2025年度肿瘤生物学与表观遗传学实验室安全考试试题（附答案）

2025年度肿瘤生物学与表观遗传学实验室安全考试试题（附答案）一、单项选择题（每题2分，共40分）1.肿瘤生物学实验室中常用的人源肿瘤细胞系（如HepG2、MCF-7）通常属于生物安全几级？A.BSL-1B.BSL-2C.BSL-3D.BSL-42.表观遗传学实验中常用的5-氮杂胞苷（5-aza-CdR）是一种DNA甲基转移酶抑制剂，其主要生物危害是？A.腐蚀性B.神经毒性C.致癌性与致突变性D.易燃性3.高压蒸汽灭菌器灭菌时，对于常规培养基（体积≤1L）的标准参数是？A.100℃，30分钟B.115℃，15分钟C.121℃，15-20分钟D.134℃，3分钟4.配制亚硫酸氢钠溶液（用于DNA甲基化检测）时，需在何种环境中操作？A.普通超净台B.化学通风橱C.生物安全柜Ⅰ级D.开放实验台5.实验室使用的γ-32P同位素标记dNTP属于放射性危害，其操作区域应张贴的警示标识是？A.生物危害标识B.腐蚀性标识C.电离辐射标识D.易燃液体标识6.处理过肿瘤细胞的移液枪头应如何处理？A.直接投入普通垃圾桶B.放入黄色医疗废物袋，高压灭菌后丢弃C.浸泡于75%乙醇中2小时后丢弃D.密封于专用锐器盒，高压灭菌后按医疗废物处理7.表观遗传学实验中常用的曲古抑菌素A（TSA，组蛋白去乙酰化酶抑制剂）需避光保存，其主要原因是？A.光照会导致分解失效B.光照会增强毒性C.光照会引发爆炸D.光照会改变颜色影响观察8.生物安全柜Ⅱ级A2型的工作原理是？A.仅保护操作者，不保护样本B.保护操作者和样本，部分气流外排C.完全密闭，气流全循环D.保护样本，不保护操作者9.实验室发生细胞培养液（含HepG2细胞）泼溅至实验台时，正确的处理流程是？A.立即用纸巾擦拭，再用75%乙醇消毒B.先用0.5%次氯酸钠覆盖10分钟，再用纸巾擦拭，最后用75%乙醇消毒C.直接用清水冲洗实验台D.用紫外线照射30分钟替代消毒10.配制含DMSO的细胞冻存液时，DMSO的主要作用是？A.提供营养B.降低冰点，减少冰晶损伤C.杀菌D.调节pH11.离心机操作时，以下哪项是错误的？A.对称放置离心管，确保重量差≤0.1gB.离心前检查转子是否安装牢固C.离心过程中若出现异常震动，立即打开机盖停止D.使用后清理转子腔，避免液体残留12.实验室存放的致癌剂（如二甲基亚硝胺）应如何管理？A.与普通试剂混放于试剂柜B.存于带锁的专用毒剧试剂柜，双人双锁管理C.存于冰箱冷藏层，无需特殊标识D.存于通风橱内，开盖放置13.进行慢病毒包装实验（表达致癌基因）时，应在几级生物安全实验室操作？A.BSL-1B.BSL-2C.BSL-3D.BSL-414.皮肤不慎接触到溴化乙锭（EB，核酸染料）后，正确的处理是？A.立即用大量清水冲洗，查看MSDS，必要时就医B.用酒精棉球反复擦拭至无颜色C.用氢氧化钠溶液中和D.无需处理，EB无危害15.实验室灭火器的种类选择需根据火灾类型，若发生细胞培养箱（含塑料、纸张）火灾，应使用？A.水基灭火器B.二氧化碳灭火器C.干粉灭火器D.泡沫灭火器16.液氮罐存取细胞冻存管时，需佩戴的防护装备是？A.普通乳胶手套B.防割手套C.低温防冻手套D.丁腈手套17.表观遗传学实验中使用的限制性内切酶（如HpaII，对甲基化敏感）需保存在？A.4℃冰箱B.-20℃冰箱C.-80℃冰箱D.室温18.实验室突发停电时，对于-80℃冰箱内的样本，正确的应对措施是？A.立即打开冰箱门检查样本B.记录停电时间，联系维修，尽量减少开门次数C.将样本转移至普通冰箱保存D.无需处理，-80℃冰箱可维持48小时低温19.进行动物实验（荷瘤小鼠模型）时，实验结束后处死小鼠的正确方法是？A.直接丢弃于垃圾桶B.二氧化碳窒息法，确认死亡后装入专用动物废物袋，高压灭菌后焚烧C.浸泡于福尔马林中保存D.冷冻后随意丢弃20.实验室安全色中，黄色代表？A.禁止、停止B.警告、注意C.指令、必须遵守D.提示、安全状态二、填空题（每空1分，共20分）1.肿瘤生物学实验室中，生物安全柜的日常使用需在开机预热______分钟后开始操作，操作结束后需运行______分钟并清洁消毒。2.表观遗传学实验常用的去垢剂（如SDS）属于______类危险化学品，其MSDS中“危险性概述”应包含______、______等信息。3.高压蒸汽灭菌效果的监测方法包括______（物理监测）、______（化学监测）和______（生物监测）。4.处理锐器（如接种环、针头）时，应使用______收集，禁止______或______。5.实验室化学品存放需遵循“______”原则，氧化剂与______类试剂需分开存放，挥发性酸（如盐酸）应存于______。6.慢病毒载体（含致癌基因）的操作需在______级生物安全柜中进行，实验废弃物需经______处理后丢弃。7.液氮罐的液面应保持在罐体容积的______以上，若液面过低需及时______，避免冻存管暴露于气相导致______。三、判断题（每题1分，共10分）1.为节省时间，可将未灭活的肿瘤细胞培养液直接倒入实验室下水道。（）2.配制试剂时，可将水倒入浓硫酸中稀释。（）3.生物安全柜内可以同时进行两种不同的肿瘤细胞操作，只要不交叉污染。（）4.放射性同位素使用后，需记录使用量、剩余量及废弃物处理情况。（）5.实验结束后，移液枪可直接放置于实验台，无需归位。（）6.皮肤被细胞冻存管（含DMSO）冻伤时，应立即用热水浸泡复温。（）7.实验室冰箱内可同时存放试剂和个人食品。（）8.使用离心机时，若离心管数量为奇数，可将一支空管对称放置以平衡。（）9.化学通风橱的有效操作区域是窗口高度≤20cm，操作时手臂应快速进出以减少暴露。（）10.实验室应急预案应包括火灾、化学品泄漏、生物暴露等场景的处理流程，并定期演练。（）四、简答题（每题6分，共30分）1.简述肿瘤细胞系（如HeLa细胞）的生物安全管理要点。2.表观遗传学实验中常用的DNA甲基化检测试剂（如亚硫酸氢钠）具有哪些危害？操作时需采取哪些防护措施？3.列举3种实验室常见的生物危害源，并说明其对应的处理原则。4.高压蒸汽灭菌器使用不当可能导致的风险有哪些？如何避免？5.实验室发生慢病毒（含致癌基因）泄漏至生物安全柜台面时，应如何应急处理？五、案例分析题（共20分）案例1（10分）：某研究生在配制亚硫酸氢钠溶液（用于DNA甲基化测序）时，不慎将溶液泼溅到左手背，局部出现红肿。请分析：（1）亚硫酸氢钠的主要危害是什么？（2）该研究生应立即采取哪些应急措施？（3）后续需完成哪些报告与记录？案例2（10分）：某实验室在进行荷瘤小鼠（移植人源乳腺癌细胞）的肿瘤组织取材时，实验员被解剖剪划伤手指，出血。请分析：（1）该场景可能的生物危害是什么？（2）正确的伤口处理步骤是什么？（3）实验室应如何预防此类锐器损伤事件？参考答案一、单项选择题1.B2.C3.C4.B5.C6.D7.A8.B9.B10.B11.C12.B13.B14.A15.C16.C17.B18.B19.B20.B二、填空题1.10-15；10-152.腐蚀/刺激；健康危害；环境危害3.温度压力表；化学指示卡/胶带；嗜热脂肪芽孢杆菌生物指示剂4.专用锐器盒；徒手捡拾；二次利用5.分类存放；还原剂；通风橱/酸柜6.Ⅱ；高压蒸汽灭菌（或化学灭活）7.1/3；补充液氮；细胞活性下降三、判断题1.×2.×3.×4.√5.×6.×7.×8.×9.×10.√四、简答题1.肿瘤细胞系生物安全管理要点：（1）细胞系来源需明确（ATCC或正规机构），禁止使用未知来源细胞；（2）操作在BSL-2级生物安全柜中进行，佩戴手套、口罩、护目镜；（3）细胞培养液、器械需经高压灭菌（121℃，20分钟）后处理；（4）建立细胞系档案，记录传代次数、支原体检测结果（每3个月检测1次）；（5）冻存细胞需标注名称、代数、冻存日期，存于-80℃冰箱或液氮罐（气相层）。2.亚硫酸氢钠危害与防护措施：危害：强腐蚀性（刺激皮肤、眼睛），遇酸释放有毒二氧化硫气体，长期接触可能致癌。防护措施：（1）操作在化学通风橱中进行，佩戴防酸碱手套（丁腈或氯丁橡胶）、护目镜、实验服；（2）配制时缓慢将亚硫酸氢钠加入水中（避免剧烈反应），禁止反向操作；（3）溶液需避光保存（用棕色瓶），标签标注“腐蚀性、有毒”；（4）泼溅时立即用大量水冲洗（15分钟以上），若入眼需用洗眼器冲洗并就医。3.常见生物危害源及处理原则：（1）人源肿瘤细胞（如MCF-7）：可能携带未知病毒或致癌因子，处理原则为高压灭菌后按医疗废物丢弃，操作在BSL-2安全柜中进行；（2）慢病毒载体（含致癌基因）：具有潜在感染性，处理原则为使用后用0.5%次氯酸钠浸泡30分钟，或高压灭菌；（3）实验动物（荷瘤小鼠）：可能传播人畜共患病（如鼠痘病毒），处理原则为处死时采用人道方法（二氧化碳窒息），尸体经高压灭菌后焚烧。4.高压蒸汽灭菌器风险与避免措施：风险：压力过高导致爆炸，灭菌不彻底（样本污染），烫伤（开启时蒸汽喷溅）。避免措施：（1）使用前检查压力表、安全阀是否正常，定期校准；（2）装载量不超过容积80%，物品间保留间隙（利于蒸汽循环）；（3）灭菌完成后待压力降至0、温度≤80℃再开启；（4）定期用生物指示剂（嗜热脂肪芽孢杆菌）验证灭菌效果。5.慢病毒泄漏应急处理：（1）立即停止操作，关闭生物安全柜风机，避免气流扰动；（2）佩戴双层手套、护目镜，用吸水纸覆盖泄漏区域，倒0.5%次氯酸钠（含1%SDS增强穿透力），静置30分钟；（3）用镊子移除污染的吸水纸，放入专用医疗废物袋，标注“慢病毒污染”；（4）用75%乙醇擦拭安全柜内壁及台面，开启紫外灯照射30分钟；（5）记录泄漏事件（时间、地点、处理过程），报告实验室安全负责人，必要时对暴露人员进行医学监测。五、案例分析题案例1：（1）亚硫酸氢钠的主要危害：强腐蚀性（导致皮肤化学灼伤），遇酸释放有毒SO₂气体，长期接触可能致癌。（2）应急措施：立即用大量流动清水冲洗患处15分钟以上，去除污染衣物；冲洗后用pH试纸检测皮肤表面是否中性，若仍有残留可使用弱碱性溶液（如碳酸氢钠）中和；观察红肿情况，若出现水疱或剧烈疼痛，立即就医并告知接触物质。（3）后续报告与记录：填写《实验室化学品暴露事件记录表》，包括时间、地点、接触物质、处理过程；报告导师及实验室安全管理员，由管理员联系EHS部门备案；保留亚硫酸氢钠的MSDS，供医疗人员参考。案例2：（1）生物危害：人源乳腺癌细胞可能携带潜在病原体（如病毒），或通过血液传播导致实验员感染（虽概率低但需警惕）；解剖剪可能被小鼠组织污染（含未知微生物）。（2