高考生物一轮复习：动物细胞工程（练习）解析版

第41讲动物细胞工程

・最新模拟精练_____________________

1.（2023・全国）克隆猴“中中”和“华华”登上学术期刊《细胞》封面，表明我国的克隆技术再次走在世界前

列。“中中，，和“华华，，的诞生成功证明了（）

A.动物细胞的全能性B.动物细胞的再生能力

C.动物细胞核的全能性D.动物细胞的分化能力

【答案】C

【分析】全能性是指个体某个器官或组织已经分化的细胞在适宜的条件下再生成完整个体（或分化为各种

细胞）的潜力。全能性原因：已分化的细胞都含有该物种所特有的全套的遗传信息，都有发育成为完整个

体所必需的全部基因。

【详解】高度分化的动物细胞，从整个细胞来说，它的全能性受到限制，但它的细胞核仍保持着全能性，

因为细胞核内含有保持物种遗传性状所需要的全套遗传物质。“中中''和"华华”就是用乳腺细胞的细胞核与去

核卵细胞重组形成的一个细胞发育而成的，这证明动物细胞的细胞核具有全能性。

故选Co

2.（2023秋・湖北•高三荆州中学校联考阶段练习）小鼠作为一种与人类基因组序列相似度较高的哺乳动物,

常用于人类某些疾病的研究。小鼠胚胎干细胞的培养过程如图所示，下列叙述错误的是（）

A.胚胎干细胞具有分化为成年动物体内的任何一种类型细胞的潜能

B.体外培养胚胎干细胞需提供的气体环境是95%的CCh和5%的空气

C.图中胚胎干细胞分化后的组织移入小鼠替代病变器官属于治疗性克隆

D.图中重组细胞重编程、分裂、分化最终产生的小鼠与患病鼠性状相似

【答案】B

【分析】胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）。特点：具

有胚胎细胞的特性，体积较小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物

任何一种组织细胞。另一方面，在体外培养条件下，ES细胞可不断增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，

也可以进行某些遗传改造。

【详解】A、胚胎干细胞有全能性，具有分化为成年动物体内的任何一种类型细胞的潜能，A正确；

B、体外培养胚胎干细胞需提供的气体环境是95%的空气和5%的CCh,B错误；

C、图中胚胎干细胞分化后的组织移入小鼠替代病变器官属于治疗性克隆，C正确；

D、图中重组细胞重编程、分裂、分化最终产生的小鼠与患病鼠性状相似，因为细胞核来自患病鼠，D正确。

故选B。

3.（2023秋・辽宁•高三校联考开学考试）精准爆破肿瘤细胞的“生物导弹”——ADC（抗体偶联药物）能对

肿瘤细胞进行选择性杀伤，该物质由抗体（导弹体）、药物（核弹头）和接头三部分组成，ADC的作用机

制如图。下列相关叙述错误的是（）

体

抗

物

药

头

接

A.ADC的制备过程运用了细胞培养和细胞融合技术

B.获得制备ADC中足够数量的抗体需经过多次筛选

C.ADC能精准地识别肿瘤细胞，进入癌细胞需要消耗ATP

D.癌细胞的凋亡是由于溶酶体中水解酶的水解作用

【答案】D

【分析】单克隆抗体的制备过程：（1）制备产生抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然

后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合；②

用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检

测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小

鼠的腹水中提取。

【详解】A、ADC是抗体与药物的偶联物，其制备过程运用了细胞培养和细胞融合技术，A正确；

B、制备ADC中的抗体为单克隆抗体，至少涉及两次筛选，第一次是利用选择性培养基进行初步筛选出杂

交瘤细胞，第二次是利用克隆化培养和抗体检测的方法筛选出既能大量增殖，又能产生所需抗体的杂交瘤

细胞，获得制备ADC中足够数量的抗体需经过多次筛选，B正确；

C、ADC能精准地识别肿瘤细胞，进入癌细胞为胞吞，需要消耗ATP,C正确；

D、结合图示可知，癌细胞的凋亡是由于溶酶体中水解酶将药物与抗体水解，释放药物，药物将癌细胞裂解,

D错误。

故选D。

4.（2023秋•江西・高三校联考阶段练习）下列有关细胞工程的叙述，正确的是（）

A.动物细胞融合可以直接用PEG处理，植物细胞不能直接用PEG处理

B.细胞产物的工厂化生产可提高单个细胞初生代谢物的含量

C.茎尖组织培养得到的脱毒苗可以抵抗病毒侵染

D.动植物组织经胰蛋白酶处理成为单个细胞后才能进行培养

【答案】A

【分析】1、植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、

芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性，属于无性生殖。

2、动物细胞融合不同于植物细胞融合的方法是灭活的病毒。

【详解】A、植物体细胞杂交过程中，需先用酶解法去除细胞壁获得原生质体后，才可以用PEG处理，进

行原生质体的融合，所以动物细胞融合可以直接用PEG处理，植物细胞融合不能直接用PEG处理，A正确；

B、细胞产物的工厂化生产无法提高单个细胞初生代谢物的含量，但可以通过培养得到更多细胞从而提高初

生代谢物的总量，B错误；

C、脱毒苗病毒含量少，甚至没有病毒，但不一定能抵抗病毒，C错误；

D、动物组织经胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理成为单个细胞后才能进行培养，植物组织培养时不需要用胰蛋白

酶处理，D错误。

故选Ao

5.（2023春•全国•高二课堂例题）Ca2+水平升高可直接或通过激活重构胚使处于MII期的卵母细胞恢复分

裂周期。由于持续高水平的成熟促进因子（MPF,一种蛋白激酶）存在，Mil期的卵母细胞不能进入末期。

下列相关分析错误的是（）

A.自然受精过程中，精子入卵可能促进了卵母细胞细胞质基质中Ca2+水平升高

B.在核移植过程中，通过电融合法可使供体细胞与去核卵母细胞融合形成重构胚

C.Ca2+载体法可激活重构胚是因为载体促进了Ca2+从膜外向膜内转运

D.蛋白酶合成抑制剂可通过抑制MPF的合成使重构胚保持休眠

【答案】D

【分析】将供体细胞注入去核卵母细胞，通过电刺激使两细胞融合，供体细胞进入受体卵母细胞内构建重

组胚胎，通过物理或化学方法（如电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活受体细胞。

【详解】A、由题可知，能使钙离子水平升高的机制都可以激活重构胚，而重构胚是促进卵母细胞分裂的，

精子的进入也是促进卵母细胞分裂的，故精子的进入促进钙离子内流，提高细胞质基质中钙离子水平；A

正确；

B、因为体细胞直接注入进去后细胞质并没有与卵母细胞融合，而是被质膜分割开来，并不能使体细胞核表

现出全能性，所以需要电刺激使其质膜融合，B正确；

C、精子的进入卵母细胞可促进其分裂，而精子的进入促进钙离子内流，提高了卵母细胞细胞质基质中钙离

子水平；题干信息钙离子水平升高可直接或通过激活重构胚使处于MII期的卵母细胞恢复分裂周期；故Ca2+

载体法可激活重构胚是因为载体促进了Ca2+从膜外向膜内转运；C正确；

D、由题意可知，持续高水平的成熟促进因子（MPF）存在，导致Mil期的卵母细胞不能进入末期，因此蛋

白酶合成抑制剂可通过抑制MPF的合成使重构胚激活，D错误。

故选D。

6.（2023春・全国•高二课堂例题）细胞工程中，选择合适的生物材料是成功的关键。下列叙述错误的是（）

A.选择植物的愈伤组织进行诱变处理可获得有用的突变体

B.选择去核的卵母细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动物的成功率

C.选择高度分化的动物体细胞进行培养有利于获得大量的细胞

D.选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗

【答案】C

【分析】1、动物细胞核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组

并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为克隆个体。

2、选用去核卵（母）细胞的原因：卵（母）细胞大，容易操作；卵（母）细胞质多，营养丰富；含有促使

细胞全能性表达的物质。

3、植物组织培养技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育

（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。

【详解】A、愈伤组织细胞处于分生状态，易受外界环境因素影响，因此选择植物的愈伤组织进行诱变处理,

再进行人工选择，可获得优质的突变体，A正确；

B、卵细胞中含有促进全能性表达的物质，因此择去核的卵细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动物的成

功率，B正确；

C、高度分化的细胞已经失去分裂能力，因此选择高度分化的动物体细胞进行培养不利于获得大量细胞，C

错误；

D、茎尖等分生区组织几乎不含病毒，因此选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗，D正确。

故选C。

7.（2023春.全国.高二课堂例题）绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘细胞分泌的一种糖蛋白。

研究人员利用HCG免疫健康小鼠，制备了用于早孕诊断的HCG单克隆抗体。下列有关叙述错误的是（）

A.早孕诊断的原理是单克隆抗体与HCG特异性结合

B.与一般的血清抗体相比，单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高、可大量制备

C.制备单克隆抗体的过程中有两次筛选，第二次筛选的目的是为了获得杂交瘤细胞

D.单抗制备过程中主要运用的细胞工程技术包括动物细胞培养和动物细胞融合

【答案】C

【分析】单克隆抗体的制备过程是：首先利用已免疫的B淋巴细胞和小鼠的骨髓瘤细胞融合，再通过特定

的选择培养基筛选获得杂交瘤细胞，然后再通过细胞培养用专一抗体检测筛选出能产生特异性抗体的杂交

瘤细胞。该杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体，因此利用符合要求的杂交瘤细胞再进行体外

培养或体内培养获得单克隆抗体。

【详解】A、单克隆抗体特异性强、灵敏度高，可以与HCG特异性结合，依据该原理，可用作早孕诊断，

A正确；

B、一般的血清抗体针对性不强，与一般的血清抗体相比，单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高、可大

量制备，B正确；

C、对杂交细胞一般要进行两次筛选，第一次筛选是用选择培养基进行筛选获得杂交瘤细胞，第二次筛选的

方法为专一抗体检测阳性和克隆化培养，最终获得的杂交瘤细胞既能产生特异性抗体，又能无限增殖，c

错误；

D、动物细胞培养技术是动物细胞工程技术的基础，动物细胞融合技术最重要的用途是制备单克隆抗体，D

正确。

故选Co

8.（2023春•广西•高二校联考阶段练习）人肌红蛋白（Myo）是早期诊断急性心肌梗塞的生化标志物之一。为

制备抗Myo的单克隆抗体，科研人员通过细胞工程技术获得杂交瘤细胞进行动物细胞培养，获取上清液

进行抗体阳性检测，检测原理如图所示。以下说法错误的是（）

注：酶标抗体可与待检测抗体结合，

且携带的酶可与相应底物反应显色

A.将能表达Myo基因的细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，用于制备抗Myo的单克隆抗体

B.单克隆抗体的制备解决了血清抗体产量低、纯度低、特异性差的问题

C.抗体检测过程中，将人肌红蛋白作为抗原固定

D.根据是否显色来判断是否有抗Myo的单克隆抗体产生

【答案】A

【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免

疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛

选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培

养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】A、已免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合制备单克隆抗体，表达Myo基因的细胞与小鼠骨髓瘤细胞

融合，不能制备抗Myo的单克隆抗体，A错误；

B、单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优势在于特异性强，灵敏度高，可大量制备，B正确；

C、而抗原和抗体的结合具有特异性，故利用人肌红蛋白作为抗原固定来检测抗体，C正确；

D、酶标抗体可与待检测抗体结合，且携带的酶可与相应底物反应显色，因此根据是否显色来判断是否有抗

Myo的单克隆抗体产生，D正确。

故选Ao

9.（2023・全国•校联考一模）已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶吟阻断。人

淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但其一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但其能不

断分裂增殖。如图是科研人员为制备抗新冠病毒单克隆抗体而设计的流程图。下列叙述正确的是（）

小鼠骨髓瘤细胞

[lining一⑤筛选出所需细胞

并用于单抗生产

D-②混合③HAT④克隆化培养

并促融培养基

淋巴细胞

A.图中过程①获得的淋巴细胞都能产生抗新冠病毒的抗体

B.过程③使用的HAT培养基中要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，通常还需加入血

清等天然成分；除此之外，还必须加入动物激素

C.可分别从④的各个小室中提取抗体，与新冠病毒混合，出现阴性反应的小室中的细胞就是所需的杂

交瘤细胞

D.制备的单克隆抗体可以用于新冠病毒的检测，利用了抗原抗体特异性结合的原理

【答案】D

【分析】在制备单克隆抗体时，首先要给小鼠注射相应抗原，产生相应的浆细胞，然后将浆细胞与骨髓瘤

细胞融合，经过选择培养基两次筛选，最后获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞。在单克隆抗体的制备过程

中，使用了动物细胞培养和动物细胞融合等动物细胞工程技术。

【详解】A、图中过程①获得的淋巴细胞不都能产生抗新冠病毒的抗体，A错误；

B、过程③使用的HAT培养基中要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，通常还需加入血清

等天然成分；该培养基为选择培养基，还需要加入氨基蝶吟以抑制骨髓瘤细胞的D途径，使培养基中只有

杂交瘤细胞能增殖，B错误；

C、④过程是筛选能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，可分别从各个小室中提取抗体，与新冠病毒混合，出现

抗原抗体杂交带（阳性）的小室中的细胞就是所需的杂交瘤细胞，C错误；

D、抗体能与引起它产生的抗原发生特异性结合反应，制备的单克隆抗体可以用于新冠病毒的检测，就是利

用了抗原抗体能发生特异性结合的原理，D正确。

故选D。

10.（2023秋・北京・高三北京二中校考阶段练习）科研工作者利用禽流感病毒蛋白制备出单克隆抗体。下列

相关叙述正确的是（）

A.用动物细胞培养液培养禽流感病毒，经分离纯化获得抗原蛋白

B.多次注射适宜浓度的抗原免疫小鼠，以获得更多的浆细胞

C.将单个杂交瘤细胞接种到小鼠腹腔培养可获得多种单克隆抗体

D.为达到预防禽流感的目的，需向未患病家禽注射所得抗体

【答案】B

【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免

疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛

选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培

养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】A、禽流感病毒没有细胞结构，不能独立代谢，因此不能用动物细胞培养液培养禽流感病毒，A错

误；

B、由于二次免疫会产生更多的记忆细胞和抗体，因此多次注射适宜浓度的抗原免疫小鼠，可以获得更多的

记忆细胞形成的浆细胞，再由浆细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，最后由杂交瘤细胞产生大量的单

一抗体，属于单克隆抗体，B正确；

C、一个杂交瘤细胞只能产生一种抗体，因此将单个杂交瘤细胞接种到小鼠腹腔培养只能获得一种单克隆抗

体，C错误；

D、为达到预防禽流感的目的，需向未患病家禽注射相应的抗原制成的疫苗，使其产生主动免疫，而注射抗

体属于被动免疫，常用于免疫治疗，D错误。

故选B。

11.（2023春・全国•高二课堂例题）将Oct3/4、Sox2、c-Myc和KIf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维

细胞后，置于培养胚胎干细胞（ES细胞）的培养基上培养。2~3周后，细胞会呈现出与ES细胞类似的形态

和活跃分裂能力，这样的细胞称为诱导多能干细胞（iPS细胞）。下列说法错误的是（）

A.从获取途径看，iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞

B.体细胞转化成的iPS细胞用于自身疾病的治疗，有低免疫排斥的优点

C.欲验证iPS细胞的产生是由于外源基因的作用，应设置不转入外源基因的对照组

D.欲比较上述4种基因诱导iPS细胞时作用的大小，应设置分别转入1种基因的四个实验组和同时转

入4种基因的对照组

【答案】D

【分析】胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具

有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不

发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。

【详解】A、由于iPS细胞具有活跃的分裂能力，故iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞，A正确；

B、体细胞转化成的iPS细胞用于自身疾病的治疗，为自身细胞，因此有低免疫排斥的优点，B正确；

C、欲验证iPS细胞的产生是由于外源基因的作用，自变量为是否含有外源基因，应设置不转入外源基因的

对照组，C正确；

D、欲比较上述4种基因诱导iPS细胞时作用的大小，应设置分别转入1种基因的四个实验组和不转入4种

基因的对照组，D错误。

故选D。

12.（2023春•全国•高二课堂例题）下图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是（）

①切取组织②制备细胞悬浮液③原代培养④传代培养

A.步骤①操作不需要在无菌环境中进行

B.步骤②用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离

C.步骤③到④常用胰蛋白酶处理

D.步骤④培养中，细胞之间相互接触能促进细胞的分裂

【答案】C

【分析】动物细胞培养过程：取动物组织块一剪碎组织一用胰蛋白酶处理分散成单个细胞一制成细胞悬液

一转入培养液中（原代培养）1放入二氧化碳培养箱培养一贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细

胞悬液一转入培养液（传代培养）一放入二氧化碳培养箱培养。

【详解】A、动物细胞培养过程需要无菌操作，故步骤①的操作需要在无菌环境中进行，A错误；

B、动物细胞培养过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织，分散成单个细胞，制成细胞悬液，B错

误；

C、传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞，使之分散成单个细胞，再分瓶培养，故步骤③到④的

分瓶操作前常用胰蛋白酶处理，C正确；

D、步骤④为传代培养过程，在该过程中，贴壁细胞会发生接触抑制细胞分裂的现象，D错误。

故选C。

13.（2023•辽宁•统考高考真题）大量悬浮培养产流感病毒的单克隆细胞，可用于流感疫苗的生产。下列叙

述错误的是（）

A.悬浮培养单克隆细胞可有效避免接触抑制

B.用于培养单克隆细胞的培养基通常需加血清

C.当病毒达到一定数量时会影响细胞的增殖

D.培养基pH不会影响单克隆细胞的病毒产量

【答案】D

【分析】培养动物细胞使用合成培养基时需要加入血清等一些天然成分，必须保证环境是无菌、无毒的，

培养液还需要定期更换。。2是细胞代谢所必需的，CO2主要作用是维持培养液的pH。细胞贴附在培养瓶的

瓶壁上称为细胞贴壁，贴壁细胞在生长增殖时会发生接触抑制的现象。

【详解】A、悬浮培养单克隆细胞，可以保证足够的气体交换，通过振荡或转动装置使细胞始终处于分散悬

浮于培养液内，可有效避免接触抑制，A正确；

B、由于细胞的生长是比较复杂的过程，血清中含有一些必须的因子，用于培养单克隆细胞的培养基通常需

加血清，B正确；

C、病毒借助于细胞进行繁殖，利用了活细胞的物质、能量、酶等，当病毒达到一定数量时细胞的生命活动

受到影响，会影响细胞的增殖，C正确；

D、细胞的正常生命活动需要适宜的pH,培养基pH会影响细胞代谢，进而影响单克隆细胞的病毒产量，D

错误。

故选D。

14.（2023秋•福建龙岩•高三上杭一中校考阶段练习）Graves病（GD）可导致甲状腺功能亢进。研究发现,

GD患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间黏附分子1（ICAM-1）,导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克

隆抗体，对治疗GD进行了尝试。

（1）用ICAM-1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠，几周后取这些免疫小鼠的血清，分别加入多孔培养板的

不同孔中，多孔培养板中需加入以检测这些小鼠产生的抗体。依据反应结果，选出抗原一抗体反应

最（填“强”或“弱”）的培养孔所对应的小鼠M。

（2）取小鼠M的脾脏细胞制成细胞悬液，与实验用骨髓瘤细胞进行融合，用选择培养基筛选得到具有

能力的细胞。核酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径（如图）。正常细胞内含有补救合

成途径所必需的转化酶和激酶，制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。可用加入H、A、T三

种物质的“HAT培养基”筛选出特定的杂交瘤细胞。

糖和

全合成途径：

氨基酸

A（阻断）核

昔一DNA

酸

补救合成途径：H、T转化酶、激酶

融合前将部分培养细胞置于含HAT的选择培养基中培养，一段时间后培养基中（填“有”或“无”）骨髓

瘤细胞生长，说明培养基符合实验要求。杂交瘤细胞可以在HAT培养基上大量增殖的原因是。

（3）将获得的上述细胞在多孔培养板上培养，用ICAM-1检测，从中选择的杂交瘤细胞，将其植入小

鼠腹腔中进行克隆培养，一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。

【答案】⑴ICAM-1强

（2）无限增殖无杂交瘤细胞可以进行补救合成途径

（3）大量产生抗ICAM-1抗体

【分析】单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫

能力的B淋巴细胞，利用动物细胞融合技术将免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合。单克隆抗体制备过程

中的两次筛选：第一次筛选，利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞（A为B淋巴细

胞，B为骨髓瘤细胞）,不需要A、B、AA、BB型细胞；第二次筛选，利用克隆化培养和抗体检测筛选，

获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。

【详解】（1）抗原和抗体结合具有特异性，多孔培养板中需加入ICAM-1以检测小鼠是否产生抗ICAM-1

的抗体。依据反应结果，选出抗原-抗体反应最强的培养孔所对应的小鼠M。

(2)B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后具备了骨髓瘤细胞无限增殖的特点，因此用选择培养基筛选得到具有

无限增殖能力的细胞。制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶，无法进行补救合成途径，且物

质A阻断了全合成途径，故在HAT培养基中无骨髓瘤细胞生长。杂交瘤细胞含有补救合成途径所必需的转

化酶和激酶，可以进行补救合成途径，可以在HAT培养基上大量繁殖。

(3)根据抗原和抗体结合的特异性，用ICAM-1检测，从中选择大量产生抗ICAM-1抗体的杂交瘤细胞，

植入小鼠腹腔中克隆培养，一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。

15.(2023春•江苏盐城•高二校联考期中)下图为科研工作者利用小鼠制备H7N9禽流感病毒单克隆抗体的

过程。请据图回答有关问题：

(1)图中X细胞一般指,与植物体细胞杂交相比，诱导X细胞和Y细胞融合还可采用o

动物细胞培养时，通常要在培养液中添加一定量的，以防培养过程中的污染；还需要放入二氧化

碳培养箱中培养，CCh的主要作用是o贴满瓶壁的细胞需要重新用酶处理，然后分瓶继

续培养，这样的培养过程通常被称为。

(2)单克隆抗体的制备过程需要经过多次筛选，首先用特定的选择性培养基筛选出______，还需再次筛选，

最终获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，选出符合要求的细胞后，可在体外条件下或注射到

进行增殖培养。

(3)利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒，用于准确、快速诊断H7N9禽流感病毒的感染者，这种

诊断运用了技术，这体现了单克隆抗体、的特性。

【答案】(1)骨髓瘤细胞灭活的病毒抗生素维持培养液的pH胶原蛋白酶或胰蛋

白酶传代培养

(2)杂交瘤细胞小鼠腹腔

(3)抗原一抗体杂交特异性强灵敏度高

【分析】分析题图：采用基因工程技术将H7N9病毒的抗原基因导入受体细胞，并使之表达；B淋巴细胞能

产生抗体，但不能无限增殖，而骨髓瘤细胞能无限增殖，但不能产生抗体，因此采用细胞融合技术将两者

融合形成杂交瘤细胞，既可产生抗体，也能无限增殖，所以图中X细胞表示骨髓瘤细胞，Y细胞表示B淋

巴细胞。

【详解】(1)X细胞具有无限增殖的能力，一般选择骨髓瘤细胞。诱导X细胞和Y细胞融合可采用化学试

剂聚乙二醇(PEG)、辅助离心震动电刺激等物理方法，还可用灭活的病毒诱导其融合，即与植物体细胞杂

交相比，让动物细胞融合特有的方法是灭活的病毒诱导细胞融合。动物细胞培养时，通常还要在细胞培养

液中添加一定量的抗生素，防止细菌污染；还需要放入二氧化碳培养箱中培养，C02的主要作用是维持培养

液的pH；贴满瓶壁的细胞需要胶原蛋白酶或胰蛋白酶处理，然后分瓶继续培养，这样的培养过程通常被称

为传代培养。

（2）单克隆抗体的制备过程需要经过多次筛选，首先用特定的选择性培养基（HAT培养基）筛选出杂交瘤

细胞，该培养基上B细胞和B细胞融合细胞、瘤细胞和瘤细胞融合细胞不能生长。还需进行克隆化培养和

专一抗体检测（使用特定的抗原决定簇进行检测），最终获得足够数量的能分泌所需（特异性/专一性）抗

体的细胞，选出符合要求的细胞后，可在体外条件下培养或注射到小鼠的腹腔内进行增殖培养。

（3）单克隆抗体能与抗原特异性结合，利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒，用于准确、快速

诊断H7N9禽流感病毒的感染者，这种诊断运用了抗原一抗体杂交技术，这体现了单克隆抗体理化性质单

一、与抗原结合的特异性强、灵敏度高的特性。

—真题实战演练

1.（2023•辽宁・统考高考真题）大量悬浮培养产流感病毒的单克隆细胞，可用于流感疫苗的生产。下列叙

述错误的是（）

A.悬浮培养单克隆细胞可有效避免接触抑制

B.用于培养单克隆细胞的培养基通常需加血清

C.当病毒达到一定数量时会影响细胞的增殖

D.培养基pH不会影响单克隆细胞的病毒产量

【答案】D

【分析】培养动物细胞使用合成培养基时需要加入血清等一些天然成分，必须保证环境是无菌、无毒的，

培养液还需要定期更换。。2是细胞代谢所必需的，CO2主要作用是维持培养液的pH。细胞贴附在培养瓶的

瓶壁上称为细胞贴壁，贴壁细胞在生长增殖时会发生接触抑制的现象。

【详解】A、悬浮培养单克隆细胞，可以保证足够的气体交换，通过振荡或转动装置使细胞始终处于分散悬

浮于培养液内，可有效避免接触抑制，A正确；

B、由于细胞的生长是比较复杂的过程，血清中含有一些必须的因子，用于培养单克隆细胞的培养基通常需

加血清，B正确；

C、病毒借助于细胞进行繁殖，利用了活细胞的物质、能量、酶等，当病毒达到一定数量时细胞的生命活动

受到影响，会影响细胞的增殖，C正确；

D、细胞的正常生命活动需要适宜的pH,培养基pH会影响细胞代谢，进而影响单克隆细胞的病毒产量，D

错误。

故选D。

2.（2022.山东.高考真题）如图所示，将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联后

重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是（）

抗体1抗体2抗体3

A.双抗可同时与2种抗原结合

B.利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞

C.筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原

D.同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞

【答案】D

【分析】单克隆抗体的制备过程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经

免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，

筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从

培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】A、根据抗原和抗体发生特异性结合的原理推测，双抗可同时与2种抗原结合，A正确；

B、根据抗原与抗体能够发生特异性结合的特性，利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞，从而使药物

发挥相应的作用，B正确；

C、在两种不同的抗原刺激下，B细胞增殖、分化产生不同的浆细胞分泌形成两种抗体，因此，筛选双抗时

需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原来进行抗原-抗体检测，从而实现对双抗的筛选，C正确；

D、同时注射2种抗原可刺激B细胞分化形成不同的浆细胞，而不是分化成产双抗的浆细胞，D错误。

故选D。

3.（2021・江苏•高考真题）下列关于哺乳动物胚胎工程和细胞工程的叙述，错误的是（）

A.细胞培养和早期胚胎培养的培养液中通常需要添加血清等物质

B.早期胚胎需移植到经同期发情处理的同种雌性动物体内发育成个体

C.猴的核移植细胞通过胚胎工程已成功地培育出了克隆猴

D.将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞

【答案】D

【分析】1、胚胎移植的生理基础（1）供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的

生理环境；（2）胚胎在早期母体中处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能；（3）子宫不对外来胚

胎发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能；（4）胚胎遗传性状不受受体任何影响。

2、浆细胞能够分泌抗体，但是不具有增殖能力，而骨髓瘤细胞具有无限增殖的能力，因此利用动物细胞融

合技术将浆细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，利用该细胞制备单克隆抗体。

【详解】A、细胞培养和早期胚胎培养的培养液中通常需添加血清等物质，A正确；

B、早期胚胎需移植到经同期发情处理的同种雌性动物体内发育成个体，B正确；

C、我国利用核移植技术成功培养出克隆猴“中中”和“华华”，C正确；

D、将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导融合后的细胞不都是杂交瘤细胞，还有B细胞自身融合的细

胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞等，D错误。

故选D。

4.(2021•浙江•统考高考真题)将蝌蚪肠细胞的细胞核移植到去核的蛙卵中，形成重建的“合子”。有些“合

子”发育成正常的蝌蚪，而单独培养肠细胞却不能发育成蝌蚪。下列叙述错误的是()

A.肠细胞不能表达全能性是受某些物质的限制

B.“合子”第一次分裂后形成的细胞已失去全能性

C.“合子”发育成正常蝌蚪的过程中伴随着细胞分化

D.细胞核具有全能性是由于其含有该物种的全套基因

【答案】B

【分析】细胞的全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特

性，植物的体细胞具有全能性，动物的体细胞不表现出全能性，但细胞核具有全能性。

【详解】A、动物细胞经过多次分裂后，细胞质的成分已经发生改变，原本能激发细胞全能性的物质已经消

失，故肠细胞不能表达全能性是受到了细胞内物质的限制，A正确；

B、“合子”第一次分裂、第二次分裂后形成的细胞仍具有全能性，B错误；

C、“合子”发育成正常蝌蚪个体的过程中，需要通过细胞分裂增加细胞的数量，通过细胞分化增加细胞的种

类，C正确；

D、虽然细胞经过多次分裂失去了激发全能性的物质，但细胞核仍含有该物种的全套基因，故动物细胞核具

有全能性，D正确。

故选B。

【点睛】

5.(2023・海南•高考真题)某团队通过多代细胞培养，将小鼠胚胎干细胞的Y染色体去除，获得XO胚胎

干细胞，再经过一系列处理，使之转变为有功能的卵母细胞。下列有关叙述错误的是()

A.营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制

B.获得XO胚胎干细胞的过程发生了染色体数目变异

C.XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化

D.若某濒危哺乳动物仅存雄性个体，可用该法获得有功能的卵母细胞用于繁育

【答案】A

【分析】动物细胞培养需要满足以下条件：

(1)充足的营养供给一微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。

(2)适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2〜7.4。

(3)无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过

程中的污染。止匕外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。

(4)气体环境：95%空气+5%CO2.。2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。

【详解】A、营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞也会发生接触抑制，A错误；

B、XO胚胎干细胞中丢失了Y染色体，因而该细胞的获得过程发生了染色体数目变异，B正确；

C、X0胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化，即细胞的功能发生了特化，因而发生

了细胞分化，C正确；

D、若某濒危哺乳动物仅存雄性个体，可用该法，即获得有功能的卵母细胞，进而用于繁育，实现濒危物种

的保护，D正确。

故选A。

6.（2022•福建・统考高考真题）我国科研人员在航天器微重力环境下对多能干细胞的分化进行了研究，发

现与正常重力相比，多能干细胞在微重力环境下加速分化为功能健全的心肌细胞。下列叙述错误的是（）

A.微重力环境下多能干细胞和心肌细胞具有相同的细胞周期

B.微重力环境下进行人体细胞的体外培养需定期更换培养液

C.多能干细胞在分化过程中蛋白质种类和数量发生了改变

D.该研究有助于了解微重力对细胞生命活动的影响

【答案】A

【分析】1、干细胞的概念：动物和人体内保留着少量具有分裂和分化能力的细胞。

2、细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构和生理功能上发生稳定

性差异的过程。细胞分化的实质是基因的选择性表达。

【详解】A、连续分裂的细胞才有细胞周期，心肌细胞已经高度分化，不能再分裂，没有细胞周期，A错误;

B、进行细胞的体外培养需定期更换培养液，避免代谢废物对细胞的毒害作用，B正确；

C、分化过程的本质是基因的选择性表达，故多能干细胞在分化过程中蛋白质种类和数量发生了改变，C正

确；

D、由题意可知，多能干细胞在微重力环境下能加速分化，所以该研究有助于了解微重力对细胞生命活动的

影响，D正确。

故选A。

7.（2022・辽宁・统考高考真题）二甲基亚碉（DMSO）易与水分子结合，常用作细胞冻存的渗透性保护剂。

干细胞冻存复苏后指标检测结果见下表。下列叙述错误的是（）

冻存剂

合成培养基+DMSO合成培养基+DMSO+血清

指标

Gi期细胞数百分比（％）65.7879.85

活细胞数百分比（％）15.2941.33

注：细胞分裂间期分为Gi期、S期（DNA复制期）和G2期

A.冻存复苏后的干细胞可以用于治疗人类某些疾病

B.Gi期细胞数百分比上升，导致更多干细胞直接进入分裂期

C.血清中的天然成分影响G1期，增加干细胞复苏后的活细胞数百分比

D.DMSO的作用是使干细胞中自由水转化为结合水

【答案】B

【分析】细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。目前细胞

冻存多采用甘油或二甲基亚矶作保护剂，这两种物质能提高细胞膜对水的通透性，加上缓慢冷冻可使细胞

内的水分渗出细胞外，减少细胞内冰晶的形成，从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用

快速融化的方法，这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化，避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内

形成胞内再结晶对细胞造成损伤。

【详解】A、冻存复苏后的干细胞可以经诱导分裂分化形成多种组织器官，用于治疗人类某些疾病，A正确;

B、Gi期细胞数百分比上升，说明细胞进入分裂间期，但不会导致干细胞直接进入分裂期，还需经过S和

G2期，B错误；

C、分析表格可知，血清中的天然成分影响Gi期（该期细胞数百分比增大），能增加干细胞复苏后的活细

胞数百分比，C正确；

D、二甲基亚飒（DMSO）易与水分子结合，可以使干细胞中自由水转化为结合水，D正确。

故选B。

8.（2022・江苏・统考高考真题）航天员叶光富和王亚平在天宫课堂上展示了培养的心肌细胞跳动的视频。

下列相关叙述正确的是（）

A.培养心肌细胞的器具和试剂都要先进行高压蒸汽灭菌

B.培养心肌细胞的时候既需要氧气也需要二氧化碳

C.心肌细胞在培养容器中通过有丝分裂不断增殖

D.心肌细胞在神经细胞发出的神经冲动的支配下跳动

【答案】B

【分析】动物细胞培养的过程：取动物组织块T剪碎组织T用胰蛋白酶处理分散成单个细胞一制成细胞悬

液T转入培养液中（原代培养）T放入二氧化碳培养箱培养一贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成

细胞悬液一转入培养液（传代培养）一放入二氧化碳培养箱培养。

【详解】A、培养心肌细胞的器具要先进行高压蒸汽灭菌，但是试剂并不都需要灭菌，如动物血清不能进行

高压蒸汽灭菌，否则会使其中的成分失活，A错误；

B、培养心肌细胞的时候既需要氧气（有助于进行有氧呼吸）也需要二氧化碳（有助于维持培养液的pH）,

B正确；

C、在体外培养条件下，细胞会因接触抑制、细胞密度过大、代谢废物积累、营养物质消耗而停止分裂，C

错误；

D、心肌细胞节律性收缩，受植物性神经的支配，是不随意的，在神经细胞释放的神经递质的支配下跳动，

D错误。

故选B。

9.（2022.湖北.统考高考真题）某兴趣小组开展小鼠原代神经元培养的研究，结果发现其培养的原代神经

元生长缓慢，其原因不可能的是（）

A.实验材料取自小鼠胚胎的脑组织B.为了防止污染将培养瓶瓶口密封

C.血清经过高温处理后加入培养基D.所使用的培养基呈弱酸性

【答案】A

【分析】小鼠原代神经元培养属于动物细胞培养，需要在无菌无毒和培养液提供类似内环境的条件下进行。

【详解】A、小鼠胚胎脑组织中含有丰富的原代神经元，细胞增殖能力强，不会造成生长缓慢，A符合题意;

B、培养瓶瓶口密封会使培养液中缺氧，影响细胞有氧呼吸，造成供能不足，可能使细胞生长缓慢，B不符

合题意；

C、血清经过高温处理后，其中活性成分变性，失去原有功能，细胞生存环境严重恶化，可能使细胞生长缓

慢，C不符合题意；

D、小鼠内环境为弱碱性，所使用的培养基呈弱酸性，使细胞生存环境恶劣，可能造成细胞生长缓慢，D不

符合题意。

故选A„

10.（2022・江苏•统考高考真题）下图表示利用细胞融合技术进行基因定位的过程，在人-鼠杂种细胞中人的

染色体会以随机方式丢失，通过分析基因产物进行基因定位。现检测细胞I、II、III中人的4种酶活性，

只有n具有芳烧羟化酶活性，只有山具有胸背激酶活性，I、ill都有磷酸甘油酸激酶活性，I、n、ni均

有乳酸脱氢酶活性。下列相关叙述正确的有（）

保留的人IIIm

类染色体X,112,11X,11,17

A.加入灭活仙台病毒的作用是促进细胞融合

B.细胞I、II、HI分别为人-人、人-鼠、鼠-鼠融合细胞

C.芳煌羟化酶基因位于2号染色体上，乳酸脱氢酶基因位于11号染色上

D.胸背激酶基因位于17号染色体上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色体上

【答案】ACD

【分析】分析题干信息：I保留X、11号染色体，II保留2、11号染色体，具有芳烧羟化酶活性，III,保

留X、11、17号染色体具有胸昔激酶活性，I、III都有磷酸甘油酸激酶活性，I、II、III均有乳酸脱氢酶

活性，所以支配芳烧羟化酶合成的基因位于2号染色体上，支配胸背激酶合成的基因位于17号染色体上；

支配磷酸甘油酸激合成的基因位于X号染色体上；支配乳酸脱氢酶合成的基因位于11号染色体上。

【详解】A、动物细胞融合过程中，可以利用灭活的仙台病毒或聚乙二醇作诱导剂促进细胞融合，A正确；

B、细胞III中保留了人的X、H、17号染色体，故不会是鼠-鼠融合细胞，B错误；

CD、根据分析可知，芳燃羟化酶基因位于2号染色体上，乳酸脱氢酶基因位于11号染色上，胸背激酶基

因位于17号染色体上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色体上，CD正确。

故选ACD„

11.(2023.湖南.统考高考真题)某些植物根际促生菌具有生物固氮、分解淀粉和抑制病原菌等作用。回答

下列问题：

(1)若从植物根际土壤中筛选分解淀粉的固氮细菌，培养基的主要营养物质包括水和—。

(2)现从植物根际土壤中筛选出一株解淀粉芽抱杆菌H,其产生的抗菌肽抑菌效果见表。据表推测该抗菌肽

对的抑制效果较好，若要确定其有抑菌效果的最低浓度，需在________浓度区间进

一步实验。

抗菌肽浓度/(gg-mf1)

测试菌

55.2027.6013.806.903.451.730.86

金黄色葡萄球菌-----++

枯草芽抱杆菌-----++

禾谷镰抱菌-++++++

假丝酵母-++++++

注：“+”表示长菌，表示未长菌。

(3)研究人员利用解淀粉芽抱杆菌H的淀粉酶编码基因M构建高效表达质粒载体，转入大肠杆菌成功构建基

因工程菌A。在利用A菌株发酵生产淀粉酶M过程中，传代多次后，生产条件未变，但某子代菌株不再产

生淀粉酶M。分析可能的原因是(答出两点即可)。

(4)研究人员通过肺上皮干细胞诱导生成肺类器官，可自组装或与成熟细胞组装成肺类装配体，如图所示。

肺类装配体培养需要满足适宜的营养、温度、渗透压、pH以及—(答出两点)等基本条件。肺类装配体

形成过程中是否运用了动物细胞融合技术—(填“是''或"否”)。

肺上皮干细胞体细胞

।———J—............I筛选

I增殖分化II

0楼⑥

肺类器官A肺类器官BV'

|共培养||共培养|

繇

肺类装配体1肺类装配体2

(5)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)是一种耐药菌，严重危害人类健康。科研人员拟用MRSA感染肺

类装配体建立感染模型，来探究解淀粉芽胞杆菌H抗菌肽是否对MRSA引起的肺炎有治疗潜力。以下实验

材料中必备的是o

①金黄色葡萄球菌感染的肺类装配体②MRSA感染的肺类装配体③解淀粉芽抱杆菌H抗菌肽④生理

盐水⑤青霉素(抗金黄色葡萄球菌的药物)⑥万古霉素(抗MRSA的药物)

【答案】(1)无机盐、淀粉

(2)金黄色葡萄球菌和枯草芽抱杆菌1.73~3.45

(3)淀粉酶编码基因M发生突变；重组质粒在大肠杆菌分裂过程中丢失

(4)无菌、无毒环境，含95%空气和5%CC)2的气体环境否

(5)②③④⑥

【分析】动物培养的条件：

1、营养：在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分。

2、无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行灭菌处理以及在无菌环境下进行操作:定期更换培养液,

以便清除代谢产物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。

3、适宜温度、pH和渗透压：哺乳动物细胞培养的温度多为(36.5±0.5)℃；pH多为7.2~7.4；动物细胞培养

还需要考虑渗透压。

4、气体环境：02：细胞代谢所必需的；CO2：维持培养液pH。

【详解】(1)由题意可知，根际促生菌具有固氮作用，可利用空气中的氮气作为氮源，因此用于筛选根际

促生菌的培养基的主要营养物质包括水、无机盐和淀粉。

(2)由题表可知，在抗菌肽浓度为3.45-55.20ug-mL-i范围内，金黄色葡萄球菌和枯草芽抱杆菌均不能生长,

表明该抗菌肽对它们的抑菌效果较好；因为抗菌肽的浓度为L73Ng-mL」时，它们均能生长，所以要确定抗

菌肽抑菌效果的最低浓度，应在1.73〜3.45ng-mL1的浓度区间进一步实验。

(3)在利用A菌株发酵生产淀粉酶M过程中，传代多次后，生产条件未变，但某子代菌株不再产生淀粉

酶M,可能的原因是淀粉酶编码基因M