2026版高中汉水丑生生物-选3第一章第2节：微生物的培养技术及应用（二）

3.1.2微生物的培养技术及应用一微生物的基本培养技术3.1.2微生物的培养技术及应用二微生物的选择培养和计数筛选菌株的思路：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物的生长。是指允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。选择培养基：

例如，在培养基中加入_________，可用于选择培养真菌；在培养基中加入高浓度的盐水，可用于选择培养金黄色葡萄球菌；不加氮源的无氮培养基可用于选择培养_______生物；不加碳源的培养基可用于选择培养_______生物；以尿素为唯一氮源的培养基可用于选择培养______________；以纤维素为唯一碳源的培养基可用于选择培养_________________。抗生素固氮自养尿素分解菌纤维素分解菌选择培养基：是指允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。选择培养基

常用方法：________________法

①当样品的__________足够高时，培养基表面生长的___________，来源于稀释培养液中的____________；

②通过统计平板上的__________来推测样品中大约含有的活菌数。稀释涂布平板稀释度一个菌落一个活菌菌落数微生物的数量测定微生物的数量测定

思考1、1g土的体积约为___ml，10g土加入到90ml无菌水，相当于稀释了____倍。

思考2、假如104稀释度下涂布的3个平板的菌落数分别为42、40和38，则1ml稀释液中的菌株数为_________，104稀释度的试管中的菌株数为_________，102稀释度的试管中的菌株数为_________，101稀释度的锥形瓶中的菌株数为_________。101稀释度的试管中的菌株来自于10g土，所以1g土中的菌株数为_________。1014004*1034*1054*1074*1064ⅹ1074ⅹ1054ⅹ1044ⅹ1034ⅹ1074ⅹ1074ⅹ1054ⅹ1044ⅹ1034ⅹ107（2）计算公式：___g土中的菌株数=（C÷V）×MC：代表______________________V：代表_____________________M：______________1某一稀释度下平板上生长的平均菌落数涂布平板时所用的稀释液体积稀释倍数

注意事项：①为了保证结果准确，每个稀释度，一般设置____个平板，选择菌落数在___________的平板进行计数，并取_________。②统计的菌落数往往比活菌的实际数目_____。原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是____个菌落。因此，统计结果一般用_________而不是用_________来表示。③设置对照：主要目的是排除实验中_________因素对实验结果的影响，提高实验结果的_________。1g土（或1ml原始菌液）中的菌株数=（C÷V）×MC：代表___________________________________________V：代表___________________________________M：_____________某一稀释度下平板上生长的平均菌落数涂布平板时所用的稀释液体积稀释倍数330—300平均值低1菌落数活菌数非测试可信度微生物的数量测定血细胞计数板（厚、深）细菌计数板（薄、浅）统计微生物数量还可以用显微镜直接计数法微生物的数量测定血细胞计数板由一块厚玻璃片特制而成，其中央有计数室。计数室分为9个大方格，每个大方格的面积为________，加盖玻片后的菌液的深度为___________。因此，每个大方格的容积为_________。大方格又分为两种规格。规格I：1个大方格=16个中方格×25个小方格；规格II：1个大方格=25个中方格×16个小方格。1毫升=1cm3=1000mm3一个大方格的容积：0.1mm3=_______毫升1mm20.1mm0.1mm310-4

如果使用规格I的血细胞计数板，先统计位于角落的4个中方格中的总菌数，求得每个中方格的__________再乘以16，就得出一个大方格中的总菌数，然后再换算成1mL菌液中的总菌数。

如果使用规格II的血细胞计数板，先统计位于______________的5个中方格中的总菌数，求得每个中方格的___________再乘以_____，就得出一个大方格中的总菌数，然后再换算成1mL菌液中的总菌数。平均菌数中间和四角平均菌数25若使用规格II的血细胞计数板，5个中方格中总菌数为A，菌液稀释倍数为B，则细菌计数板菌落数尿素［CO(NH2)2］是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后，会被土壤中的某些细菌分解成____________，再转化为________________等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成_______。NH3和CO22NH3+CO2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数NO3—、NH4+脲酶土壤取样细菌适宜在酸碱度接近中性的潮湿土壤中生长，绝大多数分布在距地表3～8cm的土壤层。因此，取样时，一般要铲去表层土。样品稀释测定土壤中细菌的数量，一般需要1×104、1×105和1×106倍稀释进行平板培养。第一次做实验适当放宽，以保证能选取菌落数为30～300之间的平板。接种涂布平板的方法进行接种。设置对照。培养30～37℃培养1～2d，每隔24h菌落计数一次，选择菌落数目稳定时的记录作为结果。观察相同的培养条件下，同种微生物会表现出稳定的菌落特征。观察你分离得到的菌落，记录菌落特征（如形状、大小和颜色等）。中性潮湿唯一氮源104、105和106放线菌102、103和104时间温度菌落数目稳定培养时间不足平均值

操作提示：1、无菌操作：

①取土样的用具在使用前都需要灭菌。②应在__________________旁称取土壤，并在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中，塞好棉塞。③在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在酒精灯火焰旁操作。2、做好标记：

本实验使用的平板和试管比较多。为避免混淆，最好使用前就做好_________。

①培养皿的标记：注明__________、______________以及平板上培养样品的_____________等。

②试管的标记：将已经进行过稀释操作的试管，按稀释度递增的顺序，依次放在试管架的另一行。3、制定计划：对于耗时较长的生物实验，要事先制定计划，以便提高工作效率。酒精灯的火焰标记培养基种类培养日期稀释度在以尿素为唯一氮源的培养基中，只有能分解尿素的细菌才能利用尿素这种氮源来生长繁殖，并长出菌