细胞治疗CAR-NK细胞制备考试试卷与答案

细胞治疗CAR-NK细胞制备考试试卷与答案一、单项选择题（每题2分，共10题）1.CAR-NK细胞中“CAR”的中文是？A.嵌合抗原受体B.肿瘤相关抗原C.自然杀伤细胞D.细胞毒性T淋巴细胞2.以下哪种不属于NK细胞的来源？A.外周血B.脐带血C.胚胎干细胞D.脂肪组织3.CAR-NK细胞制备过程中常用的转染技术是？A.脂质体转染B.电穿孔转染C.病毒载体转染D.以上都常用4.培养CAR-NK细胞时，常用的培养基是？A.DMEMB.RPMI1640C.MEMD.F125.检测CAR-NK细胞活性常用的方法是？A.MTT法B.流式细胞术C.免疫荧光法D.ELISA法6.制备CAR-NK细胞的第一步一般是？A.基因构建B.细胞采集C.细胞培养D.细胞冻存7.CAR-NK细胞相比CAR-T细胞，优势在于？A.安全性更高B.制备更复杂C.靶向性更弱D.增殖能力更强8.冻存CAR-NK细胞常用的保护剂是？A.DMSOB.甘油C.乙醇D.葡萄糖9.以下哪种细胞因子对NK细胞增殖有促进作用？A.IL-2B.TNF-αC.IFN-γD.TGF-β10.评估CAR-NK细胞质量时，不包括以下哪项指标？A.细胞纯度B.细胞活力C.细胞大小D.表面标志物表达二、多项选择题（每题2分，共10题）1.制备CAR-NK细胞所需的基本设备有（）A.流式细胞仪B.细胞培养箱C.离心机D.移液器2.CAR-NK细胞的优点包括（）A.低免疫原性B.非MHC限制性C.多种杀伤机制D.不易引起细胞因子风暴3.常用的基因载体用于构建CAR基因的有（）A.慢病毒载体B.腺病毒载体C.质粒载体D.噬菌体载体4.在CAR-NK细胞培养过程中，可能添加的成分有（）A.胎牛血清B.细胞因子C.抗生素D.生长因子5.检测CAR-NK细胞的靶向性，可采用的方法有（）A.免疫荧光B.流式细胞术C.细胞毒性实验D.基因测序6.影响CAR-NK细胞制备质量的因素有（）A.起始细胞质量B.培养条件C.转染效率D.操作人员技术7.CAR-NK细胞治疗可能面临的挑战有（）A.细胞扩增困难B.体内存活时间短C.脱靶效应D.生产成本高8.细胞采集过程中，需要注意的事项有（）A.采集量B.采集时间C.无菌操作D.样本保存9.用于鉴定CAR-NK细胞的表面标志物有（）A.CD56B.CD16C.CAR分子D.CD310.以下哪些属于CAR-NK细胞的杀伤机制（）A.释放穿孔素和颗粒酶B.激活凋亡途径C.ADCC效应D.分泌细胞因子三、判断题（每题2分，共10题）1.CAR-NK细胞可以直接从人体分离获得，无需基因改造。（）2.培养CAR-NK细胞时，温度必须严格控制在37℃。（）3.转染效率对CAR-NK细胞的制备成功与否影响不大。（）4.检测CAR-NK细胞活性只能用MTT法。（）5.外周血来源的NK细胞比脐带血来源的NK细胞更适合制备CAR-NK细胞。（）6.制备CAR-NK细胞过程中，所有操作都需要在无菌条件下进行。（）7.CAR-NK细胞治疗肿瘤不会有任何副作用。（）8.冻存的CAR-NK细胞复苏后活性不会受到影响。（）9.细胞因子的种类和浓度会影响CAR-NK细胞的生长和功能。（）10.只要CAR基因构建成功，CAR-NK细胞就一定能发挥靶向杀伤作用。（）四、简答题（每题5分，共4题）1.简述CAR-NK细胞制备的主要步骤。2.说明CAR-NK细胞与CAR-T细胞在治疗上的主要差异。3.列举两种检测CAR-NK细胞活性的方法及原理。4.简述影响CAR-NK细胞体外扩增的因素。五、讨论题（每题5分，共4题）1.讨论CAR-NK细胞在实体瘤治疗中的优势与挑战。2.如何进一步优化CAR-NK细胞的制备工艺以提高其疗效和安全性？3.分析CAR-NK细胞治疗可能面临的伦理问题及应对策略。4.探讨CAR-NK细胞与其他免疫治疗方法联合应用的前景和可能面临的问题。答案一、单项选择题1.A2.D3.D4.B5.A6.B7.A8.A9.A10.C二、多项选择题1.ABCD2.ABCD3.ABC4.ABCD5.ABC6.ABCD7.ABCD8.ACD9.ABC10.ABCD三、判断题1.×2.√3.×4.×5.×6.√7.×8.×9.√10.×四、简答题1.主要步骤：细胞采集（外周血、脐带血等获取NK细胞）；基因构建（构建含CAR基因载体）；转染（将载体转入NK细胞）；细胞培养（添加合适成分培养扩增）；质量检测（检测活性、纯度等指标）。2.差异：CAR-NK细胞免疫原性低，不易引起严重免疫反应；非MHC限制，识别更广泛；不易引发细胞因子风暴；而CAR-T细胞靶向性强但可能有严重副作用。3.MTT法：活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使MTT还原为不溶性蓝紫色结晶甲瓒，通过检测吸光度反映细胞活性。流式细胞术：利用荧光标记抗体结合细胞表面或胞内分子，通过流式细胞仪检测细胞数量和活性相关指标。4.因素：起始NK细胞的数量和质量；培养基成分（营养物质、细胞因子等）；培养条件（温度、pH、气体环境等）；转染效率影响细胞生长；培养体系的污染情况等。五、讨论题1.优势：低免疫原性、多种杀伤机制、不易引起细胞因子风暴，对实体瘤有潜在治疗效果。挑战：在实体瘤中浸润能力弱、肿瘤微环境抑制其活性、大规模制备工艺待完善。2.优化工艺：筛选更优质的起始细胞来源；改进基因载体和转染技术提高转染效率；精准调控培养条件和添加物；建立更严格的质量控制体系。3.伦理问题：如细胞来源的合