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文档简介

2025年大学《生物技术》专业题库——埃博拉病毒毒株的分析与研究考试时间:______分钟总分:______分姓名:______一、选择题(请将正确选项的字母填入括号内,每题2分,共20分)1.埃博拉病毒属于下列哪一类病毒?A.DNA病毒科B.肠道病毒科C.负链RNA病毒科D.正链RNA病毒科2.埃博拉病毒的基因组RNA是单链还是双链?A.单链正链B.单链负链C.双链RNAD.双链DNA3.在生物安全等级中,处理埃博拉病毒等高致病性病毒应主要在哪个级别的实验室进行?A.BSL-1B.BSL-2C.BSL-3D.BSL-44.下列哪种方法最常用于观察埃博拉病毒的典型丝状形态?A.活体染色B.病毒培养C.电子显微镜观察D.PCR检测5.埃博拉病毒感染宿主细胞后,其基因组首先需要经过什么过程才能进行转录翻译?A.翻译B.复制C.逆转录D.基因编辑6.以下哪种分子生物学技术是检测埃博拉病毒核酸最常用的方法之一?A.WesternBlotB.ELISAC.RT-PCRD.RFLP分析7.埃博拉病毒主要通过与哪些途径传播给人类?A.呼吸道飞沫传播B.消化道粪口传播C.接触被病毒污染的物体表面D.虫媒传播8.目前研发成功的埃博拉病毒疫苗中,不属于减毒活疫苗的是?A.rVSV-ZEBOV疫苗B.MVA-BN-FV疫苗C.Ad26.ZEBOV/MVA-BN-FV疫苗D.ChAd3-EBOV疫苗9.在埃博拉病毒感染的病理过程中,细胞焦亡(Pyroptosis)通常扮演什么角色?A.免疫激活B.病毒传播C.细胞凋亡D.免疫抑制10.对不同地区分离的埃博拉病毒毒株进行基因组测序和比较分析,主要目的是什么?A.确定病毒致病力强弱B.追踪病毒传播来源和路径C.评估疫苗有效性D.发现新的病毒变异二、填空题(请将正确答案填入横线上,每空1分,共15分)1.埃博拉病毒基因组编码的主要结构蛋白包括糖蛋白(GP)、跨膜蛋白(____________)、核衣壳蛋白(NP)和RNA依赖性RNA聚合酶复合物中的L蛋白等。2.埃博拉病毒的糖蛋白(GP)是病毒进入宿主细胞的____________,也是诱导宿主免疫应答的主要抗原。3.RT-PCR技术的全称是____________,它结合了逆转录和聚合酶链式反应,用于检测RNA病毒。4.在埃博拉病毒的防控策略中,对疑似病例和确诊病例实行____________是防止病毒扩散的关键措施。5.基于____________技术的埃博拉病毒疫苗利用病毒载体携带埃博拉病毒基因片段,诱导宿主产生免疫反应。6.埃博拉病毒的流行通常与特定的动物宿主有关,例如____________被认为是Zaire型埃博拉病毒的天然宿主。7.病毒基因组测序数据分析中,常用的____________软件可以用于比对不同毒株的基因组序列,构建进化树。三、名词解释(请给出下列名词的英文全称及中文解释,每题3分,共12分)1.糖蛋白(GP)2.生物安全水平4(BSL-4)3.逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)4.基因组测序(GenomeSequencing)四、简答题(请简要回答下列问题,每题5分,共20分)1.简述埃博拉病毒诱导宿主细胞凋亡的主要机制。2.简述使用RT-PCR技术检测埃博拉病毒核酸的基本步骤。3.简述在实验室中处理埃博拉病毒样品时,需要遵守的基本安全原则。4.简述埃博拉病毒疫苗研发面临的主要挑战。五、论述题(请结合所学知识,详细论述下列问题,每题8分,共16分)1.论述比较不同埃博拉病毒毒株基因组序列的意义。2.论述埃博拉病毒研究对发展其他病毒性传染病防控策略的启示。试卷答案一、选择题1.C2.B3.D4.C5.C6.C7.C8.B9.A10.B二、填空题1.GP2.受体3.ReverseTranscriptionPolymeraseChainReaction(逆转录聚合酶链式反应)4.隔离5.腺病毒载体(或病毒载体)6.响尾蛇(或响尾蛇、果蝠等)7.BLAST(或BasicLocalAlignmentSearchTool)三、名词解释1.糖蛋白(GP):英文全称Glycoprotein。埃博拉病毒包膜表面的主要蛋白,负责识别并结合宿主细胞受体,是病毒入侵细胞的关键,同时也是诱导宿主产生中和抗体的主要抗原。2.生物安全水平4(BSL-4):英文全称BiosafetyLevel4。实验室生物安全等级的最高级别,适用于处理具有高度易感性和高致命性的病原体(如埃博拉病毒),要求最高的物理防护和个人防护措施。3.逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR):英文全称ReverseTranscriptionPolymeraseChainReaction。一种分子生物学技术,首先利用逆转录酶将RNA模板转录成互补DNA(cDNA),然后通过聚合酶链式反应(PCR)扩增特定的DNA片段,常用于检测RNA病毒(如埃博拉病毒)。4.基因组测序(GenomeSequencing):指获取生物体全部或部分遗传物质(DNA或RNA)的核苷酸序列的过程。通过基因组测序可以了解病毒的遗传信息,用于病毒鉴定、分类、进化分析、毒力预测、药物靶点发现等研究。四、简答题1.埃博拉病毒诱导宿主细胞凋亡的主要机制包括:①病毒基因产物(如VP40蛋白)直接激活内源性凋亡途径(如线粒体通路);②病毒感染导致细胞应激反应,激活半胱天冬酶(Caspases);③病毒感染破坏细胞膜结构和功能,引发细胞坏死,随后可能继发凋亡;④病毒感染干扰细胞凋亡抑制蛋白(如Bcl-2)和凋亡促进蛋白(如Bax)的平衡。2.使用RT-PCR技术检测埃博拉病毒核酸的基本步骤包括:①样本采集与处理:收集临床样本(如血液、唾液、组织),进行核酸提取;②逆转录:在反应体系中加入逆转录酶、RNA模板、随机引物或Oligo(dT)引物,在特定温度下将RNA逆转录为cDNA;③PCR扩增:将得到的cDNA作为模板,加入特异性引物、DNA聚合酶、dNTPs等,进行PCR扩增,通常包括变性、退火、延伸三个步骤的循环;④结果检测与分析:通过凝胶电泳、荧光定量检测(如Real-timePCR)等方法检测PCR产物的大小和/或数量,判断是否含有埃博拉病毒核酸。3.在实验室中处理埃博拉病毒样品时,需要遵守的基本安全原则包括:①严格遵守生物安全操作规程,必须在符合相应生物安全等级(至少BSL-3,处理高致病性毒株需BSL-4)的实验室进行;②穿戴适当的个人防护装备(PPE),包括但不限于手套、防护服、护目镜/面屏、呼吸防护装置;③使用符合标准的二级或三级生物安全柜进行操作,防止气溶胶产生和扩散;④样品处理过程应尽量减少气溶胶和飞溅的产生,如使用密闭系统、低速离心等;⑤实验室环境和设备表面应定期进行消毒;⑥规范废物的收集、处理和销毁,防止病毒外泄。4.埃博拉病毒疫苗研发面临的主要挑战包括:①病毒的高度变异性导致不同毒株间可能存在免疫逃逸风险,疫苗需具备广谱保护力;②埃博拉病毒暴发通常突然且规模有限,难以进行大规模常规临床试验来验证疫苗的长期有效性和安全性;③疫苗在非理想条件下的储存、运输和接种程序(如冷链要求)可能带来挑战;④针对埃博拉病毒的免疫反应机制复杂,如何诱导足够强效且持久的保护性免疫(特别是细胞免疫)仍需深入研究;⑤疫苗成本较高,在资源有限的流行地区普及存在困难;⑥社会接受度和伦理问题。五、论述题1.比较不同埃博拉病毒毒株基因组序列具有多重重要意义:①病毒鉴定与分类:基因组序列是病毒物种鉴定和分类的最可靠依据,有助于明确新分离株的归属;②追溯传染源与传播路径:通过比较不同地区、不同时间点分离株的遗传距离和进化关系,可以构建病毒传播的时空网络,帮助追踪疫情的源头和传播链条;③研究病毒变异与进化:分析序列变异(如突变、重组)有助于了解病毒的进化速率、选择压力和适应性变化;④预测病毒致病性与宿主范围:某些关键基因位点(如GP)的变异可能与病毒毒力强弱、宿主细胞嗜性或免疫逃逸能力相关;⑤指导疫苗设计与评估:了解不同毒株间的序列差异,有助于设计能够覆盖多种变异株的广谱疫苗,并评估现有疫苗对变异株的有效性;⑥发现新的病毒基因与功能:通过比较不同基因组,可能发现新的基因或功能位点,深化对病毒生命周期的理解。2.埃博拉病毒研究对发展其他病毒性传染病防控策略具有重要的启示作用:①高致病性病毒研究范式:埃博拉病毒研究为如何在极高生物安全等级下进行病毒培养、检测、基因操作和疫苗研发提供了宝贵的经验和标准操作规程(SOP),可借鉴于其他危险病原体研究;②快速诊断技术的重要性:埃博拉疫情凸显了快速、准确诊断技术的关键作用,推动了分子诊断(如RT-PCR、基因芯片)和快速检测技术(如抗原检测试剂)的研发与应用,这对其他急性传染病(如流感、COVID-19)的早期防控同样至关重要;③疫苗研发技术的突破与应用:埃博拉疫苗在短时间内研发成功并投入应急使用,展示了mRNA疫苗、病毒载体疫苗等新型疫苗技术的快速响应能力和巨大潜力,为其他病毒性疾病的疫苗开发提供了信心和范例;④宿主免疫反应机制研究:深入研究埃博拉病毒诱导的免疫应答(包括保护性免疫和非保护性甚至

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