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文档简介

动物微生物与免疫技术项目二任务一病毒认知任务二病毒形态和结构认知任务三病毒增殖的认知任务四病毒培养任务一病毒认知一、病毒概念一类只能在活细胞内寄生的非细胞微生物。二、病毒子结构完整的病毒颗粒。任务一病毒认知1.形体微小(最小的微生物)--可以通过细菌滤器,必须在电子显微镜下才能看到。2.不具有细胞结构3.一种病毒只能含一种核酸,DNA或RNA4.缺乏完整的酶系统,不能在无生命的培养基上生长,应严格的细胞内寄生生活。5.病毒的增值方式为复制。6.病毒对抗生素具有明显的抵抗力。对干扰素敏感。透射电子显微镜:分辨率为0.1-0.2nm,放大倍数几万-几十万倍,现代电子显微镜最大放大倍率超过300万倍。任务二病毒形态和结构的认知任务二病毒形态和结构的认知任务二病毒形态和结构的认知任务二病毒形态和结构的认知核酸核酸存在于病毒的中心部分,又称为芯髓。一种病毒只含有一种类型核酸,即DNA或RNA。病毒的核酸无论是DNA还是RNA,均携带遗传信息,控制着病毒的遗传、变异、增殖和对宿主的感染性等特性。任务二病毒形态和结构的认知衣壳是包围在病毒核酸外面的一层外壳。衣壳的主要功能:一是保护病毒的核酸免受核酸酶及外界理化因素的破坏;二是与病毒吸附、侵入和感染易感细胞有关。此外,病毒的衣壳是病毒重要的抗原物质。

任务二病毒形态和结构的认知—囊膜囊膜

主要成分类脂、蛋白质、糖类由“出芽”获得,来源于宿主的细胞膜或者核膜。囊膜易被脂溶剂如乙醚、氯仿和胆盐等容易破坏而使病毒失活。囊膜的功能:1.保护核衣壳的作用;2.与病毒吸附、侵入易感细胞有关;3.抗原物质纤(xian)突在某些囊膜表面的刺状突起,称为纤突。不同病毒囊膜纤突在形态、成分和功能上存在差异。例如流感病毒、疱疹病毒。Page

13三、病毒的增殖病毒增殖的方式是复制。病毒的复制是由宿主细胞供应原料、能量、酶和生物合成场所,在病毒核酸遗传密码的控制下,于宿主细胞内复制出病毒的核酸和合成病毒的蛋白质,进一步装配成大量的子代病毒,并将它们释放到细胞外的过程。Page

17三、病毒的增殖双击添加标题文字双击添加标题文字Page

18三、病毒的增殖双击添加标题文字(一)吸附

病毒附着在宿主细胞的表面称为吸附。一方面是依靠病毒与细胞之间的静电吸附作用而结合。另一方面病毒对细胞的吸附有选择性,并不是任何细胞都可以吸附,必须是病毒颗粒与细胞表面的受体相结合才能吸附,这也是病毒感染具有明显选择性的原因。三、病毒的增殖(二)穿入

病毒吸附于细胞表面后,迅速侵入细胞。侵入的方式有以下四种:①通过胞饮作用进入细胞,如牛痘病毒;②通过病毒与宿主细胞膜的融合而进入细胞浆中,如疱疹病毒;③病毒颗粒与宿主细胞膜上的受体相互作用,使其核衣壳穿入细胞浆中,如脊髓灰质炎病毒;④某些病毒以完整的病毒颗粒直接通过宿主细胞膜穿入胞浆中,如呼肠孤病毒。三、病毒的增殖三、病毒的增殖三、病毒的增殖(三)脱壳

病毒脱壳包括脱囊膜和脱衣壳两个过程。在病毒衣壳的脱落,主要发生在细胞浆或细胞核。由吞饮方式进入细胞的病毒,在其吞噬泡中和溶酶体融合,经溶酶体酶的作用脱壳。三、病毒的增殖四)生物合成

包括核酸复制与蛋白质合成。病毒脱壳后,释放核酸,这时在细胞内查不到病毒颗粒,故称为隐蔽期或黑暗期。隐蔽期实际上是病毒增殖过程中最主要的阶段。此时,病毒的遗传信息向细胞传达,宿主细胞在病毒遗传信息的控制下合成病毒的各种组成成分及其所需的酶类,包括病毒核酸转录或复制时所需的聚合酶。最后是由新合成的病毒成分装配成完整的病毒子。

三、病毒的增殖(五)成熟与释放

无囊膜的DNA病毒(如腺病毒),核酸与衣壳在胞核内装配。无囊膜的RNA病毒(如脊髓灰质炎病毒),其核酸与衣壳在胞浆内装配,呈结晶状排列。大多数无囊膜的病毒蓄积在胞浆或核内,当细胞完全裂解时,释放出病毒颗粒。Page

25四、病毒的培养病毒培养方式1、动物接种2、禽胚培养3、组织培养四、病毒的培养一、动物接种病毒经注射、口服等途径进入易感动物体后可大量增殖,并使动物产生特定反应。动物接种分本动物接种和实验动物接种两种方法。实验用动物,应该是健康的,血清中无相应病毒的抗体,并符合其他要求。当然,理想的动物是无菌动物或SPF(无特定病原体)动物。常用的实验动物有小白鼠、家兔、豚鼠、鸡等。四、病毒的培养动物接种尽管是培养病毒的一种古老的方法,但也是一种现在生产中常用的方法。动物接种培养病毒主要用于病原学检查,传染病的诊断,疫苗生产及疫苗效力检验等。四、病毒的培养禽胚是正在孵育的禽胚胎。由于具有诸多优点,禽胚是目前较常用的病毒培养方法。

/2053767.html禽胚培养优点:禽胚来源充足,操作简;单病毒易于增值,禽胚胎组织分化程度低;适用面广:适用于大多数自禽类的病毒及其他病毒;易于收集和处理病毒;缺点:禽胚中可能带有垂直传播的病原;也有卵黄抗体干扰的问题四、病毒的培养组织细胞培养是用体外培养的组织块或单层细胞分离增殖病毒。具体操作组织培养即将器官或组织小块于体外细胞培养液中培养存活后,接种病毒,观察组织功能的变化,如气管黏膜纤毛上皮的摆动等。细胞培养是用细胞分散剂将动物组织细胞消化成单个细胞的悬液,适当洗涤后加入营养液,使细胞贴壁生长成单层细胞。病毒感染细胞后,大多数能引起细胞病变,称为病毒的致细胞病变作用(简称CPE),表现为细胞变形,胞浆内出现颗粒化、核浓缩、核裂解等,借助倒置显微镜(图2-9)即可观察到。还有的细胞不发生病变,但培养物出现红细胞吸附及血凝现象(如流感病毒等)。有时还可用免疫荧光技术等血清学试验检查细胞中的病毒。Page

39四、病毒的培养兽医上通常用的细胞有CEF(鸡胚成纤维细胞)、PK-15株(猪肾上皮细胞)、K-L株(中国仓鼠肺)、D-K株(中国仓鼠肾)等。细胞培养多用于病毒的分离、培养和检测中和抗体。因此,细胞培养对病毒的诊断和研究发挥很大的作用。组织细胞培养病毒有许多优点:一是离体活组织细胞不受机体免疫力影响,很多病毒易于生长;二是便于人工选择多种敏感细胞供病毒生长;三是易于观察病毒的生长特征;四是便于收集病毒作进一步检查。因此,细胞培养

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