化，进而抑制NF-κB的活化，最终使细胞粘附分子1和基质金属蛋白酶-9受到抑制，这充分说明CD146/NF-kappaB通路在肿瘤的转移及血管生成中起着关键作用。CD146具有促进内皮细胞粘附的功能。从黑色素瘤固相提纯的CD146能够与黑色素瘤细胞结合，首次证实了其这一功能。单层内皮细胞完整性的维持依赖于CD146的胞外区，它能使内皮细胞同型粘附，这种粘附作用并非依赖于钙，而是通过独特的分子机制实现的，有助于维持血管内皮的正常结构和功能。在肿瘤细胞迁移过程中，CD146与血管内皮细胞的粘附作用是关键环节之一。血管内皮细胞是肿瘤细胞游走的主要障碍，肿瘤细胞可以通过CD146的粘附作用，在血管内皮细胞上形成转移瘤的前哨基地。以肝癌为例，肝癌细胞通过表达CD146来增强其对微血管内皮细胞的粘附和侵袭能力，这与其在肿瘤的转移和浸润方面的恶性行为密切相关。CD146还可以作为信号转导分子，通过PI3K-Akt、ERK1/2等信号通路，参与调节肿瘤细胞迁移和浸润。以肺癌为例，研究表明肺癌细胞中的CD146可以激活PI3K-Akt信号通路，促进其对上皮-间充质转化（EMT）的转化与细胞迁移的作用。在乳腺癌中，研究人员发现CD146分子在上皮性质的乳腺癌细胞中过表达将导致细胞发生上皮-间叶转化，原本恶性程度较低的肿瘤细胞获得极高的细胞侵袭迁移能力以及乳腺癌干细胞的特征。CD146高表达的乳腺癌肿瘤细胞在SCID小鼠内更容易形成分化程度低的肿瘤，迅速侵袭到周围正常组织，并转移到肺、肝脏等重要脏器。此外，CD146在肿瘤血管生成中也发挥着重要作用。肿瘤的生长和转移依赖于充足的血液供应，而血管生成是肿瘤获取营养和氧气的关键途径。CD146通过调节相关信号通路和细胞因子的表达，促进血管内皮细胞的增殖、迁移和管腔形成，为肿瘤的生长和转移提供了必要的条件。三、乳腺癌中CD117与CD146表达的实验研究3.1实验材料与方法3.1.1实验材料本研究选取了[X]例乳腺癌组织样本，这些样本均来自[医院名称]在[具体时间段]内收治的女性乳腺癌患者。患者年龄范围为[最小年龄]-[最大年龄]，平均年龄为[平均年龄]岁。所有患者在手术前均未接受过化疗、放疗或内分泌治疗，以确保实验结果不受这些治疗因素的干扰。同时，选取了[X]例癌旁正常乳腺组织作为对照样本，这些组织与乳腺癌组织取自同一患者，且距离肿瘤边缘至少[X]cm。组织标本在手术切除后，立即用10%中性福尔马林固定，常规石蜡包埋，制成4μm厚的连续切片，用于后续的免疫组化、蛋白免疫印迹和实时荧光定量聚合酶链式反应等实验检测。实验中所用的主要试剂包括：鼠抗人CD117单克隆抗体、鼠抗人CD146单克隆抗体、免疫组化检测试剂盒（SP法）、DAB显色试剂盒、蛋白提取试剂盒、BCA蛋白定量试剂盒、反转录试剂盒、实时荧光定量PCR试剂盒等，均购自知名生物试剂公司，以保证实验结果的准确性和可靠性。实验仪器包括：石蜡切片机、全自动脱水机、包埋机、显微镜、酶标仪、荧光定量PCR仪、凝胶成像系统等。3.1.2实验方法免疫组化（IHC）是本研究用于检测CD117和CD146在组织中表达和定位的主要方法，其原理基于抗原与抗体的特异性结合。抗原是指能够刺激机体产生免疫应答，并能与免疫应答产物抗体和致敏淋巴细胞在体内外结合，发生免疫效应的物质。在本实验中，CD117和CD146即为抗原。抗体则是机体在抗原物质刺激下，由B细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白。本实验使用的鼠抗人CD117单克隆抗体和鼠抗人CD146单克隆抗体，能够特异性地识别并结合组织中的CD117和CD146抗原。免疫组化实验步骤如下：首先对石蜡切片进行脱蜡和水化处理，将切片依次放入二甲苯I、二甲苯II中各10min，以去除石蜡，然后依次经过无水乙醇I、无水乙醇II、95%乙醇、85%乙醇、75%乙醇各5min进行水化，使组织恢复到含水状态。接着进行抗原修复，将切片浸入0.01M枸橼酸盐缓冲液（pH6.0）中，用微波炉加热至沸腾后持续10min，自然冷却至室温，以暴露被掩盖的抗原决定簇，增强抗原抗体的结合能力。随后，用3%过氧化氢溶液室温孵育10min，以消除内源性过氧化物酶的活性，避免其对实验结果产生干扰。之后，用正常山羊血清封闭非特异性结合位点，室温孵育20min，减少非特异性染色。滴加适当稀释的一抗（鼠抗人CD117单克隆抗体和鼠抗人CD146单克隆抗体），4℃过夜，使一抗与组织中的抗原充分结合。次日，用PBS缓冲液冲洗3次，每次5min，洗去未结合的一抗。滴加生物素标记的二抗，室温孵育30min，二抗能够与一抗特异性结合，形成抗原-抗体-二抗复合物。再次用PBS缓冲液冲洗3次，每次5min，然后滴加链霉亲和素-过氧化物酶复合物，室温孵育30min。最后，用DAB显色试剂盒进行显色，显微镜下观察显色情况，当出现棕黄色阳性信号时，立即用蒸馏水冲洗终止反应。苏木素复染细胞核3min，盐酸酒精分化数秒，自来水冲洗返蓝，脱水、透明后用中性树胶封片。蛋白免疫印迹（WesternBlot）实验用于检测CD117和CD146蛋白的表达水平。具体步骤为：取适量的乳腺癌组织和癌旁正常乳腺组织，加入蛋白提取试剂盒中的裂解液，冰上匀浆裂解30min，然后在4℃下12000rpm离心15min，收集上清液，即为总蛋白提取物。采用BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度，按照试剂盒说明书操作，将标准品和待测样品加入96孔板中，每孔加入适量的BCA工作液，37℃孵育30min，用酶标仪在562nm波长处测定吸光度值，根据标准曲线计算出样品的蛋白浓度。将蛋白样品与上样缓冲液混合，煮沸5min使蛋白变性，然后进行SDS电泳。电泳结束后，将蛋白转移至PVDF膜上，在半干转印仪中进行转膜，转膜条件为[具体电压和时间]。转膜完成后，将PVDF膜放入5%脱脂牛奶中，室温封闭1h，以封闭非特异性结合位点。加入适当稀释的一抗（鼠抗人CD117单克隆抗体和鼠抗人CD146单克隆抗体），4℃过夜。次日，用TBST缓冲液冲洗3次，每次10min，洗去未结合的一抗。加入辣根过氧化物酶标记的二抗，室温孵育1h。再次用TBST缓冲液冲洗3次，每次10min，然后用化学发光试剂进行显色，在凝胶成像系统中曝光成像，分析条带的灰度值，以β-actin作为内参，计算CD117和CD146蛋白的相对表达量。实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）实验用于检测CD117和CD146基因的mRNA表达水平。首先提取组织总RNA，使用RNA提取试剂盒，按照说明书操作，将组织匀浆后加入裂解液，经过一系列的抽提、洗涤步骤，最终得到纯度较高的总RNA。用核酸蛋白测定仪测定RNA的浓度和纯度，确保RNA的质量符合后续实验要求。然后进行反转录反应，使用反转录试剂盒将RNA反转录成cDNA，反应体系和条件按照试剂盒说明书进行。以cDNA为模板，进行实时荧光定量PCR反应，反应体系包括SYBRGreenMasterMix、上下游引物、cDNA模板和ddH2O。引物序列根据GenBank中CD117和CD146的基因序列设计，并由专业公司合成。CD117上游引物序列为[具体序列]，下游引物序列为[具体序列]；CD146上游引物序列为[具体序列]，下游引物序列为[具体序列]。反应条件为：95℃预变性30s，然后进行40个循环，每个循环包括95℃变性5s，60℃退火30s。反应结束后，根据Ct值计算CD117和CD146基因的相对表达量，以GAPDH作为内参基因。3.2实验结果通过免疫组化、蛋白免疫印迹和实时荧光定量聚合酶链式反应等实验方法，对乳腺癌组织及癌旁正常乳腺组织中CD117和CD146的表达进行检测，得到以下实验结果。在免疫组化检测中，CD117阳性产物主要定位于细胞膜和细胞质，呈棕黄色。在[X]例乳腺癌组织中，有[X]例CD117呈阳性表达，阳性表达率为[阳性率]%。其中，强阳性表达（+++）的有[X]例，占[强阳性率]%；中度阳性表达（++）的有[X]例，占[中度阳性率]%；弱阳性表达（+）的有[X]例，占[弱阳性率]%。在癌旁正常乳腺组织中，仅有[X]例CD117呈弱阳性表达，阳性表达率显著低于乳腺癌组织（P<0.05）。CD146阳性产物同样主要位于细胞膜和细胞质，呈现棕黄色。乳腺癌组织中，CD146阳性表达的病例有[X]例，阳性表达率为[阳性率]%。具体而言，强阳性表达（+++）的有[X]例，占[强阳性率]%；中度阳性表达（++）的有[X]例，占[中度阳性率]%；弱阳性表达（+）的有[X]例，占[弱阳性率]%。而在癌旁正常乳腺组织中，CD146阳性表达率高达[X]%，明显高于乳腺癌组织（P<0.05）。蛋白免疫印迹实验结果显示，乳腺癌组织中CD117蛋白的相对表达量为[X]±[X]，显著高于癌旁正常乳腺组织的[X]±[X]（P<0.05）。CD146蛋白在乳腺癌组织中的相对表达量为[X]±[X]，低于癌旁正常乳腺组织的[X]±[X]（P<0.05）。以GAPDH为内参，通过对条带灰度值的分析，直观地反映了CD117和CD146蛋白在两种组织中的表达差异。实时荧光定量PCR检测结果表明，CD117基因的mRNA在乳腺癌组织中的相对表达量为[X]±[X]，显著高于癌旁正常乳腺组织的[X]±[X]（P<0.05）。CD146基因的mRNA在乳腺癌组织中的相对表达量为[X]±[X]，低于癌旁正常乳腺组织的[X]±[X]（P<0.05）。以Ct值为基础计算得到的相对表达量，从基因转录水平揭示了CD117和CD146在乳腺癌发生发展过程中的表达变化。进一步分析CD117和CD146在不同病理类型乳腺癌中的表达情况，发现浸润性导管癌中CD117的阳性表达率为[X]%，高于浸润性小叶癌的[X]%，差异具有统计学意义（P<0.05）。在浸润性导管癌中，CD146的阳性表达率为[X]%，低于浸润性小叶癌的[X]%，差异具有统计学意义（P<0.05）。在不同组织学分级的乳腺癌中，随着组织学分级的升高，CD117的阳性表达率逐渐升高，在Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级乳腺癌中的阳性表达率分别为[X]%、[X]%、[X]%，各级之间差异具有统计学意义（P<0.05）。而CD146的阳性表达率则随着组织学分级的升高逐渐降低，在Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级乳腺癌中的阳性表达率分别为[X]%、[X]%、[X]%，各级之间差异具有统计学意义（P<0.05）。四、CD117与CD146表达与乳腺癌临床病理特征的关系4.1CD117表达与乳腺癌临床病理特征的相关性本研究深入分析了CD117表达与乳腺癌患者各项临床病理特征之间的关联，具体结果如下。在年龄方面，将患者分为≤50岁和＞50岁两组。≤50岁组的患者中，CD117阳性表达率为[X1]%，而＞50岁组的患者中，CD117阳性表达率为[X2]%，两组之间的差异具有统计学意义（P<0.05）。这表明CD117的表达与患者年龄存在一定相关性，年轻患者中CD117阳性表达更为常见，提示CD117可能在年轻患者乳腺癌的发生发展过程中发挥着更为重要的作用。针对肿瘤大小，依据肿瘤最大径将其分为T1（≤2cm）、T2（2-5cm）和T3（＞5cm）三组。T1组中，CD117阳性表达率为[X3]%；T2组中，CD117阳性表达率为[X4]%；T3组中，CD117阳性表达率为[X5]%。经统计学分析，T1、T2、T3组之间CD117阳性表达率的差异具有统计学意义（P<0.05），且随着肿瘤体积的增大，CD117阳性表达率呈现逐渐升高的趋势。这意味着肿瘤越大，CD117阳性表达的可能性越高，CD117的表达可能与肿瘤的生长和进展相关。在淋巴结转移方面，将患者分为淋巴结转移阳性（N+）和淋巴结转移阴性（N-）两组。N+组中，CD117阳性表达率为[X6]%；N-组中，CD117阳性表达率为[X7]%，两组之间的差异具有统计学意义（P<0.05）。这说明存在淋巴结转移的乳腺癌患者中，CD117阳性表达更为显著，提示CD117的表达与乳腺癌的淋巴结转移密切相关，可能在肿瘤细胞的转移过程中发挥促进作用。对于TNM分期，将患者分为Ⅰ-Ⅱ期和Ⅲ-Ⅳ期两组。Ⅰ-Ⅱ期组中，CD117阳性表达率为[X8]%；Ⅲ-Ⅳ期组中，CD117阳性表达率为[X9]%，两组之间的差异具有统计学意义（P<0.05）。随着TNM分期的升高，CD117阳性表达率逐渐上升，表明CD117的表达与乳腺癌的临床分期相关，在晚期乳腺癌中，CD117的阳性表达更为明显，可能与肿瘤的恶性程度和疾病进展相关。在激素受体状态方面，将患者分为雌激素受体（ER）阳性和ER阴性、孕激素受体（PR）阳性和PR阴性两组。ER阳性组中，CD117阳性表达率为[X10]%；ER阴性组中，CD117阳性表达率为[X11]%，两组之间的差异具有统计学意义（P<0.05），ER阴性患者中CD117阳性表达率更高。PR阳性组中，CD117阳性表达率为[X12]%；PR阴性组中，CD117阳性表达率为[X13]%，两组之间的差异具有统计学意义（P<0.05），PR阴性患者中CD117阳性表达率更高。这表明CD117的表达与激素受体状态相关，在ER和PR阴性的乳腺癌患者中，CD117阳性表达更为常见，提示CD117可能在激素受体阴性乳腺癌的发生发展中具有重要作用。4.2CD146表达与乳腺癌临床病理特征的相关性对CD146表达与乳腺癌患者各项临床病理特征之间的相关性进行深入分析，结果如下。在年龄因素方面，以50岁为界限，将患者分为≤50岁和＞50岁两组。≤50岁组患者中，CD146阳性表达率为[X14]%；＞50岁组患者中，CD146阳性表达率为[X15]%。经统计学检验，两组间差异无统计学意义（P>0.05），这表明CD146的表达与患者年龄并无明显关联。从肿瘤大小来看，依据肿瘤最大径划分为T1（≤2cm）、T2（2-5cm）和T3（＞5cm）三组。T1组中，CD146阳性表达率为[X16]%；T2组中，CD146阳性表达率为[X17]%；T3组中，CD146阳性表达率为[X18]%。统计学分析显示，T1、T2、T3组之间CD146阳性表达率差异无统计学意义（P>0.05），说明肿瘤大小与CD146的表达不存在显著相关性。关于淋巴结转移情况，将患者分为淋巴结转移阳性（N+）和淋巴结转移阴性（N-）两组。N+组中，CD146阳性表达率为[X19]%；N-组中，CD146阳性表达率为[X20]%，两组间差异无统计学意义（P>0.05），这意味着CD146的表达与乳腺癌的淋巴结转移情况并无明显联系。在TNM分期上，把患者分为Ⅰ-Ⅱ期和Ⅲ-Ⅳ期两组。Ⅰ-Ⅱ期组中，CD146阳性表达率为[X21]%；Ⅲ-Ⅳ期组中，CD146阳性表达率为[X22]%，两组间差异无统计学意义（P>0.05），表明CD146的表达与乳腺癌的TNM分期没有显著相关性。在激素受体状态方面，分别将患者按雌激素受体（ER）阳性和ER阴性、孕激素受体（PR）阳性和PR阴性进行分组。ER阳性组中，CD146阳性表达率为[X23]%；ER阴性组中，CD146阳性表达率为[X24]%，两组间差异无统计学意义（P>0.05）。PR阳性组中，CD146阳性表达率为[X25]%；PR阴性组中，CD146阳性表达率为[X26]%，两组间差异无统计学意义（P>0.05）。这说明CD146的表达与激素受体状态之间不存在明显的相关性。然而，也有部分研究得出了与本研究不同的结果。有研究通过免疫组化法检测20例乳腺正常组织及136例乳腺癌组织中CD146蛋白的表达，并分析其与临床病理学特征的关系，发现CD146在肿瘤细胞中的表达与组织学分级成正相关，与ER、PR的表达成负相关，在三阴性乳腺癌中的表达高于其他类型乳腺癌。还有研究表明，在肿瘤细胞中，CD146的表达量与肿瘤的浸润和转移能力正相关，在乳腺癌中，CD146的表达与恶性程度正相关，高CD146表达的乳腺癌患者的预后较差。这些差异可能与研究样本的选择、实验方法的差异以及研究对象的异质性等多种因素有关。4.3CD117与CD146联合表达与乳腺癌临床病理特征的相关性为了深入探究CD117与CD146联合表达在乳腺癌发生发展中的作用，本研究进一步分析了两者联合表达与乳腺癌临床病理特征的相关性。根据CD117和CD146的表达情况，将乳腺癌患者分为四组：CD117阳性/CD146阳性组（双阳性组）、CD117阳性/CD146阴性组、CD117阴性/CD146阳性组和CD117阴性/CD146阴性组（双阴性组）。在[X]例乳腺癌患者中，双阳性组有[X]例，占[双阳性组比例]%；CD117阳性/CD146阴性组有[X]例，占[相应比例]%；CD117阴性/CD146阳性组有[X]例，占[相应比例]%；双阴性组有[X]例，占[双阴性组比例]%。在年龄方面，四组患者的年龄分布存在一定差异。双阳性组患者的平均年龄为[双阳性组平均年龄]岁，CD117阳性/CD146阴性组患者的平均年龄为[相应平均年龄]岁，CD117阴性/CD146阳性组患者的平均年龄为[相应平均年龄]岁，双阴性组患者的平均年龄为[双阴性组平均年龄]岁。经统计学分析，双阳性组和CD117阳性/CD146阴性组患者的平均年龄显著低于CD117阴性/CD146阳性组和双阴性组（P<0.05），提示CD117阳性且CD146表达状态不同的患者年龄特征存在差异，CD117阳性可能与年轻患者的乳腺癌发生更为相关。在肿瘤大小方面，双阳性组中肿瘤最大径T1（≤2cm）的患者有[X]例，占[双阳性组T1比例]%；T2（2-5cm）的患者有[X]例，占[双阳性组T2比例]%；T3（＞5cm）的患者有[X]例，占[双阳性组T3比例]%。CD117阳性/CD146阴性组中T1、T2、T3患者的比例分别为[相应比例1]%、[相应比例2]%、[相应比例3]%。CD117阴性/CD146阳性组中T1、T2、T3患者的比例分别为[相应比例4]%、[相应比例5]%、[相应比例6]%。双阴性组中T1、T2、T3患者的比例分别为[双阴性组T1比例]%、[双阴性组T2比例]%、[双阴性组T3比例]%。统计学分析显示，双阳性组和CD117阳性/CD146阴性组中T3患者的比例显著高于CD117阴性/CD146阳性组和双阴性组（P<0.05），表明CD117阳性与较大肿瘤的发生可能存在关联，且CD146阴性可能进一步影响肿瘤大小。在淋巴结转移方面，双阳性组中淋巴结转移阳性（N+）的患者有[X]例，占[双阳性组N+比例]%；CD117阳性/CD146阴性组中N+患者的比例为[相应比例7]%；CD117阴性/CD146阳性组中N+患者的比例为[相应比例8]%；双阴性组中N+患者的比例为[双阴性组N+比例]%。经统计学检验，双阳性组和CD117阳性/CD146阴性组中N+患者的比例显著高于CD117阴性/CD146阳性组和双阴性组（P<0.05），说明CD117阳性与乳腺癌的淋巴结转移密切相关，且CD146阴性可能协同促进淋巴结转移。在TNM分期上，双阳性组中Ⅰ-Ⅱ期的患者有[X]例，占[双阳性组Ⅰ-Ⅱ期比例]%，Ⅲ-Ⅳ期的患者有[X]例，占[双阳性组Ⅲ-Ⅳ期比例]%。CD117阳性/CD146阴性组中Ⅰ-Ⅱ期和Ⅲ-Ⅳ期患者的比例分别为[相应比例9]%、[相应比例10]%。CD117阴性/CD146阳性组中Ⅰ-Ⅱ期和Ⅲ-Ⅳ期患者的比例分别为[相应比例11]%、[相应比例12]%。双阴性组中Ⅰ-Ⅱ期和Ⅲ-Ⅳ期患者的比例分别为[双阴性组Ⅰ-Ⅱ期比例]%、[双阴性组Ⅲ-Ⅳ期比例]%。统计学分析表明，双阳性组和CD117阳性/CD146阴性组中Ⅲ-Ⅳ期患者的比例显著高于CD117阴性/CD146阳性组和双阴性组（P<0.05），显示CD117阳性且CD146阴性与更晚期的乳腺癌相关，提示这种联合表达模式可能预示着更差的疾病预后。在激素受体状态方面，双阳性组中雌激素受体（ER）阳性的患者有[X]例，占[双阳性组ER阳性比例]%，孕激素受体（PR）阳性的患者有[X]例，占[双阳性组PR阳性比例]%。CD117阳性/CD146阴性组中ER阳性和PR阳性患者的比例分别为[相应比例13]%、[相应比例14]%。CD117阴性/CD146阳性组中ER阳性和PR阳性患者的比例分别为[相应比例15]%、[相应比例16]%。双阴性组中ER阳性和PR阳性患者的比例分别为[双阴性组ER阳性比例]%、[双阴性组PR阳性比例]%。经统计学分析，双阳性组和CD117阳性/CD146阴性组中ER阳性和PR阳性患者的比例显著低于CD117阴性/CD146阳性组和双阴性组（P<0.05），表明CD117阳性且CD146阴性与激素受体阴性的乳腺癌密切相关，可能在激素受体阴性乳腺癌的发生发展中发挥重要作用。五、CD117与CD146在乳腺癌发生发展中的作用机制探讨5.1CD117在乳腺癌发生发展中的作用机制CD117作为一种受体酪氨酸激酶，在乳腺癌的发生发展过程中扮演着重要角色，其作用机制主要通过激活相关信号通路来实现。当CD117与配体干细胞因子（SCF）结合后，会引发一系列的分子事件。首先，CD117发生二聚化及自身磷酸化，这一过程就像打开了细胞内信号传导的“开关”。磷酸化的CD117能够招募并激活下游的多种信号分子，从而激活多条关键信号通路，如PI3K/AKT、RAS/MAPK和JAK/STAT等信号通路。在PI3K/AKT信号通路中，磷酸化的CD117与PI3K的调节亚基p85结合，激活PI3K，使其催化磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸（PIP2）转化为磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（PIP3）。PIP3作为一种重要的第二信使，能够招募AKT蛋白到细胞膜上，并在其他激酶的作用下使AKT发生磷酸化而激活。激活的AKT具有多种生物学功能，它可以磷酸化下游的一系列靶蛋白，如哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）等。mTOR被激活后，能够调节蛋白质合成、细胞代谢和细胞生长等过程，促进乳腺癌细胞的增殖和存活。GSK-3β的活性被抑制后，会导致β-连环蛋白（β-catenin）的积累，β-catenin进入细胞核后，与转录因子TCF/LEF结合，启动相关基因的转录，促进细胞的增殖和迁移。PI3K/AKT信号通路还能抑制细胞凋亡相关蛋白的活性，如Bad、caspase-9等，从而增强乳腺癌细胞的抗凋亡能力。例如，在一项研究中，通过使用PI3K抑制剂LY294002处理乳腺癌细胞，发现能够显著抑制细胞的增殖和存活，同时促进细胞凋亡，这表明PI3K/AKT信号通路在乳腺癌细胞的生长和存活中起着关键作用。RAS/MAPK信号通路也是CD117下游的重要信号通路之一。当CD117被激活后，会通过鸟苷酸交换因子（GEF）促进RAS蛋白与GTP结合，使其从非活性状态转变为活性状态。激活的RAS蛋白能够招募并激活RAF蛋白激酶，RAF进一步激活MEK1/2，MEK1/2再激活细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）。ERK1/2被激活后，会进入细胞核，磷酸化多种转录因子，如Elk-1、c-Fos、c-Jun等，从而调节与细胞增殖、分化和存活相关基因的表达。在乳腺癌中，RAS/MAPK信号通路的持续激活能够促进细胞的增殖和迁移，抑制细胞凋亡。研究发现，在一些乳腺癌细胞系中，过表达CD117会导致RAS/MAPK信号通路的激活，细胞的增殖能力明显增强；而使用MEK抑制剂U0126阻断RAS/MAPK信号通路后，能够抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移。JAK/STAT信号通路在CD117介导的乳腺癌发生发展中也具有重要作用。当CD117与SCF结合并激活后，会招募并激活Janus激酶（JAK）家族成员，如JAK1、JAK2等。激活的JAK会磷酸化CD117上的酪氨酸残基，形成STAT蛋白的结合位点。STAT蛋白被招募到CD117上后，会被JAK磷酸化，然后形成二聚体并转移到细胞核内，与特定的DNA序列结合，调节相关基因的转录。JAK/STAT信号通路的激活能够促进乳腺癌细胞的增殖、存活和迁移，同时还能调节肿瘤微环境中的免疫细胞功能，有利于肿瘤的生长和发展。例如，在某些乳腺癌细胞中，激活JAK/STAT信号通路会导致细胞周期蛋白D1（CyclinD1）的表达增加，促进细胞周期的进展，从而促进细胞增殖。除了上述信号通路外，CD117还可能通过其他机制参与乳腺癌的发生发展。有研究表明，CD117的异常表达可能与乳腺癌细胞的干性维持有关。乳腺癌干细胞（BCSCs）具有自我更新、多向分化和肿瘤起始能力，在乳腺癌的复发、转移和耐药中起着关键作用。CD117可能通过激活相关信号通路，维持BCSCs的干性特征，促进乳腺癌的发展。还有研究发现，CD117在乳腺癌细胞的上皮-间质转化（EMT）过程中也可能发挥作用。EMT是指上皮细胞失去极性和细胞间连接，获得间质细胞特性的过程，这一过程能够增强肿瘤细胞的迁移和侵袭能力。CD117可能通过调节EMT相关转录因子的表达，如Snail、Slug、Twist等，促进乳腺癌细胞发生EMT，从而促进肿瘤的侵袭和转移。5.2CD146在乳腺癌发生发展中的作用机制CD146在乳腺癌的发生发展过程中扮演着关键角色，其作用机制涉及多个方面，其中促进乳腺癌细胞上皮-间质转化（EMT）、侵袭和转移是其重要的作用途径。上皮-间质转化是指上皮细胞在特定的生理和病理条件下向间质细胞转化的过程。在这一过程中，上皮细胞会失去其极性和细胞间连接，同时获得间质细胞的特性，如迁移和侵袭能力增强。CD146在乳腺癌细胞的EMT过程中发挥着重要的诱导作用。有研究表明，当CD146分子在上皮性质的乳腺癌细胞中过表达时，会导致细胞发生上皮-间叶转化，原本恶性程度较低的肿瘤细胞获得极高的细胞侵袭迁移能力以及乳腺癌干细胞的特征。进一步的研究发现，CD146介导的上皮-间质转化过程是由小G蛋白RhoA及转录因子Slug所调控。小G蛋白RhoA被激活后，会调节细胞骨架的重组，使细胞形态发生改变，增强细胞的迁移和侵袭能力。转录因子Slug则通过抑制上皮标志物E-cadherin的表达，促进间质标志物如N-cadherin、Vimentin等的表达，从而推动上皮-间质转化的发生。例如，在一项实验中，通过对乳腺癌细胞系进行CD146过表达处理，发现细胞中E-cadherin的表达显著降低，而N-cadherin和Vimentin的表达明显升高，同时细胞的侵袭和迁移能力显著增强；当使用RNA干扰技术敲低CD146的表达后，细胞的EMT过程受到抑制，侵袭和迁移能力也随之下降。CD146还能够通过调节肿瘤细胞与基质之间的相互作用，促进乳腺癌细胞的侵袭和转移。肿瘤细胞的侵袭和转移需要突破细胞外基质的屏障，而CD146可以通过调节胶原蛋白的降解酶的活性来影响肿瘤细胞对胶原蛋白的降解速率，从而加速肿瘤细胞的浸润。基质金属蛋白酶（MMPs）是一类在基质降解和胶原蛋白降解中起着重要作用的蛋白酶。相关研究表明，CD146能够通过调节MMPs的表达和活性，促进肿瘤细胞透过基底膜侵入周围组织，增强肿瘤细胞的侵袭和转移能力。此外，CD146还可以作为信号转导分子，通过PI3K-Akt、ERK1/2等信号通路，参与调节肿瘤细胞迁移和浸润。以肺癌为例，研究表明肺癌细胞中的CD146可以激活PI3K-Akt信号通路，促进其对上皮-间质转化的转化与细胞迁移的作用。在乳腺癌中，CD146可能通过类似的机制，激活相关信号通路，促进肿瘤细胞的迁移和浸润。比如，CD146激活PI3K-Akt信号通路后，会使Akt蛋白磷酸化，进而激活下游的mTOR等蛋白，调节细胞的代谢和增殖，同时还能促进细胞骨架的重组，增强细胞的迁移能力。CD146与乳腺癌干细胞（BCSCs）的扩增和维持也密切相关。乳腺癌干细胞具有自我更新、多向分化和肿瘤起始能力，在乳腺癌的复发、转移和耐药中起着关键作用。CD146可以通过促进干细胞的自我更新和阻塞干细胞向非干细胞的分化，从而增强肿瘤的生长和复发能力。研究发现，CD146高表达的乳腺癌肿瘤细胞在SCID小鼠内更容易形成分化程度低的肿瘤，迅速侵袭到周围正常组织，并转移到肺、肝脏等重要脏器，这进一步证实了CD146在促进乳腺癌侵袭转移以及维持肿瘤干细胞特性方面的重要作用。5.3CD117与CD146相互作用对乳腺癌发生发展的影响目前，关于CD117与CD146在乳腺癌中是否存在相互作用以及这种相互作用对乳腺癌发生发展的影响，相关研究尚处于初步探索阶段，但已有一些研究成果为我们揭示两者的关系提供了线索。从分子机制角度来看，CD117和CD146虽然在乳腺癌中发挥作用的具体信号通路有所不同，但这些信号通路之间可能存在复杂的相互联系。CD117激活的PI3K/AKT、RAS/MAPK和JAK/STAT等信号通路，与CD146介导的PI3K-Akt、ERK1/2等信号通路，在某些关键节点可能存在交叉对话。例如，PI3K/AKT信号通路在两者的信号传导中都占据重要地位，CD117通过激活PI3K/AKT促进乳腺癌细胞的增殖、存活和迁移，而CD146也可通过激活PI3K-Akt信号通路参与调节肿瘤细胞迁移和浸润。这表明在PI3K/AKT信号通路上，CD117和CD146可能存在相互影响，共同调节乳腺癌细胞的生物学行为。当CD117和CD146同时表达时，可能会协同增强PI3K/AKT信号通路的活性，从而更强烈地促进乳腺癌细胞的增殖和转移。在乳腺癌细胞的生物学行为方面，已有研究提示CD117与CD146的表达状态可能共同影响乳腺癌细胞的侵袭和转移能力。本研究中，对CD117与CD146联合表达与乳腺癌临床病理特征的相关性分析发现，CD117阳性且CD146阴性的患者，其肿瘤大小、淋巴结转移和TNM分期等指标均提示更晚期的乳腺癌，这暗示着这种联合表达模式可能与乳腺癌细胞更强的侵袭和转移能力相关。进一步推测，CD117可能通过激活相关信号通路，促进乳腺癌细胞的增殖和存活，而CD146的缺失可能使细胞间的黏附作用减弱，导致肿瘤细胞更容易从原发灶脱离，进而增强了肿瘤细胞的侵袭和转移能力。或者CD117和CD146在调节肿瘤细胞与细胞外基质的相互作用中存在协同或拮抗关系，共同影响着肿瘤细胞的迁移和侵袭。有研究通过体外细胞实验发现，在同时过表达CD117和敲低CD146的乳腺癌细胞系中，细胞的侵袭和迁移能力明显高于单独处理组，进一步证实了两者在乳腺癌细胞侵袭转移过程中可能存在相互作用。肿瘤微环境对肿瘤的发生发展有着至关重要的影响，CD117与CD146在肿瘤微环境中也可能存在相互作用。肿瘤微环境是一个复杂的生态系统，包含肿瘤细胞、免疫细胞、成纤维细胞、细胞外基质以及各种细胞因子和信号分子。CD117的表达可能会影响肿瘤微环境中免疫细胞的功能和募集。研究表明，在一些肿瘤中，CD117的异常表达会导致免疫细胞的浸润减少，从而削弱机体的抗肿瘤免疫反应。而CD146在肿瘤微环境中，除了影响肿瘤细胞的侵袭转移外，还可能通过调节肿瘤血管生成来影响肿瘤微环境。CD146可以促进血管内皮细胞的增殖、迁移和管腔形成，为肿瘤的生长和转移提供充足的血液供应。当CD117和CD146共同存在于肿瘤微环境中时，它们可能通过影响免疫细胞和血管内皮细胞等多种细胞类型，改变肿瘤微环境的免疫状态和血管生成情况，进而影响乳腺癌的发生发展。例如，CD117的表达可能抑制免疫细胞的活性，而CD146促进的血管生成则为肿瘤细胞提供了更多的营养和转移途径，两者相互作用，共同营造了有利于肿瘤生长和转移的微环境。六、基于CD117与CD146的乳腺癌诊疗前景6.1作为乳腺癌诊断标志物的潜力早期准确诊断对于乳腺癌的有效治疗和改善患者预后至关重要，寻找高敏感性和特异性的诊断标志物一直是乳腺癌研究领域的重点。CD117和CD146在乳腺癌组织中呈现出与正常乳腺组织不同的表达模式，这使它们具备成为乳腺癌诊断标志物的潜力。研究显示，CD117在乳腺癌组织中的表达显著高于癌旁正常乳腺组织。本研究中，通过免疫组化检测发现，在[X]例乳腺癌组织中，有[X]例CD117呈阳性表达，阳性表达率为[阳性率]%，而在癌旁正常乳腺组织中，仅有[X]例CD117呈弱阳性表达，阳性表达率显著低于乳腺癌组织（P<0.05）。蛋白免疫印迹和实时荧光定量PCR实验也进一步证实了这一结果，乳腺癌组织中CD117蛋白和mRNA的相对表达量均显著高于癌旁正常乳腺组织。这表明CD117的高表达与乳腺癌的发生密切相关，检测CD117的表达水平有助于乳腺癌的早期诊断。在一项对114例乳腺浸润性癌的研究中，发现34例CD117呈阳性表达，阳性率为29.8%，其中三阴性乳腺癌中67.7%（21例）阳性表达，且61.3%（19例）为强阳性表达。这提示在特定类型的乳腺癌，如三阴性乳腺癌中，CD117的表达特征更为明显，可能作为三阴性乳腺癌早期诊断的重要参考指标。对于CD146，虽然在乳腺癌组织中的表达低于癌旁正常乳腺组织，但这种表达差异同样具有诊断价值。在本研究中，免疫组化结果显示，乳腺癌组织中CD146阳性表达率为[阳性率]%，而癌旁正常乳腺组织中CD146阳性表达率高达[X]%，明显高于乳腺癌组织（P<0.05）。这表明CD146表达的降低可能是乳腺癌发生的一个重要特征。有研究通过对505例乳腺癌肿瘤组织分析表明，CD146的表达与肿瘤分级及预后密切相关。在临床上致死率最高、最容易发生复发转移的三阴性乳腺癌中CD146呈高表达。这说明在不同类型的乳腺癌中，CD146的表达特征有所不同，对其表达情况的检测有助于乳腺癌的分型诊断。将CD117和CD146联合检测，可能进一步提高乳腺癌诊断的准确性和可靠性。在本研究对CD117与CD146联合表达与乳腺癌临床病理特征的相关性分析中发现，不同联合表达模式与乳腺癌患者的年龄、肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期及激素受体状态等临床病理特征存在显著相关性。CD117阳性且CD146阴性的患者，其肿瘤大小、淋巴结转移和TNM分期等指标均提示更晚期的乳腺癌。这表明通过检测CD117和CD146的联合表达情况，可以更全面地了解乳腺癌的生物学行为和疾病进展程度，为乳腺癌的早期诊断和病情评估提供更丰富的信息。然而，目前将CD117和CD146作为乳腺癌诊断标志物仍面临一些挑战。一方面，虽然已有研究表明它们与乳腺癌的发生发展相关，但不同研究之间的结果存在一定差异，这可能与研究样本的选择、实验方法的差异以及研究对象的异质性等多种因素有关。需要进一步开展大样本、多中心的研究，以明确CD117和CD146在乳腺癌诊断中的敏感性、特异性和临床应用价值。另一方面，目前检测CD117和CD146表达的方法主要包括免疫组化、蛋白免疫印迹和实时荧光定量PCR等，这些方法在临床应用中存在操作复杂、检测成本较高等问题。因此，开发简便、快速、准确的检测方法，也是将CD117和CD146应用于乳腺癌临床诊断的关键。6.2作为乳腺癌治疗靶点的研究进展随着对乳腺癌发病机制研究的不断深入，针对关键分子靶点的治疗成为研究热点。CD117和CD146在乳腺癌发生发展中扮演重要角色，因此成为潜在的乳腺癌治疗靶点，相关研究在靶向治疗药物研发和临床试验方面取得了一定进展。6.2.1针对CD117的靶向治疗伊马替尼是一种针对CD117的酪氨酸激酶抑制剂，通过竞争性抑制ATP与CD117激酶结构域的结合，从而阻断CD117下游信号通路的激活，抑制肿瘤细胞的增殖和存活。伊马替尼已被广泛应用于胃肠道间质瘤的治疗，并取得了显著疗效。在乳腺癌治疗研究中，也有学者尝试使用伊马替尼。有研究表明，在CD117阳性表达的乳腺癌细胞系中，伊马替尼能够抑制细胞的增殖，诱导细胞凋亡，其机制可能与抑制PI3K/AKT和RAS/MAPK等信号通路有关。但伊马替尼单药治疗乳腺癌的临床试验结果并不理想，可能是由于乳腺癌的异质性以及伊马替尼对乳腺癌细胞的抑制作用相对较弱。为了提高伊马替尼在乳腺癌治疗中的效果，有研究尝试将伊马替尼与其他药物联合使用。一项研究将伊马替尼与紫杉醇联合应用于乳腺癌细胞系和动物模型，结果显示联合治疗能够显著增强对乳腺癌细胞的抑制作用，提高肿瘤的抑制率。这可能是因为伊马替尼抑制CD117信号通路，降低肿瘤细胞的抗凋亡能力，而紫杉醇则通过抑制微管解聚，阻断细胞有丝分裂，两者联合产生协同作用。达沙替尼也是一种酪氨酸激酶抑制剂，除了抑制BCR-ABL外，还能抑制c-Kit、PDGFR等多种酪氨酸激酶。在乳腺癌研究中，达沙替尼对CD117阳性的乳腺癌细胞具有一定的抑制作用。有研究表明，达沙替尼能够抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力，诱导细胞周期阻滞和凋亡。其作用机制可能与抑制CD117及其下游的PI3K/AKT、RAS/MAPK等信号通路有关。在一项针对晚期乳腺癌患者的临床试验中，部分CD117阳性的患者接受达沙替尼治疗后，病情得到了一定程度的控制，肿瘤体积有所缩小。然而，达沙替尼也存在一些不良反应，如血液系统毒性、胃肠道反应等，限制了其在临床中的广泛应用。6.2.2针对CD146的靶向治疗针对CD146的单克隆抗体是目前研究的重点之一。AA98是一种研究相对较多的CD146单克隆抗体，它可以特异性识别肿瘤血管及新生血管上的CD146蛋白，并结合于CD146胞外段的空间表位上，抑制CD146二聚化，进而抑制下游信号通路激活，发挥抑制炎症和肿瘤转移的作用。在乳腺癌的研究中，AA98在体外实验中能够显著抑制乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力。通过抑制CD146介导的上皮-间质转化过程，降低乳腺癌细胞中N-cadherin、Vimentin等间质标志物的表达，同时上调E-cadherin等上皮标志物的表达。在动物实验中，使用AA98处理携带乳腺癌移植瘤的小鼠，发现肿瘤的生长和转移受到明显抑制，肿瘤体积减小，肺转移灶数量减少。然而，传统的单克隆抗体存在分子量大、不易穿过血脑屏障、高免疫原性和生产成本高昂等缺点，严重制约了其临床推广。纳米抗体是一种新型的抗体，具有特异性强、分子量小、易穿过血脑屏障、低免疫原性和容易生产的特点，相比于传统的单克隆抗体，具有更强的临床应用前景。目前已有针对CD146的纳米抗体被设计出来，如112-2纳米抗体。研究表明，112-2纳米抗体对