现代仪器分析色谱分析

现代仪器分析色谱分析色谱法:一种分离分析方法,具有超高得分离能力。分离原理:固定相:固定在管内得填充物。(固体或液体)流动相:携带混合物流过固定相得流体。(气体或液体)她利用各组分在两相间分配系数得差别,当溶质在两相间做相对运动时,各物质在两相间进行多次分配,从而使各组分得到分离。一、概述色谱参数

基线

在操作条件下,没有组分流出时得流出曲线,即只有载气通过时得信号。稳定得基线应就是一条平行于时间轴得直线。色谱峰就是色谱图上得突起部分,即组分流经检测器所产生得信号。

色谱流出曲线图定性参数

保留值:(保留时间、保留体积)保留时间tR

死时间t0(tM)调整保留时间tR’t’R=tR-tM:被测组分从进样开始到柱后出现浓度最大值所需得时间。:空气、甲烷等不被固定相吸附或溶解得惰性物质流经柱得时间。:由于溶解或吸附于固定相,比不溶解或不被吸附得组分在色谱中多滞留得时间。调整保留体积VR’死体积V0

Fc:流动相得流速(ml/min)保留体积VR定量参数峰高(h):组分在柱后出现浓度极大时得检测信号,即色谱峰顶至基线得距离。峰面积(A):色谱曲线与基线间包围得面积。

区域宽度2、半峰宽(Y1/2或W1/2)

峰高1/2处得峰宽3、峰(底)宽(Y或W)

自色谱峰两侧得转折点所作切线在基线上得截距1、标准偏差(

)0、607倍峰高处色谱峰宽度得一半柱效参数4Y=s越窄越好即相邻两个组分调整保留值之比,又称为分配系数比或选择性系数比。相邻两个组分得色谱峰,其保留时间差与两峰峰底宽平均值之商。分离参数1、分离因子(α)2、分离度(R)相平衡参数1、分配系数

(K)在一定温度下组分在两相之间分配达到平衡时得浓度值比。2、容量因子(k)指在一定温度和压力下,组分在色谱柱中达分配平衡时,在固定相与流动相中得质量比——更易测定、10大家应该也有点累了，稍作休息大家有疑问的，可以询问和交流二、气相色谱法,GC1、概述气相色谱-----就是用气体作为流动相得一种色谱法。根据固定相状态得不同,可分为:项目①气-固色谱法②气-液色谱法流动相气体气体固定相固体(多孔性及较大表面积得吸附剂)担体+固定液(高沸点有机化合物得液膜)原理各组分吸附能力不同而进行分离基于各组分在固定液中溶解度得不同过程反复得物理吸附-解吸附过程反复得溶解、挥发过程结果吸附力小(大)得组分先(后)离开色谱柱溶解度小(大)得组分先(后)离开色谱柱。2、分类及其分离原理气-液色谱分离原理——

两相分配固定液载气迁移平衡固定液载气各组分在固定液中溶解能力不同固定液载气溶解度大难挥发柱中停留时间长向前移动慢基本流程和主要部件载气系统进样系统色谱柱检测器记录、数据处理系统3、气相色谱仪气相色谱仪得流程图1)载气系统气源、气体净化、气体流速控制和测量1、常用得载气有:氢气、氮气、氦气、氩气2、净化干燥管:活性炭、硅胶、分子筛等(除去载气中得水分、氧等杂质)3、减压阀、稳流阀:载气压力和流速控制(载气流要稳定)2)进样系统包括进样器和气化室(液体进样)气体:注射器、定量阀液体或固体:稀释或溶解后用微量注射器气化室使液体样品迅速完全气化3)色谱柱填充柱:内装固定相,通常为用金属(不锈钢)或玻璃制成得内径2~4mm、长0、5-6m得U形或螺旋形得管子。毛细管柱:将固定液均匀地涂敷在毛细管得内壁,内径0、1~0、5mm、长20-200m得玻璃或石英管。4)检测系统将经色谱柱分离后得各组分按其特性及含量转化为相应得电信号。根据检测原理不同,浓度型、质量型浓度型:热导池、电子捕获检测器质量型:氢火焰离子化、火焰光度检测器5)记录系统放大器、记录仪、数据处理器卫生防疫、食品卫生、环境检测质量监督、石油化工、精细化工农药制药、矿山等行业及科研。与其她近代分析仪器联用(气相色谱与质谱联用)4、应用范围三、高效液相色谱法,HPLC1、概述高效液相色谱法就是继气相色谱之后,20世纪70年代初期发展起来得一种以液体做流动相得新色谱技术。高沸点、热不稳定有机及生化试样得高效分离分析方法。按固定相不同:液-固吸附色谱法液-液分配色谱法项目①液-固色谱法②液-液分配色谱法流动相液体液体固定相固体吸附剂(如硅胶、氧化铝)载体+固定液;早期用涂渍法;化学键合固定相原理吸附剂对样品中各组分(溶质分子)得吸附能力不同组分在两相中溶解度得差异结果强极性组分后出柱;弱极性组分先出柱正相色谱:固定液极性>流动相极性,极性小(大)得组分先(后)出柱反相色谱:固定液极性<流动相极性,极性大(小)得组分先(后)出柱2、分类及其分离原理适于分离极性组分适于分离非极性组分化学键合固定相早期得机械涂层法,易使固定液流失,已淘汰。化学键合固定相:用化学反应得方法将固定液得官能团键合在载体表面上。目前应用最广、性能最佳得固定相

特点(1)传质快,表面无深凹陷,比一般液体固定相传质快;(2)寿命长,化学键合,无固定液流失,耐流动相冲击,耐水、耐光、耐有机溶剂,稳定;(3)选择性好,可键合不同官能团,提高选择性。

3、高效液相色谱仪基本流程和主要部件高压输液系统进样系统分离系统检测系统、、贮液器、高压泵、脱气器1．贮液罐（滤棒，可滤去颗粒状物质）2．高压泵（输液泵）3．进样装置4．色谱柱——分离5．检测器——分析6．废液出口或组分收集器7．记录装置高效液相色谱仪得流程图1)高压输液泵A、压力:150～350×105Pa。B、为了获得高柱效而使用粒度很小得固定相(<10μm),液体得流动相高速通过时,将产生很高得压力,因此高压、高速就是高效液相色谱得特点之一。C、应具有压力平稳、脉冲小、流量稳定、可调、耐腐蚀等主要部件定义:流动相中含有两种(或更多)不同极性得溶剂,在分离过程中按一定得程