DB46∕T 554-2021 油棕组培苗繁育技术规程

ICS65.020.20

CCSB61

46

海南省地方标准

DB46/T554—2021

油棕组培苗繁育技术规程

Technicalcodeofpracticeforpropagationofoilpalmtissuecultureseedling

2021-09-16发布2021-11-01实施

海南省市场监督管理局发布

DB46/T554—2021

目次

前言..........................................................................III

1范围................................................................................1

2规范性引用文件......................................................................1

3术语和定义..........................................................................1

4组培工厂要求........................................................................1

5培养基..............................................................................2

6胚性愈伤组织诱导培养................................................................2

6.1外植体采集与处理................................................................2

6.2外植体接种......................................................................2

6.3培养条件........................................................................2

6.4胚性愈伤组织诱导................................................................2

7体细胞胚诱导培养....................................................................2

7.1培养条件........................................................................2

7.2体细胞胚诱导....................................................................2

8次生胚团诱导与增殖培养..............................................................3

8.1次生胚诱导与增殖接种............................................................3

8.2培养条件........................................................................3

8.3继代周期........................................................................3

8.4次生胚团质量要求................................................................3

8.5继代培养代数....................................................................3

9丛芽诱导培养........................................................................3

9.1接种............................................................................3

9.2培养条件........................................................................3

9.3丛芽诱导........................................................................3

10生根培养...........................................................................3

11组培瓶苗筛除.......................................................................3

11.1组培瓶苗基本要求...............................................................3

11.2需淘汰的组培瓶苗...............................................................4

12瓶苗移栽与管理.....................................................................4

12.1设施...........................................................................4

12.2出瓶苗木规格...................................................................4

12.3育苗容器.......................................................................4

12.4育苗基质.......................................................................4

12.5育苗容器与基质的消毒...........................................................4

12.6栽植操作.......................................................................4

I

DB46/T554—2021

12.7移栽管理.......................................................................4

13袋装苗培育.........................................................................5

13.1苗圃地条件与设施...............................................................5

13.2育苗容器.......................................................................5

13.3育苗基质.......................................................................5

13.4移植...........................................................................5

13.5管护...........................................................................5

13.6袋装苗筛除.....................................................................6

13.7出圃标准.......................................................................6

14苗木档案...........................................................................6

附录A（资料性）油棕侏儒株、直立株、宽节株形态..................................7

附录B（规范性）油棕组培苗各阶段培养基配方表....................................8

附录C（资料性）正常形态和异常形态的油棕瓶苗...................................10

附录D（规范性）油棕瓶苗移栽阶段病虫鼠害及其防治方法...........................11

II

DB46/T554—2021

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容有可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本文件由海南省林业局提出并归口。

本文件起草单位：中国热带农业科学院橡胶研究所。

本文件主要起草人：潘登浪、李炜芳、邹积鑫、曾精、曾宪海、林位夫、谢贵水、刘钊、李哲。

III

DB46/T554—2021

油棕组培苗繁育技术规程

1范围

本文件规定了油棕（ElaeisguineensisJacq.）组培苗繁育技术的术语和定义、组培工厂要求、

培养基、胚性愈伤组织诱导培养、体细胞胚诱导培养、次生胚团诱导与增殖培养、丛芽诱导培养、生

根诱导培养、组培瓶苗筛除、瓶苗移栽与管理、袋装苗培育、苗木档案等技术要求。

本文件适用于油棕组培苗的繁育。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文

件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用

于本文件。

LY/T1000容器育苗技术

LY/T1882林木组织培养育苗技术规程

LY/T2280林木种苗生产经营档案

LY/T2428杉木组织培养育苗技术规程

NY/T2306花卉种苗组培快繁技术规程

DB46/T316油棕种苗繁育技术规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

侏儒株juvenileform

叶片发育生长迟缓，持续无羽状复叶出现的植株，其形态见附录A中图A.1。

3.2

直立株uprightform

叶片与茎干夹角小，不弯曲，呈直立状的植株，其形态见附录A中图A.2。

3.3

宽节株wideinternode

小叶节间距离显著宽于同龄正常植株，其形态见附录A中图A.3。

4组培工厂要求

按照NY/T2306的相关规定执行。

1

DB46/T554—2021

5培养基

各阶段培养基配方按照附录B的规定执行，培养基配制及其灭菌方法按照LY/T1882的相关规定执

行。

6胚性愈伤组织诱导培养

6.1外植体采集与处理

6.1.1外植体采集

选择生长健壮、无病虫害、性状优良的成龄油棕植株为母株，并逐株编号。在一周内无雨时上午采

集外植体。取材前，铲除母株生长点附近一侧的叶片，用铲刀将纵向距生长点20cm～100cm的包裹在

多层叶鞘内的心叶连同外部叶鞘整段切下，剥除其最外2层叶鞘后，用75%酒精对其表面擦拭1遍，待其

表面干燥之后装入经75%酒精擦拭1遍并晾干的封闭容器内，带回实验室备用。

6.1.2外植体无菌处理

用湿布擦拭包裹着心叶的叶鞘段（见6.1.1）表面污垢，接着用75%酒精擦拭外层叶鞘及两端切口，

然后将心叶块置于超净工作台上，再用蘸75%酒精的纱布反复均匀擦拭外层叶鞘2min后，剥去外层，

依照此方法层层消毒，最后选留心叶块中较嫩的心叶块作为外植体。用刀将心叶块切分成长5cm～6cm

的小段并装入无菌组培瓶中备用。

6.2外植体接种

将经处理的心叶块（见6.1.2）切成长宽为1cm×2cm的薄片，接种到装有愈伤组织诱导培养基的

培养皿（直径为90mm）或250mL组培瓶中，每皿或瓶接种5片。

6.3培养条件

培养温度为（28±1）℃，光照条件为黑暗。

6.4胚性愈伤组织诱导

接种后，每60d更换1次愈伤组织诱导培养基，出现愈伤组织后，继代培养1～2次，获得淡黄色或

米色瘤状的胚性愈伤组织。

7体细胞胚诱导培养

7.1培养条件

培养温度为（28±1）℃；光照强度为3000lx，每天光照时间12h。

7.2体细胞胚诱导

将淡黄色或米色瘤状胚性愈伤组织（见6.4）转接到体细胞胚诱导培养基中，培养30d后，开始获

得体细胞胚。接种后每60d用体细胞胚诱导培养基继代培养未长体胚的愈伤组织1次。

2

DB46/T554—2021

8次生胚团诱导与增殖培养

8.1次生胚诱导与增殖接种

选未萌芽的初生胚（见7.2）接种到次生胚诱导与增殖培养基，在250mL培养瓶中接种5团。

8.2培养条件

培养条件同7.1。

8.3继代周期

体细胞胚接种到次生胚诱导培养基培养60d～90d后可形成次生胚团，次生胚团切成1cm团块转到

次生胚诱导与增殖培养基继续增殖培养，之后每30d继代一次。

8.4次生胚团质量要求

次生胚团乳白色或浅绿色，鲜亮；无褐化和水浸状；无污染。

8.5继代培养代数

次生胚团继代应控制在10代以内。

9丛芽诱导培养

9.1接种

将次生胚团增殖中产生的类似芽组织团切离次生胚团，转到芽诱导培养基，在250mL培养瓶中接

种5团。

9.2培养条件

培养条件同7.1。

9.3丛芽诱导

每60d更换培养基1次，培养180d左右形成丛生芽，丛芽中多数单芽具2～3片叶。将超过2片叶片

健壮的芽切离丛芽转入生根诱导培养，较小较弱的芽继续转到丛芽诱导培养基进行壮苗或废弃。

10生根培养

将长势健壮且具2片以上绿色全展叶片的芽切离丛芽，转接到生根培养基；250mL组培瓶每瓶接种

量为5～7个单芽或每支试管（规格18mm×200mm）接种一个芽；培养60d左右可获得生根苗；培养条

件为温度（28±1）℃，光照强度3000lx，每天光照16h。

11组培瓶苗筛除

11.1组培瓶苗基本要求

3

DB46/T554—2021

根、茎、叶形态正常（见附录C中图C.1），具3片全展叶，有次级侧根的生根苗可出瓶（管）移栽。

11.2需淘汰的组培瓶苗

组培瓶苗阶段有以下形态之一的苗应作淘汰：

——全展叶新叶比老叶小或大小相似，其形态见附录C中图C.2；

——叶片厚、肉质且硬脆，其形态见附录C中图C.3；

——植株顶端开花，其形态见附录C中图C.4；

——根肉质粗短且僵褐，无次级侧根，其形态见附录C中图C.5；

——假茎弯卷植株，其形态见见附录C中图C.6。

12瓶苗移栽与管理

12.1设施

炼苗移栽阶段的圃区宜建有可控温控光的温室，具双层以上可活动遮阳网，可通过活动遮阳网调

控光照强度；温室内宜设有苗床或可数字化调控温湿度的育苗箱，地面铺设园艺地布，安装有微喷系

统，排水良好。

12.2出瓶苗木规格

按11.1给出的要求。

12.3育苗容器

推荐育苗容器为32孔林木专用穴盘（54cm×28cm）或一次性塑料营养杯（8cm×8cm）。

12.4育苗基质

将腐熟椰糠和表土按体积比2:1混合均匀，填满育苗容器。

12.5育苗容器与基质的消毒

用50%百菌清可湿性粉剂或50%多菌灵可湿性粉剂1000倍液喷淋消毒育苗容器和基质。

12.6栽植操作

将瓶苗取出组培瓶或试管，用清水漂洗3次，再用50%多菌灵可湿性粉剂1000倍液消毒5min，轻轻

取出经消毒后的组培苗，将根部全部埋于基质中，基质埋至根与茎连接处上方大约1cm处，穴盘每孔

或每个营养杯栽植1株，栽植时避免根部损伤和弯折，栽植后淋透定根水。

12.7移栽管理

12.7.1环境条件

栽植后的环境条件管理按照表1的规定执行。

4

DB46/T554—2021

表1瓶苗移栽环境条件要求

栽植后时间温度光照空气湿度

15d～30d20℃～32℃遮光度均为75%的遮阳网双层遮荫75%

30d～60d20℃～32℃遮光度均为75%的遮阳网双层遮荫自然湿度

60d～90d20℃～32℃遮光度为50%的遮阳网单层遮荫自然湿度

12.7.2水肥管理

栽植30d内，结合环境和叶面保湿喷水，维持基质湿度；如植株叶片发黄，可叶面喷施尿素和磷

酸二氢钾（质量比为1∶3）混合物的稀释2000倍液。之后，结合基质补水，每2周淋稀释800～1000倍的

复合肥（15-15-15，氯离子的含量≤3.0%）溶液1次。

12.7.3病虫鼠害防治

期间有叶疫病、苗枯病、炭疽病、红蜘蛛、鳞翅目幼虫、蝗虫、蜗牛、鼠等危害。要求定期查看

苗木病虫鼠害发生情况，及时发现和防治。防治方法按附录D的规定执行。

13袋装苗培育

13.1苗圃地条件与设施

苗圃地条件要求按照LY/T1000的相关规定执行。相关设施主要是：圃区地面宜铺园艺地布，安

装有喷灌或滴管系统，排水良好。

13.2育苗容器

育苗容器规格为25cm×25cm，或根据育苗目标规格适当增减容器大小。

13.3育苗基质

表土或用炼苗移栽阶段育苗基质，配置方法按12.4给出的要求。

13.4移植

栽植前，用基质填满容器，并按90cm×90cm×90cm等边三角形排列方式，露天摆放成行。当总

全展叶5～6片时，将小苗从穴盘或营养袋中带土（尽量保持土球完整不散）取出，栽植于育苗容器中，

土球全部埋于基质中，每容器栽植1株，栽植后淋透定根水。

13.5管护

13.5.1水肥管理

及时查看基质湿度，表面发白即补水保湿。每30d～60d在容器内距离植株5cm处穴施复合肥

（15-15-15，氯离子的含量≤3.0%）50g～100g，施肥后淋水。施肥时应避免肥料粘在叶片上。

13.5.2杂草控制

每月人工拔除育苗容器中杂草，拔草后及时淋水。

5

DB46/T554—2021

13.5.3病虫鼠害防治

按照DB46/T316的规定执行。

13.6袋装苗筛除

随时淘汰以下形态的种苗：

——全展叶新叶比老叶小或大小相相似，树冠呈扁平状；

——叶片厚、肉质且硬脆；

——叶片锯齿状、部分小叶天然脱落；

——植株顶端开花；

——剔除侏儒株、直立株、宽节株。

13.7出圃标准

羽状复叶≥8片、苗高≥80cm、健壮无病虫害、容器未损坏且基质结团。

14苗木档案

苗木档案内容及其管理按照LY/T2280和LY/T2428的相关规定执行。

6

DB46/T554—2021

附录A

（资料性）

油棕侏儒株、直立株、宽节株形态

油棕侏儒株、直立株、宽节株形态分别见图A.1、图A.2、图A.3。

图A.1侏儒株图A.2直立株图A.3宽节株

A

7

DB46/T554—2021

附录B

（规范性）

油棕组培苗各阶段培养基配方表

油棕组培苗各阶段培养基配方见表B.1。

表B.1油棕组培苗各阶段培养基配方表

不同阶段培养基各成分用量

培养基成

培养基成分愈伤组织诱体胚诱导次生胚团诱导丛芽诱导培生根诱导

分类别

导培养基培养基与增殖培养基养基培养基

K2SO4（mg/L）990990990990

MgSO4·7H2O（mg/L）370370370370370

NH4NO3（mg/L）1650400400400400

大量

KH2PO4（mg/L）170170170170170

元素

KNO3（mg/L）1900

CaCl2（mg/L）332.2572.572.572.572.5

Ca(NO3)2·4H2（mg/L）556556556556

27.827.8527.8527.85

FeSO4·7H2O（mg/L）27.8

铁盐5

Na2-EDTA（mg/L）37.337.337.337.337.3

MnSO4·4H2O（mg/L）22.3

MnSO4·H2O（mg/L）22.422.422.422.4

KI（mg/L）0.83

微量CoCl2·6H2O（mg/L）0.025

元素ZnSO4·7H2O（mg/L）8.68.68.68.68.6

CuSO4·5H2O（mg/L）0.0250.250.250.250.25

H3BO3（mg/L）6.26.26.26.26.2

Na2MoO4·2H2O（mg/L）0.250.250.250.250.25

肌醇（mg/L）100100100100100

烟酸（mg/L）0.50.50.50.50.5

有机营

盐酸硫胺素（mg/L）0.11111

养成分

盐酸吡哆醇（mg/L）0.50.50.50.50.5

甘氨酸（mg/L）22222

8

DB46/T554—2021

表B.1油棕组培苗各阶段培养基配方表（续）

不同阶段培养基各成分用量

培养基成

培养基成分愈伤组织诱体胚诱导培次生胚团诱导丛芽诱导生根诱导培养

分类别

导培养基养基与增殖培养基培养基基

萘乙酸（mg/L）2.0～10.00.1～0.50.1～5.0

2,4-二氯苯氧乙酸

2.0～10.00.1～1.00.1

植物生长（mg/L）

调节剂噻苯隆（mg/L）2.0～10.0

6-苄基腺嘌（mg/L）1.0～2.0

多效唑（mg/L）1

吸附剂活性炭（mg/L）500～1000500～2000500～200010001000

有机附

椰汁（ml/L）200

加物

碳源蔗糖（g/L）303030～603030～60

凝固剂琼脂（g/L）6060606060

注：FeSO3·7H2O先与Na2-EDTA配制成络合物,在配制培养基时添加。

9

DB46/T554—2021

附录C

（资料性）

正常形态和异常形态的油棕瓶苗

正常形态和异常形态的油棕瓶苗分别见图C.1～C.6。

图C.1正常形态的瓶苗图C.2新叶比老叶小的瓶苗图C.3叶厚、肉质且硬脆的瓶苗

图C.4顶端开花的瓶苗图C.5根肉质粗短且僵褐的瓶苗图C.6假茎蜷曲的瓶苗

10

DB46/T554—2021

A

B

附录D

（规范性）

油棕瓶苗移栽阶段病虫鼠害及其防治方法

油棕瓶苗移栽阶段病虫鼠害及其防治方法见表D.1。

表D.1油棕瓶苗移栽阶段病虫鼠害及其防治方法

名称危害部位与症状防治措施

最早症状主要表现在芯叶基部，并造成叶基部腐烂，当枪