植物转基因技术在山西省玉米育种中的应用

植物转基因技术在山西省玉米育种中的应用摘要山西省地处黄河流域，大部分地区的自然条件特别适宜玉米的生长发育。由于山西省的地理气候条件复杂，可用耕地面积的减少，自然灾害频发，降水分布不均衡，这些客观条件的存在对玉米育种提出了更高的要求。由于人口的增加和人们对生活质量要求的提高，对培育高产、优质、抗病、抗逆、抗虫等玉米新品种的需求日趋迫切。植物转基因技术为加快玉米新品种的选育，为培育玉米目标品种开辟了新的途径。本文对植物转基因技术在玉米抗虫、抗除草剂、抗逆、抗病方面的应用进行了总结，分别介绍了农杆菌介导法、基因枪法、花粉管通道法和花粉介导法的转化原理及各自的优缺点，分析了目前转基因作物存在的安全问题和解决安全问题采用的方法，展望了植物转基因技术在玉米育种中的应用前景。关键词：植物转基因玉米育种目录TOC\o"1-2"\h\z\u1前言 11.1研究背景 11.2国内外研究现状 11.3研究目的和意义 12山西省玉米育种现状及常规育种的局限性 13植物转基因在玉米育种中的应用 23.1抗虫转基因玉米培育 23.2抗除草剂转基因玉米培育 33.3抗旱、耐盐转基因玉米培育 33.4抗病转基因玉米培育 34植物转基因技术在玉米育种中的常用方法 34.1农杆菌介导法 34.2基因枪法 44.3花粉管通道法 44.4超声波辅助花粉介导法 55转基因技术存在的安全问题及解决方法 65.1存在的安全问题 65.2解决安全问题的策略 65.2.1管理策略 75.2.2技术策略 76转基因技术在玉米育种中的展望 7后记 9参考文献 101前言研究背景玉米作为重要的粮食作物，是世界三大谷类作物之一。玉米作为粮食作物、饲料和能源物质，在我国粮食作物体系中的地位是非常重要的。由于城市化进程加快、人口数量快速增加以及人们对生活品质的要求日益提高，全社会对玉米的需求量也在随之在不断地提高。但是，目前可用耕地面积日渐减少，自然灾害频繁发生，在这种背景下，培育高产、优质、抗逆的玉米新品种就成为更为急切的需求。国内外研究现状玉米育种中转基因技术的广泛应用使我国的玉米育种进入了一个崭新阶段，代表着玉米育种新的发展趋势。1986年Fromm将抗除草剂PPT-乙酰转移酶的pat基因导入玉米原生质体，开创了转基因技术在玉米育种中应用的先河[FrommME,TaylorLP,WalbotV.Stabletransformationofmaizeaftergenetransferbyelectroporation.Nature,1986,319(6050):625～630]。1989年Klein等首次获得抗草丁膦转基因玉米植株[KleinTM,KornsteinL,SanfordJC,etal.Genetictransformationofmaizecellsbyparticlebombardment.PlantPhysiology,1989,91(1):440～444]。1990年Gordon-Kamm等首次获得可育转基因玉米植株[Gordon-KammWJ,SpencerTM,ManganoML,etal.Transformationofmaizecellsandregenerationoffertiletransgenicplants.ThePlantCell,1990,2(7):603～618]。在国内，2010年李茫雪等通过花粉管通道法将抗虫基因转入玉米自交系，获得抗虫玉米材料[李茫雪,张赫然,于晶,等.花粉管通道法将Bt-CPTI双价抗虫基因转入玉米自交系的研究.玉米科学,2010,18（1）:29～33]。2013年余桂荣等通过农杆菌介导法将抗草甘膦基因转入玉米幼胚细胞，获得转基因阳性植株。这些材料的获得为玉米新品种选育提供了基础材料[FrommME,TaylorLP,WalbotV.Stabletransformationofmaizeaftergenetransferbyelectroporation.Nature,1986,319(6050):625～630KleinTM,KornsteinL,SanfordJC,etal.Genetictransformationofmaizecellsbyparticlebombardment.PlantPhysiology,1989,91(1):440～444Gordon-KammWJ,SpencerTM,ManganoML,etal.Transformationofmaizecellsandregenerationoffertiletransgenicplants.ThePlantCell,1990,2(7):603～618李茫雪,张赫然,于晶,等.花粉管通道法将Bt-CPTI双价抗虫基因转入玉米自交系的研究.玉米科学,2010,18（1）:29～33余桂荣,刘艳,杜文平,等.农杆菌介导的转双价基因耐草甘膦玉米研究.分子植物育种,2013（3）:339～344研究目的和意义玉米是山西省最主要的粮食作物，山西省玉米生产总量已占全省粮食生产总量的一半左右。由于山西省特有的气候特点和地理特点，玉米在山西省特别适合生长发育，为玉米育种提供了区域优势。为了适应社会发展的要求，培育抗逆、高产、优质的玉米新品种已经成为了玉米育种的主要方向。近年来，植物转基因技术已经广泛应用在玉米育种中，转基因技术与玉米常规育种技术相结合，为玉米育种开辟了新的途径，提高了育种效率。本研究旨在通过对植物转基因技术在玉米抗逆、抗除草剂和品种改良等方面应用的综述，对转基因技术的种类及特点的介绍和梳理，以此来拓宽山西省在玉米育种方面的思路，最终希望找到更恰当、更经济、更高效的方法和技术，选育出适合山西省气候和地理特点的玉米新品种，满足山西省玉米生产的发展要求。2山西省玉米育种现状及常规育种的局限性玉米是山西省的第一大粮食作物，在山西省的粮食作物生产中占据重要地位。在玉米栽培方面，山西省有着悠久的历史，且种植面积分布很广。近年来，玉米优良品种在山西省的推广率已达99%左右，玉米生产总量也达到了全省粮食生产总量的首位。从山西省的地理气候方面讲，山西大部分地区的自然条件均特别适合种植玉米，山西省的玉米生产因此也具有明显的区域优势。但是，当前由于土地污染、耕地面积减少、水资源匮乏、病虫害、玉米品种、玉米栽培技术等原因制约了山西省玉米生产的发展。近年来，随着转基因技术和分子标记技术和高科技技术在玉米育种中的应用，使得玉米育种进入了一个全新的研究阶段。在这个全新的研究阶段，我们应该积极地对新的生物技术理念和思想进行梳理，找到适合特定地区的玉米育种的方法，突破常规育种的局限性。常规育种是通过先选育纯合的亲本自交系，再将亲本自交系杂交，然后对后代优良性状进行群体或个体选择，筛选出符合育种目标或后代性状优势强的杂交种的过程。玉米常规育种过程中，受玉米自身种质资源狭窄、常规育种的周期长、选育效率低等综合因素的影响，玉米新品种选育的过程就大大地延长了，很大程度上降低了玉米选育的效率。3植物转基因技术在玉米育种中的应用目前，山西省在玉米生产上应用的主要是采用常规育种方法培育的品种。例如，综31、郑单958、昌7-2等都是在省内已应用了10年以上的品种。但是在当前的转基因技术时代，作为玉米生产的大省，山西省也必须紧跟时代技术的潮流，将转基因技术用于优质玉米的培育和开发工作中，以满足人们对新品种玉米不断增长的需求。转基因玉米育种技术指的是，通过各种物理的、化学的、分子生物学等基因工程手段将外源目的基因片段导入到玉米基因组中，最终在玉米中表达目标蛋白，从而使玉米获得外源基因所表达的性状。1999年，我国首次利用农杆菌介导法完成了转基因玉米的杂交品种。转基因技术在玉米育种中的应用实现了物种间基因的交流，在育种过程中，自然界其他物种的优良基因资源可以得到充分利用，这使得玉米种质资源本身狭窄的局限得以解除，玉米品种的定向改良也得以实现。目前，国内外许多科研单位都在利用转基因技术进行玉米育种，培育出了许多抗虫、抗除草剂、抗逆、抗病、品质优良等特性的转基因玉米材料。3.1抗虫转基因玉米培育虫害一直是制约玉米产量和品质的重要因素，其中危害最大的是玉米螟。玉米螟也称作玉米钻心虫、钻茎虫，是玉米的重要虫害，严重影响玉米的品质和产量。玉米在与玉米螟共生进化的过程中，产生了一定的抗生能力。在玉米螟的防治技术方面，我们目前已有了一定的办法。但是，由于玉米内源抗性基因本身遗传机制的复杂性，长期以来，常规育种无法在抗虫玉米品种的培育上取得突破性进展。20世纪90年代以来，植物转基因技术引入抗虫转基因玉米的培育中。经过二十多年的努力，科研人员已开发出来了很多具有良好抗虫效果的转基因玉米材料。称为苏云金杆菌的Bt是广泛存在于土壤中的有益杀虫微生物。科研人员将Bt中能够专杀昆虫的蛋白质基因转到玉米中，使玉米自己能够生产这种杀死害虫的蛋白。这样，当害虫在吃含有这种蛋白的玉米时就同时被消灭掉了。2015年孙越等通过农杆菌介导的玉米茎尖遗传转化法将cry1AcM、epsps、GAT、ZmPIS转入玉米骨干自交系9801和齐319，通过逐代除草剂筛选、分子检测和抗虫性鉴定，从大量转基因株系中优选出6个优良玉米株系[孙越,刘秀霞,李丽莉,等.兼抗虫、除草剂、干旱转基因玉米的获得和鉴定.中国农业科学,2015,48（2）:215～228]。田间人工接虫试验表明，携带Bt杀虫基因的转基因玉米在玉米的整个生育期内对亚洲玉米螟有很好的抗性，且基本没有危害到玉米的生长。1996年，随着美国开始大规模商业化种植转Bt基因抗虫玉米后，其他国家也开始引进这种抗虫玉米进行种植。目前，全球的转基因抗虫玉米种植率已达24%。孙越,刘秀霞,李丽莉,等.兼抗虫、除草剂、干旱转基因玉米的获得和鉴定.中国农业科学,2015,48（2）:215～228在我国，由于转基因玉米的研究受到各方面的高度重视，在转基因育种方面取得了显著进展。在1993年，我国已经完全掌握了转基因玉米的研发技术，成功将Bt基因转入了玉米中。3.2抗除草剂转基因玉米培育田间杂草太多，会与玉米争夺养分，影响玉米的生长。因此，在玉米种植和生长的过程中，还必须考虑去除杂草的问题。而人工除草又费时费力，使用除草剂则要简单高效的多。除草剂具有超强的渗透力，它的有效成份能够迅速渗透土层，起到彻底清除各种杂草的作用。除除草剂现已广泛应用于现代农业中，一般常用的有丁草胺、乙草胺、丙草胺、2.4-滴丁酯等。虽然除草剂的使用大大地减少了田间的工作量，提高了劳动生产效率，但除草剂的使用同时也会对玉米的生长造成伤害，影响玉米的品质和产量。1996年，由美国孟山都公司开发的抗草甘膦转基因玉米注册完成。在国内，2013年余桂容等通过农杆菌介导法将抗草甘膦双价基因G2Ｒ79-epsps转入玉米幼胚细胞，获得7株转基因阳性植株，对得到的阳性植株的T1、T2代进行了跟踪检测，获得了可耐6%草甘膦的转基因玉米材料[余桂荣,刘艳,杜文平,等.农杆菌介导的转双价基因耐草甘膦玉米研究.分子植物育种,2013（3）:339～344]。2010年，王秀红等通过农杆菌介导法将抗草甘膦基因EPSPs基因转入玉米幼胚中，获得了具有潜在应用价值的抗除草剂转基因玉米的种质资源[王秀红,白建荣,孙毅,等.农杆菌介导抗草甘膦基因（EPSPs）的玉米转化及相关因子的影响研究.山西农业科学,2010,38（1）:11～14]。余桂荣,刘艳,杜文平,等.农杆菌介导的转双价基因耐草甘膦玉米研究.分子植物育种,2013（3）:339～344王秀红,白建荣,孙毅,等.农杆菌介导抗草甘膦基因（EPSPs）的玉米转化及相关因子的影响研究.山西农业科学,2010,38（1）:11～143.3抗旱、耐盐转基因玉米培育山西省独特的地理和气候特点，使得山西省发展玉米生产具有较为明显的区域优势。但是，山西省的地形复杂，盐碱地分布也较广，全年降水量分布不均匀。受这些不良自然条件的影响，山西省玉米的品质和产量始终没有达到较为理想的效果。盐碱地是由于盐类的聚集而形成的，盐类的聚集使土壤里所含的盐分或碱分大大增加，直接影响到了玉米的健康生长。盐碱地形成的根本原因在于不良土壤水分长期的侵袭，短时间内有效改良盐碱地的土壤土质是不太现实的。在这种条件下，我们除了对土壤进行改良外，培育出抗旱、耐盐碱的转基因玉米新品种就有非常大的价值，对于玉米的稳产、增产具有重要意义。2012年，王春艳等以玉米自交系H99、丹988的愈伤组织为受体材料，利用农杆菌介导法将双价的植物耐盐碱相关基因CMO-BADH转入受体材料，获得2株抗盐碱转基因植株[王春燕,关淑艳,王丕武,等.农杆菌介导的BADH-CMO基因转化玉米愈伤组织的初步研究.吉林农业大学学报,2012,34（5）:503～507]。2011年，董春林等利用海藻糖的抗旱特性，将海藻糖合酶基因TPS1导入玉米自交系郑58中，获得抗旱耐盐转基因玉米材料[董春林,张明义,林忠平,等.用花粉管通道法将抗旱耐盐基因导入玉米自交系的研究.山西农业科学,2011,395:392～394]。王春燕,关淑艳,王丕武,等.农杆菌介导的BADH-CMO基因转化玉米愈伤组织的初步研究.吉林农业大学学报,2012,34（5）:503～507董春林,张明义,林忠平,等.用花粉管通道法将抗旱耐盐基因导入玉米自交系的研究.山西农业科学,2011,395:392～3943.4抗病转基因玉米培育玉米在苗期会发生各种各样的病害，如青枯病、病毒病、大小斑病、粗缩病和丝黑穗病等。如果苗期防治不及时，玉米在灌浆乳熟期会受到严重的影响，最终直接导致产量和品质的双下降。近些年来，随着全球生态环境的不断变化，出现了弯孢菌叶斑病、灰斑病、纹枯病和锈病等新的病害，在全球范围内呈逐渐扩大蔓延的态势。在这种情况下，山西省的玉米种植也必然在一定程度上会受到这些新病害的影响。因而，提高玉米的抗病性也就成了当务之急，解决这一问题也自然成了玉米育种工作中的一个重要研究方向。2007年，白云凤等将甘蔗中的花叶病毒复制酶基因Nib成功转入玉米中，获得了具有抗玉米矮花叶功能的材料[白云凤,杨红春,曲琳,等.抗甘蔗花叶病毒的无标记反向重复转基因玉米.作物学报,2007,33（6）:973～978]。2006年和2007年，杜建中，孙毅等将水稻中的几丁质酶基因克隆并将其转入玉米中，提高了玉米抗真菌感染的能力[杜建中,孙毅,郝曜山,等.抗玉米丝黑穗病转基因株系的分子检测及抗病株系选育.华北农学报,2006,21（5）:99～104][杜建中,孙毅,王景雪,等.转基因抗丝黑穗病玉米的遗传、表达及选育研究.分子植物育,2007,5（4）:467～474]。2001年，王景雪、孙毅、崔贵梅等以玉米自交系太9101、综31等为受体，以pGLⅡ-RC-1质粒为供体，在玉米开花期，用花粉与质粒DNA混合并附加超声波处理，然后辅以人工授粉的方法将外源基因导入受体中，经PCR扩增及PCR-Southernbiot杂交检测证明，几丁质酶基因导入玉米自交系中[王景雪,孙毅,崔贵梅,等.花粉介导法获得玉米转基因植株.植物学报,2001,43(3):275～279]。白云凤,杨红春,曲琳,等.抗甘蔗花叶病毒的无标记反向重复转基因玉米.作物学报,2007,33（6）:973～978杜建中,孙毅,郝曜山,等.抗玉米丝黑穗病转基因株系的分子检测及抗病株系选育.华北农学报,2006,21（5）:99～104杜建中,孙毅,王景雪,等.转基因抗丝黑穗病玉米的遗传、表达及选育研究.分子植物育,2007,5（4）:467～474王景雪,孙毅,崔贵梅,等.花粉介导法获得玉米转基因植株.植物学报,2001,43(3):275～2794植物转基因技术在玉米育种中常用的方法植物转基因技术是指有目的地将动物、植物或微生物中某些特殊的基因分离出来，经过一定的修饰后，再转入到宿主植物基因组中的生物加工技术。该生物加工技术可以使被加工植物的遗传物质在基因水平得到改造，最终植物在某些性状和功能等方面达到和满足人们的特定需求。经过对植物转基因方法的长期探索和研究，目前，科学家们已经总结出了多种植物转基因的技术方法。4.1农杆菌介导法转化原理:农杆菌介导法是植物转基因方法中运用最早，转化机理研究最为清楚，且运用最为广泛的植物转基因方法。此方法是通过侵染植物的受伤部位，例如玉米的胚或玉米茎尖，将根癌农杆菌的Ti质粒DNA或发状农杆菌的Ri质粒DNA自身存在的一段T-DNA片段，导入至宿主细胞并且整合至宿主细胞的基因中，进而实现表达。利用农杆菌介导法的转化机理，将外源DNA基因导入宿主染色体并得以表达，最终实现稳定遗传。由于玉米是单子叶植物，不是农杆菌的天然宿主，这曾一度给玉米的基因转化实验带来了很多困难。不过近些年来，研究人员通过对农杆菌侵染机理的不懈研究，终于成功地将农杆菌介导法用在了玉米等单子叶植物的基因转化中。农杆菌介导法的优缺点:优点：1、农杆菌介导法的转化机理最清楚，方法最成熟。2、农杆菌是植物转基因的天然转化载体，转化成功率高、效果好。3、导入的外源基因多为单拷贝，不易发生基因沉默，遗传稳定性好。4、转化的后代多数符合孟德尔遗传规律。缺点：1、需要繁琐的组织培养过程建立植株的再生体系。2、不同基因型的材料组织培养体系不同，对农杆菌的敏感性也不同。3、只有部分物种可通过组织培养得到再生植株。4、对新基因型材料进行遗传转化时，需要重新探索转化体系和再生体系。5、受到基因型局限性的限制，有些物种无法直接得到种子。4.2基因枪法转化原理：基因枪法又称粒子枪法，1987年由Sanford等建立。该方法首先将外源DNA分子附着于金属微粒表面，然后利用加速装置将携带外源DNA分子的金属微粒导入受体细胞和组织或器官中，携带外源DNA分子的金属微粒穿过细胞壁、细胞膜后将外源DNA分子导入进靶细胞，进入受体后的外源基因则会随机整合到受体的基因组之中，并得到表达，最终达到转化目的。基因枪法的优缺点:优点：1、转化受体广泛，不受基因型限制；既适用于单子叶植物，又适用于双子叶植物。2、可以实现多基因的同时转化。3、较易获得再生植株。缺点：1、操作繁琐，且费用高。2、外源基因容易以多拷贝或不完整片段导入基因组，使转化的DNA片段容易断裂。3、转入的外源基因容易发生基因沉默，遗传稳定性不太好。4.3花粉管通道法转化原理：我国学者周光宇于1973年提出花粉管通道法。此后，在长达四十多年的科研探索中，该方法得到了不断的完善和发展。该方法的转化过程为：植物经过授粉后的适当时间内，外源DNA沿着花粉管经过的珠心通道进入胚囊，由于这时的细胞尚不具备正常的细胞壁，可作为天然的原生质体，易于外源DNA的整合转化，受精后细胞DNA复制活跃，合子或早期胚胎细胞自然发育成种子。花粉管通道法的优缺点:优点：1、不需要组织培养获得再生苗，克服了受体植株再生难的问题。2、该方法一般为田间进行，操作简单，对环境要求低，且转化率相对较高。3、除转化总DNA外，该方法在功能基因转化方面的应用也较广泛。缺点：1、花粉管通道法转化机理尚不明确。2、后代外源基因遗传稳定性较差。3、后代多数不符合孟德尔分离定律，不利于后续研究的开展。4.4超声波辅助花粉介导法转化原理:花粉介导法是通过花粉这种天然转化载体实现外源基因导入的方法。而超声波辅助花粉介导法则是利用超声波处理花粉，使花粉表面的核酸酶失活，并使花粉处于感受态，这时再加入外源DNA，再次进行超声波处理，使外源DNA在外力的作用下更容易进入花粉粒中，随着花粉的萌发而将其导入植物胚囊，直接参与有丝分裂，最后得到转化种子。成功使用花粉介导法的关键在于将外源DNA导入花粉的过程中还必须保护花粉的活力。花粉介导法的优缺点:优点：1、该方法无基因型的依赖。2、操作简单，成本低，避免了组织培养这一繁琐的过程。缺点：1、转化后代的筛选和鉴定较为繁琐。2、在转化过程中需要选择合适的标记基因。5转基因技术存在的安全问题及解决方法5.1存在的安全问题“民以食为天”。吃是人类最基本的生存需求之一。所以，自1996年转基因作物开始大规模、产业化生产以来，转基因作物的安全性问题一时间就成为了全球各国都十分关注问题，至今还在受到业内人士和普通大众的热议。食品安全关系到人们的身体健康，也关系着整个人类社会的稳定和发展。为了鉴别受体细胞中是否已经导入了目的基因，便于将含有目的基因的受体细胞筛选出来，科研人员在基因转化过程中，通常都会使用标记基因。标记基因是已知功能或已知序列的基因，这种基因能够起到特异性标记的作用，能够便于检测重组质粒是否已经导入受体细胞。常用的标记基因有两类：选择性基因和报告性基因。由于目前常用的选择性基因（抗除草剂基因、抗生素基因等）本身是具有一定抗性的基因，因此此类基因对植物是有一定危害的。如果将含有这类基因的转基因植物直接用作人类的食物或家禽的饲料，对食品安全和生态环境安全可能会造成一些后果无法预知的影响。在生态环境安全方面，一些研究者担心，转基因作物转入的抗除草剂、抗生素和抗逆性的外源基因是否会通过花粉飘移等方式进入杂草中。1999年，杨春等就提出了转基因作物可能造成的超级杂草或增加靶标生物抗性的情况，从而对生物多样性产生影响，破坏生态平衡[钱方,安利佳,李宪臻.正向选择的生物安全标记基因.中国生物工程杂志,2007,27（3）:115～119]。此外，在种植转基因植物的土壤中，微生物，尤其是细菌或真菌的数量可能也会发生改变[杨春,杜珍,奇海英,等.NAA,IBA,GA3对马铃薯扦插苗成活率的影响.山西农业科学,1999,27（3）:40～43钱方,安利佳,李宪臻.正向选择的生物安全标记基因.中国生物工程杂志,2007,27（3）:115～119杨春,杜珍,奇海英,等.NAA,IBA,GA3对马铃薯扦插苗成活率的影响.山西农业科学,1999,27（3）:40～43在食品安全方面,首先，转基因技术导入的目的基因所表达的蛋白可能会引起人畜的过敏。其次，外源基因的导入也可能会激活受体自身原有的一些有毒有害基因，使这些原本“沉默”的基因恢复表达，从而产生有毒有害物质。再次，在转基因过程中将抗生素基因作为标记基因，人畜在长期食用这些转基因食品后，可能会对抗生素产生耐受性，使临床上使用的抗生素有可能失效[杨春.生长素和细胞分裂素在马铃薯愈伤组织分化中的作用.山西农业科学,2008,36（7）:40～42]。杨春.生长素和细胞分裂素在马铃薯愈伤组织分化中的作用.山西农业科学,2008,36（7）:40～425.2解决安全问题的策略5.2.1管理策略自从转基因作物问世以来，人们关于转基因食品及其安全的问题就从未停止过，全世界的粮食安全部门对此问题更是高度关注。为了确保转基因产品的安全性，国际食品法典委员会（CAC）、联合国粮农组织（FAO）和世界卫生组织（WHO）制定了一系列转基因生物的安全评价标准，以此来规范食品安全和生态安全。目前国际上没有统一的管理制度，各国都是根据本国的实际情况在制定自己的管理制度。我国是世界上较早制定和实施转基因生物安全管理法规的国家之一。2001年5月23日，国务院令第304号发布了《农业转基因生物安全管理条例》，该条例的发布对农业转基因生物安全管理、保障人民身体健康、保护动植物及微生物安全、保护生态和自然环境有着非常重要的意义。该条例同时也给农业转基因生物技术的研究指明了方向，使科研人员能在明确的法规范围规定内安全有序地开展研究。农业农村部也制定并实施了4项与《农业转基因生物安全管理条例》配套的管理办法。原国家质检总局也相继颁布并施行了《进出境转基因产品检验检疫管理办法》、《中华人民共和国种子法》、《中华人民共和国农产品质量安全法》、《中华人民共和国食品安全法》等法律，对农业转基因技术的安全应用做出了强制性规定。我国的转基因技术研发安全评价具体涉及到了五个阶段，分别是：实验研究、中间试验、环境开放、生产性试验和申请安全证书。每一个阶段的评价都有一套安全指标和标准体系。在这五个安全评价阶段中，只要有一个阶段发现有潜在的风险，转基因技术的研发过程就会终止。转基因技术研发无论是处于研究试验阶段，还是处于生产加工阶段，或是处于经营进口阶段，都要依法依规办理。5.2.2技术策略目前解决转基因安全问题的常用技术策略