一种新的CD4细胞计数方法

全新的非流式CD4细胞绝对计数

上海汇中细胞生物科技有限公司CD4+T淋巴细胞HIV病毒靶细胞，免疫系统枢纽HIV感染病程发展036912123456789101112

周年初期病毒感染02505007501000CD4细胞绝对值

(cells/μl)临床潜伏期病毒载量

(copies/ml)AIDS(机会性感染）~HIV病毒载量每年上升0.1log10

10

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10

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流式细胞仪上海汇中细胞生物科技有限公司CDC美国CDC实验室向我们提出：在我们的特异性细胞分离平台上，可否开发出低价、便捷的CD4细胞检测方法?特异细胞细胞表面抗原固相载体玻片抗体

免疫结合反应反应原理普通光学显微镜CD4抗体+全血淋洗CD4细胞CD4抗原其他细胞CD4细胞染色单核细胞单核细胞单核细胞CD4细胞CD4抗原特异结合反应显微镜记数包被载玻片细胞化学染色CD4细胞检测试剂盒单凹表面包被有CD4单克隆抗体的载玻片显微镜下CD4细胞和单核细胞临床考核

该方法在上海传染病医院、北京协和医院、北京佑安医院、上海中山医院、美国CDC（疾病预防控制中心）和日本大分大学艾滋病诊疗中心共进行1300多例临床考核，与流式细胞法相关性达到0.95，并经中国药品与生物制品检定所抽样检测，所用试剂盒全部符合质量标准。操作者间重复性检测流式法670操作者A640604632672664ave=647cv=3.879%636680680636632操作者B692680744708668ave=677cv=4.547%640664660646676T检验:F(5.132)<F0.05(8.28),P>0.05不同操作者之间无差异批次间重复性检测流式法901试剂盒896920892916872AVE=899,CV=2.166%流式法295试剂盒308292324296300AVE=304,CV=4.161%1.四种结果的相关系数均大于0.952.本试剂盒相关性优于三种仪器之间的相关性1.四种结果的平均检测误差均小于50个/μl2.本试剂盒检测误差小于三种仪器之间的检测误差质控方法流式细胞法为金标准法，且有相应质控品。同一血样检测结果与流式细胞法的相关性考核客观可行。流式细胞仪光学显微镜成本低&就地操作技术特点一红细胞融解全血vsCD4技术特点二流动的细胞固定的细胞vs物理记录，永久存档技术特点三微量采血流式细胞法的1/400，可用手指末梢血。100μL0.25μL技术特点四技术特点五培训简单、无维护技术特点六无冷藏要求室温保存冰箱保存手工方法的技术局限一定的劳动强度（5分/片）。操作者失误（特别是读片计数）。专业读片可由专业读片人员进行计数。新药证书编号（国药证字S20060027）美国CDC交流泰国世界艾滋病大会南非卫生机构培训研发中心可一次同时检测CD3、CD4、CD8等多种特异性细胞数量CD3CD4CD8下一代产品谢谢！CD4细胞计数玻片细胞计数刻度板CD4细胞非CD4细胞荧光标记CD4单克隆抗体流式细胞原理《CD4检测技术回顾》HIV论坛CD4工作组工作报告第二届世界艾滋病大会泰国曼谷2004年7月检测技术国家操作方式工作原理FACScount美国自动简易流式Guava美国自动简易流式CyFlow德国自动简易流式PointCARE美国自动简易流式Dynabeads挪威人工磁珠收集Cytospheres美国人工微珠结合本试剂盒中国人工包被玻片固定FCMSlideCytosphereDynabeadsCommentdetctionmethodindirectdirectdirectdirectrequirementFCM&hemomicroscopemicroscopemicroscopeRBClysisyesnoyesyeskeyoftheaccuracyantibodyCD4CD4CD4&CD14CD4&CD14keyofthecostsamplevolume100uL0.25ul100uL125uLpoint-of-carenopossiblenonocorrelation10.96(n=216)－－initialinvestment40,000-80,000$nonenone600-800$keyfordevelopingcountryprice15$/test1.8$/test10$/test6$/testpreparationtime40min40min15min50mindetectiontime2min5－8min5min5minstain&countwithin12hanytimewithin12himmediatelyflexiblerecordnonecellchipnonenonerecheckable2005年7月，“CD4细胞玻片计数检测法”通过了上海市医学会组织的“新技术临床准入专家评审”，获得上海市卫生局临床准入批文，并进入医保收费，至今已开展了包括体检、亚健康检查、肿瘤辅助检查等在内的100