2025年大学《医学检验技术-分子诊断技术》考试模拟试题及答案解析

2025年大学《医学检验技术-分子诊断技术》考试模拟试题及答案解析单位所属部门：________姓名：________考场号：________考生号：________一、选择题1.分子诊断技术中，PCR技术的核心原理是（）A.基因重组B.基因编辑C.基因扩增D.基因测序答案：C解析：PCR（聚合酶链式反应）是一种在生物体外进行DNA扩增的技术，通过模拟DNA复制过程，能够在短时间内获得大量特定的DNA片段。这是分子诊断技术中应用最广泛的方法之一，主要用于病原体检测、基因分型等。基因重组和基因编辑是基因工程技术，基因测序是确定DNA序列的技术，与PCR的核心原理不同。2.在分子诊断样本处理过程中，核酸提取的质量直接影响后续实验结果的准确性，以下哪项不是影响核酸提取质量的关键因素（）A.样本类型B.提取试剂C.提取方法D.实验人员经验答案：D解析：样本类型、提取试剂和提取方法都是影响核酸提取质量的关键因素。不同的样本类型（如血液、组织、唾液等）含有核酸的量和纯度不同，需要选择合适的提取试剂和方法。实验人员经验虽然重要，但不是直接影响提取质量的直接因素，操作规范和严格的质量控制更为关键。3.实时荧光定量PCR（qPCR）技术中，用于检测荧光信号的仪器通常称为（）A.显微镜B.电泳仪C.荧光检测器D.分光光度计答案：C解析：实时荧光定量PCR技术通过荧光检测器实时监测PCR过程中荧光信号的变化，从而定量PCR产物。显微镜用于观察样本形态，电泳仪用于分离核酸片段，分光光度计用于测定核酸浓度，只有荧光检测器是专门用于检测荧光信号的仪器。4.在基因芯片技术中，芯片上固化的生物分子通常是（）A.蛋白质B.DNA或RNA片段C.抗体D.细胞答案：B解析：基因芯片（又称DNA芯片）是一种高密度的生物芯片，芯片上固化有大量特定的DNA或RNA片段，用于与样本中的目标核酸进行杂交，从而实现基因检测、基因表达分析等。蛋白质、抗体和细胞虽然也是生物分子，但不是基因芯片上固化的主要物质。5.数字PCR（dPCR）技术的主要优势在于（）A.操作简单B.成本低廉C.精度高，特异性强D.适用于复杂样本答案：C解析：数字PCR技术通过将样本分配到大量微反应单元中，使每个单元中目标核酸分子的拷贝数呈泊松分布，从而实现绝对定量。其主要优势在于精度高、特异性强，能够检测稀有突变等。操作相对复杂、成本较高，且在处理复杂样本时可能需要更严格的预处理。6.以下哪种分子诊断技术通常用于检测基因组中的大片段缺失或重复（）A.PCRB.DNA测序C.基因芯片D.SNP分型答案：C解析：基因芯片技术可以设计探针阵列，用于检测基因组中特定区域的大片段缺失或重复。PCR和DNA测序主要用于检测点突变或小片段变异，SNP分型（单核苷酸多态性分型）用于检测单个碱基的变异，无法有效检测大片段结构变异。7.在分子诊断实验中，用于判断实验结果是否可靠的指标是（）A.扩增效率B.Cq值C.重复性D.特异性答案：C解析：重复性是指多次实验结果的一致性，是判断实验结果是否可靠的指标。扩增效率、Cq值和特异性虽然也是重要的实验参数，但主要用于评估PCR反应条件、定量结果和检测特异性，不能直接反映结果的可靠性。8.以下哪种分子诊断技术属于无创产前检测（NIPT）的常用方法（）A.羊水穿刺B.绒毛取样C.外周血胎儿游离DNA检测D.基因芯片分析答案：C解析：无创产前检测（NIPT）是一种通过检测孕妇外周血中的胎儿游离DNA来筛查胎儿染色体异常的技术。羊水穿刺和绒毛取样是有创产前检测方法，存在一定的流产风险。基因芯片分析虽然可以用于基因检测，但不是NIPT的常用方法。9.在分子诊断样本保存过程中，以下哪种措施可以有效防止核酸降解（）A.高温保存B.酶抑制剂添加C.低温保存D.紫外线照射答案：C解析：核酸在高温和紫外线照射下容易降解，不利于长期保存。低温保存可以有效抑制核酸酶的活性，防止核酸降解。添加酶抑制剂可以在一定程度上保护核酸，但低温保存是更有效的方法。10.分子诊断技术中，用于检测基因表达水平的常用方法是（）A.基因测序B.基因芯片C.PCRD.SNP分型答案：B解析：基因芯片技术可以通过检测芯片上探针与样本中mRNA的杂交信号强度，实现对基因表达水平的定量分析。基因测序主要用于确定DNA序列，PCR用于基因扩增，SNP分型用于检测单个碱基的变异，这些方法不直接用于检测基因表达水平。11.DNA测序技术中，Sanger测序法的基本原理是（）A.基因杂交B.末端合成C.化学降解D.酶切分选答案：B解析：Sanger测序法（又称链终止法）的基本原理是在DNA模板上合成互补链，利用带有不同荧光标记的脱氧三磷酸核苷酸（dNTP）作为终止子，通过链终止反应产生一系列不同长度的DNA片段。这些片段通过标准电泳进行分离，根据荧光信号读取测序结果。该过程依赖于引物延伸和特定位点的链终止，并非简单的基因杂交、化学降解或酶切分选。12.在基因芯片杂交后，洗脱的目的是（）A.结合更多探针B.去除未结合的探针和样本分子C.增强杂交信号D.使探针变性答案：B解析：基因芯片杂交后需要进行洗脱步骤，目的是去除未与目标样本分子结合的探针和其他游离分子，以提高信号的特异性。如果不去除这些物质，会干扰信号的判读，导致假阳性结果。洗脱不会结合更多探针，也不会增强信号，且洗脱通常在变性条件下进行，但主要目的不是使探针变性。13.数字PCR（dPCR）技术中，样本分配到微反应单元的方式通常有（）A.人工分配B.液体分配C.空气间隙分配D.以上都是答案：D解析：数字PCR技术的核心是将样本液滴分配到大量独立的微反应单元中。分配方式可以采用液体分配（如微流控技术）或空气间隙分配（如芯片上的微孔）。这些方法都是实现样本分散的常用技术，因此人工分配虽然理论上可行，但效率极低，通常不被采用。正确答案应包含所有实际应用的分配方式。14.用于检测核酸样本中是否存在特定病原体核酸的分子诊断方法称为（）A.基因分型B.病原体检测C.基因表达分析D.突变检测答案：B解析：病原体检测是分子诊断技术的一个重要应用领域，其目的是鉴定样本中是否存在特定病原体（如病毒、细菌、真菌等）的核酸序列。基因分型是根据基因序列差异进行分群，基因表达分析是检测基因转录水平，突变检测是寻找基因序列的变异。只有病原体检测直接针对病原体核酸的鉴定。15.实时荧光定量PCR（qPCR）中，用于计算样本初始核酸浓度的方法通常是（）A.标准曲线法B.竞争性PCR法C.内参基因法D.探针法答案：A解析：实时荧光定量PCR最常用的绝对定量方法是标准曲线法。通过制备一系列已知浓度的标准品，绘制Cq值（荧光信号达到设定阈值时的循环数）与浓度对数的标准曲线，然后根据待测样本的Cq值在标准曲线上查出其对应的初始浓度。竞争性PCR法是一种相对定量方法，内参基因法和探针法主要用于提高实验的准确性和特异性，而非绝对定量。16.在分子诊断实验中，用于评估PCR扩增效率的指标是（）A.Cq值B.荧光信号强度C.扩增效率（E）D.灯光持续时间答案：C解析：PCR扩增效率（通常表示为E，计算公式为E=10^(-ΔCq/ΔCq_max)）是衡量PCR反应体系性能的重要指标，表示实际扩增的循环数与理论最大循环数的比值。Cq值是用于定量和比较不同样本的参数，荧光信号强度反映PCR产物的量，灯光持续时间与分子诊断实验无关。扩增效率是评估PCR性能的核心指标。17.基因芯片技术中，芯片上探针的密度通常用（）A.每平方厘米的探针数表示B.每平方毫米的探针数表示C.每平方微米的探针数表示D.每条边的探针数表示答案：C解析：基因芯片（DNA芯片）具有极高的密度，探针点通常布置在微米级别。因此，芯片上探针的密度最常用的表示单位是每平方微米（µm²）的探针数。虽然也可以用每平方厘米或每平方毫米表示，但微米级单位更能体现基因芯片的高密度特性。18.用于检测样本中是否存在已知基因突变的分子诊断方法称为（）A.基因分型B.突变检测C.基因表达分析D.病原体检测答案：B解析：突变检测是分子诊断技术的重要应用，其目的是在基因组或特定基因序列中寻找已知的致病突变。基因分型是根据基因序列差异进行分群，基因表达分析是检测基因转录水平，病原体检测是鉴定病原体核酸。只有突变检测直接针对已知的基因序列变异。19.在分子诊断样本处理过程中，用于裂解细胞并释放核酸的试剂通常称为（）A.洗脱液B.终止缓冲液C.裂解缓冲液D.酶抑制剂答案：C解析：裂解缓冲液是分子诊断样本处理中用于裂解细胞、组织或体液，使细胞膜破裂并释放出内部核酸（DNA或RNA）的试剂。洗脱液用于洗脱核酸，终止缓冲液用于终止酶的活性，酶抑制剂用于保护核酸不被降解，但裂解缓冲液是直接实现核酸释放的关键试剂。20.分子诊断技术中，用于检测小卫星DNA重复序列多态性的常用方法是（）A.PCRB.DNA测序C.基因芯片D.非特异性PCR答案：A解析：PCR技术，特别是聚合酶链式反应变异性（ARMS）或等位基因特异性PCR（AS-PCR），可以设计引物特异性地扩增小卫星DNA等高度重复序列的不同重复次数的等位基因，从而检测其多态性。DNA测序可以确定序列，但可能不经济或效率不高。基因芯片可以设计探针，但非特异性PCR不是检测小卫星DNA多态性的常用方法。非特异性PCR通常用于扩增非特异性产物。二、多选题1.PCR技术的基本要素包括（）A.模板DNAB.引物C.聚合酶D.dNTPsE.变性-退火-延伸循环答案：ABCDE解析：PCR（聚合酶链式反应）技术需要具备几个核心要素才能进行DNA扩增。首先，必须有作为模板的DNA片段。其次，需要特异性引物来界定扩增区域。然后，需要耐热的DNA聚合酶（如Taq酶）来合成新链。此外，必须提供四种脱氧核糖核苷酸（dNTPs）作为合成新链的原料。最后，PCR反应必须经过一系列变性、退火、延伸的循环，以实现DNA的扩增。所有这些要素都是PCR成功进行所必需的。2.DNA测序技术中，Sanger测序法和二代测序技术的共同点有（）A.都能确定DNA序列B.都需要测序引物C.都能进行高通量测序D.都基于DNA聚合酶的延伸反应E.都需要消耗dNTPs答案：ABDE解析：Sanger测序法和二代测序技术都是用于确定DNA序列的技术。它们都需要使用测序引物来启动DNA合成。两者都基于DNA聚合酶延伸引物，利用带有标记的dNTPs合成互补链，并通过检测合成产物来确定序列。然而，Sanger测序法是单测序反应，通常用于测定单个或少数几个DNA片段的序列，通量较低；而二代测序技术能够同时并行处理数百万甚至数十亿个测序反应，实现高通量测序。因此，高通量不是两者的共同点。3.基因芯片技术的应用领域包括（）A.基因表达分析B.病原体检测C.基因分型D.药物靶点发现E.遗传病诊断答案：ABCDE解析：基因芯片技术具有广泛的应用，尤其在分子诊断和生物医学研究中。它可以用于基因表达分析，通过检测芯片上探针与样本mRNA的杂交信号强度，了解基因的表达模式。也可用于病原体检测，设计针对病原体特异性基因的探针进行检测。基因分型是通过芯片上不同的探针或SNP位点来区分不同基因型。药物靶点发现利用芯片筛选潜在的药物作用靶基因。遗传病诊断则可以检测与遗传病相关的基因突变或缺失。这些都是基因芯片技术的常见应用。4.数字PCR（dPCR）技术的优势在于（）A.绝对定量B.精度高C.特异性强D.适用于复杂样本E.操作简单答案：ABC解析：数字PCR技术通过将样本分配到大量微反应单元，使每个单元中目标核酸分子的拷贝数呈泊松分布，从而实现绝对定量（A）。由于在每个微反应单元中进行分析，对PCR扩增效率的要求不高，因此测量精度高（B），且能有效区分不同大小的核酸分子，特异性强（C）。然而，dPCR通常需要更精密的仪器和样本前处理，操作相对复杂，不算是操作简单（E）。虽然dPCR可以分析复杂样本，但其主要优势在于高精度和高特异性，尤其是在检测稀有突变时，简单提及“适用于复杂样本”不够准确，但其确可用于复杂体系进行特定目标的检测。5.影响分子诊断实验结果准确性的因素有（）A.样本采集方法B.样本保存条件C.实验操作者技能D.试剂质量E.仪器性能答案：ABCDE解析：分子诊断实验结果的准确性受到多种因素的影响。样本采集方法直接影响样本的质量和核酸的完整性（A）。样本保存条件不当会导致核酸降解或污染，影响检测结果（B）。实验操作者的技能和经验会影响操作的规范性和准确性（C）。试剂的质量，包括PCR试剂、试剂盒等，是保证实验成功的关键（D）。仪器的性能，如PCR仪的温控精度、荧光检测器的灵敏度等，也会直接影响结果的可靠性（E）。因此，这些因素都会影响分子诊断实验的准确性。6.常用的核酸提取方法包括（）A.离心沉淀法B.染色体析出法C.组织研磨法D.化学裂解法E.磁珠法答案：ACDE解析：核酸提取是从生物样本中分离纯化DNA或RNA的过程，常用的方法有多种。离心沉淀法利用密度梯度离心或差速离心分离核酸（A）。组织研磨法通过物理方法破坏细胞结构释放核酸，常用于植物或组织样本（C）。化学裂解法使用裂解缓冲液和蛋白酶等破坏细胞膜，释放并纯化核酸（D）。磁珠法利用磁珠包裹核酸，通过磁力分离纯化核酸，是一种常用的自动化方法（E）。染色体析出法不是一种通用的核酸提取方法，通常用于特定研究或教学演示，并非常规技术。因此，离心沉淀法、组织研磨法、化学裂解法和磁珠法是常用的核酸提取方法。7.实时荧光定量PCR（qPCR）实验中，需要设置的内对照（内参基因）作用是（）A.监测PCR反应体系完整性B.校正样本间差异C.补偿引物二聚体干扰D.补偿模板浓度差异E.提高扩增效率答案：ABD解析：在qPCR实验中，内对照（内参基因）通常选择表达稳定、受处理因素影响小的基因。其主要作用是：首先，监测PCR反应体系的完整性，确保试剂、模板等没有问题（A）。其次，校正不同样本间存在的差异，如RNA提取效率、逆转录效率等，使目的基因的表达量比较具有可比性（B）。此外，也能在一定程度上补偿不同样本模板浓度或加样量的差异（D）。虽然内对照不能完全消除所有干扰，如引物二聚体，但它能提高结果的相对准确性。内对照本身并不能提高扩增效率（E），其表达水平是相对稳定的。8.基因芯片杂交后，通常需要进行哪些步骤（）A.洗脱B.封闭C.扫描D.定量分析E.信号放大答案：ACE解析：基因芯片杂交完成后，需要进行一系列后续处理以获得可靠的检测结果。首先，必须进行洗脱步骤，目的是去除未结合的样本分子和探针，减少非特异性杂交信号的干扰，提高检测的特异性（A）。然后，需要对芯片进行扫描，利用扫描仪捕捉芯片上杂交信号的荧光强度（C）。最后，对扫描得到的图像进行定量分析，比较不同探针点的信号强度，从而获得生物学信息（D）。封闭通常在杂交前进行，用于封闭非特异性位点。信号放大在某些特殊应用中可能使用，但不是常规步骤。因此，洗脱、扫描和定量分析是基因芯片杂交后的关键步骤。9.分子诊断技术中，用于检测基因突变的常用方法有（）A.PCR-限制性片段长度多态性（RFLP）分析B.DNA测序C.基因芯片D.连锁基因分析E.酶联免疫吸附试验（ELISA）答案：ABC解析：分子诊断技术中有多种方法可用于检测基因突变。PCR-限制性片段长度多态性（RFLP）分析利用限制性内切酶识别和切割特定序列，突变会改变酶切位点，导致片段大小变化（A）。DNA测序是检测基因突变最直接、最准确的方法，可以确定突变的位置和类型（B）。基因芯片可以设计探针检测特定的突变位点或突变类型（C）。连锁基因分析是基于基因与突变位点紧密连锁，通过家系分析推断突变携带状态，主要用于遗传病研究，不直接检测突变本身（D）。酶联免疫吸附试验（ELISA）主要用于检测蛋白质或抗原抗体反应，不直接检测DNA序列突变（E）。因此，PCR-RFLP、DNA测序和基因芯片是常用的检测基因突变的方法。10.数字PCR（dPCR）与实时荧光定量PCR（qPCR）的主要区别在于（）A.定量方式B.对扩增效率要求C.仪器成本D.应用场景E.基本原理答案：AB解析：数字PCR（dPCR）和实时荧光定量PCR（qPCR）是两种重要的核酸定量技术，它们的主要区别在于：首先，定量方式不同。dPCR通过将样本分成无数个微反应单元进行独立扩增，基于泊松分布统计法实现绝对定量；而qPCR通过监测PCR过程中荧光信号的积累进行实时监测，通常依赖标准曲线实现相对定量或绝对定量（A）。其次，对扩增效率的要求不同。dPCR不依赖于扩增效率是否接近100%，因为每个微反应单元内的扩增是独立的；而qPCR的定量结果与扩增效率密切相关，通常要求扩增效率接近100%（B）。虽然dPCR和qPCR的仪器成本、应用场景和基本原理（都基于PCR原理）可能存在差异，但最核心、最本质的区别在于其定量方式和对待扩增效率的要求。11.PCR技术中，影响扩增效率的因素有（）A.引物设计与退火温度B.聚合酶活性C.dNTPs浓度D.模板DNA浓度E.缓冲液pH值答案：ABCDE解析：PCR扩增效率受多种因素影响。引物设计与退火温度是关键因素，优化的引物和合适的退火温度能确保引物有效结合，起始扩增高效（A）。聚合酶的活性直接影响新链合成的速度和效率（B）。dNTPs作为合成原料，其浓度必须充足且比例适当，不足或比例失衡都会影响扩增效率（C）。模板DNA的初始浓度会影响起始扩增的效率，浓度过低可能导致扩增失败（D）。缓冲液的pH值会影响聚合酶的活性和离子强度，进而影响PCR效率（E）。因此，这些因素都会影响PCR的扩增效率。12.DNA测序技术中，Sanger测序法与二代测序技术的区别在于（）A.测序原理B.通量C.结果长度D.对模板要求E.应用范围答案：ABC解析：Sanger测序法和二代测序技术是两种不同的DNA测序技术，它们存在显著区别。首先，测序原理不同，Sanger法基于链终止反应，而二代测序通常基于合成依赖测序（如边合成边测序）（A）。其次，通量差异巨大，Sanger法是单测序反应，通量低；二代测序可同时处理数百万甚至更多反应，通量极高（B）。此外，结果长度也不同，Sanger法通常可测定几百到几千个碱基对，而二代测序产生的读长通常较短，多为几十到几百个碱基对，但可通过拼接获得长片段信息（C）。对模板的要求也不同，Sanger法通常需要较高质量的、无污染的模板；二代测序对模板要求相对宽松一些，有多种输入模板形式（D）。应用范围方面，两者都很广泛，但侧重点不同，Sanger法在精确测序和验证方面优势明显，二代测序在基因组测序、转录组分析等方面优势突出（E）。因此，原理、通量和结果长度是它们最核心的区别。13.基因芯片技术的优势包括（）A.高通量B.多参数检测C.定量分析D.成本低廉E.结果可视化答案：ABCE解析：基因芯片技术具有显著的优势。首先，它能够在一个芯片上集成数以万计甚至百万计的探针点，实现对大量基因或分子的同时检测，具有极高的通量（A）。其次，可以同时检测多个目标分子（如基因表达、基因分型、病原体检测等），实现多参数检测（B）。通过荧光等信号检测，基因芯片可以进行相对或绝对的定量分析（C）。此外，芯片检测的结果通常通过扫描仪转化为数字图像，便于计算机处理和结果可视化（E）。然而，基因芯片技术通常需要昂贵的芯片制作、杂交和扫描设备，且数据处理复杂，因此成本相对较高，不算是低廉（D）。尽管成本较高，但其高通量、多参数和可视化等优势使其在生物医学研究中应用广泛。14.数字PCR（dPCR）技术的应用场景有（）A.稀有突变检测B.肿瘤负荷评估C.基因拷贝数变异分析D.病原体绝对定量E.基质游离DNA（cfDNA）定量答案：ABCDE解析：数字PCR技术由于具有高灵敏度和精确的绝对定量能力，在多个领域有广泛的应用。它可以检测样本中极其稀有的突变等位基因（A），这是qPCR难以做到的。在肿瘤领域，可用于评估肿瘤细胞的负荷或循环肿瘤DNA（ctDNA）的绝对数量（B）。也可用于分析基因组中基因的拷贝数变异（C）。对于病原体检测，dPCR能够实现对病原体核酸的绝对定量，即使病原体载量很低也能检测到（D）。在临床检测中，可用于基质游离DNA（cfDNA）的定量，例如在无癌早筛等方面（E）。因此，这些都是数字PCR技术的典型应用场景。15.影响分子诊断实验结果可靠性的因素有（）A.试剂批间差异B.实验室环境条件C.仪器校准状态D.样本运输过程E.操作人员疲劳程度答案：ABCDE解析：分子诊断实验结果的可靠性受到多种复杂因素的影响。试剂批间差异可能导致不同批次的试剂性能（如灵敏度、特异性）不一致，影响结果稳定性（A）。实验室环境条件，如温度、湿度、洁净度等，如果控制不当，可能影响试剂活性、酶反应效率或导致污染，进而影响结果可靠性（B）。仪器的性能和校准状态至关重要，未校准或性能下降的仪器会导致测量误差，影响结果的准确性（C）。样本从采集到实验室的运输过程如果处理不当，可能导致样本降解、污染或成分改变，使结果失去意义（D）。操作人员的疲劳程度会影响操作的规范性、仔细程度，增加操作失误的风险，从而影响结果的可靠性（E）。因此，这些因素都会影响分子诊断实验结果的可靠性。16.核酸提取纯化过程中，可能引入的污染物包括（）A.蛋白质B.脂类C.多糖D.病毒E.其他核酸答案：ABCDE解析：在核酸提取纯化过程中，如果操作不当或使用的试剂、耗材不纯，可能会引入各种污染物。蛋白质（A）和脂类（B）是细胞的主要成分，如果去除不彻底，会干扰后续的PCR等扩增反应。多糖（C），特别是来自细胞壁或核膜的糖类，也可能影响核酸的纯度和后续实验。病毒（D）本身可以作为样本目标，但也可能作为污染物存在，尤其是在处理体液样本时。其他核酸，如残留的细菌DNA或RNA（E），也可能污染样本，影响检测的特异性。因此，这些都是核酸提取纯化过程中需要关注和尽量去除的污染物。17.实时荧光定量PCR（qPCR）实验中，构建标准曲线的目的是（）A.绝对定量未知样本B.校正样本间差异C.评估PCR效率D.比较不同样本的表达水平E.验证引物和探针的特异性答案：AC解析：实时荧光定量PCR（qPCR）中构建标准曲线的主要目的是为了实现绝对定量（A）和评估PCR效率（C）。标准曲线通常使用一系列已知浓度的标准品（通常是纯化的目的基因片段或合成的大浓度梯度标准品），通过qPCR检测其Cq值，绘制Cq值与浓度（或log浓度）的关系图。这个标准曲线可以用来推算未知样本的初始浓度。虽然标准曲线的构建过程和结果可以间接反映引物和探针的特异性和效率（E），但这通常不是构建标准曲线的首要目的。校正是通过比较未知样本与标准曲线来实现的（B），比较不同样本的表达水平也是通过比较各自Cq值与标准曲线或内部对照来实现的（D）。因此，标准曲线最核心的作用是绝对定量和评估/标准化PCR效率。18.基因芯片杂交后，影响信号强度的因素有（）A.样本浓度B.探针密度C.杂交温度D.洗脱条件E.芯片封片质量答案：ABCDE解析：基因芯片杂交后，最终的信号强度受到多个因素的共同影响。样本浓度（A）过高或过低都会影响杂交信号的强度。芯片上探针的密度（B）越大，理论上可结合的分子越多，信号可能越强，但也可能因拥挤效应影响杂交效率。杂交温度（C）是影响杂交特异性和效率的关键参数，过高或过低都会导致信号减弱。洗脱条件（D）直接影响非特异性杂交分子的去除程度，洗脱不充分会导致背景信号高，特异性信号相对减弱；洗脱过度则可能带走部分特异性信号。芯片封片质量（E）影响杂交液的覆盖均匀性和密封性，封片不好会导致杂交液蒸发、样本扩散不均，影响信号强度和均匀性。因此，这些因素都会影响基因芯片杂交后的信号强度。19.常用的分子诊断样本类型包括（）A.血液B.粪便C.组织样本D.体液E.唾液答案：ABCDE解析：分子诊断技术可以应用于多种样本类型的检测。血液（A）是临床最常用的样本之一，可用于传染病检测、肿瘤标志物检测等。粪便（B）样本常用于肠道病原体检测、肿瘤筛查（如结直肠癌）等。组织样本（C），无论是手术切除标本还是活检样本，都广泛用于肿瘤基因检测、遗传病诊断等。体液（D）是一个广义的概念，包括血液、尿液、脑脊液、胸腔积液、腹水等多种，都是分子诊断的常用样本来源。唾液（E）样本无创易得，常用于病原体检测（如流感、COVID-19）、遗传病筛查等。因此，血液、粪便、组织样本、体液和唾液都是分子诊断中常用的样本类型。20.分子诊断技术的伦理问题包括（）A.样本隐私保护B.结果解读和告知C.知情同意D.检测滥用E.法律责任界定答案：ABCDE解析：分子诊断技术的发展和应用带来了诸多伦理问题需要关注。首先，样本隐私保护至关重要，患者的遗传信息属于高度敏感的个人隐私，必须严格保密，防止泄露和滥用（A）。其次，检测结果的解读需要专业知识和经验，如何准确解释结果，并确保患者充分理解其含义，是一个重要的伦理问题（B）。在采集样本和进行检测前，必须获得患者的知情同意，使其了解检测的目的、过程、风险和局限性（C）。此外，分子诊断技术的应用范围扩大可能导致检测滥用，如不必要的重复检测、过度诊断等，引发医疗资源浪费和患者焦虑（D）。最后，随着技术发展，相关的法律责任界定也日益复杂，如结果错误导致的后果应由谁承担等，也是重要的伦理和法律问题（E）。因此，这些都是分子诊断技术涉及的伦理问题。三、判断题1.PCR技术的核心是DNA的复制。（）答案：正确解析：PCR（聚合酶链式反应）是一种在体外模拟生物体内DNA复制过程的分子生物学技术，其核心是通过一系列温度循环，使特异性DNA片段得到扩增。这个过程依赖于DNA聚合酶、引物、dNTPs等，最终目的是获得大量的目标DNA子链。因此，说PCR技术的核心是DNA的复制是准确的。2.DNA测序技术只能测定DNA分子的碱基序列。（）答案：错误解析：虽然传统意义上的DNA测序主要是测定DNA分子的碱基序列，但现代测序技术，特别是二代测序（NGS）平台，也可以对RNA进行测序（RNA-Seq），测定转录本（mRNA）的序列和表达水平。此外，还有一些技术可以测定蛋白质的氨基酸序列，或者对基因组进行重测序等。因此，说DNA测序技术只能测定DNA分子的碱基序列是不全面的，过于绝对。3.基因芯片技术是一种高通量检测技术，可以在一张芯片上检测成千上万个基因。（）答案：正确解析：基因芯片（GeneChip）技术是一种基于固相载物（如玻璃片、硅片等）的微阵列技术，可以在芯片表面固定大量的探针（通常是DNA片段），每个探针对应一个特定的基因或序列。通过将待测样本与芯片上的探针杂交，并根据杂交信号的强度进行检测和分析，可以同时检测样本中成百上千个基因的表达水平或检测多种生物分子。因此，基因芯片技术确实是一种高通量检测技术，能够在一张芯片上实现大规模的检测。4.数字PCR（dPCR）技术可以实现绝对定量，而实时荧光定量PCR（qPCR）只能实现相对定量。（）答案：错误解析：数字PCR（dPCR）技术通过将样本分配到多个微反应单元，使每个单元内目标分子的拷贝数呈泊松分布，通过统计阳性微反应单元的数量来计算样本初始浓度的绝对值。而实时荧光定量PCR（qPCR）也可以通过构建标准曲线的方法实现绝对定量，例如使用已知浓度的标准品进行绘制。因此，说qPCR只能实现相对定量是不准确的，两者都可以实现绝对定量，只是原理和方法不同。5.核酸提取纯化过程中，只需要去除蛋白质即可。（）答案：错误解析：核酸提取纯化的目的是获得高质量、无污染的DNA或RNA。在提取过程中，除了需要去除蛋白质（通常通过蛋白酶K消化或有机溶剂变性）外，还需要去除脂类、多糖等其他杂质。这些杂质可能会干扰后续的PCR等分子生物学实验。例如，脂类可能抑制DNA聚合酶，多糖可能与核酸结合影响其纯度和溶解度。因此，说只需要去除蛋白质是不全面的。6.实时荧光定量PCR（qPCR）中，引物二聚体会对检测结果产生干扰，需要通过熔解曲线分析来检测。（）答案：正确解析：在qPCR实验中，如果引物设计不当或反应条件不合适，可能会形成非特异性产物，如引物二聚体。引物二聚体会在较低的循环数就产生荧光信号，导致Cq值偏低，从而干扰对目的基因的定量。熔解曲线分析是一种常用的方法，通过检测不同产物的熔解温度，可以区分特异性产物和引物二聚体等非特异性产物。因此，题目表述正确。7.基因分型是根据基因表达水平的不同进行个体分类。（）答案：错误解析：基因分型（Genotyping）是根据个体在特定基因位点上存在的等位基因差异进行个体分类或识别的技术。它关注的是基因序列或等位基因的变异，而不是基因的表达水平。基因表达分析（GeneExpressionAnalysis）才是研究基因转录水平差异的技术。因此，说基因分型是根据基因表达水平进行分类是不准确的。8.知情同意原则是所有医学检验技术操作中必须遵守的伦理原则。（）答案：正确解析：知情同意是生物医学研究和临床实践中必须遵守的基本伦理原则。在实施任何医学检验技术操作前，包括