赣州市人民医院科研实验技术操作规范性考核

赣州市人民医院科研实验技术操作规范性考核一、单选题（每题2分，共20题）1.在进行动物实验时，若需对实验动物进行麻醉，应优先选择哪种麻醉方式以保证动物安全？A.气管插管吸入麻醉B.腹腔注射麻醉C.肌肉注射麻醉D.鼻腔喷雾麻醉2.使用移液器吸取液体时，正确的操作是？A.快速按压推杆到底部再缓慢松开B.直接按压推杆至所需刻度C.先部分按压推杆再缓慢加入液体D.先快速按压推杆再缓慢松开3.实验室中处理废弃化学试剂时，以下哪种做法是正确的？A.将有机废液与无机废液混合后直接倒入下水道B.将过期试剂直接丢弃在实验室垃圾桶C.按照试剂性质分类后交由专业机构处理D.将强酸与强碱混合中和后排放4.在进行细胞培养时，培养皿需要灭菌，以下哪种灭菌方法最常用？A.紫外线照射B.干热灭菌C.高压蒸汽灭菌D.乙醇浸泡5.实验室中使用的电子天平，为避免误差，应放置在？A.振动较强的台面上B.温湿度变化剧烈的环境中C.水平稳定的实验台上D.附近有强电磁干扰的地方6.配制pH7.4的磷酸盐缓冲液时，应优先选择哪种磷酸盐？A.磷酸二氢钠B.磷酸氢二钠C.磷酸三钠D.磷酸一氢钠7.进行WesternBlot实验时，蛋白质转膜后应使用哪种封闭液？A.5%脱脂奶粉溶液B.0.1%SDS溶液C.1MTris-HCl溶液D.0.01MPBS溶液8.实验室中使用的微量移液管，使用后应如何处理？A.直接清洗后晾干备用B.用酒精擦拭后放入无菌袋保存C.直接丢弃不用D.用待测液体润洗后再使用9.进行PCR实验时，引物退火温度的确定应基于？A.引物长度B.引物GC含量C.退火时间D.DNA模板浓度10.实验室中使用的离心机，离心后应如何操作？A.直接取下样品管B.等待转速降至0再打开盖子C.先用冷水冲洗离心机D.不需要特殊操作二、多选题（每题3分，共10题）1.实验室中常用的消毒方法包括哪些？A.75%乙醇消毒B.高压蒸汽灭菌C.紫外线照射D.氯仿浸泡2.进行ELISA实验时，以下哪些步骤需要避光操作？A.底物孵育B.样品稀释C.抗体孵育D.洗涤步骤3.实验室中处理生物样本时，以下哪些行为符合操作规范？A.样本标记清晰B.使用一次性手套C.样本混合时使用无菌涡旋器D.样本保存于4℃冰箱4.进行细胞培养时，以下哪些操作可能导致细胞污染？A.使用非无菌工具接触培养皿B.操作时说话或咳嗽C.液体加注时产生气泡D.使用过期培养基5.实验室中常用的无菌操作技术包括哪些？A.灭菌锅灭菌B.超净工作台操作C.液体石蜡封口D.灭菌后开盖操作6.进行琼脂糖凝胶电泳时，以下哪些因素会影响电泳结果？A.电泳缓冲液pH值B.电压大小C.染色时间D.琼脂糖浓度7.实验室中常用的化学试剂储存注意事项包括哪些？A.易燃试剂远离火源B.强酸强碱分开存放C.液体试剂用塞子封口D.化学试剂标签清晰8.进行酶联免疫吸附实验（ELISA）时，以下哪些步骤需要精确控制？A.样品稀释比例B.抗体工作浓度C.底物孵育时间D.洗涤次数9.实验室中常用的生物安全等级包括哪些？A.生物安全等级1（BSL-1）B.生物安全等级2（BSL-2）C.生物安全等级3（BSL-3）D.生物安全等级4（BSL-4）10.进行动物实验时，以下哪些行为违反伦理规范？A.实验动物过度麻醉B.实验过程中无必要疼痛C.实验记录不完整D.动物饲养环境不达标三、判断题（每题2分，共10题）1.实验室中使用的移液器，每次使用后必须用75%乙醇消毒。2.进行PCR实验时，引物二聚体过多会导致扩增效率降低。3.实验室中废弃的化学试剂可以直接倒入下水道。4.细胞培养时，培养基中的酚红指示剂颜色变黄表示培养基已变质。5.实验室中使用的电子天平，使用前需调零。6.WesternBlot实验中，膜封闭时间越长越好。7.进行ELISA实验时，洗涤步骤可以省略。8.实验室中常用的消毒剂包括酒精、碘伏和过氧乙酸。9.动物实验时，实验动物必须佩戴个体编号标签。10.琼脂糖凝胶电泳时，电压越高，电泳速度越快。四、简答题（每题5分，共4题）1.简述实验室中处理生物样本的规范流程。2.简述PCR实验中引物设计的基本原则。3.简述WesternBlot实验中膜封闭的目的是什么。4.简述实验室中常用的生物安全防护措施。五、论述题（每题10分，共2题）1.结合赣州市人民医院的实际情况，论述实验室中如何避免微生物污染。2.结合临床科研需求，论述实验室中如何规范管理化学试剂。答案与解析一、单选题答案与解析1.A解析：气管插管吸入麻醉可提供稳定的麻醉效果，且麻醉深度易控制，适用于动物实验。其他方式可能因麻醉效果不稳定或对动物造成额外伤害而较少使用。2.C解析：使用移液器时，应先部分按压推杆至所需刻度以上，再缓慢加入液体，避免吸空或吸多。3.C解析：废液需按性质分类处理，有机废液与无机废液不能混合，过期试剂需交由专业机构处理，强酸强碱不能直接混合。4.C解析：高压蒸汽灭菌适用于培养皿等耐热物品，效果最可靠。5.C解析：电子天平需放置在水平稳定的台面上，避免振动和电磁干扰，以减少误差。6.B解析：pH7.4的磷酸盐缓冲液通常使用磷酸氢二钠和磷酸二氢钠按一定比例配制。7.A解析：5%脱脂奶粉溶液可有效地封闭非特异性结合位点。8.B解析：微量移液管使用后应先用酒精擦拭，再用蒸馏水冲洗，最后放入无菌袋保存。9.B解析：引物GC含量影响退火温度，GC含量过高或过低都会导致退火温度不准确。10.B解析：离心后需等待转速降至0再打开盖子，避免样品溅出。二、多选题答案与解析1.A、B、C解析：实验室常用消毒方法包括酒精、高压蒸汽和紫外线照射，氯仿浸泡不适用于常规消毒。2.A、C解析：底物孵育和抗体孵育需避光操作，避免光解或非特异性反应。3.A、B、C、D解析：样本标记清晰、使用一次性手套、无菌操作和规范保存都是符合规范的。4.A、B、C解析：非无菌工具接触、说话咳嗽和气泡产生都可能引入污染。5.A、B、D解析：灭菌锅、超净工作台和灭菌后开盖操作是无菌技术，液体石蜡封口不常用。6.A、B、D解析：pH值、电压和琼脂糖浓度都会影响电泳结果，染色时间影响较小。7.A、B、C、D解析：化学试剂需远离火源、分开存放、封口和标签清晰。8.A、B、C、D解析：ELISA实验中，样品稀释、抗体浓度、底物孵育时间和洗涤次数均需精确控制。9.A、B、C、D解析：生物安全等级从BSL-1到BSL-4，不同等级适用于不同风险实验。10.A、B、C、D解析：过度麻醉、无必要疼痛、记录不完整和饲养环境不达标均违反伦理规范。三、判断题答案与解析1.×解析：移液器使用后用酒精擦拭即可，无需每次用蒸馏水冲洗。2.√解析：引物二聚体会竞争模板，降低扩增效率。3.×解析：废液需分类处理，不能直接倒入下水道。4.√解析：酚红变黄表示培养基已酸化，通常因氨水挥发或污染。5.√解析：电子天平使用前需调零，避免系统误差。6.×解析：膜封闭时间过长可能导致非特异性结合，一般4-6小时为宜。7.×解析：洗涤步骤可去除非特异性结合，不可省略。8.√解析：酒精、碘伏和过氧乙酸均为常用消毒剂。9.√解析：动物实验需佩戴个体编号标签，便于追踪和管理。10.√解析：电压越高，电泳速度越快，但需控制电压避免过热。四、简答题答案与解析1.实验室中处理生物样本的规范流程-样本采集后立即标记，注明姓名、编号、采集时间等信息。-使用无菌工具和容器处理样本，避免污染。-样本分装后放入无菌冻存管，保存于-80℃冰箱。-使用前需解冻，避免反复冻融。-操作过程中需佩戴手套，并定期更换。2.PCR实验中引物设计的基本原则-引物长度一般为18-25碱基，GC含量50%-60%。-引物Tm值应接近（通常相差5℃以内）。-避免引物内部二级结构（如发夹、二聚体）。-引物与模板结合位点无交叉反应。3.WesternBlot实验中膜封闭的目的是什么-封闭膜表面的非特异性位点，避免抗体非特异性结合。-提高抗体结合的特异性，增强信号强度。-常用封闭剂包括5%脱脂奶粉或BSA溶液。4.实验室中常用的生物安全防护措施-佩戴个人防护装备（手套、口罩、实验服）。-使用生物安全柜进行操作。-定期消毒实验台和设备。-废弃物分类处理，避免交叉污染。五、论述题答案与解析1.结合赣州市人民医院的实际情况，论述实验室中如何避免微生物污染-赣州市人民医院实验室应严格执行无菌操作规程，如使用超净工作台进行细胞培养和PCR实验。-定期对实验设备（如离心机、培养箱）进行消毒灭菌，避免微生物滋生。-操作人员需佩戴手套、口罩，并定期更换，避免手部污染。-样本处理时需避免与外界接触，使用无菌工具和容器。-实验室环境需定期通风消毒，保持干燥清洁。2.结