制药厂发酵车间操作规范手册

制药厂发酵车间操作规范手册一、前言本手册旨在规范制药厂发酵车间生产操作流程，确保发酵过程符合《药品生产质量管理规范》（GMP）要求，保障药品质量安全、生产过程稳定及操作人员职业健康。手册适用于发酵车间生产操作人员、技术人员、质量管理人员及相关管理人员，作为日常操作、培训及质量管理的核心依据。二、总则（一）法规与标准遵循发酵车间所有生产活动须严格遵循《药品生产质量管理规范》（GMP）、《中华人民共和国药品管理法》及相关行业标准，确保发酵过程合规性与产品质量可控性。（二）人员资质与培训操作人员需经专业培训并考核合格，掌握发酵工艺原理、设备操作技能、质量控制要点及安全防护知识后方可上岗。新员工须完成岗前培训（含理论学习、实操演练、安全培训）；在岗人员每年度接受复训，内容涵盖工艺更新、设备维护及应急处理。（三）车间环境要求发酵车间保持清洁、干燥、通风良好，温湿度、洁净度符合工艺要求（具体参数见产品工艺规程）。生产与非生产区域严格分隔，人员、物料经指定通道进入，避免交叉污染。车间内禁止存放无关物品，废弃物及时清理并按规定处置。三、发酵前准备（一）设备检查与调试发酵罐系统：检查罐体、搅拌器、传感器、阀门等完整性与密封性，启动设备空载运行，验证搅拌、温控、pH调节等功能正常。辅助设备：检查空气压缩机、蒸汽发生器、制冷机组等运行状态，确保压力、温度、流量符合要求。（二）物料准备培养基配制：按工艺规程准确称量原料（碳源、氮源等），溶解于纯化水后调节pH，执行称量复核制度。培养基灭菌：采用湿热灭菌（通常121℃、30分钟，依工艺调整），灭菌后冷却至发酵起始温度，监测灭菌参数确保彻底。菌种准备：无菌环境下复苏、活化菌种，确保活力与纯度符合要求，转接过程避免杂菌污染。（三）环境与设备消毒空间消毒：生产前采用臭氧或甲醛熏蒸（依工艺选择）灭菌，通风至残留气体安全。设备表面消毒：用75%乙醇或指定消毒剂擦拭发酵罐、操作台等，杀灭表面微生物。无菌验证：对发酵罐内部、管道进行无菌检测（如培养基模拟灌装、表面微生物取样），确认无菌后方可生产。四、发酵过程操作（一）接种操作确认发酵罐参数（温度、pH、溶氧）及设备正常，无菌操作转入种子液，记录接种时间、体积、菌种编号，启动发酵系统。（二）发酵参数控制温度：通过夹套/蛇管循环调节温度，精度±0.5℃，实时监测记录。pH：用酸碱溶液或补料调节，精度±0.1，避免局部过酸/碱。溶氧：调节搅拌速度、空气流量或补氧，维持溶氧在工艺范围（如30%~80%空气饱和度），电极定期校准。搅拌速度：依发酵阶段调整转速，确保混合均匀、溶氧稳定，避免菌体损伤。（三）过程监控与异常处理取样检测：按规程定期取样，检测菌体浓度、产物含量、残糖/氮等，无菌操作避免污染。数据记录：实时记录参数与检测结果，异常数据标注原因并报告。异常处理：染菌（杂菌检出、溶氧/pH异常）：隔离发酵罐，分析原因，采取补菌/提前终止等措施。设备故障（搅拌停转、温控失控）：启动备用设备或应急措施，通知维修，记录影响。五、发酵后处理（一）发酵液转移确认发酵液质量符合中间产品标准，转入后续设备，保持无菌/洁净状态，避免污染或产物降解。（二）菌体分离与产物提取菌体分离：用离心、过滤分离菌体，设备预先清洗灭菌，菌体按固废/回收要求处理。产物提取：依产物特性（胞内/胞外）选择萃取、层析等方法，控制温度、pH等参数确保收率与纯度。（三）设备清洗与灭菌发酵罐及设备使用后立即清洗（优先CIP），清洗液依材质与工艺选择，清洗后灭菌备用。六、设备维护与清洁（一）日常维护定时巡检设备振动、噪音、温度等，发现异常停机排查。定期更换润滑油、滤芯等易损件，记录更换时间与型号。（二）定期维护每月校准发酵罐搅拌器、电极、阀门，确保精度。每季度维护空气压缩机、制冷机组，包括管路清洗、部件检修。（三）清洁与消毒发酵罐清洁：CIP清洗（预冲洗、碱洗、酸洗、终冲洗），后用纯化水冲洗至中性，灭菌备用。辅助设备清洁：空气过滤器定期灭菌，疏水阀、冷凝器清理水垢/杂质。清洁验证：定期检测设备残留物、微生物，确保清洁效果。七、质量控制（一）过程质量检测抽检关键参数（温度、pH、溶氧）、中间产品（菌体浓度、产物含量），确保符合工艺标准。严格检测菌种纯度、培养基/发酵液无菌性，防止杂菌污染。（二）质量偏差处理偏差（参数/质量偏离工艺）时启动调查，分析原因（操作、设备、物料），评估影响，采取纠正/预防措施，记录归档。（三）质量回顾定期（季度/年度）回顾发酵批次质量数据，总结工艺稳定性、质量趋势，优化工艺。八、安全与应急管理（一）个人防护进入车间穿戴洁净工作服、鞋、帽、口罩；接触危险物料时佩戴耐酸碱手套、护目镜。禁止车间内饮食、吸烟，不携带个人物品。（二）化学品安全危险化学品（酸碱、消毒剂）单独存放于危险品库，专人管理，领用登记。泄漏时用吸附材料清理，大量清水冲洗污染区域。（三）应急预案染菌：隔离污染罐，分析原因，按偏差程序处置，必要时销毁物料。设备故障：停机断电/蒸汽，通知维修，采取措施减少生产影响。泄漏：疏散人员，开启通风，穿戴防护堵漏清理，必要时联系消防/环保。人员伤害：现场急救（冲洗、包扎），送医治疗，调查事故原因。九、记录管理（一）记录要求及时、准确记录操作、检测数据及异常情况，用蓝/黑笔填写，字迹清晰，修改需划改并签名注日期。电子记录定期备份，确保安全可追溯，与原始记录一致。（二）记录保存纸质记录分类归档，存放于干燥通风处，保存期不少于产品有效期后1年（或法规要求）。电子记录介质防磁防潮，保存期与纸质记录