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文档简介
【分析】对限制酶选择条件:不能破坏目的基因和启动子、终止子,以便于目的基因和载体正确连接。【详解】(1)引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸。引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸,因此添加限制酶序列只能连接在5'端。(2)根据质粒上的限制酶切割位点可知,XbaⅠ和SpeⅠ会破坏抗性基因和终止子,只能选择HindⅢ和EcoRⅠ两种限制酶对抗病基因和质粒载体进行切割,且抗病基因的转录方向从右往左,所以抗病基因靠近启动子一端用HindⅢ切割,另一端用EcoRⅠ切割,故抗病基因左端产生EcoRⅠ的黏性末端,右端产生HindⅢ的黏性末端。(3)用农杆菌侵染香蕉组织块,其目的是通过农杆菌的转化作用,使目的基因进入植物细胞并整合到染色体DNA上,获得转基因植株。(4)植物组织培养需添加生长素和细胞分裂素两种关键性激素,它们的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向。(5)植物组织培养获得的转基因抗病香蕉需要进行个体生物学水平的鉴定,其做法是对培养的转基因抗病香蕉进行病原体接种实验,以确定导入的抗病基因是否赋予了香蕉抗病特性及抗性的程度。
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