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文档简介
一、工作简况
(一)任务来源
2021年11月1日,根据《国家卫生健康委法规司关于下达卫生健康标准体系升级改造
项目计划的通知》和《中国疾病预防控制中心关于落实卫生健康标准体系升级改造相关工作
的通知》要求,中国疾病预防控制中心下达了公共卫生标准体系升级改造项目。其中有17
项环境健康标准修订项目,《公共场所卫生检验方法第5部分:集中空调通风系统》被列
入该修订计划。
本文件是《公共场所卫生检验方法》(GB/T18204)系列标准的一个组成部分,本部分
文件为首次修订。
(二)起草单位和起草人
本标准由中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所负责,参加起草单位有内蒙
古自治区综合疾病预防控制中心、中国疾病预防控制中心卫生应急中心、江苏省疾病预防控
制中心、深圳市疾病预防控制中心。
本文件负责人是姚孝元,主要起草人基本情况见表1:
表1主要起草人基本情况表
姓名工作单位
姚孝元中国疾病预防控制中心环境所
潘力军中国疾病预防控制中心环境所
高昇内蒙古自治区综合疾病预防控制中心
王哲中国疾病预防控制中心卫生应急中心
丁震江苏省疾病预防控制中心
余淑苑深圳市疾病预防控制中心
张伟中国疾病预防控制中心环境所
李韵谱中国疾病预防控制中心环境所
郑磊中国疾病预防控制中心环境所
闫旭中国疾病预防控制中心环境所
石晓路深圳市疾病预防控制中心
杨文静中国疾病预防控制中心环境所
叶丹中国疾病预防控制中心环境所
张宇晶中国疾病预防控制中心环境所
(三)主要工作过程
2021年11月1日,中国疾病预防控制中心下发关于2021年度国家卫生健康标准环境
健康专业修订项目的通知,确定公共卫生标准体系升级改造项目中17项环境健康标准修订
项目,本文件涵盖其中。
2021年11月10日,环境健康标准专业委员会召开2021年度国家卫生健康标准修订启
动会。潘力军研究员代表标准起草组汇报了本项文件的修订计划及相关事宜。
2021年11月19日,标准起草组组织召开本标准修订起草组第一次会议,确定修订原
则,讨论原标准主要问题、修订内容、任务分工、工作进度等问题。
2021年11月24日,秘书处整理了《公共场所卫生检验方法第5部分:集中空调通风
系统》修订参考文件汇编。
2021年12月13日,标准起草组成员根据各自分工完成了文件正文及编制说明的编写,
秘书处进行了汇总整理,形成了文件文本和编制说明初稿。
2021年12月22日,标准起草组召开本标准修订起草组第二次讨论会议,起草组成员
对各自负责修订的标准内容进行了介绍并与参会专家进行了讨论,形成第二稿文件文本及
编制说明。
2022年1月15日,标准起草组对第二稿文件文本及编制说明进行修改,形成标准专家
论证稿。
2022年2月20日,秘书处对征求意见表中所有意见及处理情况进行了整理,共收
集到26家单位的专家意见53条。并对各位起草人修改后的文件正文和编制说明进行了
汇总整理。
2022年3月16日,秘书处组织召开了标准修订起草组第三次工作会议,对标准征
求意见表中存在争议内容进行了讨论,并确定了修改思路。本标准征求意见时间范围为
2022年1月25日至3月15日,标准征求意见稿分别在卫生标准网和中国疾控中心环境
所网站挂网征求意见,同时向生态环境、高等院校和科研院所以及各省、自治区、直辖
市及新疆生产建设兵团的疾病预防控制中心和卫生监督所等定向征求意见。本标准发函
征求意见34份,收到回函34份,征集到意见53条,其中采纳45条,部分采纳3条,
不采纳条5条。不采纳的意见主要是关于标准用词、嗜肺军团菌是否需要定量等方面的
内容。编制组对不采纳的意见进行了深入的讨论,结合现行的国家和地方标准,对于不
采纳的意见均已经给予了充分的回复理由。秘书处按照会议讨论结果,统一对文件正文、
编制说明进行了修改完善。
2022年3月23日,参加了环境健康标准专业委员会组织的第一次会审会议。本标
准顺利通过审查,本文件在环境卫生标委会评审过程中,专家提出的修改意见共35条,
主要内容包括:准确描述前言中主要技术内容变化;术语和定义、仪器和设备、检测方
法及文本结构与系列标准保持统一;补充采样和检测人员的防护要求;按预审要求规范
文本描述,如3.4化学式中数字应下标。
经编制组成员充分讨论,采纳或部分采纳了上述意见31条意见,未采纳4条。并
对标准条文进行了修改。起草组根据会审意见对文件正文和编制说明进行了修改完善,
形成报批稿提交秘书处。
2022年7月15日,参加中国疾控中心卫生标准处召开的协调性审查会议,本文件
在审查过程中,专家提出的修改意见共39条,主要内容包括:术语和定义部分文字内
容调整、检测方法及文本结构与系列标准保持统一;补充采样和采样人员的防护要求等;
经编制组成员充分讨论,采纳或部分采纳了上述意见39条意见,未采纳0条。按
照专家意见修改完善标准报批稿、编制说明、征求意见表等相关材料,并上报。
(四)国家标准主要起草人及其所做的工作
标准主要起草人及其任务分工见表2。
表2主要起草人及其任务分工
任务工作内容负责人
总体协调、任务分工姚孝元、潘力军
编写空调冷却水、冷凝水中的嗜肺军团菌以及空调送风中嗜余淑苑、高昇、
嗜肺军团菌
肺军团菌检测方法文本及对应编写说明材料石晓路
空调系统新风量、空调
送风中可吸入颗粒物编写空调系统新风量、可吸入颗粒物(PM10)和风管内表面
丁震、郑磊
PM10和空调风管内表面积尘量检测方法文本及对应编写说明材料
积尘量
空调送风中细菌总数、
编写空调送风中细菌总数、真菌总数和β-溶血性链球菌检
真菌总数、β-溶血性链张伟、王哲
验方法文本及对应编写说明材料
球菌
编写空调系统净化消毒装置各参数检验方法文本及对应编
空调系统净化消毒装置潘力军、李韵谱
写说明材料
闫旭、杨文静、
汇总标准文本汇总专家组文本内容,完成标准文本及编制说明的撰写
叶丹、张宇晶
二、国家标准编制原则和确定国家标准主要内容(如技术指标、参数、公式、性能要求、试
验方法、检验规则等)的论据(包括试验、统计数据),修订国家标准时,应增列新旧
国家标准水平的对比
(一)国家标准编制原则
1.贯彻国家的有关方针、政策、法律、法规。
2.积极采用国际标准和国外先进标准。
3.坚持技术先进性原则。为推动公共场所检验检测技术发展,新增了嗜肺军团菌定量
检测方法和荧光PCR法,进一步提高了公共场所与军团病有关的突发公共卫生事件
的处置能力。
4.系统性原则。对集中空调系统的物理因素、化学污染物和微生物指标的检测方法都
进行了规定,对嗜肺军团菌等与人群健康紧密相关的微生物指标提出定量检测方法
和快速检测方法,构成了完整的集中空调卫生监测方法体系,便于第三方检测机构
和相关监管部门工作人员使用。
5.配套性原则。检验方法与卫生限值要求相配套,增加了嗜肺军团菌的快速检测方法,
并将先进与传统实验室培养法相结合,适应第三方检测机构和相关监管部门不同需
求。
6.实用性原则。同一指标保留原有检验方法,如嗜肺军团菌有培养法和荧光PCR法两
种检测方法。
(二)标准体系
本次修订的GB/T18204《公共场所卫生检验方法》包括:
第1部分:物理性指标;
第2部分:化学性指标;
第3部分:空气微生物指标;
第4部分:公共用品用具微生物指标;
第5部分:集中空调通风系统;
第6部分:卫生监测技术规范。
本部分为第5部分集中空调通风系统。
(三)确定国家标准主要内容的论据
1.范围
本文件规定了公共场所集中空调通风系统中嗜肺军团菌、细菌总数、真菌总数、送风中
-溶血性链球菌、新风量、空调送风中可吸入颗粒物(PM10)、空调风管内表面积尘量的检
验方法以及空气净化消毒装置的检测方法。
本文件适用于公共场所集中空调通风系统,其他场所使用的集中空调通风系统可参照执
行。
2.规范性引用文件
本文件依据GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规
则》给出的规则补充了规范性引用文件,所列规范性引用文件构成本标准必不可少的条款,
规范性引用文件主要为各项标检测方法所需执行的我国现行国标要求,具体引用文件为:
GB4789.28食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T18204.1公共场所卫生检验方法第1部分:物理性指标
GB/T18204.2公共场所卫生检验方法第2部分:化学性指标
GB/T18883室内空气质量标准
GB19489实验室生物安全通用要求
GB/T34012通风系统用空气净化装置
3.术语和定义
增加术语和定义部分内容,对细菌总数、真菌总数、-溶血性链球菌和嗜肺军团菌给
出了明确定义。
4.嗜肺军团菌
本次修订保留培养法,同时新增嗜肺军团菌的定量检测方法和荧光PCR快速检测法的内
容。原标准中的检测方法—培养法被认为是检验嗜肺军团菌的金标准,但存在局限性:
1)培养时间长,需要不同的试剂和培养基,检测成本高;
2)效率低,敏感性仅为50%-80%;
3)冷却塔水等人工水体属寡营养环境,且多处于低温状态或含有消毒剂,在此环境下
嗜肺军团菌会进入“活的不可培养状态(viablebutnonculturablestate,VBNC状态),
培养法无法检测活的VBNC军团菌;
4)对实验人员技术要求较高,定量检测时需要实验人员有较丰富的经验。
近年来,常用于集中空调中嗜肺军团菌的检测方法还有分子生物学检测,因其具有简便、
快速、经济等优点,在实时监控和及时预警上具有很大的优势,如普通PCR法、荧光PCR
法、EMA+qPCR法等。普通PCR法操作简便、快速,但敏感性较差,并且只能对军团菌进行
定性检测。荧光PCR法(qPCR)是在常规PCR法的反应体系中加入荧光基因,具有定性和定
量的优点,速度快耗时短,且特异度高,提高了军团菌的检出率,该方法也是除了细菌培养
法外唯一一项写入ISO技术规范的军团菌属和/或嗜肺军团菌检测标准。但是,该方法通过
检测DNA来检测军团菌,包括无致病性的死菌,可能导致假阳性的出现。EMA+qPCR法是用
于定量检测军团菌活菌的检测方法,EMA可以抑制死菌的PCR扩增,从而定量检测样品中军
团菌活菌浓度,但该方法在国内外均未标准化,方法技术尚不成熟。各种方法优缺点对比见
表3。
表3各种实验室检验方法优缺点比较
实验室检测方法优点缺点
培养法可以检测出所有军团菌,结果可靠。敏感性低,可能低估样本军团菌浓度;培
养时间长;无法检测活着的不可培养状态
(VBNC)的军团菌;对实验人员技术要求
较高
常规PCR法操作简便、快速,检出率相对较高敏感性较差,并且只能对军团菌进行定性
检测
荧光PCR法具有定性和定量的优点,特异性强,速无法区分活菌和死菌,可能导致假阳性
度快耗时短,且特异度高,提高了军团
菌的检出率
EMA+qPCR法具有定性和定量的优点,特异性强,速方法技术未标准化,尚不成熟
度快耗时短,提高了对有致病潜力的菌
株检测的准确性
由表3可见,培养法仍然是军团菌检测的金标准,也是仲裁法。分子生物学能够快速确
认军团菌的类型,可用于环境样品中嗜肺军团菌的初筛和可疑的嗜肺军团菌菌落的快速鉴定,
能够极大地提高与军团菌有关的突发公共卫生事件的处置效率,但是存在敏感性较差,无法
区分活菌和死菌等问题,不能取代培养法。同时,为了定量化评估嗜肺军团菌的健康风险,
本次修订在培养法中增加了嗜肺军团菌的定量检测方法和计算公式,以进一步提高军团病防
控的科学性和准确性,也为下一步军团菌卫生限值的确定提供依据。
5.细菌总数
(1)调整表述方式
将培养温度35℃~37℃统一修改为36℃±1℃。
调整营养琼脂的制备方法:将蛋白胨、氯化钠、牛肉浸膏加热溶于蒸馏水中,调节pH
值为7.4±0.2,加入琼脂,121℃15min灭菌后,待冷却至50℃左右,以无菌操作每皿
倾注15mL培养基于直径为90mm的平皿中备用。
(2)增加操作过程细节描述
增加:将采集细菌后的营养琼脂平皿倒扣置于36℃±1℃。培养48h,观察计数结
果。
(3)补充实验方法原理部分内容。
增加“5.1原理”章节。
(4)补充有关质量控制的内容
增加“5.8质量控制”章节。
6.真菌总数
(1)调整表述方式
送风样品:将采集真菌后的沙氏琼脂平皿倒扣置于28℃±1℃培养箱中培养5d,逐
日观察并于第5天记录结果。若真菌数量过多可于第3天计数结果,并记录培养时间。
风管内表面积尘样品:将积尘样品稀释接种后的沙氏琼脂平皿倒置温度为28℃±1℃
培养箱中培养5d,逐日观察并于第5天记录结果。若真菌数量过多可于第3天计数结果,
并记录培养时间。
调整沙氏琼脂平板的制备方法:将蛋白胨、葡萄糖加热溶于蒸馏水中,调节pH值为
5.5~6.0,加入琼脂,115℃,15min灭菌后,待冷却至50℃左右,以无菌操作每皿倾注
15mL培养基于直径为90mm的无菌平皿中备用。
(2)补充实验方法原理部分内容。
(3)增加操作细节
将采集真菌后的沙氏琼脂培养基平板“倒扣”置于28℃培养5天,逐日观察并于第5
天记录结果。若真菌数量过多可于第3天计数结果,并记录培养时间。
(4)补充实验方法原理部分内容。
增加“6.1原理”章节。
(4)补充有关质量控制的内容
增加“6.8质量控制”章节。
7.空调送风中-溶血性链球菌
(1)调整表述方式
将培养温度35℃~37℃统一修改为36℃±1℃。
(2)补充有关质量控制的内容
增加7.7质量控制章节。
(3)增加操作细节
细化培养基的制备方法:将蛋白胨、氯化钠加热溶解于蒸馏水中,调节pH值为7.4~
7.6,加入琼脂,121℃15min灭菌。待冷却至50℃左右,以无菌操作加入脱纤维羊血,
缓慢摇匀后以无菌操作倾入无菌平皿(每平皿约15mL),水平放置待其凝固后备用。
8.空调系统新风量
本次修订空调系统新风量检测方法不做变更,继续延用GB/T18204.1《公共场所卫生
检验方法第1部分:物理性指标》中规定的风管法。
9.空调送风中可吸入颗粒物PM10
本次修订空调送风中可吸入颗粒物PM10检测方法不做变更,保留GB/T18204.5《公
共场所卫生检验方法第5部分:集中空调通风系统》中5规定的可见光光散射法。增加了
使用可见光光散射法原理符合GB/T18204.5标准的直接读数光散射式粉尘仪检测方法。
10.空调风管内表面积尘量
本次修订空调风管内表面积尘量采样和检测方法不做变更,保留GB/T18204.5《公
共场所卫生检验方法第5部分:集中空调通风系统》中10规定的称重法。对原标准中重量
与质量用词不规范的地方进行了修订。
11.空调系统净化消毒装置
方法与检测指标物质总体未做调整,调整部分章节内容。
调整内容:
(1)本法规定空调系统空气净化消毒装置释放的TVOC浓度的测定采用GB/T18883
附录C热解吸/毛细管气相色谱法。
(2)部分章节调整参数单位显示为:
Psi——装置前测定断面空气平均静压,单位为帕(Pa);
Ps0——装置后测定断面空气平均静压,单位为帕(Pa);
∑△h——装置前测定断面到装置入口及装置出口到后测定断面的管道阻力之和,单位
为帕(Pa)。
(3)部分章节,补充“粒径几何标准差”数值显示单位“≤1.1m”。
(4)调整部分章节的显示单位
3
Ci——i=1或2,分别为上下游PM10平均质量浓度,单位为毫克每立方米(mg/m);
m——检测断面上的测点数,m=3~5个;
n——每个测点的测定次数,n=3次;
3
Ckj——第j个测点第k次测定值,单位为毫克每立方米(mg/m)。
(5)新增参数单位
η——PM10一次通过净化效率,单位为百分数(%);
3
C1——空气净化消毒装置上游PM10平均质量浓度,单位为毫克每立方米(mg/m);
3
C2——空气净化消毒装置下游PM10平均质量浓度,单位为毫克每立方米(mg/m)。
三、主要试验(或验证)的分析、综述报告,技术经济论证,预期的经济效果
中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所和深圳市疾控中心联合建立了荧光
PCR方法检测嗜肺军团菌,于2014年11月分别在辽宁省疾病预防控制中心、杭州市疾病预
防控制中心、无锡市疾病预防控制中心开展方法验证。三家疾控中心的验证结果均符合预期,
证明了荧光PCR方法具有初筛和快速确认的功能,可以用于快速定性检测嗜肺军团菌。本标
准修订过程中引用该项目中荧光PCR的引物和探针及扩增体系,用于定性判断集中空调通风
系统是否存在嗜肺军团菌的污染。
四、采用国际标准和国外先进标准的程度,以及与国际、国外同类标准水平的对比情况,或
与测试的国外样品、样机的有关数据对比情况
1.空调冷却水、冷凝水中嗜肺军团菌
本次修订广泛收集了国内外发布的检验方法及发表的文献资料。相关国际标准有:
(1)ISO
ISO/TS12869:2012《Waterquality-detectionandquantificationofspp.and/or
byconcentrationandgenicamplificationbyquantitativepolymerasechain
reaction(qPCR)》,该方法应用qPCR法检测军团菌。PCR分三个阶段进行:首先通过过滤
浓缩水样,然后从过滤器中提取DNA,最后对一个或多个特定DNA序列的扩增、检测和量
化,并通过实时qPCR检测军团菌属和/或嗜肺军团菌属。
①ISO11731—2017《Waterquality—EnumerationofLegionella》,适用于各种
水样,包括饮用水、工业、废水和天然水域,也可用于与水相关的基质,例如生物膜、沉积
物等。该标准根据样品的来源/特征(待测样品军团菌浓度水平)对水样中的军团菌选择性
进行膜过滤浓缩、稀释或直接培养处理,随后经过热处理、酸处理后,将处理和/或未处理
样品转移到选择性培养基(BCYE+AB/GVPC/MWY)上进行培养和菌落观察,并进一步接种
到BCYE和BCYE-CYs琼脂平板进行验证。最后依据ISO8199《Waterquality—General
guidanceontheenumerationofmicroorganismsbyculture》的计算方法估计原始水样
中军团菌的菌落形成单位数。
(2)澳大利亚
①AS3896—2017《Waters—ExaminationforLegionellaspp.includingLegionella
pneumophila》该标准适用于所有的水样,包括对娱乐,工业,废水和天然水中嗜肺军团菌
进行分离与检验。样本经过热处理或酸处理或不经任何处理,然后接种到BMPA/BCYE+AB和
MWY/GVPC琼脂平板上,通过细菌培养后经过细菌观察,进一步挑选可疑菌落接种到BCYE琼
脂平板和BCYE-CYs/BA琼脂平板,凡在BCYE琼脂平板上生长而在BCYE-CYs/BA琼脂平板不
生长的则为军团菌菌落,必要时进一步开展菌型确定。
②AS5132—2017《Waters—ExaminationforLegionellaspp.includingLegionella
pneumophila-Usingconcentration》,该标准适用于微生物负荷低的水样,其与AS3896
—2017的区别是样品先经过膜过滤技术和再悬浮(包括涡旋和超声)使样品浓缩后再经AS
3896—2017中的程序对水样中嗜肺军团菌进行分离与检验。
(3)美国
①ANSI/ASHRAEStandard188—2021《Legionellosis:RiskManagementforBuilding
WaterSystems(ANSIApproved)》规定了建筑用水系统的最低军团菌病风险管理要求,其
中涉及冷却塔和蒸发冷凝器。该标准中对环境水样的军团菌检测程序未作具体说明,只规定
开展微生物检测需根据ISO/IEC17025:2017《Generalrequirementsforthecompetence
oftestingandcalibrationlaboratories》等国家或国际认可的标准要求进行。
②ASTMD5952-08《StandardGuidefortheInspectionofWaterSystemsfor
LegionellaandtheInvestigationofPossibleOutbreaksofLegionellosis
(Legionnaires'DiseaseorPontiacFever)》为水系统军团菌检查和军团菌病(军团病或
庞蒂亚克热)可能爆发调查的标准指南,该标准规定了采样程序及要求,包括冷却塔水样品
至少收集10到100mL,在样品采集之前或之后立即测量水温。如果温度计与样品水接触,
则在两次采样之间用70%酒精擦拭温度计并风干,或使用其他合适的消毒剂。在样品收集时
可以添加硫代硫酸钠以中和残留的游离余氯并防止样品运输和储存过程中继续杀菌作用。样
品应在采集后24h内到达实验室。并在收到后24h内(最好在收集后48h内)进行处理。
自采集之日起72h内无法处理的样品应冷藏。该标准未对检测程序作出规定,但提出环境样
品中军团菌可以通过三种方法检测:细菌培养法、直接免疫荧光抗体染色(DFA)法和PCR
法,并指出DFA和PCR比细菌培养耗时短,但是,细菌培养提供了关于细菌活力的信息(感
染所必需的),并允许细菌表征调查和来源识别(爆发所必需的),且DFA法无法区分死菌
和活菌,也可能染色其他细菌,而PCR法则可能因样品存在PCR抑制剂或干扰物质而影响结
果。因此细菌培养法仍是检测军团菌的标准或主要实验室方法,其特异性为100%,但灵敏
度随水源和样品处理而变化。
(4)英国
BS7592-2008《SamplingforLegionellabacteriainwatersystems.Codeof
practice》:该标准为水和相关材料的取样提供建议和指导,以确定军团菌属生物的存在,
适用于常规监测和暴发调查采样。包括对采样点的选择、采样时间、样本量(一般为50-100
mL)和采样步骤等作出具体要求。其中,取样时要注意确保在打开样品瓶并浸入水中收集样
品时,样品瓶中所含的任何杀菌剂/中和剂不会丢失。因此,取样时用戴手套的手取下塞子
或盖子,确保没有任何东西接触瓶子或盖子的内部。将瓶子浸入水中时,长轴应保持大致水
平,但颈部略向上,以免中和剂流失;将瓶子快速浸入水面以下200mm到400mm之间,此
时瓶子向上倾斜,以便装满时立即取出。当瓶子密封应保留一点空隙,方便摇晃以确保中和
剂充分混合在水样中。其次,也可用无菌取样器取样后将水倒入样品瓶中。采样后尽快进行
实验室分析(24h内),避免受热和阳光照射,并保持在环境温度,注意低于6℃时可能
时军团菌进入VBNC状态,降低后续检出率。
(5)南非
SANS893-2-2018《Legionella-Part2:ThecontrolofLegionellainwatersystems》:
仅对采样和储存进行具体要求,包括样品应在取样后24h内进行分析,不得超过48h;运
输过程中应保持<20℃。检测方法和程序依据SANS11731《Waterquality-Detectionand
enumerationofLegionella》(同ISO11731)。
可见,培养法仍是国际上空调冷却水、冷凝水中嗜肺军团菌检测的金标准,而qPCR是
除了细菌培养法外唯一一项写入ISO技术规范的军团菌属和/或嗜肺军团菌检测标准。
Omiccioli等使用34株军团菌和16株非军团菌对这一方法进行了确认,并指出在军团菌检测
中,qPCR可取代培养法而不仅仅是作为替代选项[1]。因此,本次在保留培养法的基础上,
新增荧光PCR法用于嗜肺军团菌初筛和快速检测。
2.空调送风中的嗜肺军团菌
国际上有较多标准化的细菌采样和检测方法,用于测量环境空气中细菌浓度,但较少用
于军团菌的测定。
德国VDI4250BLATT2-2015《BioaerosoleundbiologischeAgenzien-
UmweltmedizinischeBewertungvonBioaerosol-Immissionen-Risikobeurteilungvon
legionellenhaltigenAerosolen》规定了测量气溶胶中军团菌的方法,并描述了这些生物
气溶胶的环境医学相关性。其应用撞击法进行采样,但同时提出可利用气溶胶的Coriolis
效应使用旋风分离器进行收集,但这种方法尚未得到标准化。后续定量检测使用培养法和
qPCR检测方法对气溶胶中军团菌进行联合检测。
五、与有关的现行法律、法规和强制性国家标准的关系
1.本文件编写格式依据GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的
结构和起草规则》给出的规则编写。
2.空调冷却水、冷凝水中嗜肺军团菌
我国现有的空调冷却(凝)水嗜肺军团菌的标准检验方法有:WS394-2012《公共场所
集中空调通风系统卫生规范》附录B集中空调系统冷却水、冷凝水中嗜肺军团菌检验方法、
DB11/T485-2020《集中空调通风系统卫生管理规范》附录F空调冷却(凝)水中嗜肺军团
菌检验方法和附录G冷却水中嗜肺军团菌血清1型(LP1)快速检测方法、DB31/T405-2021
《集中空调通风系统卫生管理规范》、DB32/T2720-2014《集中空调通风系统卫生管理规范》、
SN/T2770-2011《国境口岸军团菌荧光PCR检测方法》、HG/T4323-2012《循环冷却水中军
团菌的检测与计数》、SN/T2528-2010《饮用水中军团菌检测》,详见表4。
1)本次修订的标准主要依据WS394-2012《公共场所集中空调通风系统卫生规范》附
录B集中空调系统冷却水、冷凝水中嗜肺军团菌检验方法。该标准中对嗜肺军团菌的检验
方法都采用培养法,并进一步经生化培养和血清学实验鉴定确认的菌落为嗜肺军团菌。冷却
(凝)水采样量为500mL,培养时长约10d。该方法无法对水样品中的嗜肺军团菌进行定量
测定。
2)DB11/T485-2020《集中空调通风系统卫生管理规范》附录F空调冷却(凝)水中
嗜肺军团菌检验方法同GB/T18204.5-2013《公共场所卫生检验方法第5部分:集中空调通
风系统》。其中采样量更改为200mL,培养时长约10d。该方法同样无法对水样品中的嗜肺
军团菌进行定量测定。
3)DB11/T485-2020《集中空调通风系统卫生管理规范》附录G冷却水中嗜肺军团菌
血清1型(LP1)快速检测方法采用胶体金免疫层析法,以胶体金作为示踪标志物,运用抗
原抗体反应原理对冷却水中LP1进行定性分析。采样量为250mL-500mL的冷却水,培养时
长约10d。
4)DB31/T405-2021《集中空调通风系统卫生管理规范》、DB32/T2720-2014《集中
空调通风系统卫生管理规范》均参考GB/T18204.5-2013《公共场所卫生检验方法第5部分:
集中空调通风系统》。
5)SN/T2770-2011《国境口岸军团菌荧光PCR检测方法》规定了国境口岸军团菌荧光
PCR检验的对象、检测方法和结果报告,其中包括对疑似军团菌污染的集中空调通风系统冷
却水和冷凝水的检测。
6)HG/T4323-2012《循环冷却水中军团菌的检测与计数》依据GB/T6682-2008《分
析实验室用水规格和实验方法》(modISO3696:1987)、ISO11731-2:2004《水质军团菌
的检测和计数-2低菌数的直接膜过滤法》。也是采用培养法对军团菌进行检测。
7)SN/T2528-2010《饮用水中军团菌检测》采用培养法、血清学鉴定、PCR鉴定三种
方法。该标准中新增了PCR法,但方法是代替最后的生化实验,并没有减少BCYE培养时间
和实现BCYE平板上可疑菌落的精确筛选功能。
由此可见,培养法是普遍认可且应用广泛的检测方法。此方法中增菌培养可以使检测样
品中的嗜肺军团菌的数量增大,提高细菌分离阳性率,特异性为100%,且能检出所有的种
类。近年来,荧光PCR法也逐渐得到认可和标准化。因此,本次修订仍保留分离培养法,同
时新增荧光PCR法对嗜肺军团菌进行快速检测。
表4国标、行标、部分地标使用方法汇总
序号现行标准来源标准依据检验方法采样量培养时长
GB/T18204.5-2013《公共场所卫生检验方法第5卫生部2006年颁布实施的《公共场所集中空调通风系统细菌分离培养
1国家标准500mL10d
部分:集中空调通风系统》卫生规范》法
WS394-2012《公共场所集中空调通风系统卫生
细菌分离培养
2规范》附录B集中空调系统冷却水、冷凝水中卫生标准-500mL10d
法
嗜肺军团菌检验方法
DB11/T485-2020《集中空调通风系统卫生管理
(北京)地细菌分离培养
3规范》附录F空调冷却(凝)水中嗜肺军团菌-200mL10d
方标准法
检验方法
DB11/T485-2020《集中空调通风系统卫生管理
(北京)地250-500
5规范》附录G冷却水中嗜肺军团菌血清1型--10d
方标准mL
(LP1)快速检测方法
DB31/T405-2021《集中空调通风系统卫生管理(上海)地
6
规范》方标准
DB32/T2720-2014《集中空调通风系统卫生管(江苏)地
7
理规范》方标准
SN/T2770-2011《国境口岸军团菌荧光PCR检荧光PCR检测300-100
8行业标准WS/T230临床诊断中聚合酶链反应(PCR)技术应用2h
测方法》方法mL
GB/T6682-2008分析实验室用水规格和实验方法(mod
HG/T4323-2012《循环冷却水中军团菌的检测细菌分离培养100-100
9行业标准ISO3696:1987)、ISO11731-2:2004《水质军团菌的检10
与计数》法0mL
测和计数-2低菌数的直接膜过滤法》
细菌培养法、血
GB/T27403实验室质量控制规范、GB/T27405实验室质100-100
10SN/T2528-2010《饮用水中军团菌检测》行业标准清学鉴定、PCR10d
量控制规范食品微生物检测0mL
鉴定
11GB37488-2019《公共场所卫生指标及限值要求》国家标准参照《WS394-2012公共场所集中空调通风系统卫生规范》
3.空调送风中的嗜肺军团菌
目前我国现有的空调送风中嗜肺军团菌的标准检验方法有:WS394-2012《公共场所
集中空调通风系统卫生规范》附录G集中空调送风中嗜肺军团菌检验方法、DB31/T
405-2021《集中空调通风系统卫生管理规范》、DB32/T2720-2014《集中空调通风系统卫
生管理规范》,详见表4。
1)本次修订的标准主要依据WS394-2012《公共场所集中空调通风系统卫生规范附
录G集中空调送风中嗜肺军团菌检验方法》中对嗜肺军团菌的检验方法都采用液体冲击法,
配备微生物气溶胶浓缩器和液体冲击式微生物气溶胶采样器。采样空气量为1m3~2m3,培
养时长约10d。
2)DB31/T405-2021《集中空调通风系统卫生管理规范》、DB32/T2720-2014《集
中空调通风系统卫生管理规范》均参考本标准。
液体冲击法采样在国内已广泛应用,并得到普遍认可。其采集的微生物可在采样吸收液
中可均匀分布,并且对微生物的活性影响较小。另外,目前关于低浓度微生物气溶胶采集技
术的研究以及对采样器进行改进报道相对较少,且方法尚不成熟,也未广泛应用。因此,本
次修订保留液体冲击法作为空调送风中嗜肺军团菌的采集方法,并新增荧光PCR法进行嗜肺
军团菌的快速检测。
六、重大分歧意见的处理经过和依据
无。
七、国家标准作为强制性国家标准或推荐性国家标准的建议
本文件是GB37488《公共场所卫生指标及限值要求》和《公共场所集中空调通风系统
卫生规范》的配套标准检测方法,为公共场所集中空调通风系统相关卫生指标的监测和检测
提供重要技术支撑,建议为推荐性标准。
八、贯彻国家标准的要求和措施建议(包括组织措施、技术措施、过渡办法等内容)
本文件建议与GB/T18204《公共场所卫生检验方法》标准的其他部分同时颁布实施。
届时,应对相关人员进行标准解读、宣贯培训。(本文件需要使用单位有充分的过渡期,建
议发布后六个月实施,过渡期间,应当按照GB/T18204.5—2013标准实施)。
九、废止现行有关标准的建议
《公共场所卫生检验方法第5部分集中空调通风系统》对于提高公共场所卫生监测的
质量具有重要的意义。新修订的文件整合原标准中嗜肺军团菌、细菌总数和真菌总数的检测
方法,提出了嗜肺军团菌的定量检测方法和荧光PCR快速检测方法,提升公共场所集中空调
通风系统相关的突发公共卫生事件应急处置速度和能力。建议新修订的文件发布后尽快废止
原有的标准。
十、其他应予说明的事项
无。
GB/T18204.5《公共场所卫生检验方法
第5部分:集中空调通风系统》
编制说明
(报批稿)
标准编写组
2022年4月
一、工作简况
(一)任务来源
2021年11月1日,根据《国家卫生健康委法规司关于下达卫生健康标准体系升级改造
项目计划的通知》和《中国疾病预防控制中心关于落实卫生健康标准体系升级改造相关工作
的通知》要求,中国疾病预防控制中心下达了公共卫生标准体系升级改造项目。其中有17
项环境健康标准修订项目,《公共场所卫生检验方法第5部分:集中空调通风系统》被列
入该修订计划。
本文件是《公共场所卫生检验方法》(GB/T18204)系列标准的一个组成部分,本部分
文件为首次修订。
(二)起草单位和起草人
本标准由中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所负责,参加起草单位有内蒙
古自治区综合疾病预防控制中心、中国疾病预防控制中心卫生应急中心、江苏省疾病预防控
制中心、深圳市疾病预防控制中心。
本文件负责人是姚孝元,主要起草人基本情况见表1:
表1主要起草人基本情况表
姓名工作单位
姚孝元中国疾病预防控制中心环境所
潘力军中国疾病预防控制中心环境所
高昇内蒙古自治区综合疾病预防控制中心
王哲中国疾病预防控制中心卫生应急中心
丁震江苏省疾病预防控制中心
余淑苑深圳市疾病预防控制中心
张伟中国疾病预防控制中心环境所
李韵谱中国疾病预防控制中心环境所
郑磊中国疾病预防控制中心环境所
闫旭中国疾病预防控制中心环境所
石晓路深圳市疾病预防控制中心
杨文静中国疾病预防控制中心环境所
叶丹中国疾病预防控制中心环境所
张宇晶中国疾病预防控制中心环境所
(三)主要工作过程
2021年11月1日,中国疾病预防控制中心下发关于2021年度国家卫生健康标准环境
健康专业修订项目的通知,确定公共卫生标准体系升级改造项目中17项环境健康标准修订
项目,本文件涵盖其中。
2021年11月10日,环境健康标准专业委员会召开2021年度国家卫生健康标准修订启
动会。潘力军研究员代表标准起草组汇报了本项文件的修订计划及相关事宜。
2021年11月19日,标准起草组组织召开本标准修订起草组第一次会议,确定修订原
则,讨论原标准主要问题、修订内容、任务分工、工作进度等问题。
2021年11月24日,秘书处整理了《公共场所卫生检验方法第5部分:集中空调通风
系统》修订参考文件汇编。
2021年12月13日,标准起草组成员根据各自分工完成了文件正文及编制说明的编写,
秘书处进行了汇总整理,形成了文件文本和编制说明初稿。
2021年12月22日,标准起草组召开本标准修订起草组第二次讨论会议,起草组成员
对各自负责修订的标准内容进行了介绍并与参会专家进行了讨论,形成第二稿文件文本及
编制说明。
2022年1月15日,标准起草组对第二稿文件文本及编制说明进行修改,形成标准专家
论证稿。
2022年2月20日,秘书处对征求意见表中所有意见及处理情况进行了整理,共收
集到26家单位的专家意见53条。并对各位起草人修改后的文件正文和编制说明进行了
汇总整理。
2022年3月16日,秘书处组织召开了标准修订起草组第三次工作会议,对标准征
求意见表中存在争议内容进行了讨论,并确定了修改思路。本标准征求意见时间范围为
2022年1月25日至3月15日,标
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