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15F•Owen型甜菜细胞质类型快速鉴定技术2022-08-30发布本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定I0型系maintainerline4.2试剂4.2.150mmol/LEDTApH8.0(1L:800mlH₂0中加186.1gEDTANa₂·2H₂0,用NaOH调pH至8.0,定容至1L,灭菌)。4.2.250×TAE缓冲液(1L:500mlH₂O中加242gTris,溶解后加100ml10.5mol/LEDTApH8.0和57.1ml冰乙酸，定容)。2TR1:5'-AGAACTTCGATAGGCG选取拟鉴定甜菜生长期的新鲜幼嫩叶片，单株装入塑封袋，放入有冰袋的低将样品洗净擦干，称取0.5g,放入研钵，倒入液氮，迅速将样品研成粉末，装入1.ODzgo/OD2≈1.8(大于1.9,表明有RNA污染；小于1.6,表明有蛋白质、酚等污染)。对于纯的样品，只94℃预变性5min;95℃变性30s,57℃退火30s,72℃延伸1min,共30个循环；72℃进一3取PCR产物5μL,使用1%琼脂糖凝胶在1×TAE电泳缓冲液中电泳，电泳电压120V,电泳时长30min。用凝胶成像系统紫外光下检测电泳结果。8结果分析结果分析见图1所示是对部分材料进行PCR电泳检测部分结果，泳道M为DL2000Marker,泳道1、3、4、5、6条带位置在750bp,细胞质类型为N型，为具有保持能力0型材料；2、7、8、9、10、11、12条带位置在500bp,细胞质类型为S型，为CMS型材料，泳道1、2
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