2025浙江省pcr上岗证考试题及答案

2025浙江省pcr上岗证考试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）1.PCR技术的基本原理是（）A.基因重组B.核酸杂交C.核酸复制D.蛋白质合成答案：C2.在PCR反应中，起引物作用的是（）A.dNTPB.Taq酶C.寡核苷酸D.模板DNA答案：C3.PCR反应的变性温度一般为（）A.90-95℃B.50-60℃C.70-75℃D.30-40℃答案：A4.以下哪种物质不是PCR反应体系的必需成分（）A.模板B.引物C.RNA酶D.缓冲液答案：C5.PCR产物的特异性取决于（）A.模板B.引物C.Taq酶D.dNTP答案：B6.用于检测PCR产物的常用方法是（）A.琼脂糖凝胶电泳B.蛋白质印迹C.酶联免疫吸附试验D.荧光定量答案：A7.在荧光定量PCR中，常用的荧光标记物不包括（）A.SYBRGreenB.TaqMan探针C.溴化乙锭D.分子信标答案：C8.PCR技术最早由（）发明。A.MullisB.WatsonC.CrickD.Sanger答案：A9.以下关于PCR循环次数的说法正确的是（）A.循环次数越多越好B.循环次数过少产物量不足，过多会产生非特异性产物C.循环次数与产物特异性无关D.固定为30次答案：B10.进行PCR实验时，防止污染的关键措施是（）A.严格分区操作B.增加循环次数C.提高反应温度D.使用大量模板答案：A二、多项选择题（每题2分，共10题）1.PCR反应体系包括以下哪些成分（）A.模板DNAB.引物C.Taq酶D.dNTPE.缓冲液答案：ABCDE2.影响PCR反应的因素有（）A.模板纯度B.引物设计C.酶的活性D.反应温度E.反应时间答案：ABCDE3.以下哪些属于PCR的应用领域（）A.疾病诊断B.基因分型C.法医鉴定D.基因克隆E.药物研发答案：ABCDE4.荧光定量PCR的优点包括（）A.特异性强B.灵敏度高C.能定量分析D.操作简便E.不需要模板答案：ABCD5.在PCR引物设计时，需要遵循的原则有（）A.长度合适B.避免二级结构C.特异性强D.引物间不能互补E.引物自身不能互补答案：ABCDE6.PCR产物可能出现假阳性的原因有（）A.污染B.引物设计不当C.退火温度不合适D.酶活性过高E.模板不纯答案：ABC7.以下关于Taq酶的说法正确的是（）A.耐高温B.具有5'-3'聚合酶活性C.具有3'-5'外切酶活性D.是PCR反应的关键酶E.容易失活答案：ABD8.琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物时，影响电泳结果的因素有（）A.琼脂糖浓度B.电压大小C.电泳时间D.缓冲液种类E.样品量答案：ABCDE9.在进行PCR实验室建设时，需要设置的功能区包括（）A.试剂准备区B.标本制备区C.扩增区D.产物分析区E.消毒区答案：ABCD10.以下哪些情况可能导致PCR反应失败（）A.模板量过少B.引物变质C.酶失活D.反应体系中存在抑制剂E.仪器故障答案：ABCDE三、判断题（每题2分，共10题）1.PCR只能扩增DNA，不能扩增RNA。（）答案：错误2.引物在PCR反应中可以无限期使用。（）答案：错误3.Taq酶的活性在整个PCR反应过程中保持不变。（）答案：错误4.只要有足够的模板，PCR就可以无限扩增产物。（）答案：错误5.荧光定量PCR只能检测DNA。（）答案：错误6.PCR反应中，退火温度越高，产物特异性越高。（）答案：错误7.所有的DNA聚合酶都可以用于PCR反应。（）答案：错误8.PCR实验室的不同功能区可以随意进出。（）答案：错误9.在PCR反应体系中，dNTP的浓度越高越好。（）答案：错误10.琼脂糖凝胶电泳时，DNA向正极移动。（）答案：正确四、简答题（每题5分，共4题）1.简述PCR技术的基本步骤。答案：PCR技术基本步骤包括变性（90-95℃，使模板DNA双链解开）、退火（50-60℃，引物与模板互补结合）、延伸（70-75℃，Taq酶催化合成新链），如此循环多次。2.说出至少三种PCR产物的检测方法。答案：琼脂糖凝胶电泳、荧光定量PCR、聚丙烯酰胺凝胶电泳。3.简述引物设计的重要性及原则。答案：引物设计重要性在于决定产物特异性等。原则有长度合适、避免二级结构、特异性强、引物间和自身不能互补等。4.在PCR实验中，如何避免污染？答案：严格分区操作，如试剂准备区、标本制备区等分开；使用一次性耗材；实验前后对仪器设备消毒等。五、讨论题（每题5分，共4题）1.讨论荧光定量PCR在新冠疫情防控中的作用。答案：荧光定量PCR可快速检测新冠病毒核酸，确定感染情况，用于大规模筛查、诊断患者、评估疫情传播等。2.阐述PCR技术在遗传病诊断中的应用。答案：可检测遗传病相关基因的突变、缺失等，有助于早期诊断、携带者检测、遗传咨询等。3.分析PCR