DB3301∕T 1082-2018 堇叶紫金牛组赔繁育技术规程

ICS65.020.20

B05

DB3301

浙江省杭州市地方标准

DB3301/T1082—2018

堇叶紫金牛组培繁育技术规程

2018-06-20发布2018-07-20实施

杭州市质量技术监督局发布

DB3301/T1082—2018

前  言

本标准按照GB/T1.1－2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》给出的规定起草。

本标准由杭州市林业水利局提出并归口。

本标准主要起草单位：杭州市园林绿化股份有限公司、杭州市林木种苗管理中心。

本标准主要起草人：杨浩、孙英坤、胡亚芬、高凯、陈林敬、魏建芬、樊靖、姚涛、邱影、崔晓燕、

王霁、李红霞。

I

DB3301/T1082—2018

堇叶紫金牛组培繁育技术规程

1范围

本标准规定了堇叶紫金牛（Ardisiaviolacea）组培快繁过程中的外植体制备、组织培养、炼苗、

上盆、容器苗管理、苗木出圃、档案管理等内容。

本标准适用于杭州市范围内堇叶紫金牛的组培繁育。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

NY/T2306－2013花卉种苗组培快繁技术规程

DB33/T179林业育苗技术规程

3母株选择

选择长势旺盛、叶背暗紫色、叶脉清晰、无病虫害的植株作为组培繁殖母株，置于温室内培养。

4外植体制备

4.1外植体采集

选择健壮选择健壮、无病虫害、带休眠腋芽的新发茎段为外植体材料。外植体采集后宜当日进行消

毒处理，或保存于4℃冰箱，保存时间不宜超过2d。

4.2外植体消毒

4.2.1表面消毒

沿叶柄基部切除外植体材料的叶片，用小毛刷蘸取少量洗洁精轻轻刷洗茎段表面，反复刷洗叶腋附

近，用自来水冲洗干净；将外植体茎段切段，用0.1%的苯扎溴铵于磁力搅拌器上进行消毒处理,转速不

宜超过200转/min；处理时间与茎段幼嫩程度选择5min～12min；倒掉消毒液，在流水下冲洗30min～

60min。

4.2.2深度消毒

将表面消毒后的外植体材料置于无菌操作台上，用无菌水冲洗外植体茎段1次；使用75%乙醇溶液摇

晃消毒处理，处理时间根据茎段幼嫩程度选择15s～90s；倒掉乙醇溶液，用1%次氯酸钠溶液摇晃消毒处

理，处理时间与茎段幼嫩程度成反比，宜选择3s～10min；倒掉消毒液，用无菌水反复冲洗4～5次，每

次5min。

1

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5组培扩繁

5.1培养基制备

5.1.1培养基制备方法

参照NY/T2306－2013花卉种苗组培快繁技术规程。

5.1.2培养基配方

参照附录A。

5.2初代培养

5.2.1将外植体茎段切成长度约2cm的小段，并带有1个休眠腋芽。

5.2.2用无菌刀片切除小段下端（芽向上）褐化部分，迅速接种到初代培养基上。

5.2.3培养条件：温度25±2℃、光照时间10h/d、光照强度1500Lx～2000Lx，相对湿度60%～65%。

5.3增殖培养

5.3.1将新发的侧芽嫩茎切下，接种到增殖培养基上。

5.3.2培养条件：温度25±2℃，光照时间12h/d，光照强度2000Lx～2500Lx，相对湿度为60%～65%。

5.3.3培养约40d后分化产生大量侧芽和不定芽丛。

5.4壮苗培养

5.4.1将不定芽丛轻轻拨散成单个不定芽，将伸长的侧芽嫩茎切下，接种到壮苗培养基。

5.4.2培养条件为温度25±2℃、光照时间12h/d、光照强度2000Lx～2500Lx、相对湿度60%～65%。

5.4.3壮苗培养约20d后，再生小苗达到叶片数量6枚以上、高度5cm以上、茎粗2mm以上可进行生

根培养。

5.5生根培养

5.5.1切除再生小苗基部愈伤组织，接种到生根培养基上。

5.5.2培养条件：温度28±2℃、光照时间为8h/d、光照强度1000Lx～1500Lx、相对湿度70%～80%。

5.5.3生根培养40d～50d后，不定根或主根数量达到4条以上、根长1cm～3cm、叶片数量8枚以上、

高度5cm以上、茎粗2mm以上可进行炼苗。

6炼苗

6.1炼苗条件

宜选择温室。炼苗控制条件：遮光率90%以上、温度20～25℃、相对湿度约60%。

6.2炼苗方法

将组培瓶苗置于温室苗床上驯化25d～30d；移栽前3d～4d松动组培瓶盖，部分打开；移栽前1d～2d，

完全打开组培瓶盖，并加入少量无菌水，无菌水以达到最下端叶片为宜。

7移栽

2

DB3301/T1082—2018

7.1基质准备

7.1.1配方

选用粒径2cm～3cm的松鳞作为炼苗基质。基质应理化性能稳定、不带病菌、虫卵、杂草等。

7.1.2分装

将炼苗基质分装到42cm×42cm×5cm方盘，摆放至苗床上，基质表面与方盘上边缘齐平为宜。

7.1.3消毒

移栽前7d使用0.2%高锰酸钾对基质进行消毒处理，消毒液宜浸透基质底部，并用塑料薄膜覆盖严实。

7.2移栽

7.2.1轻轻取出生根苗，用清水洗净根部培养基后，以3株～4株为一丛植入炼苗基质中，深度以基

质刚覆盖根系为宜，密度以4cm×4cm为宜。

7.2.2生根苗植入方盘后浇透水，均匀喷洒0.3%多菌灵溶液，用封闭小拱棚覆盖约30d。小拱棚内温

度应控制在28℃～33℃、相对湿度约80%。覆盖期间可适当打开小拱棚两端通风以调节温度、相对湿度；

7.2.3待小苗长出新的须状根并恢复正常生长后，打开小拱棚两端通风7d～14d，然后完全打开小拱

棚培养6个月以上。通风期间应及时观测基质水分变化，适时补水以保持基质湿润。

8上盆

8.1基质准备

基质配方为50%珍珠岩、25%泥炭、25%松磷（体积比），充分拌匀备用。基质应理化性能稳定、不

带病菌、虫卵、杂草等。

8.2容器选择

可选用12cmX10cm营养钵。

8.3上盆

容器中装填1/2容器体积的基质，将方盘苗单株放入容器中间，装入基质盖住根系并墩实，基质低

于容器口1cm左右。

8.4上盆苗摆放

于温室或阴盆区条状摆放，条宽1m～1.2m，留操作步道0.5m。

9容器苗管理

9.1遮阴

遮光率应达到70%以上。

9.2水分管理

上盆后及时浇透水，隔天检查基质水分情况，水分不足的及时补浇；梅雨季应注意排水。

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9.3病虫害防治

上盆1个月后，喷施0.1%～0.3%除蜗灵或预防蜗牛危害，并喷施0.1%～0.15%多菌灵溶液预防病害。

10苗木出圃

10.1出圃质量要求

无病虫害；1年～2年生容器苗XXX，2年～3年生容器苗XXX。叶背暗紫色、叶脉清晰；根系发达、无

机械损伤。

10.2容器苗出圃

按DB33/T179执行。

10.3苗木检疫

按照《植物检疫条例实施细则（林业部分）》进行检疫。

10.4包装与运输

按DB33/T179执行。

11档案管理

按DB33/T179执行。

4

DB3301/T1082—2018

AA

附录A

（资料性附录）

堇叶紫金牛常用培养基配方

A.1堇叶紫金牛常用培养基配方

表A.1堇叶紫金牛常用培养基配方

基本培氯吡苯脲(CPPU)萘乙酸(NAA)吲哚丁酸(IBA)蔗糖卡拉胶活性炭(AC)

pH

养基mg/Lmg/Lmg/Lg/Lg/Lg/L

初代培养基MS0.15～0.300.10～0.20—307—5.8～6.2

增殖培养基MS0.50～0.800.10～0.20—307—5.8～6.2

壮苗培养基MS0.10～0.15——307—5.8～6.2

生根培养基1/2MS—0.50～0.800.50～0.802070.56.0

注：1/2MS培养基是MS培养基大量元素减半。

A.2堇叶紫金牛基本培养基成分

表A.2堇叶紫金牛基本培养基成分

名称成分浓度(mg/l)

NH4NO31650

KNO31900

大量元素CaCl2·2H2O440

MgSO4·7H2O370

KH2PO4170

KI0.83

H3BO36.20

MnSO4·4H2O22.30

微量元素ZnSO4·7H2O8.60

Na2MoO4·2H2O0.25

CuSO40.025

CoCl2·6H2O0.025

FeSO·7HO27.80

铁盐42

Na2EDTA37.30