DB4201∕T 541-2018 奶牛场牛结核病净化技术规范

ICS65.020.30

B41

DB4201

武汉市地方标准

DB4201/T541—2018

奶牛场牛结核病净化技术规范

2018-08-28发布2018-09-28实施

武汉市质量技术监督局发布

DB4201/T541-2018

前言

本规范按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本规范由武汉市动物疫病预防控制中心提出。

本规范由武汉市农业委员会归口。

本规范起草单位：武汉市动物疫病预防控制中心、蔡甸区动物疫病预防控制中心

本规范主要起草人：阮征、岳龙、张四化、吴君、肖冉、万云、王雪、黎巧、李东、王巧娜、

曾令高、宫时玉。

本规范首次发布。

I

DB4201/T541-2018

奶牛场牛结核病净化技术规范

1范围

本规范规定了奶牛场牛结核病的净化阶段、检测程序、诊断技术、阳性牛处置及饲养管理等方面的

要求。

本技术规范适用于武汉市范围内奶牛场牛结核病净化。

2规范性引用文件

下列文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标

准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。

GB/T16568奶牛场卫生及检疫规范

GB/T18645动物结核病诊断技术

GB/T32945牛结核病诊断体外检测γ干扰素法

NY/T1168畜禽粪便无害化处理技术规范

中华人民共和国主席令第53号《中华人民共和国进出境动植物检疫法》

农医发[2007]7号《牛结核病防治技术规范》

农医发[2010]20号《反刍动物产地检疫规程》

农医发[2010]33号《跨省调运乳用、种用动物产地检疫规程》

农医发[2013]34号《病死动物无害化处理技术规范》

农医发[2017]20号《国家奶牛结核病防治指导意见（2017-2020年）》

国家质检总局令第25号《进境动植物检疫审批管理办法》

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

牛结核病

牛结核病是由牛分枝杆菌引起的一种慢性消耗性人兽共患传染病，主要经呼吸道、消化道感染，可

侵害人和多种动物，其中奶牛最易感。本病潜伏期一般为10～45天，主要为肺结核，也可发生乳房结

核和肠结核等。病牛剖检可见肺脏白色或黄白色结节，胸膜和腹膜可发生密集的结核结节，形如珍珠状。

3.2

疫病净化

是以消灭和清除传染源为目的，在特定区域或场所对某种或某些重点疫病实施的有计划的消灭过

程，以达到该范围内个体不发病和无感染状态。

1

DB4201/T541-2018

3.3

牛结核病净化场

牛场牛结核病个体阳性率连续两次以上低于0.1%，经市级以上兽医主管部门组织的专家组进行现

场评审，且评审通过，认定为牛结核病净化场。

3.4

牛结核菌素

为牛分枝杆菌的分泌蛋白，临床上主要使用的是结核分枝杆菌纯蛋白衍生物（purifiedprotein

derivative,PPD）。感染过牛分枝杆菌的机体，在接触到牛结核菌素后，由于体内致敏淋巴细胞的作用，

会发生局部变态反应，表现为在结核菌素注射部位形成硬结甚至发生水泡、坏死。

3.5

γ干扰素

由淋巴细胞等免疫细胞分泌的一种重要细胞因子。感染了牛分枝杆菌后，动物体内致敏淋巴细胞再

次接触相同抗原如牛结核菌素时，会产生大量γ干扰素。因此，检测γ干扰素浓度升高程度可用于牛结核

病诊断。

4净化阶段

参照《国家奶牛结核病防治指导意见（2017-2020年）》的要求，将奶牛场开展牛结核病净化工作

分为以下四个阶段：

——未控制阶段：开展牛结核病净化工作，个体阳性率大于3％的阶段；

——控制阶段：连续2年监测个体阳性率为1％～3％的阶段；

——稳定控制阶段：连续2年监测个体阳性率为0.1％～1％的阶段；

——净化阶段：连续2年以上监测个体阳性率小于0.1％的阶段。

5检测程序

5.1对处于未控制阶段的奶牛场，每年至少进行4次检测。6周龄以上奶牛按100％比例进行检测。发

现阳性牛按照7的要求处置。当连续两年检测个体阳性率小于3％后，进入控制阶段。

5.2对处于控制阶段的奶牛场，6周龄以上的奶牛每年全群检测3次，发现阳性牛按照7的要求处置。

当连续两年监测个体阳性率小于1％后，进入稳定控制阶段。

5.3对处于稳定控制阶段的奶牛场，6周龄以上的奶牛每年全群检测2次，发现阳性牛按照7的要求

处置。当连续两年检测个体阳性率小于0.1％，经市级以上兽医主管部门组织专家评审，现场综合评审

通过后，此场认定为牛结核病净化场，进入净化阶段。

5.4对处于净化阶段的奶牛场，6周龄以上的奶牛每年全群检测1次，发现阳性牛按照7的要求处置，

同时，净化级别降至上一等级。

5.5在净化全阶段中，初生犊牛应于20日龄时进行一次检测。

6诊断技术

2

DB4201/T541-2018

6.1临床诊断

按照《牛结核病防治技术规范》规定的流行病学、临床症状和病理变化进行临床诊断。

6.2牛分枝杆菌PPD皮内变态反应试验

6.2.1单纯皮内变态反应

参照GB/T18645中4.1要求执行。

6.2.2比较变态反应

参照GB/T18645中4.2要求执行。

6.3抗体ELISA检测

采集牛血清，选择商品用牛结核ELISA试剂盒，按照试剂盒说明操作。

6.4γ干扰素释放试验

参照GB/T32945采集牛静脉抗凝血进行γ干扰素ELISA检测。

6.5检测方案

根据奶牛场实际情况从以下四种检测方案中进行选择：

a)选用6.2.1的方法进行初筛，6.4的方法确诊；

b)选用6.2.1的方法进行初筛，6.2.2的方法确诊；

c)选用6.3的方法进行初筛，6.4的方法确诊；

d)选用6.3的方法进行初筛，6.2.2的方法确诊。

6.6结果判定

6.6.1本病依据病理变化可做出初步诊断。

6.6.2ELISA检测阳性或PPD单纯皮内变态反应阳性牛，判为牛结核病疑似牛。

6.6.3PPD比较变态反应试验或γ干扰素释放试验阳性牛，判为牛结核病牛。

7阳性牛处置

7.1隔离

对牛结核病疑似牛或牛结核病牛进行隔离。隔离场地周围应有自然屏障或人工栅栏。

7.2复检

对牛结核病疑似牛使用6.2.2或6.4的方法进行复检，复检为阴性，方可合群。

7.3处置

对确诊的牛结核病阳性牛全部扑杀，并按照《病死动物无害化处理技术规范》进行无害化处理。对

阳性牛污染的场地、用具等按照8.8的要求进行紧急消毒。

3

DB4201/T541-2018

8饲养管理

8.1引种和调运

8.1.1引进的奶牛应来自非疫区，引进前报本地动物防疫监督机构备案。跨省引进奶牛及其胚胎和精

液，应按《跨省调运乳用、种用动物产地检疫规程》向输入地动物防疫监督机构申请办理审批手续。

8.1.2调运前45天进行牛结核病检疫，凭当地动物防疫监督机构出具的检疫合格证明进行调运。

8.1.3奶牛到达输入地后,第5天～7天进行一次牛结核病检疫，隔离观察45天后，再进行一次牛结

核病检疫，经本地动物防疫监督机构检查，确定为牛结核病阴性牛后方可合群饲养。

8.1.4跨境引进奶牛及其胚胎和精液，参照《中华人民共和国进出境动植物检疫法》要求执行，并按

照《进境动植物检疫审批管理办法》办理审批手续，入境后第5天～7天进行一次牛结核病检疫，隔离

观察45天后，再进行一次牛结核病检疫，经检疫合格方可入关。

8.1.5奶牛移出本市，必须提前向本地动物防疫监督机构报检，按照《反刍动物产地检疫规程》实施

产地检疫，检疫合格后出具动物检疫合格证明，凭证出场。

8.2奶牛场严格按照GB/T16568的要求进行防疫管理。

8.3病牛所产牛犊经检疫无结核病后，与母牛隔离饲养，饲喂健康牛乳或消毒乳。

8.4建立详细的奶牛结核病监测记录，包括耳标号、年龄、监测时间、检测方法、检测结果等内容，

监测记录应保存5年以上。

8.5奶牛场员工与奶牛接触时应穿工作服，佩戴口罩、手套等防护用具。

8.6奶牛场