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文档简介

第1节培养基对微生物选择作用1/281.能说出培养基类型、用途和基本成份。2.比较消毒和灭菌区分。3.举例说明惯用消毒与灭菌方法。4.能记住培养基配制方法。5.研究培养基对微生物选择作用。2/28一二一、培养基制备1.培养基(1)概念培养基是人工配制适合微生物生长繁殖或积累代谢产物

营养基质,用以培养、分离、判定和保留各种微生物。(2)成份普通包含水分、碳源、氮源、微量元素和无机盐等。(3)种类培养基按物理状态可分为液体培养基和固体培养基。后者惯用琼脂做凝固剂。3/28一二2.培养基配制和灭菌(1)培养基制备包含配制和灭菌两大步骤。(2)配制关键:准确称量、调准pH、规范制作棉塞、彻底灭菌。(3)主要制作流程:称量→溶化→调pH→分装→加塞和包扎→灭菌→摆斜面及倒平板。(4)因为配制培养基各类营养物质和容器等含有各种不一样微生物,配制好培养基必须马上灭菌,及时杀灭培养基中微生物,同时预防微生物大量繁殖造成培养基营养成份改变。(5)惯用灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。经过高压、高温蒸汽使菌体蛋白质凝固变性以到达灭菌目标。4/28一二思索:日常生活中牛奶在进入市场销售前要进行消毒,可采取哪种消毒方法呢?提醒:用巴氏消毒法对牛奶进行消毒,能够杀死牛奶中微生物,同时使牛奶营养成份不会被破坏。5/28一二二、培养基对微生物选择作用1.菌落微生物经过某种方法接种到适于生长固体培养基表面上,在适宜温度下培养一段时间后,单个菌体或孢子就能够生长繁殖成一个个肉眼可见细胞群体,称为菌落。2.培养基对微生物选择作用原理不一样种微生物对营养要求不一样,经过选择不一样培养基,人为控制培养基pH、碳源、氮源、渗透压等条件,使选择培养基利于某类或某种微生物生长,而不利于其它微生物生存,能够到达分离、培养不一样微生物目标。比如,细菌生长需要氮源高,pH中性或微碱性,所以培养细菌常采取牛肉膏蛋白胨培养基。酵母菌和霉菌生长所需碳源含量高,pH偏酸性,所以分离真菌常采取马铃薯葡萄糖琼脂培养基。6/28一二3.培养基对微生物选择作用意义在科研和生产实践中含有主要意义,它是分离和纯化不一样类型微生物基础。7/281.培养基成份与微生物生长所需营养

8/289/282.培养基类型及其应用

10/2811/283.配制培养基标准(1)目标要明确(2)营养要协调(3)pH要适宜4.消毒与灭菌比较二者区分:前者去除是部分微生物,后者去除是全部微生物。12/285.三种惯用灭菌方法比较

13/286.倒平板注意事项(1)培养基灭菌后,需要冷却到50~60℃后,才能用来倒平板。能够用手触摸盛有培养基锥形瓶,感觉锥形瓶温度下降到刚才不烫手时,就能够进行倒平板了。(2)倒平板前,要将装有培养基锥形瓶瓶口经过火焰灼烧,以预防瓶口微生物污染培养基。(3)平板冷凝后,需将平板倒置。平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后培养基表面湿度也比较高,将平板倒置,既能够使培养基表面水分更加好地挥发,又能够预防皿盖上水珠落入培养基,造成污染。(4)倒平板过程中,假如不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间部位,空气中微生物可能会在皿盖与皿底之间培养基上滋生,所以不要再继续使用这个平板培养微生物。14/28题型一题型二题型三题型四微生物营养【例题1】

以下关于微生物营养说法,正确是(

)A.同一个物质不可能既作碳源又作氮源B.凡是碳源都能提供能量C.除水以外无机物仅提供无机盐D.无机氮源也可能提供能量解析:对一些微生物来说,含C、H、O、N化合物既能够作为碳源,又能够作为氮源。CO2能够作为光能自养微生物碳源,但不能提供能量。CO2和N2是无机物,也能够分别作为微生物碳源和氮源。硝化细菌所利用氮源是无机氮源氨,同时氨也为硝化细菌提供用以化能合成作用能量。答案:D15/28题型一题型二题型三题型四易错警示含C、H、O、N化合物既能够作为一部分微生物碳源,又能够作为氮源;有机碳源能提供能量,无机碳源不能提供能量。16/28题型一题型二题型三题型四无菌操作相关技术【例题2】

细菌培养过程中分别采取了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几个不一样处理方法,这些方法依次用于杀灭哪些部位杂菌?(

)A.接种针、手、培养基 B.高压锅、手、接种针C.培养基、手、接种针 D.接种针、手、高压锅解析:高压蒸汽灭菌锅通惯用于培养基灭菌。用酒精擦拭双手能够进行消毒。火焰灼烧能够快速彻底地灭菌,适合用于微生物接种工具,如接种针。答案:C17/28题型一题型二题型三题型四反思领悟微生物培养过程中无菌操作包含消毒和灭菌两大类,各自含有不一样方法。应对试验操作空间、操作者衣着和手进行清洁和消毒;对用于培养微生物器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。18/28题型一题型二题型三题型四培养基制备【例题3】

以下关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基叙述,错误是(

)A.操作次序为称量、溶化、分装、调pH、加塞和包扎、灭菌、摆斜面及倒平板B.将配制培养基分装入试管或锥形瓶内C.待培养基冷却至50~60℃后,制成斜面或平板后备用D.配制好培养基必须马上灭菌解析:制备牛肉膏蛋白胨固体培养基操作次序是称量、溶化、调pH、分装、加塞和包扎、灭菌、摆斜面及倒平板。答案:A19/28题型一题型二题型三题型四选择培养基特点与应用【例题4】

氯苯化合物是主要有机化工原料,不易降解,会污染环境。某研究小组依照以下试验方案(图甲)筛选出能高效降解氯苯化合物微生物SP1菌。培养基配方以下表。20/28题型一题型二题型三题型四(1)配制Ⅱ号固体培养基时,除添加Ⅱ号液体培养基成份外,还应添加1%

(2)培养基配制时,灭菌与调pH先后次序是

。(3)从用途上来说,Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于

培养基和

培养基。在Ⅱ号培养基中,为SP1菌提供氮源成份是

(4)在营养缺乏或环境恶劣时,SP1菌体会变成一个圆形休眠体,这种休眠体被称为

21/28题型一题型二题型三题型四(5)将SP1菌接种在含不一样浓度氯苯Ⅲ号培养液中培养,得到生长曲线(图乙)。从图乙可知,SP1菌在

培养条件下最早停顿生长,其原因是

。22/28题型一题型二题型三题型四解析:(1)固体培养基必须含有适量琼脂。(2)配制培养基时应先调pH,后灭菌。(3)Ⅰ号培养基是为了取得更多菌株,属于通用培养基,Ⅱ号培养基是为了选择出SP1菌株,属于选择培养基,Ⅱ号培养基成份中含N物质为硝酸铵,则应由它为SP1菌株提供氮源。(4)在恶劣环境下,一些菌体会形成芽孢休眠体,以抵抗不良环境影响。(5)SP1菌株以氯苯为碳源,当氯苯耗尽时,菌株因缺乏碳源而不能继续生存,故氯苯含量越少,SP1菌株越早停顿生长。答案:(1)琼脂(2)先调pH,后灭菌(3)通用选择硝酸铵(4)芽孢(5)20mg/L氯苯碳源最早耗尽23/28123451.以下叙述错误是(

)A.微生物学试验普通都要求在无菌条件下进行B.细菌生长只需要氮源C.培养基配制包含配制和灭菌两大步骤D.不一样培养基对微生物选择作用是分离和纯化不一样类型微生物基础答案:B24/28123452.在微生物培养过程中,需要对培养基等进行灭菌,其标准是(

)A.杀死全部病原微生物B.杀死全部微生物C.杀死全部微生物细胞、芽孢和孢子D.使病原菌不生长答案:C25/28123453.以下相关培养基配制叙述,正确是(

)A.任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水B.碳源和氮源必须含有一定百分比,碳元素含量最多,其次为氮元素C.微生物生长除受营养原因影响外,还受到温度、pH、氧、渗透压等影响D.营养物质浓度越高越好答案:C解析:自养微生物培养基不需要加碳源,自生固氮菌培养基不需要加氮源。培养基中碳源和氮源必须含有一定百分比,但含量最多元素是氧。营养物质浓度并不是越多越好,浓度过

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